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Einleitung
1 Einleitung
Eberspermatozoen werden auf Grund ihrer ausgeprägten Kälteschocksensibilität bei
vergleichsweise hohen Temperaturen (zwischen 15 und 20°C) konserviert. Unter
diesen Bedingungen ist Ebersperma für ca. drei Tage haltbar. Niedrigere
Lagerungstemperaturen sind wünschenswert, da das Keimwachstum minimiert und
die Transportlogistik erleichtert würden. Gleichzeitig wird eine Verlängerung der
Lagerungsdauer angestrebt. Verfahren zur Erprobung neuer Konservierungsstrategien
benötigen sensitive Testsysteme, die eine Einschätzung befruchtungsrelevanter
Spermieneigenschaften zulässt. Die klassischen standardspermatologischen
Parameter Motilität und Morphologie sind dazu nicht ausreichend
(WABERSKI et al., 2011). Basierend auf Grundlagenarbeiten von HARRISON et al.
(1993) und PETRUNKINA et al. (2005) wurde kürzlich in der Arbeitsgruppe dieses
Labors ein Assay entwickelt, der einen deutlichen Zusammenhang zwischen
Spermienfunktion und in vitro-Lagerungsbedingungen aufzeigt (HENNING et al.,
2012, SCHMID et al. 2013a). Dabei wird die Reaktivität der Spermien auf
Kapazitationsstimuli mittels durchflusszytometrischer Bestimmung des intrazellulären
Calciumgehaltes ermittelt. Die Fähigkeit von Säugetierspermien zur Kapazitation,
d. h. zur Reifung im weiblichen Genitaltrakt, ist ein entscheidender Faktor für den
Befruchtungserfolg. Der Assay erwies sich als sensitiv genug, um Einflüsse von
Lagerungsdauer, -temperatur und Konservierungsmedium zu detektieren (HENNING
et al. 2012, SCHMID et al, 2013 a,b,). Neben diesen Faktoren wird der
Konservierungserfolg im Niedrigtemperaturbereich entscheidend durch die eberindividuelle
Eignung beeinflusst. Daher wird die Selektion von Ebern hinsichtlich
deren Fähigkeit zur Konservierbarkeit der Spermien bei Temperaturen unterhalb von
15°C und zur Langzeitlagerung diskutiert. Bislang ist es unklar, ob der neue Assay
das Potenzial hat, solche Eber zu identifizieren. Dazu müsste er sensitiv
Unterschiede bei nach Standardkriterien normospermen Ebern aufzeigen können.
Voraussetzung für eine Anwendbarkeit in der Praxis ist darüber hinaus, dass der
Reaktivitäts-parameter eberspezifisch ist. Es war daher das Ziel dieser Arbeit zu
untersuchen, ob die Reaktivität auf Kapazitationsstimuli einen Parameter darstellt,
der eberindividuelle Unterschiede in der Lagerungsfähigkeit von Spermien unter
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