TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

DISKUSSION
das Intermediärfilament Saures Gliafaserprotein (englisch glial fibrillary acidic protein,
GFAP), ein spezifischer Marker für die Differenzierung von Astrozyten (REUSS et al.
2003), festgestellt werden. Die Expression von Vimentin oder GFAP wurde in dieser
Arbeit nicht untersucht, und bFGF war im Medium zur Kokultivierung der
Endothelzellen und Astrozyten enthalten. Für weitere Untersuchungen des
Transwell-Modells sollten diese Faktoren berücksichtigt werden.
THANABALASUNDARAM et al. (2010) untersuchten die Kokultur von
primären porcinen Hirnendothelzellen mit Perizyten im Transwell-Modell und wiesen
sogar einen Abfall des Widerstands und einen Anstieg der Sucrose-Permeabilität
nach, was auf undichte Monolayer schließen lässt. Dies konnte aber durch das
Entfernen des Wachstumsfaktors VEGF wieder aufgehoben und eine Steigerung des
TEER erzielt werden. Ähnliche Effekte für VEGF wurden bereits von NITZ et al.
(2003) beschrieben. VEGF wird von den Perizyten sezerniert
(THANABALASUNDARAM et al. 2010) und stellt einen wichtigen Einflussfaktor der
Integrität der BHS dar (ARGAW et al. 2012). In der vorliegenden Arbeit war für die
Primärkulturen kein VEGF im Medium enthalten. Untersuchungen zu
inflammatorischen Erkrankungen des ZNS wiesen aber nach, dass humane
Astrozyten VEGF sezernieren können (ARGAW et al. 2012). Möglicherweise wurde
dieser Wachstumsfaktor auch von Astrozyten in den hier beschriebenen Kokultur-
Versuchen abgegeben, was erklären würde, warum der Widerstand der Monolayer
durch die Kokultur in dieser Arbeit nicht weiter gesteigert werden konnte.
6.2.2.3 Primärkulturen des Hirnkapillarendothels anderer Spezies
Mit den derzeit verfügbaren In-vitro-Modellen der BHS kann die
Mikroumgebung dieser Barriere relativ gut nachgeahmt werden und eine Reihe an
Eigenschaften und Funktionen untersucht werden (ASCHNER et al. 2006).
Versuche, menschliches Hirngewebe für BHS-Modelle einzusetzen (BERNAS et al.
2010), werden durch eher geringe Verfügbarkeit dieses Gewebes erschwert. Im
Gegensatz dazu kann Hirngewebe des Schweines und des Rindes relativ einfach
gewonnen werden (CECCHELLI et al. 2007; CARDOSO et al. 2010), und viele
Untersuchungen werden an diesen (ZHANG et al. 2006; ZHANG et al. 2009a) und
weiteren Spezies wie Maus und Ratte (COISNE et al. 2005; PERRIÈRE et al. 2007)
durchgeführt. Möglicherweise wären Primärkulturen des Hirnendothels anderer
Spezies als der Ratte eher für das Transwell-Modell geeignet. GARBERG et al.
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