TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover
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72 5.6 Virusdetektion von Tracheal- und Kloakaltupfern durch qRT- PCR Im ersten und zweiten Versuch wurde bei SPF-Hühnern und kommerziellen Broilern die Virusausscheidung aus der Trachea nach Belastungsinfektion mit dem APMV-1 Stamm LaSota mittels qRT-PCR detektiert. Im zweiten Versuch wurde zusätzlich die Virusausscheidung aus der Kloake durch qRT-PCR von Tupferproben untersucht. Am 35. Tag nach der Impfung wurden vor der Belastungsinfektion im ersten und zweiten Versuch Trachealtupfer von sieben Tieren pro Gruppe entnommen. Fünf Sentineltiere wurden jeweils einen Tag nach der Belastungsinfektion zu den Tieren hinzugegeben und fünf Tage später entfernt. An dem Tag, an dem die erste Gruppe der Sentineltiere entfernt wurde, wurde eine neue Gruppe von fünf Sentinels für fünf weitere Tage hinzugesetzt. Am dritten, fünften, siebten und zehnten Tag nach der Belastungsinfektion wurden Trachealtupfer der belastungsinfizierten SPF- Hühner und Sentinels entnommen, sowie an den gleichen Tagen zusätzlich Kloakentupfer der Broiler. Am 35. Tag nach Impfung wurde bei keinem Tier Virus in der qRT-PCR detektiert (Tabelle 4). Alle SPF-Hühner der Kontrollgruppe schieden den APMV-1 Virusstamm LaSota bis zum siebten Tag nach der Belastungsinfektion aus. Am 10. Tag nach der Belastungsinfektion war nur noch ein Tier aus der Kontrollgruppe positiv (Tabelle 4). Alle Tiere der rHVT-ND geimpften Gruppe schieden Virus bis zum siebten Tag nach der Belastungsinfektion aus. Am 10. Tag nach Belastungsinfektion war keines dieser Tiere mehr Paramyxovirus Serotyp 1-positiv in der qRT-PCR. In der ersten Sentinelgruppe der rHVT-ND Gruppe wurde bei keinem Tier rHVT-ND detektiert. Diese Sentinelgruppe unterschied sich signifikant in der Virusausscheidung von der ersten Sentinelgruppe der ungeimpften Gruppe, wo fünf von fünf Tieren das Belastungsvirus ausschieden (p
73 Tag nach der Belastungsinfektion schieden vier bis fünf Tiere der insgesamt fünf belastungsinfizierten Tiere und Sentinels der Kontrollgruppe und rHVT-ND geimpften Gruppe Belastungsvirus aus. Tiere aus der dritten und vierten Gruppe, welche mit dem Lebendimpfstoff immunisiert worden waren, zeigten nur ein positives Tier aus der vierten Gruppe am dritten Tag nach der Belastungsinfektion. In der dritten Gruppe (Lebend ND) schieden am dritten Tag nach der Belastungsinfektion drei von fünf Sentinels den APMV-1 Stamm LaSota aus, aus der vierten Gruppe (rHVT- ND/Lebend ND) drei von fünf Tieren am dritten Tag nach Belastungsinfektion und zwei von fünf Tieren am fünften Tag nach Belastungsinfektion. APMV-1 wurde auch aus Kloakaltupferproben bei jeweils einem von fünf Tieren am dritten und fünften und zehnten Tag nach der Belastungsinfektion in nicht geimpften Tieren nachgewiesen (Tabelle 5). Am dritten Tag nach der Belastungsinfektion wurde bei einem Tier von fünf aus der rHVT-ND/Lebend ND Gruppe APMV-1 nachgewiesen. Keines der Sentineltiere schied APMV-1 über die Kloake aus (Tabelle 5). 5.6.1 Virusanzucht im embryonierten Hühnerei Bei der Lebendvirusdetektion wurden Tracheal- und Kloakaltupfer der belastungsinfizierten Broiler aus dem zweiten Versuch entnommen und mittels Eianzucht auf APMV-1 untersucht. Aus Trachealtupfern konnte in der ungeimpften Gruppe infektiöses APMV-1 am dritten und fünften Tag nach der Belastungsinfektion nachgewiesen werden sowie am dritten Tag nach der Belastungsinfektion aus der rHVT-ND Gruppe (Tabelle 4). Aus Kloakaltupfern konnte nur am fünften und siebten Tag nach Belastungsinfektion APMV-1 in der ungeimpften Gruppe nachgewiesen werden (Tabelle 5).
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Tag nach der Belastungsinfektion schieden vier bis fünf Tiere der insgesamt fünf<br />
belastungsinfizierten Tiere und Sentinels der Kontrollgruppe und rHVT-ND geimpften<br />
Gruppe Belastungsvirus aus. Tiere aus der dritten und vierten Gruppe, welche mit<br />
dem Lebendimpfstoff immunisiert worden waren, zeigten nur ein positives Tier aus<br />
der vierten Gruppe am dritten Tag nach der Belastungsinfektion. In der dritten<br />
Gruppe (Lebend ND) schieden am dritten Tag nach der Belastungsinfektion drei von<br />
fünf Sentinels den APMV-1 Stamm LaSota aus, aus der vierten Gruppe (rHVT-<br />
ND/Lebend ND) drei von fünf Tieren am dritten Tag nach Belastungsinfektion und<br />
zwei von fünf Tieren am fünften Tag nach Belastungsinfektion.<br />
APMV-1 wurde auch aus Kloakaltupferproben bei jeweils einem von fünf Tieren am<br />
dritten und fünften und zehnten Tag nach der Belastungsinfektion in nicht geimpften<br />
Tieren nachgewiesen (Tabelle 5). Am dritten Tag nach der Belastungsinfektion<br />
wurde bei einem Tier von fünf aus der rHVT-ND/Lebend ND Gruppe APMV-1<br />
nachgewiesen. Keines der Sentineltiere schied APMV-1 über die Kloake aus (Tabelle<br />
5).<br />
5.6.1 Virusanzucht im embryonierten Hühnerei<br />
Bei der Lebendvirusdetektion wurden Tracheal- und Kloakaltupfer der<br />
belastungsinfizierten Broiler aus dem zweiten Versuch entnommen und mittels<br />
Eianzucht auf APMV-1 untersucht.<br />
Aus Trachealtupfern konnte in der ungeimpften Gruppe infektiöses APMV-1 am<br />
dritten und fünften Tag nach der Belastungsinfektion nachgewiesen werden sowie<br />
am dritten Tag nach der Belastungsinfektion aus der rHVT-ND Gruppe (Tabelle 4).<br />
Aus Kloakaltupfern konnte nur am fünften und siebten Tag nach Belastungsinfektion<br />
APMV-1 in der ungeimpften Gruppe nachgewiesen werden (Tabelle 5).
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