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Diskussion
(PI-negativ/ Fluo-3-negativ), mit sinkender Lagerungstemperatur ab (p < 0,05). Eine
zunehmende Lagerungszeit bewirkte ebenfalls einen Abfall der spezifisch auf
Bikarbonat reagierenden Spermienpopulation. Dies manifestierte sich bei 17 °C
Lagertemperatur zwischen 72 und 120 Stunden und bei 5 °C bereits zwischen 24
und 72 Stunden Lagerung (p < 0,05). Die spezifische Reaktivität ist somit stärker von
der Lagerungstemperatur als von der Dauer der Lagerung beeinflusst. Diese
Ergebnisse sind übereinstimmend mit der Studie von HENNING et al. (2012), die
ebenfalls einen deutlichen Einfluss der Lagerungszeit bei 17 °C beschreiben. Die
spezifische Reaktivität auf Bikarbonat sank kontinuierlich zwischen den einzelnen
Untersuchungszeitpunkten (12, 24, 72, 120 und 168 h). SCHMID et al. (2013)
untersuchten die Auswirkungen unterschiedlicher Lagerungstemperaturen auf die
spezifische Reaktivität auf Kapazitationsstimuli bei gleichzeitiger Anwesenheit von
Bikarbonat und Calcium im Medium. Dabei beobachteten sie ebenfalls eine
temperaturabhängige Reduktion dieses Parameters, während die Lagerungsdauer
weniger Einfluss zeigte.
Die Abkühlung und Lagerung flüssig konservierten Ebersamens werden mit einer
steigenden Permeabilität der Plasmamembranen für Calciumionen assoziiert
(GREEN u. WATSON 2001). Durch die Berechnung der spezifischen Reaktivität auf
Calcium konnte in der vorliegenden Arbeit die spezifisch auf Calcium reagierende
Spermienpopulation von einer unspezifisch, d.h. unabhängig von Kapzitationsstimuli
erfolgenden, destabilisierenden Population abgegrenzt werden. Mit zunehmender
Lagerdauer reagierten in einem Calcium-haltigen Medium in Abwesenheit von
Bikarbonat (Tyr Ca ) mehr Spermien mit einem Anstieg des intrazellulären
Calciumgehaltes; somit nahm die destabilisierende Spermienpopulation in
Anwesenheit von Calcium („spezifische Reaktivität auf Calcium“) berechnet anhand
der PI- und Fluo-3-negativen Spermien mit steigender Lagerungsdauer zu, was in
Übereinstimmung mit der Studie von HENNING et al. (2012) steht.
In der vorliegenden Studie kam ein vereinfachtes Protokoll des Ca 2+ -Influx zur
Anwendung, das sich im Vergleich zum Originalprotokoll (HARRISON et al. 1993)
durch den Verzicht auf die Zentrifugation durch den Percoll TM -Gradienten sowie auf
den anschließenden Waschschritt in einem Saccharose-Medium auszeichnete.
Während die Kurvenverläufe bei 17 °C Lager-temperatur dabei qualitativ den
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