Katalog Kleingeräte 2009-2010 - Beckman Coulter
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Küvetten und Durchflusszellen<br />
Küvettenauswahl<br />
Proben, die in einem Spektralphotometer gemessen werden,<br />
haben viele verschiedene chemische und spektrale Eigenschaften,<br />
und auch das Volumen und die Konzentrationen sind immer<br />
unterschiedlich. Die Wahl der geeigneten Küvette ist wichtig, um<br />
optimale Ergebnisse zu erzielen. Bei der Auswahl von Küvetten<br />
sollten die folgenden Eigenschaften berücksichtigt werden:<br />
• Fenstermaterial<br />
• Schichtdicke oder Pfadlänge<br />
• Probenvolumen<br />
• Fensterbreite<br />
• Durchflusszelle, Mikro- oder Standardküvetten<br />
und Küvettenhalter<br />
Fenstermaterial<br />
Bestimmen Sie zuerst, ob die Probe im UV, sichtbarem (visible)<br />
oder beiden Bereichen gemessen wird. Optisches Glas ist<br />
ausreichend für Messungen im sichtbaren Bereich (unterste<br />
Wellenlänge ist ca. 350 nm). Diese Küvetten sind generell<br />
preisgünstiger als Quarz- oder Silikaküvetten. Da optisches Glas<br />
UV-Licht blockiert, sind diese Küvetten nicht im UV-Bereich<br />
einsetzbar. Für Anwendungen im UV-Bereich sind UV-Silika- oder<br />
Quarzküvetten erforderlich. UV-Silika ist ideal für Wellenlängen<br />
bis herunter zu 190 nm.<br />
Einwegküvetten aus Kunststoff sind weit verbreitet bei<br />
spektralphotometrischen Tests, die routinemäßig durchgeführt<br />
werden. Sie haben zwar den Vorteil, dass sie preiswert sind, doch<br />
Messgenauigkeit und der Wellenlängenbereich sind beschränkt.<br />
Da viele Kunststoffküvetten UV-Licht stark absorbieren oder<br />
blockieren, können die meisten Einwegküvetten im UV-Bereich<br />
nicht verwendet werden.<br />
Schichtdicke<br />
Wie im Lambert-Beerschen Gesetz beschrieben, ist die<br />
Intensitätsabnahme eine Funktion der Konzentration und der<br />
Schichtdicke. Um richtige und reproduzierbare Extinktionswerte<br />
für eine Probe zu erhalten, müssen der Konzentrationsbereich der<br />
Proben und die Schichtdicke der Küvette berücksichtigt werden.<br />
Für stark verdünnte Lösungen sollte eine Küvette mit einer<br />
längeren oder größeren Schichtdicke verwendet werden. Dies<br />
verhindert sehr niedrige Extinktionswerte, die sich<br />
möglicherweise schwer vom Rauschen (Leerwert) unterscheiden<br />
lassen. Für sehr stark konzentrierte Proben sollte eine Küvette<br />
mit einer kurzen oder kleinen Schichtdicke verwendet werden,<br />
um überhöhte Intensitätswerte zu vermeiden. Für die meisten<br />
Anwendungen ist eine Standardküvette mit einer Schichtdicke<br />
von 10 mm bestens geeignet.<br />
Probenvolumen und Fensterbreite<br />
Abhängig von der Anwendung kann das minimale oder maximale<br />
Volumen einer Küvette entscheidend sein. <strong>Beckman</strong> <strong>Coulter</strong> hat<br />
eine Auswahl an Küvetten von Halb-Mikroküvetten bis hin zu<br />
Ultra-Mikroküvetten.<br />
Halb-Mikroküvetten erfordern ein minimales Volumen von ca. 150<br />
µl und sind mit schwarzen, maskierenden Seiten verfügbar. Diese<br />
Küvetten haben eine Schichtdicke von 10 mm und eine<br />
Fensterweite von 2 oder 4 mm. Wenn Sie mit dem minimalen<br />
Volumen arbeiten, mag es empfehlenswert sein, die Höhe zu<br />
justieren, um sicherzustellen, dass der Lichtstrahl direkt durch die<br />
Probe führt. Unter Umständen ist es auch erforderlich, den<br />
Lichtstrahl mit einer Blende oder Aperture einzuschränken.<br />
Kleine oder schmale Fensterbreiten können das gesamte und<br />
minimale Probenvolumen reduzieren. Die Fensterbreite hat<br />
keinen Einfluss auf die Intensitätswerte. Das optische und<br />
mechanische Design des Spektralphotometers (Größe des<br />
Lichtstrahls) hat einen konkreten Einfluss auf die Wahl der<br />
Fensterbreite von Küvetten.<br />
Durchflusszellen<br />
Sobald ein automatisches Probenverarbeitungssystem, wie ein<br />
Sipper oder Autosampler eingesetzt wird, ist eine Durchflusszelle<br />
erforderlich. Für die üblichen Anwendungen sind Quarzglas-<br />
Durchflusszellen mit einer Schichtdicke von 2 oder 10 mm<br />
verfügbar. Spezielle Durchflusszellen für Dichte-Gradienten und<br />
Tablettenauflösungstests sind ebenfalls erhältlich.<br />
Von besonderem Interesse für viele Anwender ist das minimale<br />
Volumen, das in einem Sipper oder Durchflusssystem erforderlich<br />
ist. Das minimale Volumen wird nicht nur vom internen Volumen<br />
der Durchflusszelle bestimmt, sondern auch durch die<br />
Schlauchlänge und den internen Schlauchdurchmesser (I.D.).<br />
Auch wenn das minimale Volumen einer Durchflusszelle nur 80 µl<br />
beträgt, das minimale Volumen für das komplette System mag<br />
eher 1,2 ml sein, da der Schlauch gründlich gespült werden muss.<br />
Falls die Konzentrationsvariation von Probe zu Probe klein ist,<br />
können mit 300 - 400 µl gute Ergebnisse erzielt werden.<br />
Die 50 µl Mikroküvette<br />
Bei Applikationen mit kleinem Volumen, wie DNA- und<br />
Proteinanwendungen, ist die 50 µl Mikroküvette durch die<br />
schnellen und genauen Ergebnisse oft die beste Wahl. Die 50 µl<br />
Mikroküvette ist eine schwarze maskierte UV-Silikaküvette mit<br />
einer Höhe von nur 6 mm. Mit dieser Küvette können Proben<br />
mit einem Volumen bis zu 50 µl gemessen werden. Der<br />
erforderliche 50 µl Mikroküvettenhalter ist erhältlich für die<br />
DU ® Serie 700 und den DU ® 800 Spektralphotometer.<br />
Die Mehrfach-Mikroküvette<br />
Wenn mehrere Halb-Mikroküvetten oder Mikroküvetten<br />
erforderlich sind, wie z.B. bei kinetischen Anwendungen, bietet<br />
<strong>Beckman</strong> <strong>Coulter</strong> eine einzigartige Mehrfach-Mikroküvette an.<br />
Diese Küvette bietet vier maskierte UV-Silikaküvetten in einer<br />
Einheit. Die Einheit kann einzeln, als Paar oder mit zwei<br />
zusätzlichen Mehrfach-Mikroküvetten verwendet werden. Damit<br />
können bis zu zwölf Proben mit einem Einzelvolumen geringer als<br />
100 µl gemessen werden. Die Küvette und der erforderliche<br />
Küvettenhalter sind nur für das DU ® 800 Spektralphotometer<br />
erhältlich. Die Fensterweite dieser Küvette ist 3 mm.<br />
Küvettenhalter<br />
Spektralphotometer unterscheiden sich in ihren optischen<br />
Designs sowie den Probenräumen. Aus diesem Grund ist ein<br />
geeigneter Küvettenhalter, der das Küvettenfenster für jede<br />
Probe korrekt zum Lichtstrahl ausrichtet, erforderlich. Ein<br />
optimaler Küvettenhalter ermöglicht maximalen Lichtdurchlass<br />
und erhöht die Genauigkeit und Reproduzierbarkeit der<br />
Ergebnisse.<br />
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