Der GMOfinder - DLR Online: Deutsche Lebensmittel Rundschau
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» Sonderthema: Mikrobiologische Methoden in der <strong>Lebensmittel</strong>analytik 641<br />
Abb. 1 Schematische Darstellung des Funktionsprinzips der MALDI-<br />
TOF-MS (a: Beschleunigungsstrecke, b: Driftstrecke, TOF ~ m/z)<br />
Tab. 1 Auswahl der Backhefestämme<br />
Backhefestämme<br />
Stammkodierung<br />
Saccharomyces cerevisiae 2.020<br />
Saccharomyces cerevisiae 2.045<br />
Saccharomyces cerevisiae 2.068<br />
Saccharomyces cerevisiae 2.119<br />
Saccharomyces cerevisiae 2.129<br />
Saccharomyces cerevisiae 2.200<br />
küle werden in einem elektrischen Feld<br />
nach ihrem Verhältnis von Masse zu Ladung<br />
getrennt (Abb. 1) [4].<br />
Hefe-Isolate<br />
Verwendet werden vers chiedene, speziell<br />
ausgewählte Hefen aus der VH-Stammsammlung<br />
(Versuchsanstalt der Hefeindustrie<br />
e. V.) (Tab. 1), sowie der VLB-Stammsammlung<br />
(Versuchs- und Lehranstalt für<br />
Brauerei in Berlin e. V.) (Tab. 2). Exemplarisch<br />
werden typische Vertreter der obergärigen<br />
und untergärigen Saccharomyces-<br />
Hefen sowie Nicht-Saccharomyces-Hefe<br />
genutzt.<br />
Kultivierungsbedingungen und<br />
Probenaufarbeitung<br />
Für die Kultivierung der Hefen wird zunächst<br />
ein chemisch definiertes Medium<br />
nach Olsen and Johnson (1949) verwendet,<br />
um reproduzierbare Ergebnisse zu erzeugen<br />
und eventuelle Störfaktoren im<br />
Wachstum der Hefen durch ein undefiniertes,<br />
variierendes Vollmedium auszuschließen.<br />
Dazu wird eine Vorkultur mit einer einzelnen<br />
Kolonie beimpft und für 48 Stunden<br />
bei einer Temperatur von 30 °C als<br />
aerobe Standkultur inkubiert. Aus dieser<br />
Vorkultur werden durch Übertrag von Hefen<br />
mit einer definierten Zielkonzentration<br />
(Zellen/mL) Hauptkulturen angesetzt.<br />
Die aus den verschiedenen Wachstumsphasen<br />
(Abb. 2) geernteten Hefen werden<br />
anschließend mit einer 70 %igen<br />
Ethanollösung gewaschen und zentrifugiert.<br />
Das getrocknete Hefepellet wird<br />
in einer 70 % Ameisensäure-/Acetonitrilmischung<br />
(1:1) resuspendiert und zentri-<br />
<strong>DLR</strong> | Dezember 2012 «<br />
a<br />
++ +<br />
++<br />
+ ++ +<br />
+<br />
Beschleunigungselektrode(n)<br />
Laserimpuls<br />
Intensität<br />
b<br />
+ +<br />
Probenteller<br />
mit<br />
Matrixkristall<br />
Detektor<br />
Tab. 2 Auswahl der Bierhefestämme<br />
Bierhefestämme<br />
Nicht-Saccharomyces-Fremdhefe<br />
Nicht-Saccharomyces-Fremdhefe<br />
Nicht-Saccharomyces-Fremdhefe<br />
Nicht-Saccharomyces-Fremdhefe<br />
Nicht-Saccharomyces-Fremdhefe<br />
Nicht-Saccharomyces-Fremdhefe<br />
Nicht-Saccharomyces-Fremdhefe<br />
Nicht-Saccharomyces-Fremdhefe<br />
Nicht-Saccharomyces-Fremdhefe<br />
Nicht-Saccharomyces-Fremdhefe<br />
obergärig Brauhefe<br />
obergärig Brauhefe<br />
obergärig Brauhefe<br />
obergärig Brauhefe<br />
Saccharomyces-Fremdhefe<br />
Saccharomyces-Fremdhefe<br />
Saccharomyces-Fremdhefe<br />
Saccharomyces-Fremdhefe<br />
Saccharomyces-Fremdhefe<br />
untergärig Brauhefe<br />
untergärig Brauhefe<br />
untergärig Brauhefe<br />
untergärig Brauhefe<br />
untergärig Brauhefe<br />
m/z<br />
Stammkodierung<br />
NSF-Bl1<br />
NSF-Dh1<br />
NSF-Hg1<br />
NSF-Kl1<br />
NSF-Kl2<br />
NSF-Km1<br />
NSF-Kt1<br />
NSF-Pf1<br />
NSF-Pm1<br />
NSF-Ps1<br />
obg1<br />
obg2<br />
obg3<br />
obg4<br />
SF-b1<br />
SF-b2<br />
SF-d1<br />
SF-f1<br />
SF-i1<br />
ug1<br />
ug2<br />
ug3<br />
ug4<br />
ug5
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