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TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

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Material und Methoden<br />

Fluoreszenzintensität im Kanal FL-1 aufwiesen. Ein Fremdpartikelgehalt der Proben<br />

wurde wie unter 3.5.2.3 beschrieben korrigiert.<br />

3.5.3.4 Berechnung der Reaktivitätsparameter<br />

Die Berechnung der Reaktivitätsparameter erfolgte wie bei HENNING (2009)<br />

beschrieben. Dazu wurden zunächst Verlaufskurven der einzelnen<br />

Spermienpopulationen in den verschiedenen Medien nach unterschiedlicher<br />

Lagerungsdauer erstellt. Anhand dieser Kinetiken wurde ein repräsentativer<br />

Inkubationszeitpunkt aus den Verlaufskurven bestimmt, welcher zum Vergleich<br />

innerhalb einer Spermiensubpopulation zwischen Medien und Lagerungszeitpunkten<br />

diente. Die Reaktivitätswerte wurden errechnet, um dynamische Veränderungen des<br />

Anteils einer Spermiensubpopulation während der Inkubation zu erfassen. Sie<br />

beschreiben die Differenz zwischen dem Prozentsatz einer Spermienpopulation zum<br />

ausgewählten, repräsentativen Zeitpunkt und dem relativen „Nullwert“ nach 3 min<br />

Inkubation. Durch einen Vergleich der Reaktivitätswerte zwischen Tyr BikCa und Tyr Ca<br />

kann auf mögliche lagerungsabhängige Veränderungen der Reaktivität gegenüber<br />

Bikarbonat geschlossen werden. Zur Beschreibung calcium-abhängiger<br />

Destabilisierungsvorgänge („Reaktivität auf Calcium“) wurde dies durch einen<br />

Vergleich zwischen den Medien Tyr Ca und Tyr Kontrolle erreicht. Nachfolgend sind die<br />

Berechnungen für 60 Min. Inkubationsdauer angegeben, die sich analog zu<br />

HENNING (2009) als repräsentativer Zeitpunkt in den kinetischen Messungen<br />

ergaben:<br />

Allgemeine Reaktivität nach 60 min Inkubationsdauer = R60<br />

R60 = %Spermien (60 min) - %Spermien (3 min)<br />

Spezifische Reaktivität auf Bikarbonat nach 60 min Inkubation = R60Bik<br />

R60Bik = R60 (TyrBikCa) - R60 (TyrCa)<br />

Spezifische Reaktivität auf Calcium nach 60 min Inkubation = R60Ca<br />

R60Ca = R60 (TyrCa) - R60 (TyrKontrolle)<br />

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