TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

% Digoxin
% Digoxin
STAND DER FORSCHUNG
gleichen Konzentration sowohl in die apikale als auch basolaterale Kammer gegeben
und Proben aus beiden entnommen (LUNA-TORTÓS et al. 2008).
Man spricht von einem Transport, wenn sich die Konzentrationen der zu
untersuchenden Substanz zwischen der apikalen und basolateralen Kammer
signifikant unterscheiden. Werden keine Unterschiede zwischen den
Konzentrationen einer Substanz in beiden Kammern nachgewiesen, geht man
zunächst davon aus, dass dieser Transport entweder inhibiert wurde oder die
Testsubstanz nicht von dem untersuchten Transporter transportiert wird (siehe
Abbildung 2.6 B).
A
180
160
140
120
100
Digoxin (10 nM)
LLC-Zellen
* * * * *
80
apikal
60
basolateral
40
0 120 240 360 480 600
min
B
180
160
140
120
100
80
60
Digoxin (10 nM) + TQD (0,5 µM)
LLC-Zellen
40
0 120 240 360 480 600
min
Abbildung 2.6: Beispielhafte CETAs mit Pgp-überexprimierenden LLC-Zellen +/- Inhibitor von
K. Römermann.
A: Transportversuch mit Digoxin. Die apikale Digoxin-Konzentration steigt an, die basolaterale
Konzentration des Pgp-Substrats sinkt. Die Konzentrationsunterschiede waren signifikant
verschieden. Ein Transport des Pgp-Substrats Digoxin wurde nachgewiesen.
B: Digoxin-Transportversuch nach Zugabe des Pgp-Inhibitors Tariquidar (TQD; 0,5 µM). Die
Konzentrationsunterschiede zwischen apikaler und basolateraler Kammer wurden aufgehoben.
Der Transport wurde inhibiert.
Aber auch beim CETA kann die Diffusion der Testsubstanzen nicht vollständig
eliminiert werden. Beispielsweise sollten Untersuchungen der Dichtigkeit eines
Monolayers durchgeführt werden. Für beide Varianten des Transportversuchs sind
dichte Monolayer eine Voraussetzung. Die Endothelzellen der BHS zeigen diese
Barriere-Eigenschaften in vivo. NICOLAZZO et al. (2006) wiesen aber nach, dass Invitro
BHS-Modelle eine geringere oder gar ausbleibende Expression wichtiger Tight
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