TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

elib.tiho.hannover.de
von elib.tiho.hannover.de Mehr von diesem Publisher
28.02.2014 Aufrufe

ERGEBNISSE Versuche mit einer Gruppengröße von n=1 gearbeitet wurde. Es bleibt festzuhalten, dass keiner der eingesetzten Inhibitoren in den gewählten Konzentrationen in der Lage war, den Pgp-vermittelten Transport von Rhodamin 123 vollständig in allen Versuchen zu hemmen. In zwei von vier Versuchen erhöhten sich die AUC nach Zugabe eines Pgp-Inhibitors (Abbildung 5.29 B & F). Lediglich in Graph 5.29 D verringerte sich die AUC um > 50 % nach Zugabe des Inhibitors Tariquidar. Ein Unterschied zwischen Mono- und Kokultur bzw. Corning- und Greiner- Membraneinlagen war nicht zu erkennen. 5.2.3.5 Integrität primärer Zellen anhand des TEERs und der Mannitol- Permeabilität In Tabelle 5.7 wurden alle gemessenen TEER-Werte und Mannitol- Permeabilitäten der Transportuntersuchungen mit rBCEC-Zellen beider verwendeter Rattenstämme (CD und Wistar) zusammengefasst. Es wurde deutlich, dass es auch für die Primärzellen einen Unterschied machte, ob diese auf kleinen 12Well- Membranen oder größeren 6Well-Membranen kultiviert wurden. Mit der Kultur der rBCEC-Zellen auf 12Well-Membranen wurden höhere TEER-Werte gemessen. Gleichzeitig erhöhte sich aber auch die Permeabilität für Mannitol um das etwa das Dreifache. Unterschiede wurden des Weiteren zwischen den Membranherstellern Corning und Greiner (Vergleich 12Well-Format) und den Rattenstämmen CD und Wistar deutlich. Wurden die primären Zellen auf Greiner-Membranen kultiviert erhöhte sich der TEER und die Mannitol-Permeabilität sank. Im Vergleich der Zellen aus CD- und Wistar-Ratten fiel auf, dass für die Monolayer der CD-Ratten höhere TEER-Werte und niedrigere Mannitol-Permeabilitäten gemessen wurden. 130

ERGEBNISSE Tabelle 5.6: Übersicht der TEER-Werte und Mannitol-Permeabilitäten in Bezug auf die untersuchten Parameter in Transportversuchen (CETA) mit rBCEC-Zellen. Zur besseren Vergleichbarkeit sind hier auch Daten aus der Literatur aufgeführt. Daten der Literatur Zelllinie/ Zellen Serum Kokultur TEER (Ω*cm 2 ) Parazelluläre Permeabilität (nm/s) Referenz hCMEC/D3 Human Nein 15-30 k. A. URICH et al. 2012 LCC-Wt Bovin Nein 800 Mannitol: 4-6 LÖSCHER et al. 2011 Primärkultur Bovin Ja 169-500 Fluorescein: 1,87 PERRIÈRE et al. 2005 (Ratte) Primärkultur Bovin Auch bis 600 k. A. HUTAMEKALIN et al. 2008 (Ratte) Primärkultur Bovin Nein 400-700 Mannitol: 18 FRANKE et al. 2000 (Schwein) Primärkultur Bovin Nein bis 1800 Sucrose: 0,2 NITZ et al. 2003 (Schwein) Primärkultur Bovin Auch 130 Fluorescein: 1,6-17,6 GAILLARD & DE BOER 2000 (Rind) Primärkultur Equin Nein 60-80 k. A. LEE 2004 (Rind) 131

ERGEBNISSE<br />

Versuche mit einer Gruppengröße von n=1 gearbeitet wurde. Es bleibt festzuhalten,<br />

dass keiner der eingesetzten Inhibitoren in den gewählten Konzentrationen in der<br />

Lage war, den Pgp-vermittelten Transport von Rhodamin 123 vollständig in allen<br />

Versuchen zu hemmen. In zwei von vier Versuchen erhöhten sich die AUC nach<br />

Zugabe eines Pgp-Inhibitors (Abbildung 5.29 B & F). Lediglich in Graph 5.29 D<br />

verringerte sich die AUC um > 50 % nach Zugabe des Inhibitors Tariquidar. Ein<br />

Unterschied zwischen Mono- und Kokultur bzw. Corning- und Greiner-<br />

Membraneinlagen war nicht zu erkennen.<br />

5.2.3.5 Integrität primärer Zellen anhand des TEERs und der Mannitol-<br />

Permeabilität<br />

In Tabelle 5.7 wurden alle gemessenen TEER-Werte und Mannitol-<br />

Permeabilitäten der Transportuntersuchungen mit rBCEC-Zellen beider verwendeter<br />

Rattenstämme (CD und Wistar) zusammengefasst. Es wurde deutlich, dass es auch<br />

für die Primärzellen einen Unterschied machte, ob diese auf kleinen 12Well-<br />

Membranen oder größeren 6Well-Membranen kultiviert wurden. Mit der Kultur der<br />

rBCEC-Zellen auf 12Well-Membranen wurden höhere TEER-Werte gemessen.<br />

Gleichzeitig erhöhte sich aber auch die Permeabilität für Mannitol um das etwa das<br />

Dreifache. Unterschiede wurden des Weiteren zwischen den Membranherstellern<br />

Corning und Greiner (Vergleich 12Well-Format) und den Rattenstämmen CD und<br />

Wistar deutlich. Wurden die primären Zellen auf Greiner-Membranen kultiviert<br />

erhöhte sich der TEER und die Mannitol-Permeabilität sank. Im Vergleich der Zellen<br />

aus CD- und Wistar-Ratten fiel auf, dass für die Monolayer der CD-Ratten höhere<br />

TEER-Werte und niedrigere Mannitol-Permeabilitäten gemessen wurden.<br />

130

Hurra! Ihre Datei wurde hochgeladen und ist bereit für die Veröffentlichung.

Erfolgreich gespeichert!

Leider ist etwas schief gelaufen!