TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

DISKUSSION
niedrigere Mannitol-Permeabilitäten gemessen werden, die auf eine Erhöhung der
Dichtigkeit schließen lassen. Diese Ergebnisse waren aber nicht für alle Kokultur-
Versuche in gleichem Ausmaß reproduzierbar. Die Rhodamin-Konzentrationen der
apikalen und der basolateralen Kammer waren signifikant verschieden, zeigten
oftmals kaum einen apikalen Anstieg oder Schwankungen der Substrat-
Konzentration, wobei keine Unterschiede zwischen Rattenstamm oder
Membranmaterial zu erkennen waren (Abbildung 5.28 & 5.29).
Positive Effekte der Kokultur von Endothelzellen der Ratte oder der Maus mit
Astrozyten auf TEER-Werte und parazelluläre Permeabilitäten wurden in
Untersuchungen von DELI et al. (2003) und HUTAMEKALIN et al. (2008) berichtet.
In diesen Studien wurden u.a. TEER-Werte von 307 ± 3,2 Ω*cm 2 bzw. maximal 600
Ω*cm 2 und niedrige Permeabilitäten von beispielsweise Albumin von 1,88 ± 0,1 nm/s
gemessen. Trotz der Kokultur der primären Rattenhirnendothelien mit Astrozyten
konnte kein asymmetrischer Transport von Digoxin beobachtet werden. Ein
asymmetrischer Transport von Rhodamin 123 konnte aber sehr wohl nachgewiesen
werden. Allerdings war keiner der eingesetzten Inhibitoren (Valspodar und
Tariquidar) in den gewählten Konzentrationen in der Lage, den Transport von
Rhodamin 123 vollständig und wiederholbar zu hemmen (Abbildung 5.29). Folglich
ist davon auszugehen, dass entweder höhere Konzentrationen nötig sind oder aber
der Rhodamin-Transport nicht durch den MDT Pgp verursacht wurde. Vermutungen
zufolge, könnte der Transporter BCRP am Transport beteiligt sein. ROBEY et al.
(2001) und Studien der hiesigen Arbeitsgruppe (K. Römermann, unveröffentlichte
Daten) widerlegten aber diese Annahme.
In der Kokultur der Endothelzellen (rBCEC oder hCMEC/D3) mit Astrozyten
wurden beide Zelltypen mit dem jeweiligen Medium oder aber auch nur mit dem
Medium für die Endothelien kultiviert. Unterschiede im Wachstumsverhalten und der
Morphologie waren nicht zu erkennen. Im Medium der Endothelzellen war immer der
Wachstumsfaktor bFGF und Hydrocortison enthalten (siehe
Mediumszusammensetzung für hCMEC/D3 und rBCEC S. 41 und 45). In früheren
Arbeiten dieser Arbeitsgruppe wurde untersucht, ob diese Faktoren einen Einfluss
auf das Wachstum der Astrozyten haben können. Die Expression von Vimentin, ein
Marker für mesenchymale Zellen und auch unausgereifte Astrozyten (LIN &
GOLDMAN 2009), erhöhte sich nach der Zugabe von bFGF (C. Luna-Tortós,
unveröffentlichte Daten). Für Hydrocortison konnte kein Effekt auf Vimentin oder auf
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