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TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

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% Digoxin<br />

% Digoxin<br />

% Rhodamin 123<br />

% Rhodamin 123<br />

ERGEBNISSE<br />

A<br />

180<br />

160<br />

Rhodamin 123 (2 µM)<br />

rBCEC P:1 (CD)<br />

n=1<br />

apikal<br />

basolateral<br />

B<br />

180<br />

160<br />

Rhodamin 123 (2 µM)<br />

rBCEC P:1 (Wistar)<br />

n=1<br />

140<br />

120<br />

TEER: 81,7 *cm 2<br />

140<br />

120<br />

TEER: 79,4 *cm 2<br />

100<br />

100<br />

80<br />

80<br />

60<br />

0 60 120 180 240<br />

min<br />

60<br />

0 60 120 180 240<br />

min<br />

C<br />

Digoxin (10 nM)<br />

rBCEC P:1 (CD)<br />

n=1<br />

D<br />

Digoxin (10 nM)<br />

rBCEC P:1 (Wistar)<br />

n=1<br />

180<br />

180<br />

160<br />

140<br />

120<br />

TEER: 88,7 *cm 2<br />

160<br />

140<br />

120<br />

TEER: 140,1 *cm 2<br />

100<br />

100<br />

80<br />

80<br />

60<br />

60<br />

0 60 120 180 240<br />

min<br />

0 60 120 180 240<br />

min<br />

Abbildung 5.26: Transportversuche nach der Konzentrationsgleichgewichtsmethode (CETA)<br />

mit den Substraten Rhodamin 123 (A & B) und Digoxin (C & D) in primären<br />

Hirnkapillarendothelien aus CD- und Wistar-Ratten auf Membraneinlagen im 6Well-Format. Für<br />

keines der Substrate war ein asymmetrischer Transport nachweisbar. Mit der unter D gezeigten<br />

Ausnahme waren die TEER-Werte ähnlich hoch. Die Mannitol-Permeabilitäten lagen zwischen<br />

85 und 97 nm/s.<br />

Der Konzentrationsverlauf wurde über 4 h beobachtet. Die Kultivierung der Zellen erfolgte auf<br />

Polycarbonat-Membraneinlagen (Corning). Die Versuche wurden 4 bzw. 6 Tage nach Erreichen<br />

der Konfluenz durchgeführt. Die Daten sind als Mittelwerte ± SEM angegeben.<br />

Das Membranmaterial<br />

Das Material, aus dem die Membranen für die Transwell-Inserts hergestellt<br />

werden, kann auf die Detektion eines Transports Einfluss nehmen. Für die<br />

Transportversuche mit den Primärkulturen des Hirnkapillarendothels wurden<br />

Polyester-Membraneinlagen der Firmen Corning und Greiner Bio-One verwendet.<br />

Diese bestehen zwar aus dem gleichen Material, zeigen aber eine unterschiedliche<br />

123

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