TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

III. Material und Methoden
3.4 Milchleistung, Milchprobenentnahme und -aufbereitung
Die Milchleistung wurde ab Tag 7 p.p. über den gesamten Versuchszeitraum täglich
erfasst. Vor Auswertung der Daten wurde ein wöchentlicher Mittelwert gebildet. Zur
besseren Vergleichbarkeit ist die Milchleistung im Folgenden als fat corrected milk
(FCM) dargestellt. Der FCM wurde nach folgender Formel berechnet (GAINES
1928): FCM [kg/Tag] = ((Milchfett [%] * 0,15) + 0,4) * Milchleistung [kg/Tag].
Die Milchprobenentnahme erfolgte jeweils morgens in den ersten sieben Tagen nach
der Geburt sowie an Tag 14 und 21 p.p.. Es wurden etwa 250 ml Sekret gewonnen.
Dabei handelt es sich um Sammelmilchproben aus allen Eutervierteln des jeweiligen
Tieres. Die Milchproben wurden zunächst bis zu ihrer weiteren Verwendung bei
-18°C eingefroren.
Als Vorbereitung für den ELISA wurden die Milchproben für 2 x 10 min bei 18.670 g
und 4°C zentrifugiert (RC-5C bzw. RC-5B Sorvall Superspeed Centrifuge, Dupont,
Rotortyp: SS34). Nach der ersten Zentrifugation wurde das Milchfett abgenommen,
dass sich durch das Zentrifugieren an der Oberfläche der Milch abgesetzt hatte.
Anschließend wurde das verbliebene Milchserum noch einmal zentrifugiert und nach
der zweiten Zentrifugation eventuelle Überstände aus Milchfett erneut verworfen. Die
Milchproben wurden anschließend aliquotiert und bis zur weiteren Verwendung bei
-18°C eingefroren. Vor der Herstellung der Verdünnungsreihe für den Immunglobulin-
ELISA wurden die Proben zunächst bei Raumtemperatur aufgetaut und dann bei
6.800 g für 5 Minuten bei Raumtemperatur zentrifugiert (Espresso-Zentrifuge,
Thermo Scientific).
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