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DISKUSSION
darstellt (SCHINKEL et al. 1996; FARDEL et al. 1997; RÉGINA et al. 1999), in
einigen Versuchen zur Induktion des Efflux. In weiteren Experimenten konnte dieser
Effekt nicht immer wiederholt werden. Es wurden verschiedene Konzentrationen
dieser Substanz getestet, allerdings konnte keine Konzentration gefunden werden,
die in allen Versuchen robuste Effekte lieferte. Die Untersuchung weiterer bekannter
Pgp-Induktoren wie Doxorubicin, Puromycin, Rifampicin und Vincristin zeigte für
einzelne Konzentrationen eine Induktion der Pgp-Funktionalität (Abbildung 5.5).
Für alle getesteten Pgp-Induktoren fiel auf, dass die Effekte in den
hCMEC/D3-Zellen konzentrationsabhängig zu sein schienen. Sofern mehrere
Konzentrationen getestet wurden, führten oftmals die höheren Dosierungen zu einer
Induktion des Rhodamin-Efflux bzw. einer noch stärkeren Induktion. In der
Zusammenfassung aller Versuche in Abbildung 5.7 ist zu sehen, dass
Dexamethason und Puromycin jeweils in der höchsten Konzentration die stärksten
induzierende Effekte zeigten. In Untersuchungen einer anderer Arbeitsgruppe mit
Caco-2-Zellen (aus dem Darm) führte Rifampicin in der Konzentration von 20 µM
ebenfalls zu einer Induktion des Efflux durch Pgp (DIXIT et al. 2002). Diese
Konzentration sowie weitere (5 und 10 µM) führten in der vorliegenden Arbeit zu
einer Inhibition des Efflux in den hCMEC/D3-Zellen. Erst in der Konzentration von 50
µM Rifampicin wurde der Rhodamin-Efflux in den humanen Zellen signifikant
induziert (Abbildung 5.7). Höhere Konzentrationen für Puromycin (2,65 µM) und
Rifampicin (200, 500 und 1000 µM) zeigten inhibitorische Wirkungen, was anhand
eines erhöhten Rhodamin-Gehalts im Vergleich zur Kontrolle zu erkennen war
(Daten nicht gezeigt).
Vincristin führte als einzige Substanz zu reproduzierbaren Ergebnissen und
induzierte die Pgp-Funktionalität. In der höheren Konzentration von 40 nM wirkte
Vincristin toxisch, was sich als Zellablösungen zeigte (Daten nicht dargestellt). Diese
Effekte traten auch nach höheren Konzentrationen für Doxorubicin (0,92 µM),
Puromycin (2,65 µM) und Rifampicin (200, 500 und 1000 µM) auf. Während der
Behandlung kam es zu zum Teil starken Ablösungen der Zellen. Derartige Effekte
waren zu erwarten, da es sich bei den genannten Substanzen um Zytostatika handelt
(BITTER 1977; FISCHER 1994; HUGHES & CALVIN 1979; YARMOLINSKY & DE
LA HABA 1959). Zudem weisen hCMEC/D3-Zellen im Vergleich zur
Rattenhirnendothelzelllinie GPNT einen geringeren Gehalt an Pgp auf (siehe
Abschnitt 5.1.2), weshalb die Zellen nur in einem geringeren Ausmaß in der Lage
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