TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

DISKUSSION
möglicherweise nicht ohne Weiteres mit den Daten der Messkammer verglichen
werden können.
Serum
Eine Verlaufsuntersuchung der TEER-Werte, die über 7 Tage von hCMEC/D3-
Monolayern vorgenommen wurde, zeigte u.a. Unterschiede zwischen den
verwendeten Seren im Kulturmedium. Humanes Serum soll die Integrität der
Zellmonolayer erhöhen. POLLER et al. (2008) zeigten eine Reduktion der
parazellulären Sucrose-Permeabilität um bis zu 39 % (auf ca. 15,8 nm/s), nachdem
hCMEC/D3-Zellen mit ansteigenden Konzentrationen bis zu 10 % humanem Serum
kultiviert wurden. CARL et al. (2010) wiesen nach der Kultivierung dieser Zellen mit
bovinem Serum etwa 1,5-mal höhere Werte für die Mannitol-Permeabilität (24,7
nm/s) nach. Der Transportnachweis für Digoxin wurde aber in den Versuchen, für die
die Zellen mit humanem Serum kultiviert wurden, nicht beeinflusst (Daten nicht
gezeigt). Des Weiteren zeigte die Verlaufsuntersuchung der TEER-Werte keine
Unterschiede zwischen humanem und bovinem Serum (Abbildung 5.13). Im
Vergleich mit dem apparenten parazellulären Permeabilitäts-Koeffizienten (P app ) für
Mannitol, der für dichte Zellmonolayer 12 nm/s nicht überschreiten sollte (LUNA-
TORTÓS et al. 2008), lag die Sucrose-Permeabilität von POLLER et al. (2008) über
dem genannten Wert. Deshalb sollte die Erhöhung der Dichtigkeit durch
beispielsweise noch höhere Konzentrationen des humanen Serums oder andere
Parameter in den hCMEC/D3-Zellen untersucht werden.
Die Überprüfung der parazellulären Permeabilität wurde in den hier
dargestellten Versuchen mit Mannitol durchgeführt. Die in der vorliegenden Arbeit
gemessenen Permeabilitäten für Mannitol und die TEER-Werte für Zellmonolayer auf
6Well-Membraneinlagen wurden von den verschiedenen Seren offensichtlich nicht
beeinflusst. Das bovine Serum zeigte ähnlich hohe Widerstände wie das humane
Serum und wurde deshalb und auch aus Kostengründen für die Kultivierung der
Zellen für Transport-Assays verwendet. Der Transport von Rhodamin 123 konnte in
hCMEC/D3-Zellen v.a. auf Membran-Inserts im 12Well-Format nachgewiesen
werden. Ob für dieses Format ein Einfluss durch humanes Serum nachgewiesen
werden kann, muss geklärt werden.
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