Tierärztliche Hochschule Hannover - TiHo Bibliothek elib

2. Aufgabenstellung
Um eine zuverlässige, frühzeitige und differenzierte Diagnostik von Pankreaserkrankungen
durchführen zu können ist es Ziel dieser Arbeit, Proteine zu finden, die nicht nur zufällig
während der Pathogenese der Pankreaserkrankungen ins Blut gelangen wie beispielsweise
Lipase, Amylase, CEA und CA19-9, sondern solche Proteine zu detektieren, die an der
Pathogenese der Pankreaserkrankung essentiell beteiligt sind. Daher beschränkt sich diese
Arbeit nicht darauf, Proteine im Blut zu detektieren, sondern vielmehr soll auch
herausgefunden werden, wo und in welchem Maße diese Proteine bei Pankreatitis und bei
Pankreasneoplasien detektiert werden können. Dabei wird die Theorie verfolgt, dass ein
Protein, das essentielle Bedeutung bei der Entwicklung einer Erkrankung hat, auch
zuverlässig und sensitiv in der Diagnostik verwendet werden kann. Ein Protein hingegen,
welches nicht essentiell für die Entstehung einer Erkrankung ist, ist möglicherweise auch
weniger zuverlässig für die Frühdiagnostik geeignet (CEA; CA19-9). Um dieses Ziel zu
verfolgen wurden im Einzelnen folgende Fragestellungen bearbeitet:
Hühner sind mit Peptidsequenzen von humanen S100A9 und Reg3A-Proteinen vakziniert
worden. Die von den Hühnern produzierten Antikörper sollten aus den Eiern isoliert werden.
Es sollte überprüft werden, ob die isolierten Antikörper ihre Epitope erkennen. Diese
Antikörper sollten dann zur Detektion von S100A9 und Reg3A Proteinen im Western-Blot, in
Pankreaskarzinom-Zelllinien und in humanem Gewebe mit verschiedenen
Pankreaserkrankungen verwendet werden.
Parallel zur Detektion der S100A8/A9 und Reg3A Proteine im Blutplasma von Gesunden,
von Patienten mit Chronischer Pankreatitis und von Patienten mit Duktalem Adenokarzinom
sollten die Proteine auch in Biopsien von Patienten derselben Diagnosegruppen detektiert
werden. Auf diese Weise sollte herausgefunden werden, ob erhöhte
Blutplasmakonzentrationen zufällig koinzident mit den Pankreaserkrankungen auftreten, oder
ob ein Kausalzusammenhang besteht. Weiterhin sollte überprüft werden, ob anhand der in
humanen Gewebeproben festgestellten Lokalisation und Expression der Proteine, die bisher in
der Literatur vor allem für Maus und Ratte beschrieben Funktionshypothesen bestätigt werden
können.
Letztlich sollten Blutplasmakonzentrationen bereits zur Diagnostik von
Pankreaserkrankungen etablierter Proteine wie CRP, CA19-9 und CEA mit den
Konzentrationen von S100A8/A9 und Reg3A verglichen werden. In dieser Arbeit soll
untersucht werden, ob der S100A8/A9 Proteinkomplex sowie das Reg3A Protein potenziell
zur Ergänzung der bereits etablieren Proteinmarker geeignet erscheinen. Es sollte der Ansatz
verfolgt werden, dass die Kombination mehrerer unterschiedlicher im Blut detektierter
Proteine eine sensitivere und spezifischere Differentialdiagnostik von Pankreaserkrankungen
des Menschen ermöglicht.
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