Tierärztliche Hochschule Hannover Einfluss unterschiedlicher ...

2.6 Beurteilung der Entwicklungskompetenz boviner Oozyten
dieser Methode an (COTICCHIO et al. 2004). So könne anhand der genutzten Kriterien keine
endgültige Aussage über die Entwicklungskompetenz gemacht werden (HAGEMANN 1999,
MERMILLOD et al. 1999). Zum Beispiel zeigen morphologisch gute KOK aus atretischen Follikeln
eine geringere Entwicklungskompetenz als morphologisch ähnliche aus gesunden Follikeln
(JEWGENOW et al. 1999, FENG et al. 2007). Auch die Expansion des Cumulus oophorus
wird als unzuverlässiges Kriterium beschrieben (RUSSELL et al. 2006). Insbesondere vor dem
Schritt der In vitro-Reifung können Eizellen mit In vitro-Entwicklungskompetenz morphologisch
stark variieren (DE LOOS et al. 1992).
SANTOS et al. (2008) nahmen eine Einschätzung der Entwicklungskompetenz über die Anzahl
der Poren in der Zona pellucida sowie deren Durchmesser vor. Andere Autoren zogen die
Dichte der Granulosazellen in der Follikelflüssigkeit (FENG et al. 2007), den Gehalt an Wachstumshormonen
(MODINA et al. 2007), Aminosäuren (SINCLAIR et al. 2008) oder Progesteron
(HAZELEGER et al. 1995) in der Follikelflüssigkeit oder die Aktivität des Enzyms Glucose-
6-Phosphatdehydrogenase mittels Brilliant-Kresyl-Blau-Färbung (BHOJWANI et al. 2007) für
die Beurteilung heran. Während der IVP können die Formung (DOMINKO und FIRST 1992)
des Polkörpers und eine frühe Vollendung der Kernreifung während der IVM (DOMINKO und
FIRST 1997) sowie das Auftreten der Furchung nach der Fertilisation (WARD et al. 2001) als
Hinweise auf die Entwicklungskompetenz dienen.
Die Entwicklungskompetenz basiert auf multiplen Faktoren, von denen viele auf zellulärer
bzw. molekularer Ebene angesiedelt sind und deshalb nur invasiv gemessen werden können
(COTICCHIO et al. 2004). Methoden zur Beurteilung der Kompetenz auf zellulärer und molekularer
Ebene gehen zumeist mit der Zerstörung der Eizelle einher. Sie geben jedoch die
Möglichkeit, objektive Parameter zur Beurteilung der Oozytenqualität zu finden (COTICCHIO
et al. 2004). Zur Umgehung dieser destruktiven Prozesse muss eine Korrelation zwischen invasiven,
zerstörenden Methoden und nichtinvasiven, erhaltenden Methoden gefunden werden
(ANGUITA et al. 2007).
Eine gute Methode, ein weites Spektrum von Daten bezüglich der Eizellqualität zu erfassen,
stellt die Analyse der MessengerRNA(mRNA)-Expression dar (LECHNIAK 2002). Jedoch
bedingt eine erhöhte mRNA-Expression bestimmter Gene nicht immer auch erhöhte Proteingehalte
(GYGI et al. 1999), und Proteine sind nicht immer enzymatisch aktiv (SUMNER et al.
2003). Es wird deshalb nach Korrelationen zwischen der Kompetenz und den in der Follikelflüssigkeit
bzw. dem IVM-Medium zu findenden Proteinen (ELLEDEROVA et al. 2004, GUPTA
et al. 2009) und Metaboliten (SINGH und SINCLAIR 2007) gesucht.
Mit der vollständigen Sequenzierung des bovinen Genoms entstand auch die Möglichkeit
der globalen Analyse des Transkriptoms mit Hilfe von Microarray-Techniken. Im Gegensatz
zur einzelnen Analyse der Gentranskripte mittels RT-qPCR kann hier eine Vielzahl von Genen
gleichzeitig betrachtet werden. Globale Transkriptomanalysen boviner MII-Oozyten (MI-
SIRLIOGLU et al. 2006, KUES et al. 2008) sowie vergleichende Analysen reifer und unreifer
Eizellen (MAMO et al. 2011) lieferten neue Informationen über die molekularen Veränderungen
während der Eizellreifung und konnten das Vorhandensein aktiver Transkription während
der Eizellreifung belegen (MAMO et al. 2011). O’SHEA et al. (2012) gelang über eine Meta-
Analyse veröffentlichter Microarray-Daten die Identifizierung 63 potenzieller Markergene für
die Entwicklungskompetenz boviner Oozyten.
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