Tierärztliche Hochschule Hannover Einfluss unterschiedlicher ...

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6 Zusammenfassung Die hier untersuchten Parameter zur In-vitro-Reifung von Oozyten zeigten sich durch die Anwesenheit von Progesteron nicht beeinflusst. Allerdings führt die Progesteronexposition während der Reifung zu einer veränderten Genexpression, die sich negativ auf die embryonale Entwicklung auswirken kann. 70
7 Summary Nicole Schlüter Influence of different progesterone concentrations on bovine oocyte maturation in vivo and in vitro The influence of different progesterone concentrations on oocyte maturation was investigated. In the first part of the experiments oocytes were retrieved by twice-weekly OPU. The first OPU-session was performed on day 7 of the natural cycle (oestrus = day 0). Cumulus-oocytecomplexes (COC) were classified by morphological criteria and mRNA expression of GDF9, BMP15, SCL2A1, HIF2α, PGR, PGRMC1, PGRMC2 und PAQR5 was measured via RT-qPCR. Bloodsamples were taken at every OPU-session and serum progesterone levels measured by radioimmunoassey (RIA). Despite twice weekly removal of all follicles > 2mm from the ovaries all animals showed a natural cycle and formation of C.l. (induced C.l.) during the OPU period. Induced C.l. were smaller (ind. C.l. 140,6 ±55,9 mm 2 , nat. C.l. 246,7 ±56,0 mm 2 ; P ≤0,05) and produced less progesterone (ind. C.l. 2,8 ±1,0 ng/ml, nat. C.l. 4,6 ±1,9 ng/ml; P ≤0,05) than their natural counterparts at the beginning of the experiment. There was neither an influence of the cycle on number or size of follicles nor on number and quality of retreived oocytes. Messenger RNA expression levels showed a reduced abundance of GDF9, BMP15, HIF2α, PGR, PGRMC1, PGRMC2 und PAQR5 transcripts in oocytes of the induced c.l.-phase. In the second part of the experiments oocytes from slaughterhouse ovaries were matured in vitro with different progesterone concentrations (< 50 ng/ml, 150 ng/ml, 300 ng/ml, 450 ng/ml) followed by in vitro production of embryos. Matured oocytes were rated for meiosis II stages and the expression of GDF9, BMP15, SCL2A1, HIF2α, PGR, PGRMC1, PGRMC2 und PAQR5 was measured. There was no influence of progesterone on maturation and cleavage rates. Oocytes of the < 50 ng/ml group showed a significant reduction of developmental rates on day 7 and 8 when compared to those of the control group (d7: 10,7 ±5,4 % vs. 20,7 ±6,6 %; d8: 15,8 ±5,4 % vs. 25,4 ±8,0 %). Oocytes from all progesterone treatment groups contained less transcripts of GDF9, HIF2α, PGR, PGRMC2 und PAQR5 compared to immature oocytes. In conclusion, twice-weekly OPU has an influence on the natural cycle in cattle and may induce C.l.s with different characteristics. The cycle has no influence on OPU results and morphological quality of COC. There are alterations in the molecular structure of the oocyte that may influence their developmental competence. Supplementation of progesterone did not show an influence on oocyte maturation and cleavage rates. Gene expression in oocytes matured in progesterone supplemented medium was altered and may have negative effects on early embryonic development. 71
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Tierärztliche Hochschule Hannover
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Meinen Großvätern
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Inhalt 3.2.1 Herkunft der Ovarien .
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text
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1 Einleitung BONS et al. 1994, BONI
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2 Literatur 2.1 Gewinnung von Kumul
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2.2 Einfluss des OPU auf die Gesund
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2.5 Einfluss des Zyklusstandes auf
Seite 19 und 20:
2.6 Beurteilung der Entwicklungskom
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2.7 Einfluss des Zyklusstandes auf
Seite 23 und 24:
2.9 In-vitro-Maturation (IVM) bovin
Seite 25 und 26:
2.11 Einfluss der Maturationsbeding
Seite 27 und 28: 2.12 Einfluss der Steroidsupplement
Seite 29 und 30: 2.13 MessengerRNA-Expression entwic
Seite 35 und 36: 2.14 MessengerRNA-Expression von Pr
Seite 37 und 38: 3 Material und Methoden Die genaue
Seite 39 und 40: 3.1 Ovum Pick-Up (OPU) Abbildung 3.
Seite 41 und 42: 3.1 Ovum Pick-Up (OPU) Abbildung 3.
Seite 43 und 44: 3.2 In-vitro-Produktion boviner Emb
Seite 49 und 50: 3.3 mRNA-Analyse der Oozyten zur Da
Seite 51 und 52: 3.4 Auswertung der Daten und statis
Seite 53 und 54: 4 Ergebnisse 4.1 OPU Da alle sechs
Seite 55 und 56: 4.1 OPU 4.1.1 Zyklusverhalten und G
Seite 57 und 58: 4.1 OPU Tabelle 4.2: Punktierte Fol
Seite 59 und 60: 4.2 Progesteronsupplementation wäh
Seite 61 und 62: 4.3 mRNA-Expression verschiedener G
Seite 63 und 64: 4.3 mRNA-Expression verschiedener G
Seite 65 und 66: 5 Diskussion 5.1 Zyklusverhalten w
Seite 67 und 68: 5.1 Zyklusverhalten während der OP
Seite 69 und 70: 5.2 Follikeleigenschaften, Eizellau
Seite 71 und 72: 5.3 MessengerRNA-Häufigkeiten in d
Seite 73 und 74: 5.4 Progesteronsupplementation wäh
Seite 75 und 76: 5.5 Einfluss des Progesterons auf d
Seite 77: 6 Zusammenfassung Nicole Schlüter
Seite 82 und 83: A Medien und Chemikalien Tabelle A.
Seite 89 und 90: B Verzeichnis der Gesamtdaten B.1 D
Seite 91 und 92: B.1 Daten aus dem OPU-Versuch Tabel
Seite 97 und 98: B.1 Daten aus dem OPU-Versuch Datum
Seite 105 und 106: B.1 Daten aus dem OPU-Versuch B.1.1
Seite 107 und 108: B.2 Daten aus dem IVM-Versuch B.1.3
Seite 109 und 110: B.2 Daten aus dem IVM-Versuch Datum
Seite 111 und 112: B.2 Daten aus dem IVM-Versuch Tabel
Seite 113 und 114: B.2 Daten aus dem IVM-Versuch B.2.2
Seite 115 und 116: B.2 Daten aus dem IVM-Versuch Tabel
Seite 117 und 118: B.3 Daten aus der RT-qPCR B.3 Daten
Seite 119 und 120: B.3 Daten aus der RT-qPCR Tabelle B
Seite 121 und 122: Abbildungen 2.1 Schematische Darste
Seite 123 und 124: Tabellen 2.1 Untersuchungen zu vers
Seite 125 und 126: B.13 C.l.-Eigenschaften und Serumpr
Seite 127 und 128: Literaturverzeichnis ABELE, E., STI
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Literaturverzeichnis SCHAMS, D., SC
Seite 160 und 161:
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Literaturverzeichnis TAMASSIA, M.,
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Literaturverzeichnis WARD, F., RIZO
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Literaturverzeichnis YAN, C., WANG,
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Abkürzungsverzeichnis pg . . . . .
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