TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

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Wissenschaftliche Betreuung: Apl.- Prof. Dr. D.Waberski Reproduktionsmedizinische Einheit der Kliniken Klinik für kleine Klauentiere 1. Gutachterin: Apl.-Prof. Dr. Dagmar Waberski 2. Gutachter/in: Prof. Dr. Harald Sieme Tag der mündlichen Prüfung: 14.11.2013

1 Einleitung ..................................................................................1 2 Literaturübersicht.....................................................................3 2.1 Einfluss der Konservierung auf funktionelle Eigenschaften von Eberspermatozoen. 3 2.1.1 Spermienmotilität ................................................................................. 3 2.1.2 Kapazitation in vitro............................................................................... 6 3 Material und Methode.............................................................12 3.1 Versuchsdesign 12 3.2 Versuchstiere 13 3.3 Samengewinnung 13 3.4 Samenverarbeitung und –lagerung 14 3.5 Spermatologische Parameter 14 3.5.1 Computer-assistierte Spermienanalyse .............................................. 14 3.5.1.1 Gerät und Software ............................................................................. 14 3.5.1.2 Probenaufbereitung und Messung ...................................................... 16 3.5.2 Membranintegrität ............................................................................... 17 3.5.2.1 Gerät ................................................................................................... 17 3.5.2.2 Farbstoffe............................................................................................ 17 3.5.2.3 Geräteeinstellung und Fremdpartikelkorrektur .................................... 17 3.5.2.4 Messung und Auswertung................................................................... 19 3.5.3 Calciuminflux....................................................................................... 19 3.5.3.1 Farbstoffe............................................................................................ 20 3.5.3.2 Medien und Messzeitpunkte ............................................................... 20 3.5.3.3 Messung und Auswertung................................................................... 21 3.5.3.4 Berechnung der Reaktivitätsparameter............................................... 22 3.6 Statistik 23 4 Ergebnisse ..............................................................................24 4.1 Experiment 1 24 4.1.1 CASA-Motilitätsparameter................................................................... 24 4.1.2 Membranintegrität ............................................................................... 26 4.1.3 Calciuminflux....................................................................................... 27

1 Einleitung ..................................................................................1<br />

2 Literaturübersicht.....................................................................3<br />

2.1 Einfluss der Konservierung auf funktionelle Eigenschaften von<br />

Eberspermatozoen. 3<br />

2.1.1 Spermienmotilität ................................................................................. 3<br />

2.1.2 Kapazitation in vitro............................................................................... 6<br />

3 Material und Methode.............................................................12<br />

3.1 Versuchsdesign 12<br />

3.2 Versuchstiere 13<br />

3.3 Samengewinnung 13<br />

3.4 Samenverarbeitung und –lagerung 14<br />

3.5 Spermatologische Parameter 14<br />

3.5.1 Computer-assistierte Spermienanalyse .............................................. 14<br />

3.5.1.1 Gerät und Software ............................................................................. 14<br />

3.5.1.2 Probenaufbereitung und Messung ...................................................... 16<br />

3.5.2 Membranintegrität ............................................................................... 17<br />

3.5.2.1 Gerät ................................................................................................... 17<br />

3.5.2.2 Farbstoffe............................................................................................ 17<br />

3.5.2.3 Geräteeinstellung und Fremdpartikelkorrektur .................................... 17<br />

3.5.2.4 Messung und Auswertung................................................................... 19<br />

3.5.3 Calciuminflux....................................................................................... 19<br />

3.5.3.1 Farbstoffe............................................................................................ 20<br />

3.5.3.2 Medien und Messzeitpunkte ............................................................... 20<br />

3.5.3.3 Messung und Auswertung................................................................... 21<br />

3.5.3.4 Berechnung der Reaktivitätsparameter............................................... 22<br />

3.6 Statistik 23<br />

4 Ergebnisse ..............................................................................24<br />

4.1 Experiment 1 24<br />

4.1.1 CASA-Motilitätsparameter................................................................... 24<br />

4.1.2 Membranintegrität ............................................................................... 26<br />

4.1.3 Calciuminflux....................................................................................... 27

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