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DISKUSSION
al. 2008a). Dies ist laut der MDT-Hypothese eine Erklärung für die
Pharmakoresistenz bei Epilepsien (LÖSCHER & POTSCHKA 2005b; SCHMIDT &
LÖSCHER 2009). Für etliche Antiepileptika wie z.B. Levetiracetam, Phenobarbital,
Phenytoin, Topiramat und Valproat wurde bereits nachgewiesen, dass sie von Pgp
transportiert werden (LÖSCHER et al. 2011; ZHANG et al. 2012), womit geringe
Konzentrationen der Antiepileptika im Gehirn zu erklären wären. Welche weiteren
Antiepileptika Substrate von MDT darstellen und dementsprechend modulierende
Effekte möglich sind, wird nach wie vor diskutiert (OWEN et al. 2001; BALTES et al.
2007a, b; LUNA-TORTÓS et al. 2008 & 2009; LÖSCHER et al. 2011; ZHANG et al.
2012). Der Transport von u.a. Levetiracetam, Phenobarbital, Phenytoin und
Topiramat durch Pgp wurde in den Zelllinien LLC und MDCK II nachgewiesen
(LUNA-TORTÓS et al. 2008 & 2009), die aus dem Nierenepithel des Schweins bzw.
des Hundes stammen. Um den Transport von Antiepileptika durch Pgp an der BHS
untersuchen zu können, wurde deshalb die Hirnendothelkapillarzellen hCMEC/D3
eingesetzt. Sofern sich diese immortalisierte Zelllinie für die Anwendung als BHS-
Modell eignet, sollte in weiterführenden Studien der Transport von Antiepileptika in
Hirnendothelzellen humanen Ursprungs untersucht werden.
6.1.3.1 Einflüsse auf den Nachweis von Pgp-spezifischen Transport
Es wurden verschiedene bekannte Pgp-Substrate und Einflüsse durch das
Membranmaterial, Mediumszusätze (Simvastatin, weitere Wachstumsfaktoren), den
Ursprung und die Qualität des Serums und das Format der Membraneinlagen
untersucht.
Auswahl des Substrats
In Untersuchungen des Transports in Zellen aus Nierenepithel (LLC-PK1 und
MDCK II) wurde der Transport von Digoxin durch Pgp nachgewiesen
(TAIPALENSUU et al. 2004; ACHARYA et al. 2008; LUNA-TORTÓS et al. 2008 und
2009). Dieses von der FDA empfohlene Substrat für Transportstudien in Nierenzellen
(FDA, 2006) zeigte trotz Variation und Optimierung der Versuchsbedingungen in
keinem der Versuche mit hCMEC/D3-Zellen einen Transport, obgleich mehrere
Parameter angepasst wurden (Abbildung 5.14, 5.15 & 5.20). Ähnlich verhielt es sich
mit Verapamil, welches ebenfalls ein Pgp-Substrat darstellt (HENDRIKSE et al. 1998;
LEE et al. 2006; Abbildung 5.15) und für das in Studien von SHIRASAKA et al.
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