TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

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28.02.2014 Aufrufe

IX. Anhang X. ANHANG Verwendete Chemikalien Dimethylsulfoxid (DMSO) Di-Natriumhydrogenphosphat (Na 2 HPO 4 ) Natriumcarbonat (Na 2 CO 3 ) Natriumchlorid (NaCl) Natrium-Dihydrogenphosphat (NaH 2 PO 4 ) Natriumhydrogencarbonat (NaHCO 3 ) Schwefelsäure (H 2 SO 4 ), 1N Tetramethylbenzidin (TMB) Tween 20 Wasserstoffperoxid (H 2 O 2 ), 30% Zitronensäure-Monohydrat (Citrat) Sigma-Aldrich, Steinheim Sigma-Aldrich, Steinheim Sigma-Aldrich, Steinheim Roth, Karlsruhe Roth, Karlsruhe Sigma-Aldrich, Steinheim Merck KG aA, Darmstadt Sigma-Aldrich, Steinheim Sigma-Aldrich, Karlsruhe Merck KG aA, Darmstadt Roth, Karlsruhe a

IX. Anhang Tabelle 8: Durchführung ELISA Arbeitsschritt Temperatur Menge in µl/Well Zeit Coaten der Mikrotiterplatte mit Sheep Anti-Bovine IgG1- bzw. IgG2- Antikörper und Coating-Puffer Waschen mit B-Puffer Inkubation mit Erstantikörper Waschen mit B-Puffer Inkubation mit Detektionsantikörper Waschen mit B-Puffer Inkubation mit Substratlösung Stoppen der Farbreaktion mit Stopplösung Messung der Extinktion bei 450 nm und 630 nm Raumtemperatur (RT) bzw. 4°C RT 75 µl 5 Waschgänge mit je 300 µl B-Puffer/Well RT 75 µl RT 5 Waschgänge mit je 300 µl B-Puffer/Well RT 75 µl RT 5 Waschgänge mit je 300 µl B-Puffer/Well 30 min auf dem Schüttler, dann über Nacht bei 4°C 4 min 1 h auf dem Schüttler 4 min 45 min auf dem Schüttler 4 min RT 75 µl 15 – 20 min RT 50 µl b

IX. Anhang<br />

X. ANHANG<br />

Verwendete Chemikalien<br />

Dimethylsulfoxid (DMSO)<br />

Di-Natriumhydrogenphosphat (Na 2 HPO 4 )<br />

Natriumcarbonat (Na 2 CO 3 )<br />

Natriumchlorid (NaCl)<br />

Natrium-Dihydrogenphosphat (NaH 2 PO 4 )<br />

Natriumhydrogencarbonat (NaHCO 3 )<br />

Schwefelsäure (H 2 SO 4 ), 1N<br />

Tetramethylbenzidin (TMB)<br />

Tween 20<br />

Wasserstoffperoxid (H 2 O 2 ), 30%<br />

Zitronensäure-Monohydrat (Citrat)<br />

Sigma-Aldrich, Steinheim<br />

Sigma-Aldrich, Steinheim<br />

Sigma-Aldrich, Steinheim<br />

Roth, Karlsruhe<br />

Roth, Karlsruhe<br />

Sigma-Aldrich, Steinheim<br />

Merck KG aA, Darmstadt<br />

Sigma-Aldrich, Steinheim<br />

Sigma-Aldrich, Karlsruhe<br />

Merck KG aA, Darmstadt<br />

Roth, Karlsruhe<br />

a

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