TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

DISKUSSION
6.1.3.3 Überprüfung eines asymmetrischen Transports
Ein asymmetrischer Transport von 2 µM Rhodamin 123 konnte in hCMEC/D3-
Zellen nachgewiesen werden. Zur Überprüfung, ob es sich um Pgp-spezifischen
Transport handelte, wurden die bekannten Inhibitoren Valspodar (PSC833) und
Tariquidar eingesetzt. Der Rhodamin-Transport konnte aber nur bedingt durch diese
Pgp-Inhibitoren gehemmt werden. In einem einzelnen von insgesamt 8 Versuchen
wurde der Transport vollständig durch Tariquidar inhibiert (Abbildung 5.21 F).
Allerdings waren die Konzentrationsunterschiede zwischen Substrat mit und ohne
Inhibitor sehr gering, weshalb der gemessene asymmetrische Transport von
Rhodamin in diesem Einzelversuch fraglich ist (Abbildung 5.21 E & F).
Untersuchungen von TANG et al. (2004) und FORSTER et al. (2012) zeigten
beispielsweise eine Hemmung des Rhodamin-Transports durch die Pgp-Inhibitoren
GF-120918 bzw. Quinidin in MDCK II-Zellen. YUMOTO et al. (1999) sowie
TROUTMAN & THAKKER (2003) konnten eine Inhibition des Transport von
Rhodamin 123 durch u.a. Quinidin und einen weiteren Pgp-Inhibitor (GW918) in der
Darmzelllinie Caco-2 nachweisen. Ausgehend von diesen Studien sollten weitere
Versuche durchgeführt werden, die auch andere Pgp-Inhibitoren und eventuell
höhere Konzentrationen der bereits untersuchten Inhibitoren berücksichtigen und das
Vermögen, Pgp-spezifischen Transport in hCMEC/D3-Zellen zu inhibieren,
untersuchen.
Die hCMEC/D3-Zellen wurden aus reseziertem epileptischem Hirngewebe
einer pharmakoresistenten Epilepsiepatientin gewonnen. Es wäre denkbar, dass
diese Pharmakoresistenz nicht nur auf die erhöhte Funktionalität bzw. Expression
eines MDT in der BHS zurückzuführen ist. Es könnten mehrere Transporter daran
beteiligt sein, sodass Rhodamin 123 durch einen anderen MDT als Pgp transportiert
wurde und die Resultate der vorliegenden Arbeit eventuell nicht auf einen
spezifischen Transport durch Pgp zurückzuführen sind. Demnach würde eine
Inhibition von Pgp keinen Einfluss auf den Transport nehmen. Andererseits wird
Rhodamin 123 oft als Pgp-Substrat für Kumulationsstudien eingesetzt (EFFERTH et
al. 1989; LEE et al. 1994; WEKSLER et al. 2005; TAI et al. 2009). Zudem berichteten
ROBEY et al. (2001), dass Rhodamin 123 zwar von Mutanten des Transporterproteins
BCRP aber nicht vom ursprünglichen MDT (Wildtyp) transportiert wird.
Die Integrität der Zellmonolayer, die im Rahmen der Transportstudien mit
hCMEC/D3-Zellen genauer betrachtet wurde, wurde durch die Parameter Mannitol-
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