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DISKUSSION
nachweisen. In wie weit sich die Expression dann auch auf die Funktionalität
auswirkt, ist unklar. Allerdings zeigten YANG et al. (2008) in In-vitro-Experimenten
mit Rattenhirnendothelien, dass die Funktionalität und Expression von Pgp nach
einer 60-tägigen Behandlung mit Antiepileptika (Carbamazepin, Phenobarbital,
Phenytoin und Valproat) und Rifampicin parallel induziert wurden. Dennoch müssen
Funktionalität und Expression von Pgp nicht zwangsläufig miteinander korrelieren.
Wenn Substanzen nur über einen relativ kurzen Zeitraum auf die Funktionalität
einwirken, müssen mögliche Effekte nicht unbedingt auch für die Expression gelten.
Ebenso müssen Abweichungen in der Expression nicht mit einer veränderten
Funktionalität einhergehen. Ungeachtet dessen könnte die Dauer der Behandlung in
den hier dargestellten Versuchen (drei Tage) den Nachweis stärkerer Induktionen
durch Antiepileptika unmöglich gemacht haben. Im Gegensatz dazu zeigten
fluoreszenzmikroskopische Untersuchungen zum Pgp-Trafficking an mit grünfluoreszierenden
Pgp (GFP-Pgp) transfizierten hCMEC/D3-Zellen in der hiesigen
Arbeitsgruppe, dass bereits zwei Stunden nach der Behandlung mit der Pgpinduzierenden
Substanz Mitomycin C die Translokation von Pgp aus dem Zytosol zu
den Membranen erfolgt. Eine Auswirkung auf die Funktionalität bzw. Expression war
erst 24 h später nachweisbar (A. Noack, Publikation in Revision), wobei es sich um
eine kürzere Zeitspanne handelt als für die in dieser Arbeit durchgeführten
Behandlungen. Zu beachten ist aber, dass intrazelluläres Pgp-Trafficking von der
Polarisation der Zellen und auch der Wahl der Zelllinie abhängig ist (FU & ARIAS
2012) und demzufolge Studien mit verschiedenen Zellkulturmodellen zu
unterschiedlichen Ergebnissen kommen können.
Bezüglich der Kultivierungsdauer (Anzahl der Passagen) könnte ein variabler
Pgp-Gehalt in den Zellen dafür verantwortlich sein, dass die Grundfunktion verändert
wird und robuste Effekte nur schwer nachweisbar sind. Das Ausmaß der Expression
von Pgp im Laufe der Kultivierung von Zellen kann durchaus einen Einfluss auf den
Nachweis bestimmter Effekte haben. Ein unterschiedliches Ausmaß des Efflux war
aber in Abhängigkeit der Kultivierungsdauer und der Passagenzahl der hCMEC/D3-
Zellen nicht erkennbar. Dennoch ist eine genauere Kenntnis zum Einfluss der Dauer
der Zellkultur und Behandlung auf die Expressions- und Funktionalitätslevel
unbedingt notwendig.
Die Induktion von Pgp wird u.a. über die Rezeptoren CAR und PXR vermittelt
(EKINS & ERICKSON 2002; WANG & LECLUYSE 2003). Außerdem zeigten
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