TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover
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Ergebnisse 4.1.2 Membranintegrität Der Anteil PI- und FITC-PNA-negativer (membranintakter) Spermien (Abbildung 1) wurde von der Temperatur und der Lagerungsdauer beeinflusst (p < 0,05). Der Prozentsatz membranintakter Spermien sank signifikant nach 24 h Lagerung bei 5°C bzw. nach 72 h bei 17°C im Vergleich zu der frischverdünnten Probe (6 h, 20°C). Der Unterschied zwischen den Lagerungstemperaturen war an jedem Untersuchungstag signifikant. Innerhalb der Temperaturstufen zeigte sich kein signifikanter Einfluss der Lagerungsdauer. 100 90 a a,b b b Membranintakte Spermien (%) 80 70 60 50 40 30 20 10 c c 0 20°C 17°C 17°C 17°C 5°C 5°C 6 h 24 h 72 h 120 h 24 h 72 h Temperatur und Lagerungsdauer (°C ,h) Abb. 1: Prozentualer Anteil membranintakter (Propidiumjodid- und FITC-PNAnegativer) Spermien an der Gesamtpopulation (MW ± SD) in Abhängigkeit von der Lagerungsdauer und -temperatur (n = 7 Eber, n = 42 Ejakulate). Werte mit unterschiedlichen Buchstaben unterscheiden sich signifikant (p < 0,05). 26
Ergebnisse Bei Betrachtung der einzelnen Eber ist bei allen Lagerungszeitpunkten eine absteigende Tendenz der Membranintegritätswerte festzustellen, die jedoch unterschiedlich stark ausgeprägt ist (Abbildung 2). Eberunterschiede zeigten sich besonders bei den 5°C gelagerten Proben. 100 90 80 Membranintakte Spermien (%) 70 60 50 40 30 20 10 0 20°C 17°C 17°C 17°C 5°C 5°C 6 h 24 h 72 h 120 h 24 h 72 h Temperatur(°C) und Lagerungsdauer (h) Eber 1 Eber 2 Eber 3 Eber 4 Eber 5 Eber 6 Eber 7 Abb. 2: Prozentualer Anteil membranintakter (Propidiumjodid- und FITC-PNAnegativer) Spermien für einzelne Eber (MW ± SD) in Abhängigkeit von der Lagerungsdauer und -temperatur (n = 6 Ejakulate je Eber). 4.1.3 Calciuminflux 4.1.3.1 Kurvenverläufe der kinetischen Populationsveränderungen in Abhängigkeit von der Lagerungstemperatur und -dauer Die Ergebnisse des Calciuminflux sind für die verschiedenen Lagerungs- und Temperaturgruppen den Abbildungen 3A bis F zu entnehmen. Dargestellt sind kinetische Verlaufskurven für drei Spermiensubpopulationen nach Inkubation in drei Varianten des Tyrode-Mediums. Die drei Subpopulationen (PI- /Fluo-3-negativ, PInegativ / Fluo-3-positiv, PI-positiv) ergeben sich aus den Kombination der Anfärbung mit Propidiumjodid (Marker für Membranintegrität) und Fluo-3 (Marker für 27
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Ergebnisse<br />
Bei Betrachtung der einzelnen Eber ist bei allen Lagerungszeitpunkten eine<br />
absteigende Tendenz der Membranintegritätswerte festzustellen, die jedoch<br />
unterschiedlich stark ausgeprägt ist (Abbildung 2). Eberunterschiede zeigten sich<br />
besonders bei den 5°C gelagerten Proben.<br />
100<br />
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Membranintakte Spermien (%)<br />
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6 h 24 h 72 h 120 h 24 h 72 h<br />
Temperatur(°C) und Lagerungsdauer (h)<br />
Eber 1 Eber 2 Eber 3 Eber 4 Eber 5 Eber 6 Eber 7<br />
Abb. 2: Prozentualer Anteil membranintakter (Propidiumjodid- und FITC-PNAnegativer)<br />
Spermien für einzelne Eber (MW ± SD) in Abhängigkeit von der<br />
Lagerungsdauer und -temperatur (n = 6 Ejakulate je Eber).<br />
4.1.3 Calciuminflux<br />
4.1.3.1 Kurvenverläufe der kinetischen Populationsveränderungen in<br />
Abhängigkeit von der Lagerungstemperatur und -dauer<br />
Die Ergebnisse des Calciuminflux sind für die verschiedenen Lagerungs- und<br />
Temperaturgruppen den Abbildungen 3A bis F zu entnehmen. Dargestellt sind<br />
kinetische Verlaufskurven für drei Spermiensubpopulationen nach Inkubation in drei<br />
Varianten des Tyrode-Mediums. Die drei Subpopulationen (PI- /Fluo-3-negativ, PInegativ<br />
/ Fluo-3-positiv, PI-positiv) ergeben sich aus den Kombination der Anfärbung<br />
mit Propidiumjodid (Marker für Membranintegrität) und Fluo-3 (Marker für<br />
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