Tierärztliche Hochschule Hannover Einfluss unterschiedlicher ...
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3 Material und Methoden 3.4 Auswertung der Daten und statistische Analyse Alle Daten sind, soweit nicht anders angegeben, als arithmetisches Mittel mit Standardabweichung (¯n± SD) bzw. Standardfehler (± SEM) dargestellt. Die Erstellung der Kurven zum Progesteronverlauf der einzelnen Tiere erfolgte unter Verwendung von Gnuplot 4.4.3 für Windows. Aufgrund des physiologischerweise zyklischen Verlaufes liegt eine Sinusfunktion zugrunde, deren Verlauf durch die Manipulationen des Versuches (OPU) exponentiell abfällt. Die Startparameter für den Least Square Fit (LSF) wurden anhand der Daten so gewählt, dass die Konvergenz des Algorithmus gewährleistet war. Anhand der erstellten Funktion der Form f(x) = a·(sin((x+b)·c)+1)·exp −d·x erfolgte dann eine Berechnung der Maxima (Max) und Minima (Min) sowie der Punkte mit y=1 (entspricht P4=1 ng/ml) im Bereich -5 ≥ x ≤ 52. Die statistische Analyse der Daten erfolgte mit dem Computerprogramm SigmaStat 2.0 der Fa. Jandel Scientific, San Rafael, USA. Die Analyse der Daten aus dem OPU und der IVP fand mittels ANOVA und Tukey Test statt. Alle Daten wurden mittels Komolgorow-Smirnow- Test auf Normalverteilung geprüft. Die anschließende Varianzanalyse wurde mit dem Levene Median Test durchgeführt. Unterschiede von P ≤ 0,05 galten als statistisch signifikant. 42
3.4 Auswertung der Daten und statistische Analyse Tabelle 3.4: Verwendete Primer Gen Primersequenz Primer- Amplifikat- Datenbankvom 5´- zum 3´-Ende position größe (bp) Nr. GDF9 F:TCC TTT GGT TTT GCT GCT TT 57 204 NM_174681 R:GTT CCC TGT GCC CAT CAT AC 260 BMP15 F:GCA GCC AAG AGG TAG TGA GG 634 194 DQ463368 R:CAA TAC TGC CTG CTT GAC GA 827 HIF2α F:GCG ACG ACA GAA TCA CAG AA 1043 194 AB018399 R:TGT CTC CAG CCA CAC ATA GC 1236 SLC2A1 F:CAG GAG ATG AAG GAG GAG AGC 894 256 M60448 (Glut1) R:CAC AAA TAG CGA CAC GAC AGT 1151 PGR F:TAC CTT AGG CCG GAT TCA GA 1570 197 NM_001205356 R:CAA TCG TTT CTT CCA GCA CA 1766 PGRMC1 F:GGA AGA GAT GCA TCC AGA GG 425 207 NM_001075133.1 R:TGG CTC CTC CTT GTC TGA GT 631 PGRMC1 F:AGT CAG GGG CCT TCA GAA CTG CA 693 207 NM_001099060.1 R:TCA GGA TGA AGC CCC ACC AGA CAT T 899 PAQR5 F:ACA CCT TCA GCT CCA TGT CC 327 203 XM_605853 R:GTA GCA GGA GAG CCA GAT GC 529 Globin F:GCA GCC ACG GTG GCG AGT AT 241 257 X04751 R:GTG GGA CAG GAG CTT GAA AT 555* *Intron an Position 281-357 43
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3 Material und Methoden<br />
3.4 Auswertung der Daten und statistische Analyse<br />
Alle Daten sind, soweit nicht anders angegeben, als arithmetisches Mittel mit Standardabweichung<br />
(¯n± SD) bzw. Standardfehler (± SEM) dargestellt.<br />
Die Erstellung der Kurven zum Progesteronverlauf der einzelnen Tiere erfolgte unter Verwendung<br />
von Gnuplot 4.4.3 für Windows. Aufgrund des physiologischerweise zyklischen Verlaufes<br />
liegt eine Sinusfunktion zugrunde, deren Verlauf durch die Manipulationen des Versuches<br />
(OPU) exponentiell abfällt. Die Startparameter für den Least Square Fit (LSF) wurden anhand<br />
der Daten so gewählt, dass die Konvergenz des Algorithmus gewährleistet war. Anhand der erstellten<br />
Funktion der Form f(x) = a·(sin((x+b)·c)+1)·exp −d·x erfolgte dann eine Berechnung<br />
der Maxima (Max) und Minima (Min) sowie der Punkte mit y=1 (entspricht P4=1 ng/ml) im<br />
Bereich -5 ≥ x ≤ 52.<br />
Die statistische Analyse der Daten erfolgte mit dem Computerprogramm SigmaStat 2.0 der<br />
Fa. Jandel Scientific, San Rafael, USA. Die Analyse der Daten aus dem OPU und der IVP<br />
fand mittels ANOVA und Tukey Test statt. Alle Daten wurden mittels Komolgorow-Smirnow-<br />
Test auf Normalverteilung geprüft. Die anschließende Varianzanalyse wurde mit dem Levene<br />
Median Test durchgeführt. Unterschiede von P ≤ 0,05 galten als statistisch signifikant.<br />
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