TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

DISKUSSION
(2005) berichteten beispielsweise, dass die Unterschiede des Transports durch Pgp
in primären und immortalisierten Hirnkapillarendothelzellen verschiedener Spezies
sehr groß sind. Des Weiteren ist es schwierig, ausreichend reine Kulturen an
primären Hirnkapillarendothelien der Ratte mit hohen TEER-Werten zu gewinnen
(LECHARDEUR & SCHERMAN 1995; HURST & FRITZ 1996; ABBOTT et al. 1997;
REINHARDT & GLOOR 1997). Zudem wiesen NITZ et al. (2003) in
Hirnkapillarendothelzellen des Schweines Widerstände von bis zu 1800 Ω*cm 2 nach.
FRANKE et al. (2000) konnten nach Messungen des transendothelialen Widerstands
in den gleichen Zellen immerhin Werte von bis zu 700 Ω*cm 2 feststellen. Für
Primärkulturen des Hirnkapillarendothels des Rindes wurden allerdings
vergleichsweise niedrige TEER-Werte von etwa 70 Ω*cm 2 (LEE et al. 2004) bzw. 130
Ω*cm 2 gemessen (GAILLARD & DE BOER 2000), sodass BHS-Modelle mit bovinen
Zellen möglicherweise eher ungeeignet sind. WOLBURG et al. (1994) wiesen aber
für primäre Zellen bovinen Ursprungs teils höhere Widerstände nach, die Werte bis
800 Ω*cm 2 erreichten. Unabhängig von der Wahl der Spezies dürfen für die
Interpretation der Ergebnisse und die Translation von In-vitro-Daten auf die In-vivo-
Situation mögliche Speziesunterschiede nicht außer Acht gelassen werden
(CECCHELLI et al. 2007; CARDOSO et al. 2010).
6.2.2.4 Zusammenfassung der Transportuntersuchungen in rBCEC-Zellen
In einem einzelnen Versuch wurde der Transport des Antiepileptikums
Phenytoin untersucht (Daten nicht gezeigt). Es war kein signifikanter Transport zu
erkennen, obgleich Phenytoin als Pgp-Substrat gilt (LUNA-TORTÓS et al. 2008).
Dies macht deutlich, dass zur Untersuchung des Transports von Antiepileptika in
Primärkulturen des Rattenhirnendothels im Transwell-Modell die Bedingungen weiter
optimiert werden müssen. Dennoch mussten für diese Zellen im Vergleich zu den
immortalisierten humanen Hirnkapillarendothelzellen weniger Parameter verändert
werden, um einen Transport detektieren zu können. Die Primärkulturen des
Rattenhirnendothels zeigten von Beginn an höhere TEER-Werte (6Well: 97,5 ± 24,8
Ω*cm 2 ; 12Well: 168,1 ± 37,6 Ω*cm 2 ) als die hCMEC/D3-Zellen (6Well: 31,9 ± 12,8
Ω*cm 2 ; 12Well: 138,6 ± 35,4 Ω*cm 2 ) (siehe Tabelle 5.4 & 5.6). Die höheren TEER-
Werte der rBCEC-Zellen könnten auf eine generell bessere Eignung der primären
Zellen für das Transwell-Modell hinweisen, wie es auch von anderen Arbeitsgruppen
beschrieben wurde (FRANKE et al. 2000; GARBERG et al. 2005; PERRIÈRE et al.
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