TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

DISKUSSION
sind, Substanzen schnellstmöglich aus den Zellen zu transportieren und sich auf
diese Weise vor toxischen Wirkungen zu schützen. Die Behandlungen mit diesen
hohen Konzentrationen führten i.d.R. zu einer Induktion des Efflux, dennoch wurden
diese Daten aus der Gesamtwertung ausgeschlossen. Der Rhodamin-Gehalt wird
zwar auf die Proteinkonzentration bezogen und nimmt demnach auch Bezug auf eine
geringere Zellzahl. Trotzdem wären falsch positive hinsichtlich einer Induktion
denkbar, weshalb die induzierenden Effekte nach Zellablösungen unter Vorbehalt zu
betrachten sind. Mit dem spezifischen Hemmstoff Tariquidar (SZAKÁCS et al. 2006)
konnte stets eine Inhibition des Rhodamin-Efflux nachgewiesen werden, d.h. dass
die Zellen funktionelles Pgp aufwiesen.
Der Vergleich der hCMEC/D3-Zellen mit den Rattenhirnkapillarendothelien
GPNT und RBE4 zeigte funktionelles Pgp in allen drei Zelllinien, wobei der stärkste
Efflux des Substrats bei den GPNT-Zellen auftrat (Abbildung 5.4). Im vergleichenden
Kumulations-Assay konnte der Rhodamin-Efflux in RBE4-Zellen ebenfalls durch
Dexamethason induziert werden. In GPNT-Zellen war dieser Effekt nicht zu sehen.
Außerdem zeigten diese Zellen einen höheren Efflux, der an dem niedrigen
intrazellulären Rhodamin-Gehalt zu erkennen war. Der Efflux der Kontrollgruppen der
hCMEC/D3- und RBE4-Zellen fiel geringer aus. Als Ursache für diesen variablen
Efflux wären unterschiedliche Pgp-Gehalte als Ursache denkbar. Dies konnte
anhand der Western Blots bestätigt werden (Abbildung 5.2). Die GPNT-Zellen
zeigten demnach die höchste Pgp-Expression. Solch hohe Expressionen können
durch Induktoren kaum gesteigert werden, was in dem Kumulationsversuch zu sehen
war. In allen drei Zelllinien bestand eine Korrelationen zwischen der Funktion und der
Expression des Transporters Pgp.
Weitere Ursachen für dieses unterschiedliche Ausmaß des Rhodamin-Efflux
könnten die Herkunft (Spezies und Organ) oder die verschiedenen Mechanismen für
die Pgp-Induktion sein. Es ist beispielsweise bekannt, dass die Pgp-Funktion über
die ONRs PXR und CAR vermittelt wird. Diese Rezeptoren werden u.a. auch an der
BHS exprimiert (BAUER et al. 2006) und sorgen dort durch Induktionen von MDT für
den Abtransport von Xenobiotika. Die Expression dieser Rezeptoren ist allerdings
sehr variabel und wird als gewebe- und zellspezifisch erachtet (XU et al. 2005;
CHEN 2010). Bestimmte Substanzen stimulieren die Rezeptoren, die wiederum Pgp
induzieren (BAUER et al. 2005; OTT et al. 2009). Für Rifampicin wiesen CHEN &
RAYMOND (2006) und ZHOU et al. (2008) nach, dass dessen Wirkung PXR-
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