TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

ERGEBNISSE
verschiedenen Materialien (Polyester und Polycarbonat) dargestellt, auf den genauer
unter den genannten Punkten eingegangen wird.
5.1.4.5 Bidirektionaler Transport-Assay
Die ersten Versuche wurden mittels der
Konzentrationsgleichgewichtsmethode (CETA), die sich für den Nachweis des
Transports von Antiepileptika als sensitiver erwiesen hat, durchgeführt. Dies führte
aber nur bedingt zum Nachweis eines asymmetrischen Transports, weshalb weitere
Transportversuche mit der bidirektionalen Methode durchgeführt wurden. Andere
Arbeitsgruppen, die Transportuntersuchungen mit den hCMEC/D3-Zellen
durchführen, verwenden ausschließlich den bidirektionalen Assay (POLLER et al.
2008; CARL et al. 2010). Daher wurde dieser zum Vergleich mit dem CETA
angewandt. Es wurde nur die Substanz Rhodamin 123 als Substrat eingesetzt.
Digoxin wurden unter diesen Bedingungen nicht untersucht. Wenn die Transportratio
einen Wert von mindestens 1,5 aufweist, spricht man von einem Transport.
Mit der bidirektionalen Methode gelang es nicht, einen eindeutigen
asymmetrischen Transport nachzuweisen. In Abbildung 5.18 A war ein geringer
asymmetrischer Transport zu erkennen, der allerdings eine Transportrate von nur 1,2
aufwies. Alle Transportraten für die hCMEC/D3-Zellen zeigten niedrigere Werte als
1,5. Obwohl in diesem Zusammenhang Medien mit einem unterschiedlichem
Ausmaß an Mediumszusätzen (v.a. Wachstumsfaktoren) getestet wurden, ließ dies
keinen Einfluss erkennen. Die Mannitol-Permeabilität war stets höher als der
Grenzwert von 12 nm/s. Es fiel auf, dass die Greiner-Membraneinlagen eine höhere
Transportrate aufwiesen, aber die TEER-Werte niedriger ausfielen. Dies ist mit den
Ergebnissen der Transportversuche nach der CETA-Methode vergleichbar. Deshalb
wurde für weitere Transportversuche die Konzentrationsgleichgewichtsmethode
angewandt.
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