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3.1.2 Material Blutentnahmesystem (Serum, EDTA, K2 EDTA-Gel, Heparin) ELISA 96-Lochplatte (BD Falcon 96- Well Microplate, clear imaging plate) Fett-Stift (Dako Pen) Mobicol® Säule Nr. M 2135 KABE Labortechnik, Nümbrecht Falcon, BD Diagnostics, Heidelberg DAKO, Hamburg MoBiTec GmbH, Göttingen Nitrozellulosemembran (Amersham Hybond ECL Nitrozellulose Membrane 0,2µm, 0,45 µm) Objektträger, beschichtet (SuperFrost® Plus) Pipetten/ Pipettenspitzen, 2µl, 20µl, 100µl, 200µl, 1000µl Pipettenspitzen, Einweg, steril, 5ml, 10ml, 25 ml Reagenzröhrchen 15ml, 30ml Reagenzröhrchen 1,5ml, 2ml (nach Eppendorf) Resin (Matrix) für Affinitätschromatographie (PIERCE UltraLink Biosupport) Säulchen, zentrifugierbar, 1ml (Mobicol ® centrifugable 1ml column) Zellkulturschalen rund, Cell + 8cm 2 Zellkulturflaschen, Cell + 175 cm 2 Zellkulturschalten, Cell + 2 cm 2, 24- Lochpatte GE Healthcare, Freiburg Menzel Gläser, Braunschweig Eppendorf, Hamburg Falcon, BD Diagnostics, Heidelberg Falcon Tube, BD Diagnostics, Heidelberg Sarstedt, Nümbrecht Fisher Scientific (Thermofischer), Schwerte MoBiTec Lab Supplies, Göttingen Saarstedt, Nümbrecht Saarstedt, Nümbrecht Saarstedt, Nümbrecht 22
3.1.3 Geräte und Software Bilderstellung/ Bildbearbeitung, Cell^F/ Cell^P imaging-software Blotkammer (Trans-Blot ® SD Semi- Dry) Brutschrank (HERAcell ® CO 2 Inkubator) Dampfgarer (BraunMultiGourmet FS20) ELISA Reader (NOVOstar) Glashomogenisator Heizblock IBM SPSS Statistics 19 Microtom Mikroskop (Olympus BX-41; Kamera: U TV1X-2 CC) Pipettierhilfe (Pipetboy pro) Protein-Elektrophorese Kammer (Mini- Protean Electrophoresis System) UV Transilluminator Waage (Ulm Analytic AC 210 S) Wasseraufbereitungsanlage (Mill-Q ® Integral) Wasserbad (Typ 1004S) Zellkulturwerkbank (HERAsafe ® KS mikrobiologische Sicherheitswerkbank) Zentrifuge (5417 R) Olympus Deutschland, Hamburg Bio-Rad, München Heraeus, Hanau Braun, Kronberg BMG LABTECH, Offenburg B. Braun, Melsungen Grant Instruments, Großbritannien IBM Corp., USA Microm international, Walldorf Olympus Deutschland Hamburg IBS Integra Biosciences, Fernwald Bio-Rad, München Bachofer, Reutlingen Sartorius, Göttingen MilliporeCorporation, Billerica, USA GFL, Großburgwedel Heraeus, Hanau Eppendorf, Hamburg 23
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Seite 16 und 17: zwischen Cathepsin L und B sowie St
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Seite 26 und 27: Matrixproteine Laminin-1 und Fibron
Seite 28 und 29: die Verwendung von Antikörpern, di
Seite 30 und 31: 2. Aufgabenstellung Um eine zuverl
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Seite 40 und 41: PBS, phosphate buffered saline 13,7
Seite 42 und 43: 3.1.6 Antikörper Zur Detektion bes
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Seite 56 und 57: Kupplungspuffer bestehend aus 0,6 M
Seite 58 und 59: Sekundärantikörpern inkubiert. Di
Seite 60 und 61: erhöhte Salzkonzentration sollte d
Seite 62 und 63: die Gruppen „chronische Pankreati
Seite 64 und 65: Alexa Fluor 488, Ziegenantikörper
Seite 66 und 67: Veränderungen der Plasmakonzentrat
Seite 68 und 69: derselben Firma durchgeführt. Dabe
Seite 70 und 71: 4.9 Statistische Auswertung Die Erg
Seite 72 und 73: 5. Ergebnisse Im Folgenden werden d
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Seite 78 und 79: Abb. 4: Immunfluoreszenzmarkierung
Seite 80 und 81: Bildbereich als Leerwert ausgewähl
Seite 82 und 83: Pankreasgewebeschnitte angepasst un
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Wie bereits in Abb. 6 gezeigt, wird
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Abb. 8: Fluoreszenzmarkierung von R
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Abb. 9: Zwei histopathologische Bil
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Abb. 11 A zeigt die Fluoreszenzmark
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Abb. 12: A-C‘ Chronische Pankreat
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Abb. 13: Immunfluoreszenzmarkierung
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In Abb. 14 A wurde S100A9 in Gewebe
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Abb. 16: Immunfluoreszenzmarkierung
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5.4 Ergebnisse der quantitativen Pr
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Abb. 19: ROC-Analyse der S100A8/A9
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signifikant, während sich die Grup
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Abb. 22: ROC-Analyse der Plasmakonz
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6. Diskussion Das Pankreas produzie
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Das zweite Protein, das in dieser A
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ICAM-1 des Endothels erhöht. Fasst
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(Ghavami 2004) beschrieb die Indukt
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Adenokarzinom meistens im Pankreask
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Reg3A für die Aggregation von Bakt
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homogener Tumortypen zur Immunfluor
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spricht dafür, dass man chronische
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Als Indikator der Überexpression v
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detektiert werden. In der Mehrzahl
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8. Summary Till Erben: “Detection
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ER Fab Fc GAPDH (G/V) h HE HPF HRP
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Puffer RNA ROC ROS rpm RT SB Sens.
Seite 134 und 135:
Chelvanayagam DK, Beazley LD (1997)
Seite 136 und 137:
Keim V, Iovanna JL, Rohr G, Usadel
Seite 138 und 139:
Ni XG, Bai XF, Mao YL, et al. (2005
Seite 140 und 141:
Strobel O, Rosow DE, Rakhlin EY, et
Seite 142 und 143:
11. Danksagung Mein herzlicher Dank
Seite 144 und 145:
What to do with high autofluorescen
Seite 146 und 147:
Introduction: The preservation of t
Seite 148 und 149:
erythrocytes (Baschong, et al., 200
Seite 150 und 151:
Materials and Methods: Preparation
Seite 152 und 153:
carried out by first applying Sudan
Seite 154 und 155:
For each set of compared experiment
Seite 156 und 157:
was visualized using bright field m
Seite 158 und 159:
prior to the application immunolabe
Seite 160 und 161:
Discussion: Intrinsic and induced a
Seite 162 und 163:
effects on the fluorescent staining
Seite 164 und 165:
Toluidine Blue has been described t
Seite 166 und 167:
References: Andersson, H., Baechi,
Seite 168 und 169:
Rosenow, F., Ossig, R., Thormeyer,
Seite 170 und 171:
Tab. 1: Specifications of the filte
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Figure legends Fig. 1 Localization
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conjugated antibodies reveal mature
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Fig. 2 Fig. 3 - 33 -
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Fig. 6 - 35 -
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Fig. 8 - 37 -
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