Tierärztliche Hochschule Hannover Einfluss unterschiedlicher ...

1 Einleitung
BONS et al. 1994, BONI et al. 1997, PETYIM et al. 2003). Die Entfernung der antralen Follikel
auf dem Ovar induziert eine neue Follikelwelle, es erfolgt jedoch keine natürliche Ovulation.
Je nach Punktionsintervall unterbleibt auch die Ausbildung eines dominanten Follikels (GIBB-
ONS et al. 1994, GARCIA und SALAHEDDINE 1998, CARLIN et al. 1999, PETYIM et al. 2003,
LOPES et al. 2006). Somit sind auch die mit diesen Prozessen einhergehenden hormonellen
Veränderungen beeinflusst. Aus diesem Grund kann die Situation der Follikel auf den Ovarien
von Tieren, bei denen OPU angewendet wird, nicht mit denen von zyklischen Tieren verglichen
werden. Es konnte bereits ein Zusammenhang zwischen dem Gehalt an Progesteron in
der Follikelflüssigkeit mit sowohl der Morphologie als auch der Entwicklungskompetenz der
aus dem Follikel gewonnenen Eizelle hergestellt werden (HAZELEGER et al. 1995). Um die
OPU-/IVP-Technologie weiter zu verbessern, ist es deshalb notwendig, mehr über die Zusammenhänge
zwischen den hormonellen Veränderungen und der Eizellqualität sowie die Rolle des
hormonellen Umfeldes während der Eizellreifung zu erfahren.
Zur Verbesserung der IVP von Rinderembryonen wurden in den letzten Jahren verschiedenste
Versuche bezüglich der Supplementation der Medien der einzelnen Produktionsschritte durchgeführt.
Steroidhormone als natürliche Sexualhormone, deren Konzentration sich während des
natürlichen Zyklus und damit auch während des Heranreifens von Oozyten in vivo ständig verändert
(SCHAMS und BERISHA 2002), spielten dabei immer wieder eine Rolle (FUKUI et al.
1982, SIROTKIN 1992, RYAN et al. 1999, SILVA und KNIGHT 2000, MINGOTI et al. 2002). Bisher
konnten jedoch keine eindeutigen Ergebnisse bezüglich deren Einfluss gewonnen werden.
Der Wechsel vom dominierenden Estradiol zur Progesterondominanz im Follikel im Zeitraum
zwischen LH-Peak und Ovulation (DIELEMAN et al. 1983) sowie die Expression der Progesteronrezeptoren
in Oozyte und Kumuluszellen (APARICIO et al. 2011) lassen eine Rolle von
Progesteron bei der Eizellreifung vermuten (LONERGAN 2011, FAIR und LONERGAN 2012).
Nach wie vor ist diese Rolle von Progesteron jedoch nicht ausreichend definiert (LONERGAN
2011, FAIR und LONERGAN 2012). Es ist außerdem ungeklärt, ob die Beeinflussung der Oozyte
durch Steroide, insbesondere Progesteron, auf direktem oder indirektem Wege erfolgt.
Die Darstellung der mRNA-Expression bei Rinderembryonen ist in den letzten Jahren ein viel
beachtetes Thema geworden (NIEMANN und WRENZYCKI 2000). Frühe kritische Schritte der
Entwicklung, wie Zeitpunkt der ersten Teilung, Aktivierung des embryonalen Genoms, Kompaktierung
und Blastozystenbildung und -expansion können durch die Kulturmedien und die
In-vitro-Bedingungen sowie durch die Produktionsverfahren selbst in erheblichem Maße beeinflusst
werden. Diese Veränderungen betreffen sowohl eine signifikante Hoch- oder Herrunterregulation
sowie die De novo-Induktion oder Abschaltung von Genen, die für eine ungestörte embryonale,
fetale und neonatale Entwicklung von Bedeutung sind. Es konnte gezeigt werden, daß
sich das höhere Entwicklungspotenzial von in vivo gereiften Eizellen im Gegensatz zu dem in
vitro gereifter Oozyten auch auf molekularer Ebene wiederspiegelt (WRENZYCKI et al. 2007).
Obwohl die Ausgangsqualität die wohl entscheidene Rolle für die Genexpressionsmuster darstellt,
haben Untersuchungen des Einflusses der Follikelumgebung bzw. der IVM-Bedingungen
auf bovine Oozyten und die darauf folgenden embryonalen Entwicklungsstadien bis zur Blastozyste
auf molekularer Ebene bisher erst in den letzten Jahren stattgefunden [eine Übersicht
der Arbeiten findet sich bei FAIR und LONERGAN (2012)].
In dieser Arbeit soll nicht nur der Einfluss der sich ändernden peripheren Progesteronkonzentration
durch ein Corpus luteum während des natürlichen Zyklus auf die reifende Eizelle in vivo
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