Tierärztliche Hochschule Hannover Einfluss unterschiedlicher ...

2.11 Einfluss der Maturationsbedingungen auf die Eizell- und Embryonenqualität
abhängig. Anfangs wurden komplexe Medien wie das Tissue Culture Medium 199 (TCM199)
mit dem Zusatz von undefinierten Stoffen wie zum Beispiel Serum, semidefinierten Stoffen wie
Bovines Serum Albumin (BSA) oder definierten Stoffen wie das Makromolekül Polyvinylalkohol
(PVA) verwendet (EYESTONE und FIRST 1989). Obwohl diese Medien erfolgreich in
der IVP eingesetzt wurden, erfolgte eine Weiterentwicklung der Kultursysteme, um die Embryonenqualität
zu verbessern. Dies diente besonders dem Ziel, die Problematik des Large Offspring
Syndromes (LOS) zu lösen. Das LOS wird durch signifikant höheres Geburtsgewicht,
Polyhydramnion, Hydrops fetalis, verändertes Organwachstum, Defekte von Plazenta, Skelett
und Immunsystem sowie eine hohe perinatale Mortalität charakterisiert (WALKER et al. 1996,
KRUIP und DEN , DAAS 1997, YOUNG et al. 1998, RENARD et al. 1999, SINCLAIR et al. 2000).
Deshalb wurden einfache Medien entwickelt, die häufig auf Modifikationen des Synthetic Oviduct
Fluid (SOF)-Mediums (TERVIT et al. 1972) basieren, bei denen Polyvinylpyrrolidon (PVP)
oder PVA zugesetzt werden (KESKINTEPE und BRACKETT 1996). Auch das Hamster Embryo
Culture Medium (HECM) zählt zu diesen einfachen Medien. Bei Verwendung von TCM199,
SOF oder HECM können Entwicklungsraten von mehr als 40 % erreicht werden (KESKINTEPE
und BRACKETT 1996, KRISHER et al. 1999, FERGUSON et al. 2004). Es konnte gezeigt werden,
dass die Entwicklungsraten in definierten Medien niedriger sind als bei der Verwendung
semidefinierter (mit BSA-Zusatz) oder undefinierter (mit Serum-Zusatz) Medien (ECKERT und
NIEMANN 1995, KESKINTEPE und BRACKETT 1996, WRENZYCKI et al. 1999). Trotz dieser
Verbesserungen ist die Qualität in vitro produzierter Embryonen immer noch deutlich schlechter
als die in vivo gewonnener (NIEMANN et al. 2002, RIZOS et al. 2002). So können nach
dem Transfer von IVP-Embryonen Trächtigkeitsraten von 30-40 % erziehlt werden, nach Embryotransfer
oder nach künstlicher Besamung (KB) 50-70 % (MOORE und THATCHER 2006).
Im Allgemeinen wird auch von höheren Verlusten während der Trächtigkeit berichtet (HASLER
et al. 1995, GALLI et al. 2001). MARQUANT-LE GUIENNE et al. (1989) stellten eine geringere
Anzahl an Zellen der Inner Cell Mass (ICM) bei IVP-Embryonen im Vergleich zu in vivo
generierten fest. Die Qualität eines Embryos zeichnet sich nicht nur durch die Fähigkeit, eine
Trächtigkeit zu induzieren und zu erhalten aus. Auch Parameter wie die Morphologie, die zeitliche
Abfolge der Entwicklung sowie die Kryotoleranz sind qualitätsanzeigend (WRENZYCKI
et al. 2005a). Eine langsamere Entwicklung in vitro (BARNES und EYESTONE 1990, GRIS-
ART et al. 1994) sowie eine geringere Kryotoleranz (RORIE et al. 1990, VOELKEL et al. 1992)
konnten schon in den 1990er Jahren belegt werden. JIANG et al. (1992) zeigten in ihrer Arbeit,
dass die Gesamtzellzahl des Trophoblasten ein gutes Kriterium zur Beurteilung der Qualität
darstellt. Andere Autoren konnten einen Zusammenhang der Qualität mit der Fähigkeit zum
Glukosestoffwechsel nachweisen (KRISHER et al. 1999, STEEVES und GARDNER 1999, HER-
RICK et al. 2006). Auf molekularer Ebene konnte die Expression bestimmter Gentranskripte als
Indikator für die Embryonenqualität identifiziert werden (WRENZYCKI et al. 2007).
2.11 Einfluss der Maturationsbedingungen auf die Eizell- und Embryonenqualität
Wie vorhergehend angedeutet, nehmen die IVP-Bedingungen entscheidenden Einfluss auf die
sich entwickelnden Embryonen und ihre spätere Güte. So kann allein die Dauer der Reifung die
Ergebnisse bezüglich der Teilungs- und Entwicklungsraten wesentlich verändern (WARD et al.
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