TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

ERGEBNISSE
5 ERGEBNISSE
5.1 Die humane Hirnkapillarendothelzelllinie hCMEC/D3
5.1.1 Charakterisierung der hCMEC/D3-Zellen
Für die Charakterisierung der humanen Zellen wurden u.a. die Zellgröße und
die Zellzahl bestimmt. Dazu wurden die ebenfalls immortalisierten
Rattenhirnendothelzelllinien GPNT und RBE4 kultiviert. Diese wurden in früheren
Versuchen der hiesigen Arbeitsgruppe bereits charakterisiert und wurden für
vergleichende Untersuchungen mit den hCMEC/D3-Zellen herangezogen.
Dazu wurden alle drei Zelllinien über 3 Passagen kultiviert, auf 6Well-Platten
ausgesät und am 5. Tag nach Erreichen der Konfluenz für die Bilder und die
anschließende Zellzählung verwendet. Die Zellzählung wurde dabei wie in Abschnitt
4.3.2 (S. 54 f.) beschrieben durchgeführt.
Abbildung 5.1: Bilder der humanen hCMEC/D3-Zellen (A) im Vergleich mit den
Rattenhirnkapillarendothelzelllinien GPNT (B) und RBE4 (C). Die Bilder wurden mit einer 200x
Vergrößerung aufgenommen. Die GPNT- und RBE4-Zellen sind kleiner und weisen auf der
gleichen Fläche eine etwa 2,5-mal höhere Zellzahl/ml auf als die humanen Zellen (A).
Die humanen Zellen waren nach diesen Bildern durchschnittlich etwa 40-50
µm groß und damit etwa doppelt so groß wie die Zellen der Rattenzelllinie GPNT. Die
GPNT-Zellen zeigten eine rundere Form als die anderen beiden Zelllinien. Beide
Rattenzelllinien (GPNT und RBE4-Zellen) zeigten im Gegensatz zu den hCMEC/D3-
Zellen auf der gleichen Fläche (A = 9,6 cm 2 ) dichter gepackte Zellen. Dies wurde
zusammen mit den Unterschieden in der Zellgröße mit Hilfe der Zellzahlbestimmung
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