Programmreport 2012 - DORIS - Bundesamt für Strahlenschutz

5. ERGEBNISSE
Es wurden bereits umfangreiche Primersets für die Gene MLL-AF4/AF9 AML RUNX1, ETV6, E2A und TZF3
konfiguriert und in Analysen getestet. Zusätzlich wurden für alle im Angebot abgegebenen Translokationsbruchpunkte
Restriktionskarten erstellt sowie verschiedene Exonukleasen mit und ohne Ligasereaktion getestet.
Hier zeigte sich bereits in dem frühen Projektstadium, dass für die meisten Zelllinien die methodischen
Probleme lösbar sind. Es wird in den folgenden Schritten darauf ankommen, dies auf das primäre Patientenmaterial
zu übertragen und für die anderen Rekombinationen entsprechend zu adaptieren.
Des Weiteren wurden für das Gesamtprotokoll, das in Einzelschritten aus der Isolierung der genomischen
DNA, Restriktionsverdau und Aufreinigung, Ligation und Exonukleaseverdau sowie nachfolgender PCR bzw.
real time PCR besteht, nachfolgend Modifizierungen vorgenommen. Die experimentellen Einzelschritte wurden
in den letzten Wochen in den Labors in Erlangen und Düsseldorf getestet und entsprechend modifiziert.
6. GEPLANTE WEITERARBEIT
Das erstellte experimentelle „GIPFEL-Protokoll“ soll auf das Primärmaterial von Kindern mit Leukämie mit entsprechenden
translokationstragenden Zellen übertragen und die Sensitivität ermittelt werden.
TB 07
Statusberichte TB 07: Vorhaben mit allgemeiner Bedeutung im Strahlenschutz 203