TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

% Rhodamin 123
% Rhodamin 123
% Rhodamin 123
% Rhodamin 123
ERGEBNISSE
A
150
125
Monokultur, 6Well (PET)
hCMEC/D3 P:31
n=3
apical
basolateral
B
150
125
Monokultur, 12Well (PET)
hCMEC/D3 P:30
n=3
* * *
*
*
100
100
75
TEER: 29,6 *cm 2
50
0 30 60 90 120
min
75
TEER: 119,0 *cm 2
50
0 30 60 90 120 150 180 210 240
min
C
Kokultur, 12Well (PET)
hCMEC/D3 P:35 + Astrozyten P:7
n=6
D
Kokultur, 12Well (PC)
hCMEC/D3 P:30 + Astrozyten P:15
n=3
150
125
100
* * *
150
125
100
*
*
*
* *
75
TEER: 155,2 *cm 2
50
0 30 60 90 120 150 180 210 240
min
75
TEER: 162,6 *cm 2
50
0 30 60 90 120 150 180 210 240
min
Abbildung 5.19: Zwei vergleichende Transport-Assays (CETA) mit monokultivierten (A & B) und
kokultivierten hCMEC/D3-Zellen (C & D) und 2 µM Rhodamin. Die Kultivierung der Zellen
erfolgte auf Membraneinlagen der Firma Corning im 6Well-Format (A) bzw. 12Well-Format (B-
D). Die Membranen bestanden aus Polyester (A-C) bzw. aus Polycarbonat (D). Die Zellen
wurden an Tag 10 und 7 nach Erreichen der Konfluenz für den Transport-Assay verwendet.
Veränderungen der Rhodamin-Konzentration in der apikalen und basolateralen Kammer
wurden über 2 h (A) bzw. 4 h (B-D) beobachtet. Die TEER-Werte waren im Vergleich zu denen
monokultivierter hCMEC/D3-Zellen auf Membraneinlagen im 6Well-Format etwa 4-mal erhöht (A
& B). Die Mannitol-Permeabilitäten lagen für die Monokultur auf 12Well-Membraneinlagen (B)
bei 366,5 nm/s und für die Kokultur auf Polyethylen-Membraneinlagen (C) bei 24 nm/s. Die
kokultivierten Zellen auf Polycarbonat-Membraneinlagen (D) zeigten eine Mannitol-
Permeabilität von 191,5 nm/s. Für den unter A dargestellten Versuch wurde Mannitol nicht
untersucht. Die mit Astrozyten kokultivierten humanen Zellen auf 12Well-Membraneinlagen
wiesen höhere TEER-Werte und i.d.R. niedrigere Mannitol-Permeabilitäten als monokultivierte
Zellen auf.
Ein Transport von Rhodamin 123 (2 µM) in monokultivierten hCMEC/D3-Zellen und deren
Kokultur mit Astrozyten konnte gezeigt werden (B-D). Die Daten sind als Mittelwerte ± SEM
101