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TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

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Rhodamin 123<br />

(Fluoreszenz/mg Protein)<br />

Rhodamin 123<br />

(Fluoreszenz/mg Protein)<br />

Rhodamin 123<br />

(Fluoreszenz/mg Protein)<br />

Rhodamin 123<br />

(Fluoreszenz/mg Protein)<br />

Rhodamin 123<br />

(Fluoreszenz/mg Protein)<br />

Rhodamin 123<br />

(Fluoreszenz/mg Protein)<br />

Rhodamin 123<br />

(Fluoreszenz/mg Protein)<br />

Rhodamin 123<br />

(Fluoreszenz/mg Protein)<br />

ERGEBNISSE<br />

A<br />

150000<br />

100000<br />

70000<br />

60000<br />

50000<br />

40000<br />

30000<br />

20000<br />

10000<br />

0<br />

Kontrolle<br />

hCMEC/D3 P:30<br />

n=4<br />

Dex 1 µM<br />

*<br />

TQD 0,5 µM<br />

B<br />

150000<br />

100000<br />

70000<br />

60000<br />

50000<br />

40000<br />

30000<br />

20000<br />

10000<br />

0<br />

Kontrolle<br />

hCMEC/D3 P:31<br />

n=3<br />

*<br />

Dex 1 µM<br />

*<br />

TQD 0,5 µM<br />

C<br />

150000<br />

100000<br />

70000<br />

60000<br />

50000<br />

40000<br />

30000<br />

20000<br />

10000<br />

0<br />

Kontrolle<br />

hCMEC/D3 P:36<br />

n=3<br />

Dex 20 µM<br />

*<br />

TQD 0,5 µM<br />

D<br />

Kontrolle<br />

hCMEC/D3 P:35<br />

n=3<br />

150000 *<br />

100000<br />

70000<br />

60000<br />

50000<br />

40000<br />

p=0,0881<br />

30000<br />

20000<br />

10000<br />

0<br />

Dex 5 µM<br />

Dex 10 µM<br />

Puro 0,5 µM<br />

TQD 0,5 µM<br />

E<br />

150000<br />

100000<br />

70000<br />

60000<br />

50000<br />

40000<br />

30000<br />

20000<br />

10000<br />

0<br />

Kontrolle<br />

hCMEC P:32<br />

n=3<br />

Puro 0,5 µM<br />

*<br />

TQD 0,5 µM<br />

F<br />

150000<br />

100000<br />

70000<br />

60000<br />

50000<br />

40000<br />

30000<br />

20000<br />

10000<br />

0<br />

Kontrolle<br />

hCMEC P:31<br />

n=6<br />

Puro 1 µM<br />

* *<br />

Vin 20 nM<br />

*<br />

TQD 0,5 µM<br />

G<br />

150000<br />

100000<br />

70000<br />

60000<br />

50000<br />

40000<br />

30000<br />

20000<br />

10000<br />

0<br />

Kontrolle<br />

Dex 1 µM<br />

hCMEC/D3 P:32<br />

n=3<br />

* * *<br />

Dex 5 µM<br />

Dex 10 µM<br />

Rif 20 µM<br />

*<br />

Puro 1 µM<br />

*<br />

TQD 0,5 µM<br />

H<br />

150000<br />

100000<br />

70000<br />

60000<br />

50000<br />

40000<br />

30000<br />

20000<br />

10000<br />

0<br />

Kontrolle<br />

hCMEC/D3 P:39<br />

n=3<br />

Dox 0,23 µM<br />

Rif 2,5 µM<br />

Abbildung 5.5: Kumulation des Fluoreszenzfarbstoffs Rhodamin 123 nach Behandlung mit den<br />

Pgp-Induktoren Dexamethason, Doxorubicin, Puromycin, Rifampicin, Vincristin und dem Pgp-<br />

Inhibitor Tariquidar in acht unabhängigen Versuchen in hCMEC/D3-Zellen. Tariquidar führte in<br />

allen Versuchen zur signifikanten Erhöhung der Kumulation. Dexamethason und Rifampicin<br />

zeigten inkonsistente Effekte. Doxorubicin führte in der gewählten Konzentration nicht zu einer<br />

Induktion des Efflux. Puromycin (1 µM) und Vincristin induzierten den Efflux, der Rhodamin-<br />

Gehalt war im Vergleich zu den unbehandelten Kontrollzellen reduziert.<br />

Die Zellen wurden ab dem 3. Tag der Konfluenz über 72 h mit den Induktoren behandelt.<br />

Tariquidar wurde erst zu Beginn des Versuchs einer Gruppe von unbehandelten Zellen zugefügt.<br />

Die Versuche wurden am 6. Tag nach Erreichen der Konfluenz durchgeführt. Die Versuche<br />

69

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