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Pankreasgewebeschnitte angepasst und optimiert. Dabei zeigte bereits die
Hellfeldmikroskopie, dass Zymogengranula, Erythrozyten und elastische Fasern, also
autofluoreszenzreiche Strukturen, intensiv durch Sudan Schwarz angefärbt werden (Abb. 7
H). Zellkerne färben sich mit Sudan Schwarz nur schwach an (Abb. 6 G), die vergleichsweise
intensive Autofluoreszenz der Kerne bleibt dementsprechend relativ ausgeprägt erhalten.
Weiterhin konnte gezeigt werden, dass die Intensität der Färbung pankreatischer Azini durch
Sudan Schwarz bei verlängerter Färbezeit deutlich zunimmt (Abb. 6 A-G). Darüber hinaus
konnte im DAPI Filtersatz ermittelt werden, dass die Autofluoreszenz der Azini mit
verlängerter Färbezeit abnimmt (Abb. 6 H-N, P). Eine optimale Unterdrückung der
Autofluoreszenz von Azini lag bei 90 minütiger Sudan Schwarz-Inkubation vor (Abb. 6 P).
Nach der in der Literatur beschriebenen Inkubationszeit von 30 Minuten (Viegas 2007)
konnte die Autofluoreszenzintensität im DAPI Filtersatz um 59% reduziert werden (Abb. 6
P). Diese Arbeit zeigte, dass die Autofluoreszenz der Azini in diesem Filtersatz nach 90
Minuten Inkubationszeit um 80% 7 reduziert wurde (Abb. 6 P), ein Wert der sich nur noch
ungleichmäßig steigern ließ.
Abb. 6: Autofluoreszenz pankreatischer Azini im Zeitverlauf der Sudan Schwarz Inkubation. A-G
Hellfeldmikroskopie, die wenig gefärbten Zellkerne sind deutlich erkennbar (G). H-N Autofluoreszenz von
Gewebeschnitt A-G im DAPI Filtersatz. P Absolute gemittelte Intensität von H-N ohne Leerwertkorrektur. A-N:
Olympus PlanN 40x/0.65 Objektiv. Balken 25 µm, Belichtungszeit DAPI 200 ms, Hellfeld 5 ms. n = 2
unabhängige Versuche.
7 Autofluoreszenz vor der Behandlung entspricht 100%
70