TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

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ERGEBNISSE Obwohl die TEER-Werte und Mannitol-Permeabilitäten für alle unter Abbildung 5.25 dargestellten Versuche vergleichbar waren, konnte in rBCEC-Zellen der Rattenstämme CD und Wistar nur ein Transport von Rhodamin 123 (2 µM) detektiert werden. Dabei zeigten diese Zellen ähnlich hohe TEER-Werte wie die humanen Zellen hCMEC/D3 auf Membraneinlagen im 12Well-Format. Zellen, die aus CD- Ratten gewonnen wurden, zeigten einen gleichmäßigeren Konzentrationsverlauf als die Zellen des anderen Stamms. Die Mannitol-Permeabilitäten waren alle mindestens 20-mal höher als die Grenze von 12 nm/s. Der Nachweis eines asymmetrischen Transports von Digoxin und Verapamil war unter den genannten Konzentrationen und Bedingungen nicht möglich. 120

% Verapamil % Verapamil % Digoxin % Digoxin % Rhodamin 123 % Rhodamin123 ERGEBNISSE A Rhodamin 123 (2 µM) rBCEC P:1 (CD) n=4 B Rhodamin 123 (2 µM) rBCEC P:1 (Wistar) n=4 180 160 140 120 100 apikal basolateral TEER: 162,5 *cm 2 * * * 180 160 140 120 100 * TEER: 140,1 *cm 2 * * * 0 60 120 180 240 min 0 60 120 180 240 min C Digoxin (10 nM) rBCEC P:1 (CD) n=4 D Digoxin (10 nM) rBCEC P:1 (Wistar) n=4 400 400 350 350 300 300 250 250 200 TEER: 134,2 *cm 2 150 0 60 120 180 240 min 200 TEER: 142,2 *cm 2 150 0 60 120 180 240 min E Verapamil (10 nM) rBCEC P:1 (CD) n=6 F Verapamil (10 nM) rBCEC P:1 (Wistar) n=6 400 400 350 300 TEER: 149,5 *cm 2 350 300 TEER: 127,3 *cm 2 250 250 200 200 150 0 60 120 180 240 300 360 min 150 0 60 120 180 240 300 360 min Abbildung 5.25: Vergleichende Transport-Assays nach der Konzentrationsgleichgewichtsmethode (CETA) mit den Substraten Rhodamin 123 (A & B), Digoxin (C & D) und Verapamil (E & F) in monokultivierten Primärkulturen des Hirnkapillarendothels aus CD- und Wistar-Ratten auf Membraneinlagen im 12Well-Format (Corning). Für Rhodamin 123 konnte ein asymmetrischer Transport in den rBCEC nachgewiesen werden. 121

ERGEBNISSE<br />

Obwohl die TEER-Werte und Mannitol-Permeabilitäten für alle unter Abbildung<br />

5.25 dargestellten Versuche vergleichbar waren, konnte in rBCEC-Zellen der<br />

Rattenstämme CD und Wistar nur ein Transport von Rhodamin 123 (2 µM) detektiert<br />

werden. Dabei zeigten diese Zellen ähnlich hohe TEER-Werte wie die humanen<br />

Zellen hCMEC/D3 auf Membraneinlagen im 12Well-Format. Zellen, die aus CD-<br />

Ratten gewonnen wurden, zeigten einen gleichmäßigeren Konzentrationsverlauf als<br />

die Zellen des anderen Stamms. Die Mannitol-Permeabilitäten waren alle mindestens<br />

20-mal höher als die Grenze von 12 nm/s. Der Nachweis eines asymmetrischen<br />

Transports von Digoxin und Verapamil war unter den genannten Konzentrationen<br />

und Bedingungen nicht möglich.<br />

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