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Mikrobiologische Übung FI, Teil 2b - Mikrobiologie und Weinforschung

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2. Chromatographiestreifen in beschriftete <strong>und</strong> 2 ml Lösungsmittel enthaltende<br />

Reagenzgläser hängen (Startlinie unten) <strong>und</strong> mit Stopfen verschließen.<br />

Gruppe 1: Gruppe 2:<br />

<br />

Wasser Wasser<br />

3% NH 4 CI Methanol<br />

Aceton Ethylacetat<br />

Trichlormethan Trichlormethan<br />

Zunehmend apolar Zunehmend<br />

3. Weichagar verflüssigen, auf 50°C abkühlen (25 ml)<br />

4. Mit 2 ml einer 24 St<strong>und</strong>en alten Staphylococcenkultur beimpfen <strong>und</strong> gleichmäßig<br />

über die Gr<strong>und</strong>schicht auf der Petrischale mit Nähragar verteilen, fest werden<br />

lassen.<br />

5. Auf der Plattenunterseite beschriften (Laufmittel) <strong>und</strong> Strich ziehen, um<br />

Chromatogramme auf eine Startlinie zu legen.<br />

6. Chromatographiestreifen entnehmen, auf Alufolie legen, trocknen (an der<br />

Flamme!).<br />

7. Die Streifen an den Enden so zurechtschneiden, daß sie auf die Platte passen.<br />

Die gut getrockneten Chromatogramme werden vorsichtig mittels abgeflammter<br />

Pinzette auf die beschriftete Platte gelegt (genügend Abstand derselben beachten)<br />

(je 2 Streifen auf eine Platte).<br />

8. Die Platte wird 24 Std. bei 37°C bebrütet.<br />

Auswertung:<br />

Es wird graphisch dargestellt, wo sich die Mittelpunkte der Hemmhöfe befinden.<br />

Berechnung der R f -Werte (R f -Wert = Laufstrecke Hemmhofmitte / Laufmittelfront).<br />

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