Tierärztliche Hochschule Hannover Einfluss unterschiedlicher ...

5.4 Progesteronsupplementation während der Eizellreifung
supplementierten Medienportionen, die ohne Oozyten für 24 h inkubiert wurden, keine Reduktion
der P4-Konzentration gemessen wurde, ist ein chemischer Zerfall auszuschließen.
5.4.1 Einfluss der Progesteronsupplementation auf die Genexpression
Von den hier untersuchten, qualitätsanzeigenden Gentranskripten SCL2A1, GDF9, BMP15 und
HIF2α waren lediglich GDF9 und HIF2α bei den mit P4 gereiften Oozyten signifikant verändert.
Die Expression des Glukosetransporters SCL2A1 zeigte im vorliegenden Versuch keine
statistischen Unterschiede zwischen den Oozyten der Versuchsgruppen bzw. im Vergleich zu
den unreifen Eizellen. Dies entspricht der Beobachtung anderer Autoren, die einen Anstieg des
Glukosestoffwechsels erst im 8- bis 16-Zellstadium beobachteten (JAVED und WRIGHT 1991,
RIEGER et al. 1992, KHURANA und NIEMANN 2000a). Eine Abnahme des Transkriptes, wie
sie durch LEQUARRE et al. (1997) beschrieben wurde, konnte hier nicht bestätigt werden. Allerdings
scheint das SCL2A1-Gen in seiner Expression durch die Reifungsumgebung beeinflusst
zu sein (GARDNER und KAYE 1995, SAGIRKAYA et al. 2007, VAN HOECK et al. 2011).
Bezüglich GDF9 konnte eine signifikant verringerte Menge des Transkriptes in den Progesteronruppen
gegenüber den unreifen Eizellen festgestellt werden. Der Vergleich der ohne Zusatz
gereiften Kontrollgruppe mit unreifen Oozyten ergab keinen Unterschied. Dies widerspricht den
Beobachtungen anderer Autoren, nach denen sich der Gehalt an GDF9 in den Oozyten während
der Maturation verringert (SOMFAI et al. 2011, CHU et al. 2012).
Die Expression von BMP15 war in Oozyten aller untersuchten Gruppen gleich. Ob dies einem
nicht vorhandenen Einfluss der Reifungsumgebung, einer fehlenden Transkription oder einem
fehlenden Verbrauch während der Reifung geschuldet ist, bleibt unklar. Zwar gibt es Hinweise
auf einen Einfluss der BMP15-Expression auf die Entwicklungskompetenz der Oozyte (HOSOE
et al. 2011), dieser könnte allerdings auch erst in den frühen Embryonalstadien relevant werden,
die hier nicht untersucht wurden.
Transkripte des HIF2α Gens wurden sowohl in den unreifen als auch den gereiften Oozyten
nachgewiesen, wobei die Oozyten der Gruppen 150 ng/ml, 300 ng/ml und 450 ng/ml im Vergleich
zu den unreifen Oozyten geringere Mengen des Transkriptes aufwiesen. Dies lässt einen
konzentrationsabhängigen Einfluss von Progesteron auf die Expression vermuten. Ein regulatorischer
Einfluss von HIF2α auf die Expression von SCL2A1 (WRENZYCKI et al. 1998, 2001,
HARVEY et al. 2004) wurde hier nicht offensichtlich.
Für die untersuchten Progesteronrezeptoren ergaben sich veränderte Transkripthäufigkeiten
im Hinblick auf den nukleären Progesteronrezeptor PGR, den membranständigen Progesteronrezeptor
PGRMC2 und PAQR5.
In Bezug auf PGR fällt zunächst die signifikant niedrigere Transkriptmenge in unreifen Oozyten
gegenüber den ohne Zusatz gereiften Oozyten auf. Dies spricht für eine aktive Transkription
während der Reifung. Auch SALHAB et al. (2011) beobachteten eine steigende mRNA-
Expression von PGR in Oozyten während der Maturation und berichten sogar von einer Überexpression
nach 10 h Reifung. In der Studie von CLEMENTE et al. (2009) zeigten hingegen
unreife Oozyten die höchste Expression von PGR. Unter Progesteroneinfluss gereifte Eizellen
enthielten signifikant weniger Transkripte des PGR-Gens. Offenbar ist die Expression des Re-
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