DRK - Forschungsbericht Kap.0 2009 08 - Drk-Blutspendedienste

DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen
gemeinnützige GmbH
Forschungsbericht
2007 - 2008

Inhaltsverzeichnis
Forschung
Vorwort 5
Entwicklung der Forschung 2001 bis 2008 7
Überblick über die Forschungstätigkeiten 2007 bis 2008 10
Forschungsstruktur der Standorte 14
Qualitätssicherung in der Blutversorgung 25
Entwicklung neuer Filter für die Leukozytendepletion bei Blutprodukten 26
Screening der Blutspender auf seltene Blutgruppen und Entwicklung von Antikörper-Identifizierungs-Panels 28
Spezifitäts-Studie Enzygnost HBsAg 6.0 29
Diagnostik in der Transfusionsmedizin 30
Leistungsbewertungsstudie eines neuen Verfahrens zur Blutgruppenbestimmung mittels Lateral-Flow-Technik:
„MDmulticard“ 32
Hämovigilanzprogramm und Vorbereitung eines Erfassungssystems akuter Transfusionsreaktionen (ATR)
nach Gabe von Pathogen-inaktivierten Thrombozyten-Konzentraten (PI-TK) und konventionellen
Thrombozyten-Konzentraten (TK)-Protokoll-Nr. PLT07001 34
Bakterielle Kontamination von Blutprodukten 36
Blood and organ transmitted infectious agents (BOTIA Studie) 39
Entwicklung von Realtime-PCR-Systemen mit der Detektion in zwei Genombereichen 41
Prävalenz von Parvovirus B19 bei Blutspendern 44
Blutspenderscreening mit dem Cobas s201/Cobas TaqScreen MPX unter Routinebedingungen in
Instituten des Deutschen Roten Kreuzes 46
Europäisches Projekt EQUAL-Blood: Entwicklung von Standards zur Etablierung von
Qualitätsmanagementsystemen in der Transfusionsmedizin 49
Europäisches Projekt EU-Blood-Inspection (EuBIS): Entwicklung von Standards und Kriterien entsprechend
Direktive 2002/98/EC und 2005/62/EC für die Inspektion von Blutspendeeinrichtungen 51
Europäisches Projekt Optimal USE of Blood 56
Automatisiertes Screeningverfahren zum Nachweis granulozytärer Antikörper 58
Dokumentation der photochemischen Pathogeninaktivierung von Thrombozytenkonzentraten unter
Verwendung von Amotosalen und UVA-Licht mittels PCR und Bioanalyzer 61
Einfluss des Mirasol®-Pathogen-Reduktionsverfahrens auf den Thrombozytenmetabolismus und
die Aktivierung von Thrombozyten 63
Nicht invasive quantitative Bestimmung der Resterythrozytenzahl in Thrombozytenkonzentraten mittels
Sensormessung 65
Qualitätssicherung der derzeit empfohlenen Rhesus-Typisierungsstrategie in den deutschsprachigen Ländern 67
Qualitätssicherung D-negativer Erythrozyten-Präparate: Erkennung von DEL-Phänotyp und chimären Blut 69
Sicherheit und Effizienz bei ambulanten Therapien mit leukozyten-depletierten Erythrozytenkonzentraten 71
1

Forschungsbericht 2007 – 2008
Stammzellen und Zelltherapie 75
Homing und Mobilisation unreifer hämatopoietischer Zellen 76
Regulation des Zirkulationsverhalten Mesenchymaler Stammzellen (MSCs) 77
Erythrozyten aus Stamm- und Vorläuferzellen 79
Homing von Stamm- und Vorläuferzellen in Tumorgewebe 81
Leukämieentwicklung im präklinischen Modell 83
Langzeit-Sicherheitsbeobachtung im Rahmen der Gewinnung allogener Blutstammzellen (alloPBSC)
von gesunden Fremdspendern nach Vorbehandlung mit rhuG-CSF (Filgrastim oder Lenograstim) 86
Adoptive Immuntherapie der chronischen CMV-Infektion nach allogener Knochenmark- oder peripherer
Blutstammzelltransplantation: eine Phase I/II-Studie 88
Zielgerichtete Killerzellen für die zelluläre Krebs-Immuntherapie (RETARGET-IT) 90
Antwort von hämatopoietischen Stamm- und Progenitorzellen auf die Bestrahlung mit hochenergetischen
schweren Ionen 92
Doppel-blinde, randomisierte, kontrollierte Studie zur Erfassung des Effektes einer intrakoronaren Applikation
von Knochenmark-Progenitorzellen auf die koronare Flussreserve bei Patienten mit akutem Koronarsyndrom
„REPAIR-AMI ACS“ 94
Isolation und Charakterisierung endothelialer Vorläuferzellen aus Nabelschnurblut, Subprojekt des Teilprojektes
C3„Analysis of the multistep nature of homing and incorporation of circulating progenitor sells during tumor
angiogenesis“ im Rahmen des TR-SFB 23 97
OsteoCord Bone from Blood: Optimised isolation, characterisation and osteogenic induction of mesenchymal stem
cells from umbilical cord blood 99
Standardisierung für die Regenerative Medizin (START-MSC) Stammzellbank mesenchymaler Stammzellen
aus Nabelschnurblut und Entwicklung GMP-konformer Prozessierungstechniken 101
Vergleichende Analyse mesenchymaler Stammzellen aus Knochenmark, Nabelschnurblut oder Fettgewebe 103
Aptamer-basierte Isolation von mesenchymalen Stammzellen und deren Detektion mittels MRT 106
Sicherheitsstudien zur Markierung von mesenchymalen Stammzellen mit eisenhaltigen Nanopartikeln 109
Präventive und therapeutische CMV-Peptid-Vakzinierung bei Patienten nach allogener hämatopoietischer
Stammzelltransplantation 112
Deutsches Register für Stammzelltransplantationen 114
Genetische Markierung und Modifikation von hämatopoietischen und mesenchymalen Stammzellen
zum direkten in vivo-Nachweis und Verbesserung des Therapiefeldes 116
Bedeutung der oxidativen Wirkung von eosinophilen Granulozyten auf den biologischen Effekt von
nekrotischen Tumormaterial hinsichtlich der Reifung von dendritischen Zellen und der Proliferation von
mesenchymalen Stammzellen 118
Markierung von Stammzellen für die Detektion von Migration sowie Beeinflussung der Differenzierung
von Stammzellen durch Nanopartikel als Drug-Delivery-System 121
Knochenmarkstannzellen zur intrakoronaren Therapie bei akutem Myokardinfarkt im Rahmen einer
randomisierten, placebo-kontrollierten, doppelt-blinden Studie 123
Validierung eines neuen Zellseparators Spectra Optia WBC zur Sammlung autologer peripherer
Blutstammzellen für die Transplantation von Patienten nach Hochdosis-Chemotherapie 125
Untersuchungen zu mesenchymalen Stammzellen: Isolierung, Charakterisierung, Differenzierung,
Seneszenz, GMP-konforme ex vivo Expansion und Migrations-Monitoring 127
2

Forschung
Transplantationsmedizin und Immungenetik 131
AML-Pilotstudie und Einführung der NK-Zell-Typisierung vor Stammzelltransplantation 132
Die Deutsche Stammzellspenderdatei Rhein-Main, Rhein-Neckar und Nord. Ausbau und Neugestaltung
der regionalen Stammzell- und Knochenmarkspenderdateien in Hessen, Rhein-Neckar und Nord 134
Immunregulation von natürlichen Killerzellen und Krankheitsprädisposition bei Autoimmunität 137
Immunrekonstitution nach Blutstammzelltransplantation: Entwicklung von Methoden und
Untersuchungsstrategien für HLA- und KIR-Differenzen im Rahmen der Gewebeverträglichkeit
bei Blutstammzelltransplantationen 139
Verbesserung der Gewebeverträglichkeit durch Bestimmung von Minor Histokompatibilitätsantigenen
und NOD2/CARD15 141
Individuell angepasste Immunsupression nach allogener Transplantation durch molekulargenetisches
Immunmonitoring 144
Entwicklung einer Multiplex-PCR zur IL-6 Promotor-Genotypisierung und Charakterisierung der
IL-6 Produktion bei Hämodialysepatienten in Abhängigkeit vom IL-6 Genotyp 146
Etablierung der klinischen Inseltransplantation 147
Einfluss von immunologisch relevanten Nicht-HLA-Genpolymorphismen in der Stammzelltransplantation 149
Entwicklung von Reagenzien zur automatischen Sequenz-basierten HLA –Typisierung – Charakterisierung
neuer sowie NULL-HLA-Allele 152
Detektion von TRALI-assoziierten Antikörpern 155
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie 159
Genetische Variabilität von Genen der Blutgerinnung in der Normalbevölkerung 160
Molekulare Diagnostik hereditärer Fibrinogen-Erkrankungen 162
Molekulare Diagnostik von erblich bedingten hämorragischen und thromboembolischen Krankheitsbildern
der Blutgerinnung 164
Molekulargenetische Analysen bei Hämophilie A-Patienten zur Analyse des Hemmkörperrisikos
bei Anwendung von ADVATE-FVIII-Konzentrat 166
Pharmakogenetik der oralen Antikoagulation 168
Faktor-IX-Varianten für die Behandlung der Hämophilie A 171
Optimierung einer rekombinanten FVIII Produktion in heterologen Zellsystemen und Analyse
des FVIII-Sekretionsweges 173
Pharmakokinetik und thrombotische Aktivität von FVIII-Etablierung und Analyse eines Mausmodells
mit fluoreszenzgekoppelten FVIII (FVIII-GFP) 176
Toleranzinduktion durch nicht-viralen Gentransfer und zelluläre Immunmodulation mittels
mesenchymaler Stammzellen (MSCs) bei der Hämophilie A 178
Bestimmung der Natürlichen Killerzell-Aktivität im Vollblut 180
Immunmodulation durch intravenöse Immunglobuline 182
Regulation der Natürlichen Killerzell-Aktivität durch aktivierende und inhibierende Signale 184
Molekulare Grundlage abgeschwächter Antigeneigenschaften im AB0 Blutgruppensystem 186
Charakterisierung der molekularen Grundlagen des Aspirin-like Defekts bei pädiatrischen Patienten
und deren Familien 188
Identifizierung und Charakterisierung neuer Rezeptoren bei Thrombozyten 190
3

Forschungsbericht 2007 – 2008
Molekulare Grundlage abgeschwächter Antigeneigenschaften und seltener Antigene des RHCE-Systems 192
Analyse und Genreparatur angeborener Immun- und Hämatopoiesedefekte I 194
Analyse und Genreparatur angeborener Immun- und Hämatopoiesedefekte II 196
Aufklärung des Polymorphismus im Rhesus-Blutgruppensystem 198
BloodGen: Blutgruppen-Bestimmung und Genotypisierung 200
Core Facility Hochgeschwindigkeitszellsortierung und durchflusszytometrische Diagnostik 203
Diagnostik der PNH 206
Stammzelltransplantationen bei aplastischer Anämie und paroxysmaler nächtlicher Hämoglobinurie 208
Therapie der PNH 210
Finanzierung der Forschung 213
Publikationen 2007 bis 2008 214
Wissenschaftliche Vorträge, publizierte Abstracts 2007 bis 2008 224
Wissenschaftspreise / Posterpreise 2007 bis 2008 244
Ausgerichtete wissenschaftliche Kongresse und Symposien 2007 bis 2008 245
Lehrveranstaltungen 2007 bis 2008 246
Fortbildungsveranstaltungen 2007 bis 2008 252
Akademische Ausbildung 2007 bis 2008 269
Patente 2007 bis 2008 270
Mitgliedschaften / Funktionen 2007 bis 2008 272
Organe der Gesellschaft 274
Impressum 276
4

Vorwort
Sehr geehrte Leserin,
sehr geehrter Leser,
Entwicklung der Forschung
der DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH nimmt wichtige Versorgungs- und
Forschungsaufgaben der Transfusionsmedizin wahr.
Die transfusionsmedizinischen Institute in Frankfurt, Heidelberg, Mannheim, Tübingen und Ulm haben als universitäre
Einrichtungen nicht nur einen direkten Forschungs- und Lehrauftrag, sondern die unmittelbare Nähe und die Integration
unserer Institute in die medizinischen Fakultäten führen zusätzlich zu vielen gemeinsamen wissenschaftlichen
Kooperationen.
Daneben haben die genannten Institute zusammen mit den Instituten in Baden-Baden und Kassel einen Versorgungsauftrag
sowohl für die Universitätskliniken in Baden-Württemberg und Hessen, als auch für die über 400 Krankenhäuser
in unseren Regionen.
Der Ihnen vorliegende Forschungsbericht 2007 – 2008 umfasst 80 beschriebene Forschungsprojekte der oben genannten
Institute und stellt deren Forschungsstrukturen und Entwicklungsaktivitäten dar. Forschungsschwerpunkte
des DRK-Blutspendedienstes Baden-Württemberg - Hessen sind die Qualitätssicherung in der Blutversorgung,
Stammzellen und Zelltherapie, Transplantationsmedizin und Immungenetik sowie molekulare Pathophysiologie, Diagnostik
und Therapie.
Für die Finanzierung der Forschung und Entwicklung wurden von den einzelnen Forschungsgruppen und Instituten
auch in den Jahren 2007 und 2008 wieder hohe Drittmittelbeträge eingeworben. Zusätzlich wird die Forschungsarbeit
finanziell von den beteiligten Universitäten wesentlich getragen und vom DRK-Blutspendedienst anteilig unterstützt.
Die Forschungsaktivitäten an den Instituten des DRK-Blutspendedienstes Baden-Württemberg - Hessen führten im
Zeitraum 2007 – 2008 zu 244 Publikationen in wissenschaftlichen Fachzeitschriften, welche zusammen eine Impact-
Faktor Summe von 1035 erreichten. Es wurden im gleichen Zeitraum 513 Abstracts für Vorträge und Poster bei wissenschaftlichen
Konferenzen und Kongressen eingereicht und damit ein großer Beitrag zur fachlichen Diskussion
geleistet. Wissenschaftliche Ergebnisse aus unseren Instituten führten zudem zu Patentanmeldungen.
Transfusionsmedizin ist ein wichtiger Bestandteil der medizinischen Ausbildung. Unser Lehrauftrag an fünf medizinischen
Universitäten führte 2007 und 2008 nicht nur zu Habilitationen und der Ernennung einer außerplanmäßigen
Professur, der tägliche Umgang mit Studenten durch die Übernahme von Lehrverpflichtungen trug dazu bei, dass
vermehrt Studenten wissenschaftliches Interesse am Fachgebiet Transfusionsmedizin fanden und ihre Promotion hier
anfertigten.
Ein weiterer Erfolg war die Durchführung mehrerer wissenschaftlicher Kongresse und Symposien, zum Beispiel des
10th European Haemovigilance Seminar, das im Februar 2008 in Frankfurt stattfand.
Die Organisation des Weltkongresses der International Society of Blood Transfusion (ISBT), der als Joint Congress
mit der Deutschen Gesellschaft für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie (DGTI) 2010 in Berlin (Kongresspräsident
Prof. Seifried) stattfinden wird, hat bereits begonnen.
Die Beteiligung mehrerer Kollegen unseres Blutspendedienstes in nationalen, europäischen und internationalen Gremien
und wissenschaftlichen Fachgesellschaften wie z. B. die Präsidentschaft der ISBT, Vorstandsmitgliedschaften in
der DGTI, im Europarat, in der Richtlinienkommission der Bundesärztekammer, in der Leitlinienkommission, in der
European Blood Alliance, im Arbeitskreis Blut u. v. a. belegt die Aktivität, die Kompetenz und die fachliche Akzeptanz
unserer gemeinsamen Arbeit.
5

Forschungsbericht 2007 – 2008
Der Bereich Forschung und Entwicklung an den Instituten des DRK-Blutspendedienstes Baden-Württemberg - Hessen
leistet durch die stetigen Verbesserungen der diagnostischen Möglichkeiten und der Qualität der Blutprodukte
einen wichtigen Beitrag zur Zukunft des Gesamtunternehmens.
Ich bedanke mich bei allen, die zum Gelingen der Forschungsleistung beigetragen haben. Außergewöhnlich ist auch
die Tatsache, dass die Aufsichtsratsmitglieder unseres Blutspendedienstes unsere Forschungsambitionen nicht nur
akzeptieren, sondern aktiv befürworten. Dies sei an dieser Stelle ganz besonders dankbar erwähnt.
Forschung und Entwicklung sind für unser Unternehmen aber nicht nur notwendig, um den wachsenden Anforderungen
der Transfusionsmedizin gerecht zu werden, Forschung ist auch spannend und interessant. In diesem Sinne
wünsche ich Ihnen eine gewinnbringende Lektüre des Forschungsberichtes 2007 und 2008 der Institute des DRK-
Blutspendedienstes Baden-Württemberg - Hessen.
Prof. Dr. med. Dr. h. c. Erhard Seifried
6

Entwicklung der Forschung
Entwicklung der Forschung
Seit 2001 werden die gemeinsamen Forschungsdaten und Informationen zu den Forschungsprojekten aus den Instituten
in Baden-Baden, Frankfurt, Mannheim und Ulm zusammengestellt. Seit 2005 fließen auch die Daten aus dem
Institut in Tübingen und seit 2006 aus dem Institut in Heidelberg in den Forschungsbericht des DRK-Blutspendedienstes
Baden-Württemberg – Hessen ein.
Die Anzahl der Forschungsprojekte hat seit 2001 stetig zugenommen (Abbildung 1). In dem aktuellen Forschungsbericht
sind insgesamt 80 wissenschaftliche Projekte aufgeführt. Die Zunahme der Projekte über die Jahre ist teilweise
durch die Integration der Institute in Tübingen und Heidelberg, aber vor allem durch eine Intensivierung der gesamten
Forschungsaktivität im DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg – Hessen bedingt.
Abbildung 1: Anzahl der aktiven
Forschungsprojekte von
2001 bis 2008
Anzahl (gesamt)
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
53
Eine weitere Kennzahl für die wissenschaftliche Tätigkeit ist die Beteiligung an nationalen sowie internationalen Kongressen
und Konferenzen.
Abbildung 2 zeigt, dass in den Jahren 2007 und 2008, wie auch schon in der Vergangenheit, eine Vielzahl von Forschungsergebnissen
und Studien der wissenschaftlichen Gemeinschaft anhand von Vorträgen, Abstracts und Postern
präsentiert wurde.
61
2001-2002 2003-2004 2005-2006 2007-2008
65
80
7

Forschungsbericht 2007 – 2008
167
144
312
367
212
Abbildung 2: Anzahl der eingereichten
Abstracts für Vorträge
und Poster bei
Kongressen und Konferenzen
2001 bis 2008
Wissenschaftliche Publikationen in Fachzeitschriften sind ein wichtiger Indikator für die Produktivität von Forschungsgruppen.
Abbildung 3 fasst die Anzahl der publizierten Arbeiten des DRK-Blutspendedienstes Baden-Württemberg
– Hessen über die letzten Jahre zusammen. Seit 2005 konnte das bereits bestehende hohe Niveau an
publizierten Artikeln weiter ausgebaut werden.
Abbildung 3: Anzahl der publizierten
wissenschaftlichen
Artikel 2001 bis 2008
Die Bewertung publizierter Arbeiten erfolgt häufig anhand des international akzeptierten Impactfaktors, der oftmals
zur Evaluation von Forschungsleistungen herangezogen wird. Abbildung 4 zeigt die Entwicklung der kumulativen Impactfaktoren
seit 2001. In diesem Zeitraum stieg dieser annähernd um das Dreifache. Dabei lag der durchschnittliche
Impactfaktor pro Publikation in den Jahren 2007 und 2008 bei 4,6 bzw. 3,9.
8
Anzahl (gesamt)
Anzahl (gesamt)
400
350
300
250
200
150
100
50
0
140
120
100
80
60
40
20
0
2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008
58
48
68
64
2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008
107
244
127
246
124
267
120

Abbildung 4: Entwicklung der
kumulativen Impactfaktoren
der Veröffentlichungen in wissenschaftlichenFachzeitschriften
2001 bis 2008. Jede
Publikation mit Beteiligung
von Wissenschaftlern des
Blutspendedienstes wurde
einfach in die Wertung aufgenommen
Abbildung 5: Eingeworbene
begutachtete Drittmittel 2001
bis 2008
Impaktfaktor (kumulativ)
Eingeworbene begutachtete Drittmittel
[Mio. Euro]
600,0
500,0
400,0
300,0
200,0
100,0
0,0
4
3,5
3
2,5
2
1,5
1
0,5
0
175,9
194,8
Für die Finanzierung von Forschung und Entwicklung im Blutspendedienst werden neben Eigenmitteln auch eingeworbene
Drittmittel genutzt. In Abbildung 5 sind die begutachteten Mittel, die durch Forschungsgruppen des DRK-
Blutspendedienstes Baden-Württemberg – Hessen eingeworben wurden, zusammengestellt. Dabei handelt es sich
ausschließlich um Drittmittel, die durch unabhängige Fachgutachter zur Förderung ausgewählt wurden. Da die meisten
Förderzyklen über zwei bis drei Jahre reichen und in unserer Statistik nur im Bewilligungsjahr erfasst werden,
kommt es zu größeren Abweichungen der erhobenen Daten zwischen den Jahren. Insgesamt kann aber auch hier ein
stetiges Wachstum der geförderten Mittel verzeichnet werden.
218,1
261,1
409,6
552,3
2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008
0,81
0,52
1,19
2,15
1,67
2,59
Entwicklung der Forschung
2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008
537
1,47
498
3,44
9

Forschungsbericht 2007 – 2008
Überblick über die Forschungstätigkeiten im Jahr 2007 – 2008
Schwerpunkt I: Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Die Sicherstellung der Blutversorgung und die Arbeit an ihrer kontinuierlichen Verbesserung stellt einen Hauptschwerpunkt
der Forschungs- und Entwicklungstätigkeiten des DRK-Blutspendedienstes Baden-Württemberg - Hessen dar.
Das schließt als langfristig verfolgte Ziele die Versorgung mit Spezialpräparaten und Blutprodukten ein, die weiter erhöhten
Sicherheitsstandards genügen. Dazu gehören weiterhin die Entwicklung neuartiger Testverfahren und deren
Einführung. Diese Ziele werden verfolgt durch (a) die Einführung von Herstellungsverfahren mit zusätzlichen Schritten
zur Inaktivierung von Pathogenen in Blutkomponenten und (b) die Weiterentwicklung diagnostischer Testsysteme im
Bereich der so genannten NAT-Verfahren, also der Detektion auf Ebene von Nukleinsäuren.
Im Berichtszeitraum waren die Hauptziele:
Die Entwicklung diagnostischer Methoden zur bestmöglichen Sicherheit vor viralen und bakteriellen Kontaminationen
in Blutpräparaten,
die Prüfung von Pathogeninaktivierungsverfahren, in einem Falle auch die Vorbereitung zum klinischen Einsatz im
Rahmen einer Anwendungsbeobachtung in hämatologischen Patienten,
die Verbesserung und Weiterentwicklung immunhämatologischer Testmethoden,
die Initiierung europaweiter Zusammenarbeit im Rahmen der „Public Health“-Initiative der Europäischen Kommission.
Bei der Diagnostik zur Verbesserung der Virus- und bakteriellen Sicherheit von Blutpräparaten ist als zukünftiges Ziel
die routinemäßige Erfassung bakterieller Kontaminationen mit Hilfe eines NAT-Verfahrens zu nennen. Weitere Aktivitäten
lagen auf dem Gebiet der EU-weiten Kooperation, um die Bereitschaft („Preparedness“) zur Bestimmung seltener
oder unerwarteter Mikroorganismen zuverlässiger zu erfassen. Weiterhin ist es erforderlich, PCR-Verfahren zu entwickeln,
die in zwei unterschiedlichen Genombereichen eines Mikroorganismus detektieren können. Hiermit soll ermöglicht
werden, ggf. auf genetische Veränderungen infektiöser Agenzien wie HI-Viren zuverlässig zu reagieren.
Im Bereich der Infektionsserologie ist im Berichtszeitraum zur Verbesserung der Sicherheit plasmahaltiger Blutpräparate
im Berichtszeitraum deutschlandweit der allgemeine Ausschluss solcher Spender und Spenderinnern vorgeschrieben
worden, die ein erhöhtes Risiko bergen, in Empfängern schwere Transfusionsreaktionen vom Typ der
Transfusionsassoziierten akuten Lungeninsiffizienz (TRALI) auszulösen. Forschungsaktivitäten zur Entwicklung von
Tests zur Diagnostik von Antikörpern gegen Granulozyten wurden hier in den letzten Jahren vorangetrieben. Die Evaluation
der Methodik zum Einsatz beim Spenderscreening ist weit fortgeschritten. Damit stehen erstmals in Blutspendewesen
Untersuchungstechniken für einen breiten Einsatz zur Verfügung
Pathogeninaktivierungsverfahren ermöglichen die weitgehende Elimination eines sehr weiten Spektrums von in Blutspenden
und Blutkomponenten auftretender Erreger. Sie könnten so eine Alternative oder, eher wahrscheinlich, eine
Ergänzung zu bestehenden Tests darstellen. Die Pathogeninaktivierung erfolgt durch Kreuzvernetzung von DNA, zum
Beispiel durch Zugabe von DNA-interkalierenden Substanzen und anschließende Belichtung mit bestimmten Formen
von UV-Licht. Im Berichtszeitraum wurde vor allem die Zulassung eines Pathogeninaktivierungsverfahrens für Thrombozytenkonzentrate
verfolgt. Die erste Anwendung der Thrombozytenkonzentrate im Rahmen eines Hämovigilanzprogramms
in hämatologischen Patienten erforderte ebenfalls detaillierte Vorbereitungen, inkl. den Aufbau und die
Validierung von Produktionsstraßen in den Instituten Frankfurt, Mannheim und Ulm. Darüber hinaus zielten Forschungstätigkeiten
in diesem Bereich auf die Evaluation weiterer Inaktivierungsverfahren, so des Inaktivierungsverfahrens
mit Hilfe von Riboflavin oder die Entwicklung begleitender Untersuchungen zur Bestimmung der Effizienz und
Dokumentation der erfolgten Inaktivierung z.B. durch ein PCR-Verfahren.
In der Immunhämatologie sind als wesentliche Initiativen zu nennen:
(1) Die Aktivitäten zur Entwicklung einer optimalen Qualitätssicherung im Bereich der Rhesus-Blutgruppentypisierung
mit einem zusätzlichen Schwerpunkt in der Diagnostik Rh (D)-negativer Spender und Empfänger. Sie beinhalten
serologische Evaluationen, den Einsatz von PCR-Methoden und den Einsatz eines im Rahmen eines EU-Projektes
entwickelten und nun CE-zertifizierten „BloodChips“.
10

(2) Unter Beteiligung mehrerer Institute des BSD werden die molekularen Grundlagen von Phänotyp-Varianten der
ABO- und RhCE-Blutgruppenmerkmale untersucht. Vorrangiges Ziel ist die Verbesserung der Diagnostik dieser
Merkmale.
(3) Als minutenschnelle Methode wurde die „lateral flow“-Technik in der Anwendung getestet und validiert, um im
Falle der Notversorgung neue Sicherheiten zu schaffen.
(4) Eine Arbeitsgruppe beschäftigt sich zentral mit der Erfassung und Versorgungsmöglichkeit bei seltenen Blutgruppen
einschließlich der Kryokonservierung von Erythrozytenkonzentraten von Spendern mit seltenen Blutgruppen.
Die EU-weite Zusammenarbeit bei der Entwicklung neuer und einheitlicher Qualitätsstandards in der Versorgung mit
Blutkomponenten steht als vierte Hauptaktivität im Fokus der Entwicklungsarbeit dieses Schwerpunkts. Diese wird
im Rahmen dreier Projekte beforscht; bei zwei Projekten ist der DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
federführend. Im Berichtszeitraum konnte das erste dieser Projekte, „EU-Q-Blood-SOP“, mit dem Erscheinen des
hier entwickelten Manuals mit Minimalanforderungen zur Erstellung transfusionsmedizinischer Arbeitsanweisungen
erfolgreich und nach Erreichen aller Arbeitsziele im Berichtszeitraum beendet werden. Das Projekt hat inzwischen
eine breite internationale Resonanz gefunden. Im Projekt „EuBIS“ werden Standards zu Inspektion von sog. „Blood
Establishments“, also in der Blutversorgung in jedweder Hinsicht beteiligter Institutionen, entwickelt. Auch dieses
Projekt erhält zunehmende internationale Aufmerksamkeit. Unser Blutspendedienst ist darüber hinaus einer der
Hauptpartner an dem „Optimal Use“-Projekt, das einen optimierten Einsatz von Blutkomponenten zum Ziel hat.
Schwerpunkt II: Stammzellen und Zelltherapie
Die Bereitstellung von Blutstammzellpräparaten hat sich zu einer wesentlichen Kernaufgabe vieler Blutspendedienste
entwickelt. Die Bereitstellung und weitere Entwicklung von Kompetenz in diesem Bereich bildet eine der Hauptaufgaben
im Bereich Forschung und Entwicklung in unserem Blutspendedienst. Der Blutspendedienst ist hierbei initiativ in
der Entwicklung von Herstellungsverfahren für Zelltherapien,
der Entwicklung von präklinischen Modellen zur Untersuchung der Wirksamkeit von Zelltherapien,
der klinischen Anwendung von Stammzellen und Zelltherapeutika.
Präklinische Entwicklungen und Modelle
Eine zentrale Rolle spielen die Arbeiten zu mesenchymalen Stammzellen (MSC). Hier kann als wesentlicher Erfolg die
2007/2008 erfolgte Antragstellung und positive Begutachtung des europäischen Verbundprojektes CASCADE
(„Cultered Adult Stem Cells as Alternative for Damaged tissuE“) genannt werden, in dem der französische Blutspendedienst
EFS und der DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen als größte Partner vertreten sind. Mit der
Arbeitseinheit („Workpackage“) Nr. 2 mit dem Titel „Mechanisms of repair and validation of engineered MSC“ wird
ein Hauptteil der durchgeführten Arbeiten von Herrn Prof. Dr. H. Schrezenmeier (Ulm) aus unserem Blutspendedienst
koordiniert.
In den Jahren 2007 und 2008 standen in den Instituten in Frankfurt, Mannheim, Tübingen und Ulm Arbeiten für dieses
Projekt im Fokus der Zusammenarbeit verschiedener Arbeitsgruppen. So wurden in enger Kooperation zwischen
den Gruppen der vier genannten Institute bereits (a) die Isolierung von MSC aus verschiedenen Geweben, (b) die
Herstellung von GMP-fähigen (d.h. für einen klinischen Einsatz geeigneten) Medien und Reagenzien zur Expansion
von MSC und zu ihrer Zellmarkierung, sowie (c) in vitro- und in vivo-Modelle zur Erfassung der Migration von MSC
durchgeführt und (d) Nanopartikel-basierte Methoden zur Markierung der Zellen entwickelt.
In den weiteren in diesem Schwerpunkt verfolgten präklinischen Projekten stehen vor allem hämatopoietische Zellen
im Vordergrund. Diese fokussieren auf
(1) Natürliche Killerzellen,
(2) sog. dendritische Zellen,
(3) Vorläuferzellen, die in Tumoren einwandern können und Tumorwachstum beeinflussen, sowie
(4) blutbildende Zellen und die Bildung reifer Blutzellen.
Forschung
Hierzu wurden in vitro Differenzierungsverfahren, aber auch in einigen Fällen bereits Tiermodelle entwickelt. Sie sind
im Wesentlichen abgestimmt auf die im Folgenden genannten klinischen Anwendungen.
11

Forschungsbericht 2007 – 2008
Klinischen Anwendung von Stammzellen und Zelltherapeutika.
Im Berichtszeitraum 2007 bis 2008 erfolgten Anwendungen innovativer Zelltherapien mit im Blutspendedienst hergestellten
Zellpopulationen bei zahlreichen klinischen Kooperationspartnern. Hier sind vor allem zu nennen:
Institut Frankfurt
- Klinik für Pädiatrische Hämatologie und Onkologie,
- Medizinische Klinik II, Hämatologie, Onkologie, Rheumatologie und Klinische Immunologie,
- Medizinische Klinik III, Kardiologie (jeweils am Universitätsklinikum Frankfurt),
- Medizinische Klinik der Universität Würzburg.
Institut Mannheim
- Medizinische Klinik III, Hämatologie des Universitätsklinikums Mannheim,
- Klinik für Dermatologie, Venerologie und Allergologie am Universitätsklinikum Mannheim mit
Klinischer Kooperationseinheit für Dermato-Onkologie des Deutschen Krebsforschungszentrums Heidelberg.
Institut Ulm
- Klinik für Innere Medizin III, Hämatologie, Onkologie, Rheumatologie, Infektionskrankheiten,
- Klinik für Innere Medizin II, Kardiologie, Angiologie, Pneumonologie, Sport- und Rehabilitationsmedizin,
- Klinik für Kinder- und Jugendmedizin,
- Klinik für Hals-Nasen- und Ohrenheilkunde.
Eingesetzte Zellpopulationen beinhalteten u. a. Natürliche Killerzellen, gegen den CMV-Virus gerichtete spezifische
T-Lymphozyten, ex vivo expandierte dendritische Zellen und Vorläuferzellen bei Patienten mit akutem Herzinfarkt.
Schwerpunkt III: Transplantationsmedizin und Immungenetik
Die in diesem Schwerpunkt zusammengefassten Projekte befassten sich im Wesentlichen mit folgenden Fragestellungen
der Transplantationsimmunologie:
(1) Bedeutung von Zelloberflächenrezeptoren und Polymorphismen von Zytokingenen für den Transplantationserfolg,
(2) Translation von laboranalytischen Markern aus der Forschung in die Routinediagnostik.
Erforschung transplantationsrelevanter Antigene. Die Analysen im Bereich von Zelloberflächenrezeptoren umfassten
zum einen die sog. NK (Natürliche Killerzell)-Rezeptoren. Hier wurden Verfahren zur Typisierung weiterentwickelt. In
einer auf dem „European Bone Marrow Transplantation (EBMT)-Kongress vorgestellten preisgekrönten Arbeit wurde
eine Rolle eines NK-Zellrezeptors für den Erfolg und das Überleben von Patienten nach allogener Stammzelltransplantation
gefunden. Weitere Untersuchungen beschäftigten sich mit der Immunrekonstitution von NK-Zellen nach allogener
Stammzelltransplantation und der Rolle von NK-Zellen bei Autoimmunität. Eine weitere Arbeit, welche
ebenfalls bei einem EBMT-Kongress mit einem Preis ausgezeichnet wurde (Lyon 2007) etablierte ein Verfahren, wie
bei der Suche nach einem unverwandten Spender der Erfolg und die Zahl erforderlicher Untersuchungen vorhergesagt
werden kann.
Umsetzung in die klinische Anwendung und Routinediagnostik: Die Umsetzung von Verfahren in die Routinediagnostik
wurde im Rahmen einer automatisierten HLA-Typisierung angegangen. Die Entwicklung von Multiplexdiagnostiken,
z.B. für Polymorphismen im Promoter des IL-6 Zytokingens, erfährt ebenfalls eine solche Umsetzung in die
Klinik. Auch steht das Monitoring der Anpassung der Immunsuppression nach Stammzelltransplantation im Fokus
der Forschungsinteressen in diesem translatorischen Bereich. Aktivitäten hierzu erfolgen in den Instituten Frankfurt,
Heidelberg, Mannheim, Tübingen und Ulm.
12

Schwerpunkt IV: Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Die Forschung in diesem Bereich vereinigt Aktivitäten zur Aufklärung der genetischen Ursachen von Krankheiten oder
weiterer diagnostisch nutzbarer genetischer Anomalien und Varianten, sowie die diagnostische und therapeutische
Nutzung dieser Erkenntnisse. Diese Ziele werden in den folgenden Bereichen verfolgt:
Genetische Stammzelldefekte und Genreparatur
Der in Ulm langjährig etablierte Forschungsbereich, der sich mit Gendefekten in hämatopoietischen Stammzellen und
undifferenzierten Vorläuferzellen des Immunsystems beschäftigt, arbeitete weiter an der Aufklärung von Mechanismen
der Genreparatur und der Möglichkeit ihrer Nutzbarmachung im Sinne einer therapeutischen Genkorrektur.
Darüber hinaus gelang es, die Ursache weiterer erblicher Defekte der Blutbildung zu lokalisieren. So beschreibt eine
international hochkompetitiv publizierte Arbeit 2008 die Ursache der retikulären Dysgenesie (Aleukozytose), einer
regelhaft zum Tode führenden Krankheit im Neugeborenenalter, der ein Defekt eines mitochondrialen Gens zugrunde
liegt. Die Arbeitsgruppe ist zudem in nationale und internationale Netzwerke zur Erforschung von Immundefekten eingebunden.
Aus den gemeinsamen Studien wurden ebenfalls wesentliche neue Erkenntnisse zur Pathogenese dieser
Krankheiten in Kooperation publiziert.
Darüber hinaus steht im Institut Ulm die Aufklärung der Pathophysiologie und die Entwicklung neuer therapeutischer
Ansätze bei der sog. aplastischen Anämie (AA) und bei der paroxysmalen nächtlichen Hämogobinurie (PNH) im Mittelpunkt
des Interesses. Auch diese Forschung ist zusätzlich zur klinischen Einbindung vor Ort durch Kooperationen
z.B. im Bereich klinischer Behandlungsprotokolle etwa im Rahmen der EBMT europaweit vernetzt.
Im Institut Ulm wird zusammen mit dem ZKRD auch das Deutsche Register für Stammzelltransplantation (DRST) geführt,
welches alle seit Januar 1998 in Deutschland durchgeführten Transplantationen erfasst und auswertet.
Thrombozytenimmunologie und -funktion
In einer in Mannheim etablierten wissenschaftlichen Arbeitsgruppe werden derzeit im Rahmen eines von der Deutschen
Forschungsgemeinschaft geförderten Projektes die molekularen Grundlagen einer erblichen Thrombozytenfunktionsstörung,
dem Aspirin-like Defekt, charakterisiert. Grundlegende Arbeiten konzentrieren sich zudem auf die
Charakterisierung neuer Rezeptoren auf Thrombozyten. Die Arbeitsgruppe ist außerdem an mehreren nationalen und
internationalen Kooperationsprojekten beteiligt, in denen der Zusammenhang genetischer Polymorphismen mit der
Entstehung maligner Erkrankungen und Herzkreislauf-Erkrankungen untersucht wird. Die in den Studien entdeckten
Gene und ihre Vererbungsmuster liefern neue Einblicke in die Mechanismen der Herzinfarktentstehung, die wichtig
für die Prävention und Therapie des Herzinfarktes sind. So können die neuen Erkenntnisse dazu beitragen, die individuelle
Risikobewertung bislang nicht erkrankter Personen zu optimieren. Und es ist zu erwarten, dass sie in der Entwicklung
neuer medikamentöser Therapien münden.
Hämostaseologie
Im Bereich Hämostaseologie zielen die Aktivitäten zum einen auf die Kartierung von für die Blutgerinnung relevanten
Genpolymorphismen. Die molekulare Diagnostik hereditärer Fibrinogenerkrankungen, die bessere Erkennung und
Einteilung thromboembolischer Erkrankungen und die genetischen Grundlagen der erfolgreichen oralen Antikoagulation,
d.h. die Möglichkeiten einer Vorherbestimmung und begleitenden Diagnostik bei einer Marcumar-Behandlung
stehen als Beispiele für einen expandierenden therapierelevanten Bereich. Im Bereich der Hämophilieforschung stehen
die Aufklärung des Sekretionsweges von Gerinnungsfaktor VIII, die Optimierung der Faktor-VIII-Produktion und
die im Rahmen einer klinischen Behandlung mit Faktor-VIII-Konzentraten ermittelte Toleranzinduktion im Vordergrund.
Grundlagenbezogene Arbeiten haben sich in diesem Bereich zudem mit der Einführung einer Gentherapie für
Gerinnungsfaktoren beschäftigt.
PD Dr med. R. Henschler Prof. Dr. med. Dr. h. c. Erhard Seifried
Forschung
13

Forschungsbericht 2007 – 2008
Forschungsstruktur der Standorte
Das Institut Baden-Baden
Institut Baden-Baden
Institutsleitung: Dr. med. Ekkehard Richter
DRK Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Gunzenbachstraße 35
76530 Baden-Baden
Telefon +49(0)7221 214-0
Telefax +49(0)7221 214-435
Forschungsstruktur der Standorte
Das Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-Baden des DRK-Blutspendedienstes Baden-
Württemberg - Hessen ist ein Versorgungsstandort mit zentralen Aufgaben. Die ausschließlich anwendungsorientierten
Forschungsprojekte betreffen die Qualitätssicherung in der Blutversorgung und dienen der Optimierung der
Abläufe bei der Herstellung von Blutkomponenten, der Verbesserung der Qualität und Haltbarkeit der Blutpräparate
und der Untersuchung immunhämatologischer Fragestellungen, wie z.B. die Frequenz seltener erythrozytärer Antigene
in der Bevölkerung bzw. unter Blutspendern.
In den Abteilungen laufen routinebegleitende Analysen sowie Applikations-, Entwicklungs- und Industrieauftragsforschung.
Die personellen und materiell-technischen Voraussetzungen sind darauf beschränkt. Es bestehen Kooperationen
mit entsprechenden DGTI Arbeitsgruppen, der BEST Collaborative, des Internationalen Referenzlabors für
Blutgruppen in Bristol, SCARF (Philadelphia) und dem New York Blood Center.
Das am Institut ansässige Reisemedizinische Beratungszentrum organisiert jährlich in Zusammenarbeit mit „Reisen
und Gesundheit“ den „Baden-Badener Tag der Impf- und Reisemedizin“, der am 08.11.2008 zum 10. Mal stattgefunden
hat. Die Wissenschaftliche Leitung obliegt hierbei dem Institut Baden-Baden des DRK-Blutspendedienstes
Baden-Württemberg - Hessen.
Dr. med. E. Richter
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Das Institut Frankfurt
Institut Frankfurt
Institutsleitung: Univ.-Prof. Dr. med. Dr. h. c. Erhard Seifried
DRK Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Sandhofstraße 1
60528 Frankfurt
Telefon +49(0)69 6782-191
Telefax +49(0)69 6782-258
Aufgaben
Forschung
Das Institut Frankfurt nimmt die Versorgung, die hämotherapeutische Beratung sowie die immunhämatologischen
Laborleistungen für das gesamte Universitätsklinikum Frankfurt wahr und betreut damit das Universitätsklinikum in
allen transfusionsmedizinischen Belangen. Weiterhin stellt das Institut in Mittel- und Südhessen die Versorgung von
insgesamt mehr als 100 Krankenhäusern mit Blutprodukten sicher und ist Referenzlabor für andernorts nicht lösbare
immunhämatologische Fragestellungen. Neben mehr als 200.000 Vollblutspenden pro Jahr, die von mehr als 100.000
Blutspendern entgegen genommen werden, werden jährlich mehrere hundert Stammzellapheresen in der Abteilung
Zellseparation durchgeführt. Der Lehrstuhl (C4) für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie am Universitätsklinikum
Frankfurt stellt Lehre und Forschung im Fachgebiet sicher.
Die Forschungsaktivitäten des Frankfurter Instituts haben das Ziel, zu einer kontinuierlichen Fortentwicklung der
medizinischen Versorgung in transfusionsmedizinischen Belangen beizutragen. Hierzu gehört ebenso die Verbesserung
der Therapie und der Sicherheit von Blut und Blutprodukten durch den Einsatz modernster Diagnose-, Produktions-
und Qualitätssicherungsverfahren wie auch die Entwicklung neuer Zell- und Gentherapeutika. Neben den für die
Transfusionsmedizin fachspezifischen Krankheitsbildern sind die Ärzte und Wissenschaftler des Instituts auch mit der
fachübergreifenden Entwicklung von neuen Therapieverfahren beschäftigt. Besonders die Erforschung und Umsetzung
neuartiger zellulärer Therapien (Stammzellen, Immunzellen, gentechnisch veränderte Zellen) und die Berücksichtigung
und Einhaltung der arzneimittelrechtlichen Vorgaben stellt hierbei eine Herausforderung dar. Im gleichen
Zusammenhang muss auch die Prozessierung, Einlagerung und Anwendung von Produkten verschiedener Gewebearten
gesehen werden. Sie erfordert ebenfalls eine enge Zusammenarbeit mit den verschiedenen anderen medizinischen
Disziplinen. Die Kooperationen der verschiedenen Forschungsgruppen mit dem Universitätsklinikum sowie mit
assoziierten Forschungsinstituten werden daher kontinuierlich ausgebaut. Weitere Forschungsschwerpunkte liegen
am Frankfurter Institut im Bereich der Sicherheit von Blutprodukten für die Anwendung am Patienten (Hämotherapie),
der Transplantationsimmunologie (HLA-Diagnostik), im Bereich der Immunhämatologie, der Molekularen Hämostaseologie,
der Stammzelltransplantation, der experimentellen und angewandten Zelltherapie, der Gentherapie angeborener
Erkrankungen des Blutes und des Blutgerinnungssystems sowie im Bereich „Qualitätsmanagement in der
Transfusionsmedizin“.
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Forschungsbericht 2007 – 2008
Entwicklung 2007 – 2008
Schwerpunkt I: Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Forschungsstruktur der Standorte
Auch im Berichtszeitraum 2007 und 2008 wurden die in Frankfurt zu diesen Themen bestehenden Projekte weiter
entwickelt und fortgeführt. Einige Projekte konnten darüber hinaus erfolgreich abgeschlossen werden. Im Bereich der
Infektionssicherheit von Blutpräparaten wurden die Aktivitäten zur Erhöhung der bakteriellen Sicherheit mit Hilfe verschiedener
Verfahren aus den Vorjahren zunächst 2007 erfolgreich publiziert. Diese Arbeiten stellen die Kooperation
mit dem Institut Ulm und weiteren DRK-Blutspendediensten dar. Die Ergebnisse wurden auf internationalen Kongressen
bei den weltweit führenden Arbeitsgruppen sehr häufig genannt und zitiert. Es ist davon auszugehen, dass diese
Daten einen signifikanten Anteil am Zustandekommen des Stufenplans des Paul-Ehrlich-Instituts zur Verminderung
des Infektionsrisikos durch bakteriell kontaminierte Thrombozytenkonzentrate beitrug. Es wurde als Alternative zu
den in den Niederlanden und den USA betriebenen und letztlich gescheiterten Bemühungen der Einführung einer
Testung auf Anwesenheit von Bakterien während bzw. teilweise nach Ausgabe der Produkte in Deutschland eingeführt.
Im dem auf europäischer Ebene in multilateraler Kooperation betriebenen und auf fünf Jahre angelegten
„BOTIA“-Projekt arbeitet die Gruppe aus dem Frankfurter Institut inzwischen an einer systematischen Erstellung von
Tests zur besseren Bekämpfung neu auftretender Erreger, sog. „emerging pathogens“ mit. Als weiteres zentrales Projekt
in diesem Schwerpunkt wurde in Frankfurt die Automatisation des PCR-Verfahrens weiter vorangetrieben.
Ein zweiter Schwerpunkt der Arbeit im Bereich „Qualitätssicherung in der Blutversorgung“ ist die Einführung neuer
Herstellungsverfahren für Blutkomponenten, durch die sog. Pathogeninaktivierung. In Frankfurt wurde 2007 die
Herstellungserlaubnis für pathogeninaktivierte Thrombozytenkonzentrate erwirkt. Im Berichtszeitraum wurde die Zulassung
beim Paul-Ehrlich-Institut beantragt und am 25.03.2009 ebenfalls für den gesamten Blutspendedienst erteilt.
Das Institut Frankfurt ist in diesem Projekt federführend. Parallel waren zahlreiche Entwicklungs- und Anpassungsschritte
in der Routineproduktion notwendig, um in enger Abstimmung und Koordination mit den Instituten in Mannheim
und Ulm eine befristete probeweise Anwendung solcher Präparate an einem ausgesuchten Patientengut
vorzubereiten und sicherzustellen.
In den Bereich des Schwerpunkts fällt ein weiterer wesentlicher Teil der in Frankfurt durchgeführten Forschungs- und
Entwicklungstätigkeiten, und zwar die europaweit geführten und durch die Europäische Kommission finanziell unterstützten
Projekte im Bereich des Qualitätsmanagements. Diese betreffen vor allem das von Frankfurt aus führend
betriebene Projekt „EuBIS“ (europäisches Inspektionsprojekt), das „Optimal Use“-Projekt und das Projekt „DOMAINE“
(„Donor Management in Europe), die alle im Berichtszeitraum neu etabliert werden konnten.
Schwerpunkt II: Stammzellen und Zelltherapie
Die Forschungstätigkeiten im Gebiet „Stammzellen und Zelltherapien“ sind in Frankfurt stark vertreten und decken
von der Erforschung von Grundlagen bis hin zur klinischen Anwendung ein weites Spektrum ab. Das Gebiet wird von
mehreren Arbeitsgruppen bearbeitet. Zusätzlich zu der Gruppe von PD Dr. R. Henschler, die überwiegend im präklinischen
Bereich arbeitet, und der Arbeitsgruppe von PD Dr. T. Tonn, die wesentlich an der Entwicklung der
GMP-Herstellung arbeitet, konnte zum 01.09.2007 zusätzlich Herr Dr. H. Bönig als neuer Mitarbeiter gewonnen werden.
Dr. Bönig arbeitete vor seinem Umzug nach Frankfurt langjährig an dem als führend geltenden US-amerikanischen
Stammzell-Transplantationszentrum in Seattle und ist sowohl als Arzt wie auch als Wissenschaftler etabliert
und ausgewiesen. Die bereits vor dem Berichtszeitraum in Frankfurt etablierten Projekte der Sicherheitsbeobachtung
von Stammzellspendern, der Herstellung von Stammzellpräparaten zur Zelltherapie nach Herzinfarkt und zum Einsatz
Zytomegalievirus (CMV)-spezifischer T-Lymphozyten wurden 2007 und 2008 weiter verfolgt und die Zahl der behandelten
Patienten erhöht. Im Falle der REPAIR AMI-Studie mit Patienten nach Herzinfarkt wurde die Studie abgeschlossen
und es wurde eine europaweit rekrutierende Anschluss-Studie vorbereitet. Im Bereich der präklinischen
Entwicklungen standen vor allem die Arbeiten an sog. Mesenchymalen Stammzellen (MSC) im Vordergrund, die in
das 2008 positiv begutachtete, aus einer EU-weiten Ausschreibung hervorgehende Projekt „CASCADE“ („Cultured
Adult Stem Cell Alternative for Damaged Tissue“) in Kooperation mit den Instituten in Mannheim, Tübingen und Ulm
und in ein, durch das Bundesministerium für Bildung und Forschung gefördertes Projekt zur Immunmodulation durch
MSC mündeten. Weitere Projekte führten zur genaueren Erforschung der Mechanismen, die für das koordinierte „Homing“
transplantierter blutbildender Vorläuferzellen z.B. in Tumorgewebe verantwortlich sind und die in Zukunft für
tumorgerichtete Therapien eingesetzt werden könnten. Auch zur Transfusion könnten unreife Vorläuferzellen nützlich
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sein, wenn sich aus ihnen reife Blutzellen (z. B. Erythrozyten) in Kultur entwickeln lassen, oder zumindest Zwischenstufen,
die innerhalb kurzer Zeit nach Transfusion reife Blutzellen bilden.
Schwerpunkt III: Transplantationsmedizin und Immungenetik
In Frankfurt bestehen besondere Vorarbeiten auf den Gebieten der HLA-Diagnostik. Neue Gebiete werden mit der
2007 und 2008 intensiv vorangebrachten kooperativen Studie mit dem Universitätsklinikum erarbeitet, die die Rolle
der zusätzlichen Bestimmung von Merkmalen sog. NK-Zell-Rezeptoren bei Spendern und Empfängern untersucht
hat (Prof. Dr. C. Seidl). Ein signifikanter Stellenwert dieser Untersuchungen für das Überleben nach Transplantation
und den Therapieerfolg wurde nachgewiesen. Die Studie wurde auf dem „European Bone Marrow Transplantation“-
Kongress mit einem Preis ausgezeichnet und inzwischen zur Veröffentlichung eingereicht.
Weitere Schwerpunkte stellen die erfolgreich etablierten Bestimmungen zusätzlicher immungenetischer Marker bei
Patienten mit Autoimmunerkrankungen sowie von Genpolymorphismen bei stammzelltransplantierten Patienten und
deren Spendern dar. Beide Ansätze stellen jeweils erfolgreiche Umsetzungen von Forschungsergebnissen in
Diagnostikverfahren dar, die derzeit z.B. klinische Studien begleiten und die anschließend als fest etablierte Diagnostikverfahren
angeboten werden sollen.
Schwerpunkt IV: Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
In Frankfurt ist dieser Bereich mit Arbeiten auf den Gebieten der Immunhämatologie und der molekularen Hämostaseologie
vertreten. Im Bereich der Immunhämatologie sind vor allem die Entwicklung und klinische Evaluation neuer
Testverfahren zu nennen, so die „lateral flow“-Technik, durch die in Minutenschnelle Blutgruppenmerkmale insbesondere
für Notfallsituationen in Zukunft zuverlässig und automatisiert bestimmt werden können, und die verbesserte
molekulargenetische Abklärung seltener Blutgruppenmerkmale. Den Großteil der Tätigkeiten bilden jedoch in Frankfurt
die Arbeiten im Bereich der Hämostaseologie. Die Arbeitsgruppe von Herrn Dr. J. Schüttrumpf hat hier neue, vor
allem therapeutisch ausgerichtete Verfahren zur Gentherapie etabliert, um einerseits die Hämophilie B zu bekämpfen
(Faktor IX Mangel), andererseits der besonders häufigen sog. Hemmkörper-Hämophilie mit neuen Mitteln zu begegnen,
wie z.B. Toleranzinduktion. In der Arbeitsgruppe von PD Dr. T. Tonn wurde die intrazelluläre Prozessierung des
Faktor-VIII-Moleküls weiter bearbeitet und eine wichtige Promotion abgeschlossen; die Erkenntnisse werden in Anschlussprojekten
derzeit für die gezielte Steuerung intrazellulärer Signalwege in Faktor-VIII-produzierenden Zellen zur
gentechnischen Herstellung von Gerinnungsfaktor VIII umgewandelt. In den Bereich der Umsetzung grundlegender
Erkenntnisse durch Entwicklung neuer diagnostischer Verfahren und Methoden fallen die Aktivitäten in der Arbeitsgruppe
von Dr. C. Geisen, die die zuverlässige Kartierung von therapierelevanten Gen-Polymorphismen insbesondere
in den Bereichen Blutungsneigung und Thrombophilie etablieren.
Perspektiven für 2009:
Die in den letzten beiden Jahren erarbeiteten Ergebnisse und Erkenntnisse stellen die Grundlage für folgende weitere
Entwicklungen dar:
Verbesserung der PCR durch Automatisation und Erweiterung des Testspektrums;
Ausbau der Aktivitäten im Bereich Zelltherapie, Erweiterung um unter GMP-Bedingungen hergestellte Mesenchymale
Stammzellen und ggf. Immunzellen (wie Natürliche Killerzellen), Koordinierung der Aktivitäten und arbeitsteilige
Bearbeitung mit den Instituten in Mannheim, Tübingen und Ulm;
Durchführung eines gemeinsamen Projekts zur Verknüpfung der Tätigkeiten in der Stammzellspendersuche
und -transplantation;
Umsetzung von Ergebnissen in europäische Richtlinien im Bereich Qualitätsmanagement;
Einführung neuer molekularbiologischer diagnostischer Testverfahren vor allem im Bereich der Hämostaseologie.
Prof. Dr. med. Dr. h. c. Erhard Seifried
Forschung
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Forschungsbericht 2007 – 2008
Das Institut Heidelberg
Institut für Immunologie
Ärztlicher Direktor: Univ.-Prof. Dr. med. Stefan Meuer
Institut für Klinische Transfusionsmedizin und Zelltherapie Heidelberg
Geschäftsführer: Prof. Dr. S. Meuer und Dipl.-Volkswirt M. Stähle
Im Neuenheimer Feld 305
69120 Heidelberg
Telefon +49(0)6221 4000
Telefax +49(0)6221 5990
Forschungsstruktur der Standorte
Das Institut für Immunologie der Ruprecht-Karls-Universität Heidelberg erfüllt Aufgaben in der mittelbaren Krankenversorgung,
der Forschung und der Lehre auf den Gebieten Transfusionsmedizin, Transplantationsimmunologie und
Medizinischer Immunologie. Von den ca. 200 Mitarbeiterinnen und Mitarbeitern sind rund zwei Drittel mit klinischem
Service betraut, ein Drittel führt Forschungen auf dem Gebiet der Immunbiologie und Immunpathologie des menschlichen
Immunorgans durch. Das Institut führt den Sonderforschungsbereich 405 „Immuntoleranz und ihre Störungen“
seit 1997. Es wurde 2008 als „Center of Excellence in Clinical Immunology“ der „Federation of Clinical Immunology
Societies (FOCIS)” akkreditiert. Ebenfalls 2008 wurde das „Kompetenzzentrum für Immunmonitoring” etabliert, welches
mit modernsten Infrastrukturen klinische Studien der Phasen I/II qualifiziert begleitet. Im Jahre 2006 wurde der
transfusionsmedizinische Bereich überführt in ein Gemeinschaftsunternehmen des DRK-Blutspendedienstes Baden-
Württemberg - Hessen und des Universitätsklinikums Heidelberg, das Institut für Klinische Transfusionsmedizin und
Zelltherapie (IKTZ) gemeinnützige GmbH Heidelberg.
Prof. Dr. med. S. Meuer
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Das Institut Mannheim
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie Mannheim
Institutsleitung: Univ.-Prof. Dr. med. Harald Klüter
DRK Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Friedrich-Ebert-Straße 107
68167 Mannheim
Telefon +49(0)621 3706-817
Telefax +49(0)621 3706-818
In den Jahren 2007/2008 sind am Institut Mannheim drei Forschungsschwerpunkte innerhalb des Forschungsprofils
des DRK-Blutspendedienstes Baden-Württemberg - Hessen mit den folgenden Themen bearbeitet worden:
Schwerpunkt: Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Arbeitsgruppe Pathogeninaktivierung (Dr. Janetzko)
Eines der vorrangigen Themen in diesem Schwerpunkt ist die photochemische Pathogeninaktivierung von Thrombozytenkonzentraten
mittels Amotosalen in Kombination mit UVA-Bestrahlung. In den vergangenen Jahren wurden
Studien für die Beurteilung der Thrombozytenqualität in vitro und in vivo durchgeführt. Daneben wurden neue Prüfverfahren
entwickelt, die es ermöglichen, auf der Basis von PCR-Untersuchungen die erfolgreiche Amotosalen-UVA-
Behandlung zu dokumentieren. Eine quantitative Auswertung dieser PCR-Ergebnisse mittels Bioanalyzer konnte
etabliert werden. Im Zuge der jetzt erteilten Zulassung photochemischer Thrombozytenkonzentrate durch das
Paul-Ehrlich-Institut sollen nun größere Datenmengen zur Auswertung erhoben werden. Darüber hinaus stellt das
Mirasol®-Pathogen-Reduktionsverfahren auf Basis von Riboflavin in Kombination mit UVB-Bestrahlung einen weiteren
Schwerpunkt dar. In in vitro Studien wurde anhand unterschiedlicher Fragestellungen der Einfluss dieser Behandlung
auf den Thrombozytenmetabolismus und die Thrombozytenaktivierung untersucht.
Arbeitsgruppe Qualitätskontrolle (Dr. Janetzko)
Die Bestimmung der Hämolyserate stellt einen entscheidenden Qualitätskontrollparameter bei Erythrozytenkonzentraten
dar. Diese kann semiquantitativ makroskopisch anhand einer Hämolysefarbskala bestimmt werden, sofern das
Erythrozytenkonzentrat erneut verwendet werden soll. Die Bestimmung der Hämolyserate kann darüber hinaus z. Zt.
quantitativ nur unter Eröffnung und damit Vernichtung des Erythrozytenkonzentrates erfolgen. Die Arbeitsgruppe von
Frau PD. Dr. Meinke, Klinik für Dermatologie, Venerologie und Allergologie, Charité-Universitätsmedizin Berlin und
Dr. Helfman, Laser- und Medizin-Technologie GmbH, Berlin, hat einen Sensor entwickelt, mit dem die nicht-invasive
quantitative Bestimmung der Hämolyserate möglich ist. Aktuell soll darüber hinaus die Resterythrozytenzahlmessung
in Thrombozytenkonzentraten oder Plasma quantitativ ohne Eröffnung des Blutproduktes an dem Beutelschlauch
mittels Sensor erfolgen. Die Optimierung des Sensor-Prototyps zu einem für die Routine einsetzbaren Messinstrument
ist Ziel unserer Arbeitsgruppe.
Arbeitsgruppe Spenderscreening (Dr. Nguyen)
Forschung
Die Arbeitsgruppe befasst sich derzeit mit einer neuen Methode zur Untersuchung von einer umfangreicher Spenderpopulation
auf granulozytäre Antikörper mittels Durchflusszytometrie (Flow GIFT). Um die Abarbeitung der Proben zu
standardisieren und zu rationalisieren, wird das Verfahren automatisiert. Es ist auch erstmalig gelungen, eine Automatisation
eines solchen Verfahrens zu etablieren. Somit können alle therapeutischen Plasmen bzw. Apheresethrombozytenkonzentrate
von Spenderinnen mit Schwangerschaftsanamnese untersucht werden und nach negativer
Testung zur Applikation freigegeben werden.
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Forschungsbericht 2007 – 2008
Schwerpunkt: Stammzellen und Zelltherapie
Arbeitsgruppe Zell- und Immuntherapie (Dr. K. Bieback)
Forschungsstruktur der Standorte
Die Arbeitgruppe konzentriert sich auf die Untersuchung verschiedener Stammzell populationen, und auch dendritischer
Zellen für die Immuntherapie. Dabei stehen Verfahren zur GMP-konformen Herstellung und Qualitätskontrolle
im Vordergrund. Stammzellen, insbesondere Mesenchymale Stammzellen und Endothelvorläuferzellen aus Nabelschnurblut,
werden untersucht, um den möglichen therapeutischen Nutzen für zelltherapeutische Appliklationen zu
evaluieren.
Schwerpunkt: Transplantationsmedizin und Immungenetik
Arbeitsgruppe IL-6 und Transplantation (PD Dr. med. M. Müller-Steinhardt)
IL-6 ist ein zentrales Zytokin mit einer Vielzahl von unterschiedlichen Funktionen, wie z.B. der Induktion der Akut-
Phase Reaktion. Die Arbeitsgruppe konnte bereits eine Assoziation zwischen IL-6 Promotor Genotyp (-597/-572/-
174) und Transplantatüberleben nach allogener Nierentransplantation nachweisen. In einer aktuellen Arbeit wird
geprüft, ob ein Zusammenhang besteht zwischen IL-6 Genotyp und IL-6 Plasmaspiegel bei gesunden Spendern und
bei Hämodialysepatienten, die auf der Warteliste für eine Nierentransplantation stehen. Dies könnte für eine verbesserte
individuelle Risikoabschätzung vor Transplantation von großer Bedeutung sein. Ferner sollen Stimulationsversuche
ergänzt werden, um diese Daten zu bestätigen.
Schwerpunkt: Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Arbeitsgruppe Thrombozytenimmunologie und -funktion (Prof. Dr. Bugert)
Die Arbeitsgruppe befasst sich in verschiedenen Projekten mit der Identifizierung und funktionellen Charakterisierung
neuer Rezeptoren bei Thrombozyten. Die Untersuchung der molekularen Grundlagen des Aspirin-like-Defekt bildet
einen weiteren Schwerpunkt der Arbeitgruppe. Hierbei handelt es sich um ein Kooperationsprojekt, das durch die
Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) gefördert wird. In mehreren nationalen und internationalen Kooperationsprojekten
werden außerdem Genvarianten untersucht, die im Zusammenhang mit Herzkreislauf- und Krebserkrankungen
stehen.
Arbeitsgruppe Molekulare Immunhämatologie (Prof. Dr. Bugert)
Diese Arbeitsgruppe ist Teil einer Zusammenarbeit mehrerer Institute der DRK-Blutspendedienste. Während die serologischen
Untersuchungen zur Identifizierung auffälliger Proben an den Instituten Ulm, Baden-Baden und Frankfurt
durchgeführt werden, besteht die Aufgabe der Mannheimer Arbeitsgruppe darin, die molekularen Analysen zur Charakterisierung
der besonderen Blutgruppeneigenschaften vorzunehmen. Im Vordergrund stehen dabei Merkmale im
AB0- und im RHCE-System.
Prof. Dr. med. H. Klüter
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Das Institut Tübingen
Institut für Klinische und Experimentelle Transfusionsmedizin
Universitätsklinikum Tübingen
Institutsleitung: Univ.-Prof. Dr. med. H. Northoff
Zentrum für Klinische Transfusionsmedizin
Geschäftsführer: Prof. Dr. med. H. Northoff und Dipl.-Volkswirt M. Stähle
Otfried-Müller-Straße 4/1
72076 Tübingen
Telefon +49(0)7071 81601
Telefax +49(0)7071 5040
Die Aufgabenstellung des Zentrums für Klinische Transfusionsmedizin (ZKT) in Tübingen umfasst die Abnahme und
Herstellung von Blutprodukten und die transfusionsmedizinische Krankenversorgung. In Personalunion geführt wird
das für Forschung und Lehre zuständige Institut für klinische und experimentelle Transfusionsmedizin (IKET). Das
Budget des IKET wird vom ZKT zu ca. 25 % unterstützt.
Der Hauptschwerpunkt der Forschung am ZKT erfolgt im Bereich Stammzellen und Zelltherapie. Im Labor für Mesenchymale
Stammzellen werden mit klinikumsinternen und externen Kooperationspartnern Fragestellungen zur Isolation/Charakterisierung,
Differenzierung, Markierung und Immunmodulation von mesenchymalen Stammzellen
untersucht. Hierbei wurde zur Entwicklung von zukunftsweisenden Verfahren in der Regenerativen Medizin beigetragen
(erste intranasale Applikation von Stammzellen, Modulation des Homingverhaltens von Stammzellen, Optimierung
von Markierungsverfahren von Stammzellen). Die Isolation und Expansion von Stammzellen erfolgt mit
GMP-konformem Humanserum aus eigener Produktion. Im September 2006 und im April 2008 wurde in Tübingen
von uns in Zusammenarbeit mit der Klinik für Pädiatrie ein internationaler Kongress veranstaltet, der sehr gut besucht
und angenommen wurde. Der nächste Kongress wird im November 2009 und zukünftig alle zwei Jahre stattfinden.
In Zusammenarbeit mit der Chirurgischen Klinik wurde ein Verfahren zur Isolation und Präparation sowie Transplantation
von Pankreasinselzellen entwickelt. Diesbezüglich liegt eine Herstellungserlaubnis vor und der erste Patient
wurde bereits erfolgreich transplantiert.
Im Schwerpunkt Transplantationsimmunologie und Immungenetik wurden neue und bereits bewährte Methoden
(LCT, MAIPA, ELISA) bei der Antikörpersuche (HLA-Klasse I, II, HPA) in verschiedenen Phasen der Nierentransplantationen
verglichen. Um die vorgeschaltete zelluläre Immunaktivierung untersuchen zu können, wird der ELISPOT-Test
etabliert, der auch bei Verdacht auf thrombozytäre Antikörper hilfreich ist.
Am IKET läuft eine breite Palette an weiterer Forschungstätigkeit. Dazu gehört zum einen die Entwicklung einer
diagnostischen Plattform auf Basis von Schwingquarzsensorik. Dieses BMBF-geförderte Projekt wird in einer breiten
Kooperation mit Industrie und anderen universitären Instituten vorangetrieben. Entwicklungsziele sind derzeit der Einsatz
von Schwingquarzen bei hämostaseologischem Monitoring und in der Malariaforschung. Die Kernarbeitsgruppe
umfasst insgesamt acht Drittmittelgeförderte Physiker, Chemiker, Pharmazeuten und Informatiker. Als weiteres Forschungsgebiet
im IKET läuft die Herstellung und der Einsatz von Genexpressionschips für die Stressforschung. Dieser
wurde u. a. auch bei der umfassenden Untersuchung der Antwort des Organismus auf erschöpfende Ausdauerbelastungen
unter verschiedenen Umgebungsbedingungen eingesetzt, einem weiteren drittmittelgeförderten Forschungsgebiet
des IKET.
Prof. Dr. med. H. Northoff
Forschung
21

Forschungsbericht 2007 – 2008
Das Institut Ulm
Institut Ulm
Institutsleitung: Univ. Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Helmholtzstraße 10
89081 Ulm
Telefon +49(0)731 150-0
Telefax +49(0)731 150-575
Aufgaben
Forschungsstruktur der Standorte
Das Institut für Klinische Transfusionsmedizin und Immungenetik Ulm (IKT Ulm) versorgt neben dem Universitätsklinikum
Ulm über 130 Einrichtungen mit Blutprodukten, Stammzell - und Zelltherapiepräparaten und transfusionsmedizinischer,
immunhämatologischer sowie transplanta tions immunologischer Diagnostik. Das vom DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen und der Universität Ulm gemeinsam getragene Institut für Transfusionsmedizin der
Uni versität Ulm nimmt die Aufgaben in Forschung und Lehre war.
Entwicklung 2008
Die Mehrzahl der Forschungsaktivitäten im Institut sind den folgenden Schwerpunkten zuzuordnen:
1) Molekulare Diagnostik in den Bereichen Blutgruppenbestimmung, Immungenetik und Immun-/Hämatopoiese-
Defekte und
2) Entwicklung von Stammzellpräparaten und Zelltherapeutika zur klinischen Anwendung.
Im Schwerpunkt Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie sind die Arbeitsgruppe „Molekulare Diagnostik
erythrozytärer Antigene“, die Arbeitsgruppe „Transplantationsimmunologie“ und die Arbeitsgruppe „Mole kulare
Pathophysiologie und Diagnostik von Immun- und Hämatopoiese-Defekten und deren Gentherapie“ aktiv. Zwischen
diesen bestehen methodische Überschneidungen, aber ein komplementäres Untersuchungsprofil. Die Fragestellungen
der jeweiligen Untersuchungen knüpfen an diagnostische Fragestellungen an, welche schon jetzt zum Leistungsprofil
des Instituts zählen und entwickeln entweder neue Methoden und/oder Ausweitungen der Methoden auf
weitere Parameter. Ein Beispiel ist die Blutgruppendiagnostik, welche als serologische Diagnostik zum Standard-
Repertoire gehört. Die in der Arbeitsgruppe „Moleku lare Diagnostik erythrozytärer Antigene“ gewonnenen Erkenntnisse
zur molekularen Grund lage der Blutgruppenantigene, insbesondere zur genomischen Organisation des Rhesus-
Lokus, stellten eine essentielle Basis für die Entwicklung eines Blutgruppen-Biochips in einem EU-geförderten
Kooperationsprojekt dar. Ein weiteres Beispiel ist die Aufklärung der molekularen Ursache von Defekten der Blutbildung,
wodurch eine gezielte Diagnostik überhaupt erst möglich wird. Gleichzeitig wird damit auch die Möglichkeit
eines Brücken schlags zur Therapie eröffnet. Die in dem Projekt gewonnen Erkenntnisse definieren die Zielstrukturen
für Genkorrekturansätze.
Im Schwerpunkt Stammzellen- und Zelltherapie beschäftigen sich die Arbeitsgruppen „Zelluläre Immuntherapie und
Stammzelltransplantation“, „Pathophysiologie und Therapie von hämatopoietischer Insuffizenz“ und „Deutsches Register
für Stammzelltransplantationen“ mit der Entwicklung, Etablierung und Auswertung von Therapien mit Stammzellen
und neuen Zelltherapeutika. Dabei geht es zum einen um die GMP-gerechte Herstellung von Stammzell- und
Zellthera piepräparaten, aber auch deren funktionelle Charakterisierung. Zu den Forschungsaktivitä ten gehören die
Untersuchungen von Zelltypen wie Mesenchymale Stammzellen (MSC), welche ein breites therapeutisches Potential
besitzen, und der Einsatz von Knochenmarkzellen, welche schon lange in der Stammzelltransplantation eingesetzt
werden, in neuen Indikationen, z. B. dem akuten Myokardinfarkt. Mit der Anwendung von Stammzellen in neuen
Indikationen bzw. dem Einsatz neuer Zelltherapeutika sind immer auch Fragen zum Verhalten der Zellen im Organismus
verbunden. Um verfolgen zu können, in welchen Geweben sich die Zelltherapie-Präparate ansiedeln und wie
sich die Zellen dort verhalten, wird an Methoden zur Markierung dieser Zellen durch Nanopartikel gearbeitet.
22

Forschung
Weitere Detailinformationen finden sich in der nachfolgenden Kurzzusammenfassung wesentlicher Forschungs- und
Entwicklungs-Aktivitäten der Arbeitsgruppen in den Jahren 2007 und 2008 und in den ausführlicheren Einzelprojekt-
Beschreibungen.
Die Arbeitsgruppe „Molekulare Diagnostik erythrozytärer Anti gene“ (Prof. Dr. W. A. Flegel, Frau Dr. I. von Zabern)
erforscht Zu sammenhänge zwischen Geno typ, Phänotyp, Struktur und Funk tion der blutgruppentragenden Proteine,
um Transfusionen sicherer und wirtschaft licher zu machen.
Die in Ulm entwickelten geneti schen Methoden werden einer breiten Anwendung zugeführt. Die Prototyp-Entwicklung
des Blut gruppen-Biochips in einem EU-geförderten Projekt (BloodGen) ist abgeschlossen. Durch molekulare
Untersuchung aller serologisch D-negativen Erstspender konnte gezeigt werden, dass ungefähr einer unter 500
scheinbar D-negativen Blutspendern ein RHD-Allel aufweist. Ungefähr einer unter 1.000 scheinbar D-negativen Blutspendern
trägt einen DEL-Phänotyp und wird permanent den D-positiven Blutspendern zugeordnet. Diese molekulare
Untersuchung von Blutspendern erhöht die Sicherheit der Therapie, da anti-D Immunisierung vermieden wird.
In Kooperationen mit anderen Blutspendediensten in Deutschland und im Ausland wurde seit 2006 die klinische Relevanz
von weiteren neuen Rhesus D-Varianten analysiert.
Die Arbeitsgruppe „Transplantationsimmunologie“ (PD Dr. J. Mytilineos, Dr. D. Fürst, Dr. K. Hirv [bis 02/2008], A. Vigh)
beschäftigt sich im Schwerpunkt Transplantationsimmunologie und Immungenetik mit der HLA-Genetik, der Bedeutung
der Zytokingenpolymorphismen sowie weiteren Histokompatibilitäts-Fragestellungen bei Transplantationskandidaten.
In einer Studie mit einem Kollektiv von voll kompatiblen Spender-Empfänger-Stammzelltransplantationspaaren
wurde mittels eines Luminex-basierten, selbst entwickelten Verfahrens der Einfluss verschiedener Genpolymorphismen
auf das Patientenüberleben untersucht. In einer populationsgenetischen Studie bei 10.000 freiwilligen Stammzellspendern
wurde die Frequenz von HLA-Null-Allelen untersucht. Darüber hinaus wurde ein Verfahren zur
Bestimmung von HLA-DRB1 Merkmalen mittels Sequenzanalyse entwickelt, das sich gegenwärtig im Prozess der
CE-Zertifizierung befindet. Des Weiteren wurde ein Verfahren zur Typisierung von MICA-Allelen mittels Sequenzierung
entwickelt. In einem Kollektiv von Blutplasma- sowie Thrombozytenspendern mit und ohne Immunisierungsanamnese
wurde die Inzidenz von HLA-Klasse I, Klasse II sowie HNA-Antikörpern, die mit dem Auftreten einer Transfusions-assozierten
Lungeninsuffizienz (TRALI) einhergehen, untersucht. Zum Nachweis dieser Antikörper wurden ein
ELISA-basiertes Verfahren sowie ein Luminex-Test eingesetzt, um die unterschiedliche Sensitivität der beiden Verfahren
zu vergleichen. Weitere Projekte, an denen gegenwärtig gearbeitet wird, sind: die Eva luation des Einflusses von
Minor-Histokompatibilitäts-Polymorphismen auf die Stammzell transplantation sowie die Bedeutung von HNA und
MICA Antikörpern in diversen Erkrankungen und bei Nierentransplantationspatienten.
Weitere Projekte beschäftigen sich mit der Entwicklung von Verfahren zur Detektion von HLA-Null-Allelen, Durchführung
eines ELISA-Crossmatch für die Organtransplantation und Eva luation des Einflusses von Minor-Histokompatibilitäts-Polymorphismen
auf die Stammzell transplantation
In der Arbeitsgruppe „Molekulare Charakterisierung angeborener Immun- und Hämato poiese-Defekte und deren
Gentherapie“ (Dr. K. Schwarz, Dr. D. Niewolik, Dr. U. Pannicke, Dr. F. Radecke) wurde die molekulare Diagnostik
angeborener Immundefekte, angeborener Autoimmunitätserkrankungen und primärer Erythrozytendefekte (mit Dr.
H. Cario, Klinik für Kinder- und Jugendmedizin, und Prof. emerit. Dr. H. Heimpel) um neu charakterisierte Defekte ergänzt.
So wurde gemeinsam mit der Kinderklinik in Ulm und dem Max-Planck Institut für Immunbiologie eine neue
Entität des schweren, kombinierten Immundefektes beschrieben. Bei der Retikulären Dysgenesie (einer Aleukozytose)
fällt ein mitochondriales Enzym (Adenylatkinase 2) des Energiestoffwechsels aus. Dies ist die erste Beschreibung
eines Immundefekts mit Veränderungen der Mitochondrien. Die molekulare Beschreibung der Mutationen einer
Art der kongenitalen Erythrozytosen (CDAI), wurde vervollständigt. Bekannte Defekte wurden besser charakterisiert
und neue Varianten beschrieben (z.B. kombinierter Immundefekt bei hypomorphen RAG-Mutationen).
Zur Entwicklung neuer Genkorrekturansätze von angeborenen Lymphozyten- und Erythrozytendefekten werden Genelemente
aus sehr kurzen, modifizierten, in vitro synthetisierten DNA-Strängen in Zell- und Tiermodellen eingesetzt,
die es erlauben, auf Einzelzellebene mit Fluoreszenzanalytik Reparatureffizienzen und Reparaturexaktheit zu testen,
Korrekturmodalitäten zu entwickeln und Nebenwirkungen der Therapie zu beschreiben.
23

Forschungsbericht 2007 – 2008
Forschungsstruktur der Standorte
Die Arbeitsgruppe „Zelluläre Immuntherapie und Stammzelltransplantation“ (Dr. R. Lotfi, Dr. V. Mailän der [bis
08/2008], Dr. M. Marx [bis 06/2008], Dr. P. Reinhardt, Dr. M. Rojewski, Dr. P. Schauwecker, Dr. M. Wiesneth) beschäftigt
sich mit der Weiterentwicklung klinisch anwendbarer Zelltherapeutika.
In Kooperation mit den Kliniken für Innere Medizin II und Innere Medizin III wurden Patienten mit akutem Myokard -
infarkt im Rahmen einer placebo-kontrollierten, doppelt-blinden Studie autologe Knochenmarkzellen intrakoronar
appliziert. In Kooperation mit der Klinik für Innere Medizin III des Universitätsklinikums Ulm wird die präventive und
therapeutische CMV-Peptid-Vakzinierung bei Patienten nach allogener hämatopoietischer Stammzelltransplantation
untersucht.
Verfahren zur GMP-gerechten Ex-vivo-Expansion von Mesenchymalen Stammzellen (MSC) für die klinische Anwendung
werden optimiert und die funktionellen Eigenschaften der MSC untersucht.
Zur Markierung von Stammzellen/Zelltherapeutika und zur gezielten Applikation von bioaktiven Substanzen werden
zusammen mit dem Max-Planck-Institut für Polymer-Forschung (Prof. Dr. K. Landfester) Nanopartikel entwickelt,
welche die Stammzellen für bildgebende, nicht-invasive Nachweisverfahren markieren oder die Funktion der Zellen
modulieren.
In der Arbeitsgruppe „Diagnostik und Therapie hämapoietischer Insuffizienz“ (Dr. B. Höchsmann, Dr. M. Rojewski)
werden im Rahmen internationaler Studien in Kooperation mit der Klinik für Innere Medizin III Patienten mit paroxysmaler
nächtlicher Hämoglobinurie und aplastischer Anämie therapiert. Die Arbeitsgruppe koordiniert für Deutschland
das Internationale PNH-Register und arbeitet als Referenzlabor an der Weiterentwicklung diagnostischer Verfahren
für diese Erkrankungen.
Die Datenzentrale des Deutschen Regis ters für Stammzelltransplantationen (DRST) (Dr. Dr. C. Müller) konnte in einem
von der Deutschen José Carreras Leukämie-Stiftung unterstützten Projekt die Auswertungen zu den in Deutschland
seit 1998 durchgeführten Stammzelltrans plantationen fortsetzen.
Ausblick
Wichtige weitere Projekte liegen in den beiden Schwerpunkten Entwicklung von Zelltherapeutika und molekulare
Diagnostik:
Untersuchung des Potentials Mesenchymaler Stamm-/Stromazellen für die Behandlung chronischer Wunden;
Entwicklung und Erprobung weiterer Nanopartikel zur Markierung und Modulation von Stammzellen (in Kooperation
mit dem Max-Planck-Institut für Polymerforschung, Mainz);
Interaktion von eosinophilen Granulozyten und „Damage associated molecular patterns“ (DAMPs) mit dendritischen
Zellen und mesenchymalen Stamm-/Stromazellen;
Optimierung GMP-gerechter Produktion von Mesenchymalen Stammzellen (MSC) für Studien zur regenerativen
Therapie, zur Immunmodulation und zur Durchführung von Zellmarkierungsstudien;
Molekulare Charakterisierung von Blutgruppenantigenen und Analyse der klinischen Bedeutung.
Molekulares Screening von serologisch RhD-negativen Blutspendern;
Weiterentwicklung der Genreparatur mit Oligo nukleotiden und Analyse der Genotoxizität dieser DNA-Korrekturmethode;
Molekularpathophysiologische Analyse von neu aufgeklärten Immundefekten und Anä mien, insbesondere Aufklärung
wie ein Defekt der Adenylkinase 2 zu einer Störung der Leukozyten-Entwicklung führt;
Entwicklung weiterer in vitro-Diagnostika zur Optimierung der Spenderauswahl für die Stammzelltransplantation;
Analyse der Bedeutung von HLA- und nicht-HLA-Polymorphismen in der Transplantation.
Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier
24

1 Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Qualitätssicherung in der Blutversorgung
25

Forschungsbericht 2007 – 2008
Entwicklung neuer Filter für die Leukozytendepletion
bei Blutprodukten
Hintergrund und Projektbeschreibung
EK-inline Blutbeutelsysteme der Firma Fresenius arbeiten mit Hartschalenfiltern für die Depletion von Leukozyten.
Diese unterliegen bei der Zentrifugation einer höheren Bruchgefahr. Für eine größere Produktsicherheit hat Fresenius
einen neuen Weichschalenfilter entwickelt.
Das Ziel der Arbeit war, die Effizienz des Weichschalenfilters im Vergleich zum bisherigen Hartschalenfilter zu prüfen
und das Blutbeutelsystem für den Einsatz in der Routine zu validieren.
Dafür wurden 20 Poolpaare hergestellt, die jeweils mit dem Hartschalen- bzw. Weichschalenfilter behandelt wurden.
Zusätzlich wurden 12 Einzelpräparate hergestellt, 35 Tage gelagert und auf Qualitätsparameter untersucht. Volumen,
Anzahl Leukozyten, Hb-Gehalt, Hämatokrit und Hämolyse Parameter wurden vor und nach Lagerung von 35 Tagen
bestimmt.
Weitere Tests zur Prüfung von Filterentwicklungen im Auftrag für die Fa. ASAHI
LOG
Vergleich Leukozytendepletion Hartschalenfilter 3.9 log und Vergleich Filtrationsdauer mit durchschnittlich 24 Minuten
Weichschalenfilter 4.6 log für den Weichschalenfilter und 48 Minuten mit dem
Hartschalenfilter
Wichtigste Ergebnisse
Der Weichschalenfilter zeigte mit 4.6 log eine bessere Leukozytendepletion als der Hartschalenfilter mit 3.9 log. Die
Hb recovery war beim Hartschalenfilter geringfügig besser, da der Weichschalenfilter ein größeres Volumen hat. Die
Filtrationszeiten des Weichschalenfilters betrugen mit 24 Minuten die Hälfte der Filtrationsdauer des Hartschalenfilters.
26
4,8
4,6
4,4
4,2
4,0
3,8
3,6
hard shell filter
soft shell filter
hard shell filter
WBC Reduction
Filter
soft shell filter
Minutes
50
45
40
35
30
25
20
15
Duration for Filtration
hard shell filter
Filter
soft shell filter
hard shell filter
soft shell filter

Summary
Qualitätssicherung in der Blutversorgung
All laboratory results are within the EuG. The EuG permit QC parameters out of range for up to 10 % of the units tested.
Approximately 4 % of the hard shell filtered RCC show haemolysis rates > 80 %. For the soft shell filter 3.5 % is
a comparable result. With the soft shell filter the residual leukocyte count is improved and the filtration time is reduced
considerably. The new soft shell filter is suitable for routine use.
Standort Baden-Baden
Arbeitsgruppe Dr. E. Richter
Projektleiter Dr. A. Agildere
Mitarbeiter Frau G. Haungs; Herr Blizil
Kooperationen Fresenius Hemocare; ASAHI-KASEI medical
Förderung ASAHI
Laufzeit des Projektes Fresenius Frühjahr – Sommer 2007
ASAHI: Februar 2007; August 2007
Weitere Informationen
poster presentation ISBT Madrid 2007; AABB Anaheim 2007, DGTI 2007
27

Forschungsbericht 2007 – 2008
Screening der Blutspender auf seltene Blutgruppen und
Entwicklung von Antikörper-Identifizierungs-Panels
Hintergrund und Projektbeschreibung
Die Versorgung mit Blutpräparaten bei Patienten mit seltenen Blutgruppen und Antikörpern gegen hochfrequente Antigene
sowie multiplen Antikörpern ist eine der schwierigsten Aufgaben der Transfusionsmedizin.
In den letzten Jahren wurden am Institut Baden-Baden für mehrere solcher Patienten aus dem Gebiet der gesamten
Bundesrepublik, für die keine kompatiblen Blutspender zur Verfügung standen, Screeningaktionen durchgeführt. Es
handelte sich um Antikörper mit verschiedenen Spezifitäten (Anti-Lan, Anti-Vel, Anti-Lu(b), Anti-Yt(a), Anti-Kp(b), Antik,
Anti-AnWj, u.a.).
Wichtigste Ergebnisse
Bei mehr als 80.000 getesteten Blutspendern wurden ca. 200 Personen gefunden, die seltene Blutgruppenmerkmale
besitzen. Sie konnten mehrfach für die Versorgung von Patienten in verschiedenen transfusionsmedizinischen Einrichtungen
in Deutschland herangezogen werden und stehen in unserer Spenderdatei für besondere Anforderungen
zur Verfügung.
Blutproben dieser Blutspender wurden für Testzwecke im Rahmen des SCARF-Programms (Serum, Cells and Rare
Fluid Exchange, Philadelphia, USA) an Referenzlabors in der ganzen Welt sowie im Rahmen des Austauschprogramms
„Seltene Blutgruppen“ der DGTI im deutschsprachigen Raum versendet. Eine besonders enge wissenschaftliche
Kooperation mit Austausch seltener Proben/Seren besteht auch mit dem New York Blood Center, USA.
Mehrere Präparate mit seltenen Blutgruppen sowie Antigen-getestete Erythrozytenkonzentrate wurden in Kooperation
mit Industriepartnern (Fa. DiaMed/ Schweiz, Fa. BioRad/ Frankreich) für die Herstellung von Antikörper-Identifizierungs-Panels
verwendet. Diese Panels sind unverzichtbar für die prätransfusionelle Diagnostik.
Summary
The supply of red cell concentrates to patients with rare blood groups is a great challenge to blood centres and one
of the most difficult tasks of transfusion medicine. In the last few years the Institute for Transfusion Medicine and Immunothaematology
in Baden-Baden has performed several screening programmes for patients with antibodies to
high frequency antigens (anti-Lan, anti-Vel, anti-Lu(b), anti-Yt(a), anti-Kp(b), anti-k, anti-AnWj, etc.) who could not find
compatible donors. More than 80,000 blood donors have been screened and about 200 donors with rare blood could
be found. These donors have donated blood for patients in different parts of Germany. Their red cells have also been
used for exchange programmes of national and international reference laboratories like SCARF (Serum, Cells and
Rare Fluid Exchange, Philadelphia, USA), the German Rare Donor Working Programmes or in cooperating with the
New York Blood Center. Some of the extendedly typed red cells concentrates have also been included in the production
of commercial antibody screening and identification panels (DiaMed and BioRad) which are used in pretransfusion
diagnostics.
Standort Baden-Baden
Arbeitsgruppe Sicherheit der Hämotherapie
Projektleiter Dr. med. Erwin Andreas Scharberg
Mitarbeiter Dr. Susanne Seyboth, Andrea Ernst (MTA), Marina Mujakic (MTA), Naime Kömürcü (MTA), Nureyla
Kanbur (MTA),
Kooperationen Fa. DiaMed (Schweiz), Fa. BioRad (Frankreich), AG „Seltene Blutgruppen“ DGTI, SCARF, New York
Blood Center, The International Blood Group Reference Laboratory, Bristol/UK, Institute of Haematology
and Blood Transfusion, Warsaw/Poland
Förderung Firma DiaMed (Schweiz)
Firma BioRad (Frankreich)
Laufzeit des Projektes 01.05.2004 bis auf Weiteres
28

Spezifitäts-Studie Enzygnost HBsAg 6.0
Hintergrund und Projektbeschreibung
Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Enzygnost HBsAg 6.0 ist ein neuer qualitativer Enzymimmunoassay zum Nachweis von Hepatitis B (surface) – Antigen
in Serum und Plasma. Er basiert auf einem Zweischritt-Verfahren.
Prinzip:
Das in der Probe enthaltene HBsAg wird im ersten Schritt simultan an die Festphase und dem Konjugat 1 (Anti-
HBs/Biotin) gebunden. Im nächsten Schritt reagiert der vorgefertigte Komplex mit Streptavidin/POD, welches für die
enzymatische Umsetzung des Chromogens (TMB) verantwortlich ist. Die Farbintensität ist proportional zur vorhandenen
Antigenkonzentration in der Probe.
Ziel der Studie:
Als Teil einer Multicenter-Studie für die IVD-Zulassung des Tests sollten mindestens 5.000 Serum-Proben mit drei
Gamma-Testchargen des Enzygnost HBsAg 6.0 getestet werden und im Vergleich zum Probenstatus der Routine
ausgewertet werden. Die Studie sollte belegen, dass mit Seren als Probenmaterial von einem nicht vorselektionierten
Spenderkollektiv eine vergleichbare Spezifität mit drei Gamma-Chargen der Firma Dade Behring Marburg GmbH erreicht
wird.
Wichtigste Ergebnisse
29

Forschungsbericht 2007 – 2008
Standort Baden-Baden
Arbeitsgruppe Dr. E. Richter
Projektleiter Dr. T. Dengler
Mitarbeiter A. Blache
Kooperationen Siemens, Dade Behring Marburg GmbH
Förderung Siemens, Dade Behring Marburg GmbH
Laufzeit des Projektes KW 22 bis KW 24 2008
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Diagnostik in der Transfusionsmedizin
Hintergrund und Projektbeschreibung
Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Mit der erheblich verbesserten Sicherheit von Blutprodukten muss die Diagnostik Schritt halten. Wir bemühen uns in
Zusammenarbeit mit dem Qualitätsmanagement und den Fachabteilungen um kontiniuerliche Weiterentwicklung und
Überprüfung diagnostischer Prozesse sowie von Produkteigenschaften auf wissenschaftlicher Basis.
Wichtigste Ergebnisse
Der Zeitpunkt der pre-storage Leukozytendepletion hat Auswirkung auf die Konzentration pro-inflammatorischer Mediatoren
im Plasma: Die Akkumulation pro-inflammatorischer Zytokine während der spezifikationsgerechten Vollblutlagerung
zur Poolthrombozytenherstellung wurde gezeigt (Chudziak et al. Vox Sanguinis, in press).
Verfügbare ES-Zellen sind ungeeignet für die in vitro Generierung von „universal donor“ Erythrozyten: Eine kritische
Voraussetzung für die Erzeugung von Universalspender-Erythrozyten aus ES-Zellen wäre die Verfügbarkeit von
Rh-negativen Ausgangszellen. Dass solche Zellen derzeit nicht zur Verfügung stehen wurde demonstriert (Bonig et al.
Transfusion 2008).
Enzymbehandelte Testzellen zur Diagnostik bei IAT-AKS-negativen Patienten: Wir demonstrierten, dass die Frequenz
von nur Enzym-Testzell-reaktiven Alloantikörpern mit 0,77 %, und führten den Nachweis, dass es sich bei einer Vielzahl
dieser Antikörper um potenziell transfusionsrelevante IgG-Antikörper handelt. Aufgrund dieser Daten und der
Dokumentation von hämolytischen Transfusionsreaktionen durch solche Antikörper u.a. im SHOT-Bericht empfehlen
wir daher die regelhafte Einführung des Enzym-AKS (Geisen et al. ISBT 2009, Geisen et al. submitted).
Weitere Untersuchungen, in enger Zusammenarbeit mit der AG Geisen, beschäftigten sich mit den Grenzen der Medion
Lateral Flow Blutgruppendiagnostikkarte sowie der Verbesserung der Markumarsensitivitätsgendiagnostik.
Diagnostics in Transfusion Medicine
Diagnostics in Transfusion Medicine has to keep up with improvements in product quality. Therefore, we are addressing
aspects of diagnostic or product safety as well as process optimization in diagnostics, in collaboration with
Quality Management and the respective Divisions within the institute. Thus we recently demonstrated the accumulation
of inflammatory cytokines during the holding period prior to pre-storage leukocyte depletion, demonstrated the
unsuitability of currently available ES cell lines for the generation of universal donor RBCs, and generated data on the
frequency of „enzyme-only“ allo-antibodies, which provide a rational basis on which to propose the re-introduction of
routine screening for such antibodies. Additional studies, in close collaboration with the Geisen group, addressed benefits
and limitations of the Medion lateral flow blood group diagnostic test and improved tests for coumarine sensitivity.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Dr. med. H. Bönig
Projektleiter Dr. med. H. Bönig
Mitarbeiter Dipl. biol. D. Chudziak, Dr. phil. nat. G. Spohn, cand. med. A. Teiler
Kooperationen Dr. med. C. Geisen, Dr. med. D. Klarmann, Prof. Dr. med. Dr. h. c. E. Seifried, MUDr. W. Sireis,
DRK-Blutspendedienst, Institut Frankfurt
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Laufzeit des Projektes fortlaufend
Weitere Informationen
h.boenig@blutspende.de
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Forschungsbericht 2007 – 2008
Leistungsbewertungsstudie eines neuen Verfahrens zur Blutgruppenbestimmung
mittels Lateral-Flow-Technik: „MDmulticard“
Hintergrund und Projektbeschreibung
Medion Diagnostics AG hat eine Lateral-Flow-Testkarte zur Bestimmung der Blutgruppeneigenschaften A-B-D-D-K-
C-Cw-c-E-e in einem Ansatz entwickelt („MDmulticard AB0-D-Rh subgroups-K for patients“). Die Lateral-Flow-Technik
erlaubt eine Bestimmung der Erythrozyteneigenschaften aus Vollblut innerhalb von fünf Minuten, ohne dass ein
Zentrifugationsschritt erforderlich ist.
Das Ziel der Studie ist der Nachweis der Leistungsfähigkeit der „MDmulticard AB0-D-Rh subgroups-K for patients“ in
der Anwendung an statistisch signifikanten Spender- und Patientenpopulationen im Routinebetrieb im Vergleich zu
State-of-the-Art Methoden (DiaMed Gel Test; Olympus PK-7200). Insgesamt wurden 4276 Blutproben (3550 Spender,
726 klinische Proben) vergleichend untersucht. Unter den Proben befanden sich 88 Proben mit schwacher Antigen-
Expression (weak D, partial D, weak A, A, Ael, weak B) sowie 86 neonatale Proben.
Abgesehen von wenigen im Folgenden aufgeführten Ausnahmen ergaben sich durchweg übereinstimmende Ergebnisse
im Vergleich zu State-of-the-Art Methoden (DiaMed Gel Test; Olympus PK-7200).
Bei einem Spender wurde ein möglicherweise qualitativ verändertes Rhesus e-Antigen mit MDmulticard nicht nachgewiesen.
Bei einem weiteren Spender mit ausgeprägter Hyperlipidämie wurden im Regelansatz unter Verwendung
der Vollblutmethode unspezifische Ergebnisse erhoben. Weiterhin ergaben sich bei einem Patienten mit hochtitrigen
erythrozytären Auto-Antikörpern vom IgG-Typ zunächst unspezifische Ergebnisse. In beiden Fällen konnten unter
Verwendung von gewaschenen Erythrozyten regelhafte Blutgruppenbefunde erhoben werden. Bei einem Patienten
mit hochtitrigen kältereaktiven Auto-Antikörpern konnte erst nach vorheriger Inkubation bei 37 °C ein korrekter Blutgruppenbefund
erhoben werden. Insbesondere wurden bei neonatalen Proben keine Abweichung vom Referenz-Blutgruppenbefund
festgestellt. Weiterhin ergaben sich bei Ansatz alternativer Antikoagulantien (EDTA-, ACD-, CPDAsowie
Citrat-Blut) keine Abweichungen von der Referenz-Blutgruppe.
32
Ergebnis einer Blutgruppenbe-
stimmung mittels „MDmulticard
AB0-D-Rh subgroups-K
for patients“: Ist ein Blutgruppen-Merkmal
vorhanden ergibt
sich eine rote Bande, bei
Fehlen des Blutgruppen-
Merkmals ist keine Bande
nachweisbar. Als interne Positiv-
bzw. Negativ-Kontrollen
dienen: val: Roter Punkt; ctl:
Kein Signal. Im gezeigten Beispiel
lautet das Ergebnis der
Bestimmung der Erythrozyteneigenschaften:
B Rh positiv
(CcD.Ee) kk

Wichtigste Ergebnisse
Qualitätssicherung in der Blutversorgung
„MDmulticard AB0-D-Rh subgroups-K for patients“ stellt ein hochsensitives und zugleich auch äußerst spezifisches
Verfahren zur Bestimmung der Blutgruppeneigenschaften A-B-D-D-K-C-Cw-c-E-e mittels Lateral-Flow-Technik dar.
Die verwendete Methode zeichnet sich durch eine einfache Handhabung aus, die aufgrund der wenigen erforderlichen
Arbeitsschritte auch eine sehr sichere Methode zur Bestimmung einer Blutgruppe darstellt. Als weiterer Vorteil
der Methode erwies sich die sehr kurze Zeit zwischen Auftragung der Blutprobe auf den Testträger und der Befundung
(fünf Minuten ). Dies erlaubt insbesondere den Einsatz der Methode in der Notfalldiagnostik.
Summary
A novel lateral flow assay (“MDmulticard”) allows for simultaneous multi-parameter testing in a single assay, providing
a stable end-point without centrifugation. Briefly, in the lateral flow method 100 l of diluted blood or erythrocyte
sediment are pipetted into the application zone of the MDmulticard, followed by 300 l of a rinsing buffer. Results
can be read after five minutes. Positive results are recognised as distinct red bands, negative results are recognised
by the absence of the respective band.The aim of this study is to evaluate the performance of MDmulticard in routine
testing on statistically significant donor and patient populations as opposed to state-of-the-art methods (DiaMed Gel
Test; Olympus PK-7200).
In 4271 samples AB0, D, K and Rhesus subgroup typing concurred. Five samples showed discrepant results. In one
sample Rhesus e-antigen was typed negative in the lateral flow assay while different monoclonal antibodies gave variable
results in the gel agglutination assay suggesting a partial e-antigen. In two samples false positive results were
observed initially, which were most likely due to excessive hyperlipaemia and high titer IgG-autoantibodies, respectively.
After washing red blood cells regular results in the lateral flow assay could be obtained in both samples. In one
sample with high cold agglutinin titer due to complete auto agglutination in the application zone of the lateral flow
device no band could be observed. After preincubation of the sample at 37 °C the lateral flow assay gave concurring
results. In one Aw sample a positive result with Anti-A could only be observed with MDmulticard but not with the gel
agglutination test.
The lateral flow assay “MDmulticard” represents a highly sensitive and specific method for AB0, D, K and Rhesus
subgroup antigen typing within five minutes without a centrifugation step. Therefore MDmulticard is highly suitable
for emergency diagnostics.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Immunhämatologie
Projektleiter Dr. med. Christof Geisen
Mitarbeiter Regine Bernhöft (TA)
Monika Müller (TA)
Christine Peters (TA)
Sandra Wirsing (TA)
Kooperationen Dr. P. Schwind, Medion Diagnostics AG, Düdingen, Schweiz
Förderung Industriemittel, Medion Diagnostics AG, Düdingen, Schweiz
Laufzeit des Projektes 01.06.2005 – 31.12.2008
Weitere Informationen
Geisen C, Schwind P, Seifried E. (2006): Rapid multi-parameter blood grouping without centrifugation
performance evaluation with donor, patient and neonatal samples. Transfusion 46, (9S), 143A
Geisen C, Schwind P, Seifried E. (2007): Rapid Multi-Parameter Blood Grouping without centrifugation
performance evaluation with donor, patient and neonatal samples. Transfus med Hemother 2007; 34(suppl 1); 55
Geisen C, Schwindt P, Seifried E, Bonig H (2009): performance evaluation of novel antisera for rapid ABO, RH
Subgroup, and K typing using Lateral Flow technique (MD MultiCard), ISBT: Vox Sanguinis, in press
http://www.blutspende.de/institute_tochtergesellschaften/frankfurt/immunhaematologie.php
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Forschungsbericht 2007 – 2008
Hämovigilanzprogramm und Vorbereitung eines Erfassungssystems
akuter Transfusionsreaktionen (ATR) nach Gabe von Pathogen-inaktivierten
Thrombozyten-Konzentraten (PI-TK) und konventionellen
Thrombozyten-Konzentraten (TK)-Protokoll-Nr. PLT07001
Hintergrund und Projektbeschreibung
Bei Patienten mit Erkrankungen, bei denen nicht ausreichend körpereigene Thrombozyten zur Blutstillung im Knochenmark
erzeugt werden können, sind Thrombozyten-Konzentrate (TK) wichtige Bestandteile der Therapie. Durch
ihre Lagerbedingungen bei + 22 °C für maximal vier Tage bestehen Risiken einer bakteriellen Kontamination. Die insgesamt
seltene bakterielle Kontamination von TK ist meist durch Hautkeime aus tiefen Hautschichten des Blutspenders
bedingt. Hautkeime in tiefen Hautschichten können bei der Hautdesinfektion des Blutspenders mit keiner der
derzeitig verfügbaren Desinfektionsmethoden komplett entfernt werden. Im Regelfall sind diese vereinzelten Bakterien
harmlos und werden während der Aufarbeitung der Blutspende durch Selbststerilisation des Blutes eliminert. In
Einzelfällen können sich solche, an sich harmlosen Hautkeime vermehren und insbesondere immun-inkompetente
Patienten schädigen.
Neue Methoden zur Inaktivierung solcher Bakterien bei der Herstellung werden derzeit kommerziell verfügbar. Diese
verschiedenen Verfahren werden derzeit in unseren Instituten etabliert. Die Effizienz der Inaktivierung und der Reduktion
des bakteriellen Kontaminationsrisikos ist gut belegt. Aktuelle Beobachtungen aus Frankreich zeigen weiterhin
eine mögliche Reduktion der Rate akuter Transfusionsreaktionen (ATR) durch Gabe von Pathogen-inaktivierten TK
(PI-TK) im Vergleich zu Standard-TK. Ein Zulassungsantrag für Pathogen-inaktivierte TK (PI-TK) wurde bei der Bundesoberbehörde,
dem Paul Ehrlich-Institut in Langen, gestellt.
Nach Zulassungserteilung soll an den drei universitären Hämatologie-/Onkologie-Abteilungen in Frankfurt, Mannheim
und Ulm zunächst eine Anwendungsbeobachtung (AWB), bei der PI-TK und Standard-TK hinsichtlich ihrer Nebenwirkungsrate
verglichen und durchgeführt werden.
34
gemeldete Tf´zwischenfälle/10.000 Produkte
12
10
8
6
4
2
0
7,4
Gemeldete Transfusionszwischenfälle am Universitätsklinikum Frankfurt am Main
pro 10.000 transfundierter Blutprodukte 2005 - 2007
8,3
4,9
5,7
11,3
9,0
EK
TK
GFP
7,1
durchschnittlich 7,1 gemeldete
Transfusionszwischenfälle
pro 10.000 transfundierte
Blutprodukte 2005-2007
über alle drei Standardprodukte
2005 2006 2007 kumulativ 05+06+07
Jahr
8,0
5,1
6,7
im Vergleich dazu:
ca. 35/10.000
ca. 30/10.000
9,2
6,5
Abbildung 1:
Aus einem Universitätsklinikum
an den Blutspendedienst
gemeldete Transfusionsreaktionen
(ATE) zwischen 2005
und 2007 pro 10.000 transfundierter
Blutprodukte
(PRCC = Erythrozyten-Konzentrat
(EK); PC = TK; FFP =
gefrorenes Frischplasma
(GFP)). Im Vergleich hierzu
werden in anderen Industrieländern
(Frankreich, Kanada)
vier- bis fünfmal mehr Transfusionsreaktionen
pro 10.000
transfundierter Blutprodukte
und Jahr gemeldet.

Wichtigste Ergebnisse
Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Da in Deutschland Transfusionszwischenfälle seltener berichtet werden als in vergleichbaren anderen Industrieländern,
wurde zunächst beispielhaft ein „Status quo“ der im Institut Frankfurt in den Jahren 2005 bis 2007 aus dem
Universitätsklinikum gemeldeten Transfusionsreaktionen (Abb. 1) erhoben. Um eine verbesserte, möglichst lückenlose
Dokumentation zu gewährleisten, wurde für ausgewählte hämatologische Stationen ein neu geregeltes „Feedback“-System
zur Erfassung solcher Meldungen etabliert: Abbildung 2 zeigt den Laufzettel zur Dokumentation der
Verträglichkeit der TK-Transfusionen. Zusammen mit einer regelmäßigen, aktiven Abfrage der Verträglichkeit durchgeführter
TK-Transfusionen (Abb. 3) möchten wir ein realistischeres Bild der Häufigkeit von akuten (bis 24 nach TK-
Gabe) und schwerwiegenden (bis sieben Tage nach TK-Gabe) Transfusionsreaktionen nach Gabe von insgeamt 5.000
PI-TK im Vergleich zu 5.000 Standard-TK erhalten.
Haemovigilance Programme and Preparation of a System for Evaluation of the Rate of Acute Transfusion
Reactions following Administration of Pathogen Inactivated Platelets and Conventional Platelets
The German report rate for adverse transfusion reactions is low compared to other countries like for example France
or Canada (fig. 1). We are currently finalising the preparations for an observation program using 5,000 pathogen
inactivated (PI) whole-blood derived pooled platelet concentrates (PC) and 5,000 standard PC in three German University
hospitals. PI PC may not only convey a lower risk of transmission of bacteria and currently undetected
(re)emerging pathogens endangering blood safety, but also a lower rate of acute transfusion reactions (ATR). Using a
patient transfusion log (PTL) as shown in fig. 2, each PC transfusion has to be documented regarding ATRs within a
24h-period after transfusion and serious adverse transfusion events (SATE) within seven days after transfusion. In
case of an ATR or even a SATE, a transfusion report form for ATR or SATE has to be completed by the treating physician
and will be entered into the central database by the study nurse as depicted in fig. 3.
[7 days for SATE]
Abbildung 2: TK mit angehängtem Laufzettel zur Dokumentation Abbildung 3: Fluss-Diagramm zum Ablauf der Anwendungsder
Verträglichkeit der Transfusion für PLT07001. beobachtung (AWB) PLT07001 auf den hämatologisch-onkologischen
Stationen der Unversitätskliniken Frankfurt, Mannheim
und Ulm. Die farblich hinterlegten Zahlen zeigen die in der AWB
als wichtig erkannten Aktivitäten, die kontrolliert werden (BDS
Distribution = Vertrieb Blutspendedienst; Ward = Station).
Standort Frankfurt, Mannheim, Ulm
Arbeitsgruppe Produktion
Projektleiter Dr. med. Markus M. Müller und PD Dr. med. Reinhard Henschler
Mitarbeiter Dr. med. Veronika Brixner, cand. med. Sylwia Parisi-Wisniewska
Kooperationen Dr. med. Karin Janetzko, PD Dr. med. Michael Müller-Steinhardt, Mannheim
Dr. med. Britta Höchsmann, Dr. med. Markus Wiesneth, Ulm
Laufzeit des Projektes 2008 – 2010
35

Forschungsbericht 2007 – 2008
Bakterielle Kontamination von Blutprodukten
Hintergrund und Projektbeschreibung
Die Einführung hochsensitiver Screeningmethoden (Realtime-PCR) reduzierten das Restinfektionsrisiko für HIV-1
auf 1 : 4,3 Millionen und für HCV auf 1 : 10,88 Millionen. Dagegen steht ein Risiko für bakterielle Infektionen von
ca. 1 : 2000 und für schwere septische Infektionen von ca. 1 : 50.000 bis 1 : 100.000. Gerade die Thrombozytenkonzentrate
(TK), die bei Raumtemperatur unter ständiger Agitation gelagert werden, stellen für viele Bakterien nahezu
ideale Kulturbedingungen dar. Anders als bei den viralen Infektionsübertragungen besteht bei den Bakterien die besondere
Herausforderung, dass zunächst nur eine sehr geringe Konzentration an Bakterien im Thrombozytenkonzentrat
vorliegt. Der ideale Test verfügt daher über eine extrem hohe Sensitivität und auch Spezifität. Ferner stellt sich
die Frage, ob sich die unterschiedlichen Thrombozytenkonzentrate (Pool-Thrombozytenkonzentrate und Apheresekonzentrate)
bezüglich des bakteriellen Restrisikos unterscheiden. Neben bereits kommerziell erhältlichen Nachweismethoden
bestand eine weitere Aufgabe darin, eigene Schnellmethoden zu entwickeln. Alternativ besteht jedoch
auch die Möglichkeit zur Durchführung einer Pathogeninaktivierung.
Wichtigste Ergebnisse
Es konnte gezeigt werden, dass sich die unterschiedlichen Thrombozytenkonzentrate (Apheresen und Pool-TKs)
nicht bezüglich ihrer bakteriellen Kontaminationsrate unterscheiden. Ferner gab es keine signifikanten Unterschiede
bezüglich des Restinfektionsrisikos zwischen Pool-TKs in Plasma und Pool-TKs in Additivlösung. Im direkten Vergleich
zwischen kommerziell verfügbaren Screeningmethoden zeichnete sich BacT/Alert aufgrund einer hohen Sensitivität
aus. Die hohe Sensitivität ging jedoch einher mit einer höheren Rate an unspezifischen Befunden.
Internationale Untersuchungsergebnisse bezüglich einer geringen klinischen Effizienz bei der Anwendung von Kulturmethoden
konnten bestätigt werden. Es zeigte sich beim BacT/Alert, dass ca. 50 % der reaktiven TKs zum Zeitpunkt
des Bakteriennachweises bereits transfundiert waren. Ferner besteht bei den Kulturmethoden die Gefahr des Probenfehlers.
Alternativ entwickelte Schnellmethoden bieten zwar potentiell die Möglichkeit einer späten Probenziehung,
sind aber zum gegenwärtigen Zeitpunkt noch nicht routinetauglich. Im direkten Vergleich zeichnete sich die
16s Realtime-PCR Methode gegenüber der FACS-Methode und der Scansystem-Methode durch eine hohe Sensitivität
aus. Dem gegenüber stellt die Pathogeninaktivierung eine gute Alternative dar, mit der die Sicherheit der Thrombozytenkonzentrate
erhöht werden kann, ohne dass es dadurch zu einer zeitlichen Verzögerung kommt. Ferner
konnten zwei spezifische Hexaplex-Realtime-PCR-Systeme entwickelt werden, mit denen 12 transfusionsmedizinisch
relevante Keime mit hoher Sensitivität nachgewiesen werden konnten. Die analytische Sensitivität der Hexaplex
PCR beträgt ca. 10 CFU/ml.
Summary
The Research Group initiated a prospective multicenter study to assess prevalence and nature of bacterial contamination
of pooled buffy-coat platelet concentrates (PPCs) and apheresis platelet concentrates (APCs) by routine
screening with a bacterial culture system. In nine centres overall, 52,243 platelet (PLT) concentrates (15,198 APCs,
37,045 PPCs) were analysed by aerobic and anaerobic cultures (BacT/ALERT, bioMérieux). In 135 PLT concentrates
(PCs; 0.26 %), bacteria could be identified in the first culture (0.4 % for APCs vs. 0.2 % for PPCs; p < 0.001). In
37 (0.07 %) of these PC units, the same bacteria strain could be identified in a second culture from the sample bag
and/or the PC unit. The rate of confirmed positive units did not differ significantly between APC (0.09 %; 1/1169) and
PPC units (0.06 %; 1/1544). Bacteria from skin flora (Propionibacterium acnes, Staphylococcus epidermidis) were the
most prevalent contaminants. Median times to first positive culture from start of incubation were 0.7 and 3.7 days in
aerobic and anaerobic cultures for confirmed-positive units. With a “negative-to-date” issue strategy, most PC units
(55 %) had already been issued by time of the first positive culture. The rate of confirmed bacterial contamination of
PC units was low. Nevertheless, clinicians must be aware of this risk. The risk of bacterial contamination does not
warrant universal preference of APCs. It must be questioned whether routine bacterial screening by a culture method
can sufficiently prevent contaminated products from being transfused due to the delay until a positive signal in the
culture system and due to false-negative results.
36

Qualitätssicherung in der Blutversorgung
In a second study a solid-phase scanning cytometer (optimized Scansystem, Hemosystem), fluorescence-activated
cell sorting (FACS) analysis, and 16S RNA in-house nucleic acid testing (NAT) was evaluated by spiking PCs with four
transfusion relevant bacteria (Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Klebsiella pneumoniae, and Escherichia coli ).
Two different inocula (10 colony-forming units [CFUs]/mL and 10 CFUs/bag) were used to simulate real-life conditions.
Samples were taken at 12, 16, 20, and 24 hours after spiking. With the high inoculum, NAT had a 100 % rate of
positive testing for all four types of bacteria (10/10 replicates) at each time point. With the exception of E. coli, the
sensitivity of FACS and optimized Scansystem was comparable for the high inoculum. With the low inoculum, 60 %
of E. coli, 80 % of B. cereus, 90 % of K. pneumoniae, and 100 % of S. aureus were NAT-positive 12 hours after spiking.
In contrast, only 20 % of E. coli, 10 % of B. cereus, and 70 % of K. pneumoniae were FACS positive with the
low inoculum 12 hours after spiking. In summary, the preliminary data revealed a higher sensitivity for NAT in comparison
to FACS and optimized Scansystem under the defined study conditions. To imitate real-life conditions, further
spiking studies with a low inoculum (10 CFUs/bag) and slower growing organisms should be conducted to examine
the sensitivity of available detection systems.
Finally two hexaplex realtime NAT systems were developed for the most relevant twelve bacterial strains. The analytical
sensitivity was improved to 10 CFU/ml.
K. pneumoniae MP NAT I
Fig. 1. Platelet concentrates (PCs) spiked with Klebsiella pneumoniae with 105 CFU/ml to 100 CFU/ml. Five ml PCs were centrifuged
and analysed by realtime hexaplex NAT. The analytical senstivity was 10 CFU/ml.
Standort Frankfurt, Multizenter-Studie der DRK-Blutspendedienste
Arbeitsgruppe Bakterielle Kontamination von Blutprodukten
Projektleiter Prof. Dr. med. Dr. h. c. E. Seifried
Mitarbeiter PD Dr. M. Schmidt, Dr. Kai Hourfar, Dr. Brigitte Rüster
Kooperationen Dr. T. Montag (Paul Ehrlich Institut), Dr. V. Schäfer (Mirkobiologie JWG Universität)
Förderung Roche Molecular System
Laufzeit des Projektes 01.01.2008 – 31.12.2013
105 CFU/ml
104 CFU/ml
103 CFU/ml
102 CFU/ml
101 CFU/ml
100 CFU/ml
Neg
NTC
37

Forschungsbericht 2007 – 2008
Weitere Informationen
38
Schmidt M, Hourfar MK, Wahl A, et al. Fluorescence quencher improves SCANSYSTEM for rapid bacterial detection.
Vox Sang 2006;90(4):276-8.
Schmidt M, Hourfar MK, Nicol S-B, et al. A comparison of three rapid bacterial detection methods under simulated
real-life conditions. Transfusion 2006;46(8):1367-73.
Schmidt M, Hourfar MK, Nicol SB, et al. FACS technology used in a new rapid bacterial detection method. Transfusion
Medicine 2006; 16(5):355-361.
Schrezenmeier H, Walther-Wenke G, Muller TH, Weinauer F, Younis A, Holland-Letz T, Geis G, Asmus J, Bauerfeind
U, Burkhart J, Deitenbeck R, Forstemann E, Gebauer W, Hochsmann B, Karakassopoulos A, Liebscher UM,
Sanger W, Schmidt M, Schunter F, Sireis W, Seifried E. Bacterial contamination of platelet concentrates: results of
a prospective multicenter study comparing pooled whole blood-derived platelets and apheresis platelets. Transfusion
2007;47(4):644-52.
Schmidt M, Karakassopoulos A, Burkhart J, Deitenbeck R, Asmus J, Muller TH, Weinauer F, Seifried E, Walther-
Wenke G. Comparison of three bacterial detection methods under routine conditions. Vox Sang 2007;92(1):15-21.
Pietersz RN, Engelfriet CP, Reesink HW, Wood EM, Winzar S, Keller AJ, Wilson JT, Henn G, Mayr WR, Ramirez-
Arcos S, Goldman M, Georgsen J, Morel P, Herve P, Andeu G, Assal A, Seifried E, Schmidt M, Foley M, Doherty
C, Coakley P, Salami A, Cadden E, Murphy WG, Satake M, de Korte D, Bosnes V, Kjeldsen-Kragh J, McDonald C,
Brecher ME, Yorntovian R, Aubuchon JP. Detection of bacterial contamination of platelet concentrates. Vox Sang
2007;93(3):260-77.
Schmidt M, Wahl A, Nicol SB, Montag T, Roth WK, Seifried E. Fluorescence quencher improves Scansystem for
rapid bacterial detection. Vox Sang 2006; 90(4):276-278.

Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Blood and organ transmitted infectious agents (BOTIA Studie)
Hintergrund und Projektbeschreibung
Vermehrte Anstrengungen in den vergangenen Jahren in Bezug auf Spenderselektion und auch der Implementierung
von modernen Screeningmethoden führten zu einer wesentlichen Zunahme an Sicherheit. Dennoch bleibt ein potentielles
Restrisiko, welches auch durch neue Pathogene bedingt ist, die derzeit nicht in die Routinediagnostik eingeschlossen
sind. So breitete sich das West-Nil-Virus in den USA epidemisch Anfang dieses Jahrtausends von der Ostzur
Westküste der USA aus und führte dazu, dass eine West-Nil-PCR 2003 in den USA verpflichtend für alle Blutspenden
eingeführt wurde. Andere neue Pathogene, wie zum Beispiel SARS oder H5N1, spielen in der Transfusionsmedizin
nur eine geringe Rolle, da der Hauptinfektionsweg oral erfolgt.
In Vorbereitung auf neue bisher unbekannte Pathogene wurde eine europäische Studie initiiert, in der Probenpaare
zwischen Spender und Empfänger gebildet werden. Unter Beteiligung von sieben europäischen Ländern sollen insgesamt
30.000 Spender-Empfänger-Paare gewonnen werden. Dabei werden beim Empfänger eine Blutentnahme vor
der Transfusion sowie zwei weitere Entnahmen nach der Transfusion entnommen. Im Anschluss werden alle Proben
mit RAPD-Primern auf DNA untersucht. Im Falle einer neuen Epidemie werden die Proben herangezogen, um zeitnah
untersuchen zu können, ob dieses Pathogen zum einen damals schon in der Population vorhanden war und zum anderen
eine transfusionsmedizinische Relevanz besteht. Bei der Identifizierung von neuen Pathogenen sollen die Proben
auch für die Entwicklung von neuen diagnostischen Tests genutzt werden.
Abbildung 1: Ausbreitung von
neuen Pathogenen weltweit.
Während einige Viren, wie
zum Beispiel das West-Nil-
Virus, sich lokal auf ein Gebiet
fokussieren, breiten sich andere
Viren, wie zum Beispiel
das SARS-Virus, innerhalb
weniger Tage weltweit aus.
Wichtigste Ergebnisse
Die Studie wurde im Jahr 2006 gestartet und befindet sich zurzeit noch in der Phase 1, die darin besteht, die Spender-Empfänger-Paare
zu sammeln. Die Probensammlung konnte gegenwärtig in allen beteiligten Instituten weitestgehend
abgeschlossen werden. Im letzten Studientreffen im Januar 2009 wurden folgende erste wissenschaftliche
Forschungsprojekte beschlossen:
Untersuchung zur Prävalenz von Hepatitis E Viren bei Spendern und Empfängern
Untersuchung zur Prävalenz von HHV8 bei Spendern und Empfängern
Generisches Virusscreening (Viromics) bei Empfängern vor und nach der Transfusion
39

Forschungsbericht 2007 – 2008
Abbildung 2: Die BOTIA-Studie verläuft in insgesamt fünf Phasen. Nach dem Probensammeln (Phase 1), dem Aufbau einer Datenbank
(Phase 2) und dem unspezifischen Screening mit RAPD-Primern (Phase 3) werden in den Phasen 4 und 5 die Entwicklung von neuen
diagnostischen Untersuchungstests angestrebt, sofern neue Pathogene innerhalb der Studie detektiert werden.
Standort Frankfurt, Multizenter-Studie der Europäischen Union
Arbeitsgruppe BOTIA-Studie
Projektleiter Prof. Dr. med. Dr. h. c. E. Seifried
Mitarbeiter PD Dr. M. Schmidt, Dr. Kai Hourfar
Kooperationen Prof. Dr. J. P. Allain, UK
Förderung Europäische Union (SP23-CT-2006-006487)
Laufzeit des Projektes 01.06.2006 – 31.12.2010
40
Phase 1
Probensammlung
Phase 2
Datenbank
Phase 3
Unspezifisches
Screening
Phase 4
Entwicklung von Q-PCR
Tests
Phase 5
Entwicklung von
Schnelltest-verfahren
Reguläres
Spenderscreening
Einschluss
Empfänger in die
Studie
Blutentnahme vor
Transfusion
Transfusion von
Blutprodukten
Blutentnahme 1, 6
Monate nach der
Transfusion
DMS DatenmanagementsystemAnonymisierung
der
Proben
Vergabe von
anonymen
Paarnummern
Zentrifugation
Aliquotierung des
Plasmas in
Röhrchen mit 2D
Barcodes
Versand der
Aliquots
Verhinderung der
Rückverfolgbarkeit zum
Spender und Empfänger
Rückverfolgbarkeit zum Spender/
Empfänger nicht möglich
Fortsetzung der Studie
mit
Phase III

Entwicklung von Realtime-PCR-Systemen mit der Detektion
in zwei Genombereichen
Hintergrund und Projektbeschreibung
Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Im Januar 2007 kam es zur Übertragung einer HIV-1-Virusinfektion durch einen 44-jährigen Mehrfachspender. Der
Empfänger war ein 63 Jahre alter Mann, der im Rahmen einer Notfalloperation aufgrund eines Herzinfarktes mit
25 Blutprodukten (15 Erythrozytenkonzentrate, vier Thrombozytenkonzentrate und sechs Plasmabeutel) versorgt
wurde. Bei der darauffolgenden Spende im April 2007 wurden beim Spender Antikörper gegen HIV-1 diagnostiziert.
Im anschließenden Spender induzierten Look-Back-Verfahren konnte das HI-Virus in der Einzel-PCR Testung mit
einer Konzentration von 146 IU/ml nachgewiesen werden. Abbildung 1 zeigt schematisch den Verlauf der Infektion
sowie die Testung des Spendermaterials in verschieden virologischen Instituten mit unterschiedlichen PCR-Methoden.
HIV-1 Gruppe M, Subtyp B
Spender 44 Jahre, männlich, Mehrfachspender, 52. Spende
Einzelproben
PCR
Pos
146 IU/ml
AK und
PCR neg
25.01.
Empfänger, 63 Jahre, männlich, Herzinfarkt
Transfusion
Look back
26.02.
HIV-1
PCR pos
08.03.
Zeitverlauf
HIV-1
9600 IU/ml
19.03.
Einzelproben
PCR
neg
AK pos
PCR neg
11.04.
GRC Plauen
GRC Frankfurt
Virologie Greifswald
Plasma
Abbildung 1: Die Abbildung zeigt den zeitlichen Verlauf zwischen der Spende im Januar und der Infektion des Empfängers. Zunächst
wurde die Infektion im April beim Spender aufgrund von HIV-1 Antikörper nachgewiesen. Im anschließenden Look-Back konnte der infizierte
Empfänger eindeutig identifiziert werden.
Phylogenetische Untersuchungen beim Empfänger und Spender ergaben mit einer an Sicherheit grenzenden Wahrscheinlichkeit
eine genomische Übereinstimmung sowohl im gag-pol Bereich (konservierter Bereich) als auch in der
env Region. Ferner konnte durch die Sequenzanalyse belegt werden, dass Mutationen im Primer- und Sondenbereich
vorlagen. Aufgrund der vorliegenden Mutationen lässt sich eine verminderte Amplifikationseffizienz erklären. Anhand
des aktuellen Falles lässt sich belegen, dass neben der analytischen Sensitivität besonders für RNA-Viren (z. B. HI-
Viren) ein Risiko durch Mutationen im Primer- und Sondenbereich besteht.
PEI
Virologie Frankfurt
41

Forschungsbericht 2007 – 2008
Wichtigste Ergebnisse
Gegenwärtig erfolgt die Detektion der HI-Viren mit dem DRK HIV-1 PCR-Kit in der 5´LTR-Region. Aufgrund der
HIV- Übertragung im Institut Lütjensee, wurde eine PCR entwickelt, die in einer ersten Phase eine weitere konservierte
Region des HI-Virus mit einschließt. Dabei erfolgt die Amplifikation weiter in der 5´LTR-Region und zusätzlich in
der gag Region. In einer zweiten Phase sollen zusätzlich über ein Multiplexverfahren auch Primer für HIV-2 mit eingebunden
werden. Diesbezüglich wurde auch an einem Ringversuch vom NIBSC bezüglich HIV-2 WHO Standards teilgenommen.
Abbildung 2: Die Abbildung zeigt die Paralleltestung mit einem PCR-System in dem die Amplifikation für HIV-1 ausschließlich in der
5´LTR Region erfolgt und einem PCR-System mit einer Amplifikation in der 5´LTR Region und der gag Region. Beide PCR-Systeme
haben eine vergleichbare analystische Sensitivität.
Summary
Background: In February 2007, a 63-year old man underwent emergency surgery and was transfused with 15 red cell
products, four platelet products and six plasma products. Ten days after transfusion the patient was tested HIV-1 positive
by NAT. The transfusion-transmitted infection was identified by a donor-related look-back in April 2007. The minipool
(MP) and individual (ID) NAT screening using the Roche COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HIV-1 (CAP/CTM
HIV-1 Test) gave a negative result for this donation. All available archived plasma samples of the donor (four dona -
tions between June 2006 and January 2007) were tested by ID NAT (CAP/CTM HIV-1 Test). HIV-1 RNA was detected
in the last seronegative donation from January 2007 with a concentration of 146 IU/ml. This donation had tested negative
by minipool NAT screening before it was transfused to the recipient.
Methods: Sequence analysis was performed in the gag-pol region as well as in the V3 loop env region. Plasma from
the donor seroconversion donation (April 2007) was screened with different HIV-1 NAT assays (Abbott RealTime HIV-
1 assay, COBAS Amplicor HIV-1 Monitor Test v1.5, CAP/CTM HIV-1 Test, Cobas Ampliscreen HIV-1 Test v1.5 multiprep
procedure, Immuno Baxter HIV-1/2 PCR and DRK-HIV-1 PCR). Plasma from the January donation was used for
the ID-NAT testing with the CAP/CTM HIV-1 Test and for HIVAg/Ab-Combo testing (Abbott Architect).
Results: The seroconversion-donation (April 2007) was positive in four out of six NAT assays used. The mean concentration
was 639 IU/ml (range 410 IU/ml – 924 IU/ml). Only COBAS Amplicor HIV-1 Monitor Test v1.5 and
CAP/CTM HIV-1 Test (both Roche) did not detect the virus. Sequence analysis from the donor plasma in the gag, pol
and env region revealed HIV-1 of subtype B. Comparison with sequences from the recipient showed almost complete
identity for a total of approximately 1600 bp from the gag and pol region, thus confirming the transmission by molecular
data. Sequence analysis of the gag region also revealed one mismatch to the CAP/CTM HIV-1 Test probe region
and mismatches to the CAP/CTM HIV-1 Test downstream primer region near the end of the 3´-primer.
42
LOD probability (%)
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Detection 5´LTR only Detection 5´LTR and gag
95%:4.35 IU/ml
50%:2.2 IU/ml
0 2 4 6
LOD probability (%)
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
95%:3.9 IU/ml
50%:1.4 IU/ml
0 1 2 3 4 5 6
Virus concentration (IU/mL) Virus concentration (IU/mL)

Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Conclusion: This case demonstrates the first HIV-1 transmission by transfusion of a red cell concentrate after mandatory
introduction of HIV-1 NAT for blood screening in Germany. Mismatches in the probe and the downstream primer
(gag region) might explain the detection failure of the NAT screening system. Mutations are frequent events in
retroviruses as a result of the missing proofreading function of the reverse transcriptase/polymerase. Therefore, new
HIV-1 variants are to be continuously expected. There is a risk that new variants contain mutations at positions critical
for amplification or detection of viral RNA. To reduce the risk of a detection failure by NAT, screening could be
done in different conserved regions. Furthermore, this case also demonstrates that the archive material volume
should be defined in relation to the input volume for the ID NAT screening system. One to two ml archive volume may
not be sufficient if the ID NAT assay needs an input volume of one ml per test.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Sicherheit von Blutprodukten
Projektleiter PD Dr. med. M. Schmidt
Mitarbeiter Dr. Kai Hourfar
Kooperation Prof. Dr. L. Gürtler, Prof. Dr. H. Rabenau
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen, Institut Frankfurt
Laufzeit des Projektes 01.05.2007 – 31.12.2009
43

Forschungsbericht 2007 – 2008
Prävalenz von Parvovirus B19 bei Blutspendern
Hintergrund und Projektbeschreibung
Parvovirus B19 wurde zum ersten Mal 1975 in einem Blutprodukt von einem klinisch gesunden Spender entdeckt.
Obwohl der Hauptinfektionsweg über Tröpfcheninfektionen verläuft, sind in der Literatur Übertragungen durch Blutprodukte
beschrieben worden. Beim Parvovirus B19 handelt es sich um ein kleines nicht umhülltes Virus mit einem
Durchmesser zwischen 18 und 26 mm. Aufgrund der fehlenden Lipidhüllen lässt es sich nur schwer inaktivieren. Infektionen
verlaufen in 20 % der Erkrankungen asymptomatisch oder gehen mit milden Symptomen wie einer vorübergehenden
Rötung einher. In seltenen Fällen kann sich auch eine Vaskulitis, Myokarditis, Glomerlusonephritis und eine
Erythroblastopenie bilden. Das Virus befällt die erythrozytären Vorläuferzellen und induziert in diesen den programmierten
Zelltod (Apoptose). Gerade während einer Schwangerschaft, für Neugeborene oder für immunsupprimierte
Menschen besteht eine klinische Gefahr.
44
Pos donations per month (>10 5 IU/ml)
14
12
10
8
6
4
2
0
Schmidt et al.
Transfusion 2007;47:1775-1782
Wichtigste Ergebnisse
Incidence of Parvo B19 per month
month with the highest incidence per year
2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006
Years
2007 2008
Abbildung 1: Inzidenz von
B19 positiven Konserven mit
einer Konzentration
> 105 IU/ml. Es zeigen sich
kleinere Epidemien 2000,
2005 und 2008.
Seit April 2000 wurden alle Blutspenden mit Hilfe einer CE-zertifizierten Realtime-PCR-Methode auf Parvoviren B19
untersucht. Positive Blutspenden mit einer Viruskonzentration größer 10 5 IU/ml werden gesperrt. Mini-Pools mit einer
Viruskonzentration kleiner 10 5 IU/ml in der Realtime-PCR wurden nicht aufgelöst. In einer prospektiven Studie wurden
50 B19 positive Spender über ein Jahr systematisch erfasst und auch auf B19 Antikörper untersucht. Dabei
zeigte sich, dass Spender mit einer hohen Viruslast (in der Anfangsphase einer Infektion) nur sehr selten neutralisierende
Antikörper (VP-2 Antikörper) aufwiesen, wohingegen Spender mit einer geringen Viruskonzentration ausschließlich
auch neutralisierende Antikörper besaßen. Es zeigte sich somit, dass man auf die Auflösung von schwach
positiven Spenderpools aufgrund der Anwesenheit von neutralisierenden Antikörpern verzichten kann, ohne dadurch
eine Sicherheitslücke bei den Blutprodukten zu bekommen. Diese Aussage konnte in einer Studie mit dem IKT Ulm
durch Untersuchungen bei Empfängern von B19 virämischen Blutprodukten verifiziert werden. Während im IKT Ulm
die Spender erst mit einer Verzögerung von acht Wochen auf Parvovirus B19 untersucht werden, erfolgt die Untersuchung
in Frankfurt als Freigabe relevanter Parameter. In Look-Back-Untersuchungen konnte gezeigt werden, dass
9/18 (50 %) Empfänger, die ein Erythrozyten oder Thromboyztenkonzentrat mit einer Parvovirus B19 Konzentration
> 10 5 IU/ml erhalten hatten, ebenfalls Parvovirus B19 positiv waren, wohingegen Empfänger von Blutprodukten mit
Year
2000
2001
2002
2003
2004
2005
2006
2007
2008
Month
July
March
June
Jan/ May
April/ July
March
June
September
June

Qualitätssicherung in der Blutversorgung
einer Parvovirus B19 Konzentration < 10 5 IU/ml in 16/16 Fällen Virus-negativ waren. Dieser Unterschied ist bereits
statistisch signifikant und lässt sich zum Teil durch die fehlenden neutralisierenden Antikörper bei Spendern mit einer
hohen Viruskonzentration erklären. Eine klinische Symptomatik konnte bei den Empfängern jedoch nicht beobachtet
werden.
Summary
Although the main transmission pathway of B19 is normally via the respiratory route, several transfusion-transmitted
infections have been reported. In order to increase blood safety, all blood donations to our blood donor service have
been screened by a B19 mini-pool real-time NAT since April 2000 and from additional customers since summer 2003.
Study design: In total, 2.8 million donations from Europe were screened for B19 by real-time mini-pool NAT. A subgroup
of 50 B19 positive donors was screened for B19 IgG and IgM antibodies and B19 DNA over a six month period.
The results were compared to those of 100 B19 DNA negative donors.
Results: Data accumulated over the last six years indicates massive epidemics, in spring and summer 2004 and
2005. In total, the incidence was 11.06 and 192.79 per 100,000 donations with virus loads over 10 5 and below
10 5 IU/mL, respectively. Median virus concentration in the case group was 4.85 x 10 7 IU/mL at time point T0 and reduced
to 4 x 10 2 IU/mL at the next donation (three months later). Neutralizing antibodies (VP2) were detected in all
donations if virus load was reduced to less than 10 5 IU/mL.
Conclusion: The release of B19 positive blood products with a concentration < 10 5 IU/mL appears safe because of
the high level of neutralizing VP2 antibodies. In contrast, blood products with a high B19 DNA concentration
(> 10 5 IU/mL), some of which did not contain neutralizing antibodies, were discarded in order to protect at risk persons.
Abbildung 2: Phylogenetische
Übereinstimmung zwischen
Spender und Empfänger von
Parvovirus B19 positiven Blutprodukten.
Phylogenetic tree between donor and recipients
Genotype 1
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Molekulare Virussicherheit
Projektleiter PD Dr. M. Schmidt
Mitarbeiter Dr. Kai Hourfar
Kooperationen IKT Ulm Prof. Dr. H. Schrezenmeier, Frau Dr. Mayr-Wohlfart
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Laufzeit des Projektes 01.08.2006 – 31.07.2008
45

Forschungsbericht 2007 – 2008
Blutspenderscreening mit dem Cobas s201/ Cobas TaqScreen MPX
unter Routinebedingungen in Instituten des Deutschen Roten Kreuzes
Hintergrund und Projektbeschreibung
In den letzten Jahren wurden Vollautomaten entwickelt für die Untersuchung von Blutspenden auf die Parameter
HIV-1, HBV und HCV. Die aktuelle Studie wurde in den DRK-Instituten Hagen, Springe und Frankfurt durchgeführt.
Dabei wurde der PCR-Automat der Firma Roche (Cobas s201/Cobas TaqScreen MPX) mit dem jeweiligen Routineverfahren
bezüglich der analytischen Sensitivität und der analytischen Spezifität verglichen. Abschließend erfolgte ein
Paralleltest unter Routinebedingungen anhand dessen auch die Arbeitsprozesse kritisch untersucht wurden. Abbildung
1 zeigt den Arbeitsablauf mit dem Cobas s201/Cobas TaqScreen Test
Wichtigste Ergebnisse
46
Einzelspende,
Primärröhrchen
Data Manager
Workstation
cobas s 201 System
Automatisierte PCR für die Analyse
von Blutspenden - Workflow
Pooling Manager
Workstation
PDM Server
Ergebnistransfer
zum LIMS
Hamilton Microlab STAR Pipettierer
Automatischer
Ergebnistransfer nach
Freigabe
AmpliLink Software
Workstation
Probenvorbereitung
COBAS® TaqMan®
Pooling inkl.
Auflösung
COBAS® AmpliPrep®
Amplifikation
und Detektion
Abbildung 1: Das Cobas
s201/Cobas TaqScreen System
besteht aus einem Probenverteiler
(Hamilton), in
dem Poolgefäße mit bis zu
96 Proben pro Pool prozessiert
werden können. Aus
dem Poolgefäß werden anschließend
850 µl in spezielle
Kunststoffgefäße pipettiert
und manuell auf den Cobas
AmpliPrep positioniert. Anschließend
erfolgt die Extraktion
und die Amplifikation
(über eine Dockingstation)
vollautomatisch. Nach
2,5 Stunden sind die Ergebnisse
des ersten Laufs vorhanden.
In allen drei Instituten konnten die Herstellerangaben bezüglich der analytischen Sensitivität und Spezifität reproduziert
werden. Abbildung 2 vergleicht dabei die analytische Sensitivität des Cobas s201/Cobas TaqScreen MPX Verfahrens
mit dem CE-zertifizierten DRK-PCR-Kit. Für die Parameter HIV-1 und HCV erzielte der DRK-PCR-Kit eine
höher analytische Sensitivität, dagegen zeichnete sich das Roche-Verfahren durch eine exzellente Sensitivität bei
HBV aus. In der Paralleltestung von 36.064 Proben kam es im Roche-Verfahren zu insgesamt 29 invaliden Ergebnissen.
Diese Befunde konnten in den Instituten Hagen und Springe nicht reproduziert werden. Daraufhin erfolgte eine
erneute Überprüfung des Systems durch den Hersteller. Es stellte sich heraus, dass ein für die Extraktion wichtiger
Motor, mit einem insuffizienten Drehmoment fixiert worden war. Im Anschluss wurden weitere 41.928 Proben parallel
mit beiden Verfahren untersucht, ohne weiter invalide Ergebnisse. In der Workflow-Analyse benötigten beide Untersuchungsverfahren
für die Bearbeitung von 36 Pools eine Gesamtzeit von sechs Stunden und 40 min. Beim vollautomatischen
Verfahren wurde jedoch nur eine Arbeitskraft für eine Stunde benötigt, wohingegen beim manuellen Verfahren
drei Personen für insgesamt fünf Stunden und 50 Minuten benötigt wurden. Durch die Anwendung von vollautomatischen
Prozessen besteht eine komplette Barcodekontrolle, so dass manuelle Vertauschungen ausgeschlossen werden.

Abbildung 2: Vergleich zwischen
dem Cobas s201/
Cobas TaqScreen System
und dem DRK-PCR-Kit. Der
DRK-PCR-Kit besitzt eine signifikant
höhere analytische
Sensitivität bezüglich HIV-1.
Summary
Wahrscheinlichkeit (%)
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Ergebnisse LOD HIV
Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Vergleich Roche Cobas TaqScreen MPX mit DRK HIV-1 PCR Kit
Analytische Nachweisgrenze pro prozessiertes Volumen (IU/ml)
Cobas TaqScreen MPX DRK HIV-1 PCR Kit
95%:26,6 IU/ml
(17,6-64,9 IU/ml)
50%:11,68 IU/ml
(6,7-24,4 IU/ml)
0 10 20 30 40
Background: In 1997 German Red Cross (GRC) blood donor services introduced mini-pool NAT-testing for HIV-1,
HCV and HBV to increase blood safety. With the new Cobas S201/Cobas TaqScreen MPX a fully automated extraction
method and a multiplex amplification system specifically adapted to the needs of blood donation services is
available.
Methods: The Cobas s201 system was evaluated at the GRC BTS locations Hagen, Springe and Frankfurt. In phase
A the analytical sensitivity for the detection of HBV, HCV and HIV-1 was investigated and in phase B at least 60,000
samples at each test site were screened in parallel with the Cobas s201/Cobas MPX assay and the existing routine
mini-pool NAT system to compare the diagnostic specificity and the diagnostic sensitivity.
Results: Comparable analytical sensitivities in a range of 1.6 - 3.6 IU/ml, 4.9 - 10.9 IU/ml and 14.7 - 26.6 IU/ml for
HBV, HCV HIV, respectively, for the s201/COBAS TaqScreen MPX (95 % probability based on probit analysis) were
determined at all test sites. The diagnostic sensitivity was 99.8 % and the diagnostic specificity was 99.85 %.
Conclusions: The Cobas S 201/Cobas TaqScreen MPX is a fully automated NAT system suitable for routine blood
donor screening. The analytical sensitivity as well as the diagnostic sensitivity fulfilled all requirements of the Paul-
Ehrlich-Institute for blood donor screening in mini pools up to 96 donations per pool. A major benefit of the automated
NAT system is the reduced personnel time and the extensive complete barcode controlled process
documentation.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Sicherheit von Blutprodukten
Projektleiter PD Dr. med. M. Schmidt
Mitarbeiter Dr. K. Hourfar; Dr. B. Rüster
Kooperation DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen,
DRK-Blutspendedienst West,
DRK-Blutspendedienst NSTOB
Förderung Roche Molecular Systems
Laufzeit des Projektes 01.01.2008 – 31.12.2009
Wahrscheinlichkeit (%)
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Viruskonzentration (IU/ml) Viruskonzentration (IU/ml)
Angabe Hersteller: 49 IU/ml
95%:9,1 IU/ml
(7,1-14,4 IU/ml)
50%:2,32 IU/ml
(0,5-3,5 IU/ml)
NIBSC WHO 97/650
47

Forschungsbericht 2007 – 2008
Weitere Informationen
48
Michael Schmidt, Lutz Pichl, Christine Jork, John Saldanha, Michael Kai Hourfar, Volkmar Schottstedt, Franz F.
Wagner, Thomas H. Müller, Jürgen Bux and Erhard Seifried. Blood donor screening with cobas s201/ cobas
taqscreen mpx under real life conditions at German Red Cross Institutes. Vox Sang. in press.

Europäisches Projekt EQUAL-Blood:
Entwicklung von Standards zur Etablierung von
Qualitätsmanagementsystemen in der Transfusionsmedizin
Project objectives and deliverables
Qualitätssicherung in der Blutversorgung
The overall objective of the project is to contribute to good quality management (QM) in blood services, based on the
requirements set out in directive 2002/98/EC and its technical annexes. It will deliver this through the development of
a manual that will assist blood services to implement or expand their standard operating procedures (SOPs).
Results
The project has finalised the first edition of a manual addressing the responsibilities of blood establishments, including
those that carry out routine activities and those that are highly specialised, as well as hospital blood banks.
Specifically the project has
1 assessed the existence of SOP manuals and guidelines currently used in the 16 blood services involved in the
project in order to identify (A) international and national SOP manuals already in place and (B) the current inspection
practice;
2 developed a manual to assist blood establishments to develop and implement their own SOPs.
3 tested this new SOP methodology among the partner institutions.
4 produced this manual in different languages.
Language translations are currently available for English, German, French, Spanish and Czech. Translation into
Macedonian, Bulgarian and Polish are underway.
49

Forschungsbericht 2007 – 2008
50
The manual will support the public health programme
on ”quality and safety of blood” in delivering a practical
SOP-based tool that will contribute to the understanding
and management of quality processes in
blood services. The EU-SOP tool will assist blood
establishments in preparing for the inspection of their
services related to the implementation of quality relevant
elements required by the EU directive
2002/98/EC.
In order to sustain the dissemination of its results, the
project has link its content to the current EuBIS project
and the European Blood Alliance network.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Medizinische Geschäftsführung
Projektleiter Prof. Dr. med. Dr. h. c. Erhard Seifried (Project Leader),
Prof. Dr. med. Christian Seidl (Project Coordinator)
Mitarbeiter MUDr. Walid Sireis (Project Manager),
Roger Fleck (Project Adminstration)
Kooperationen Blutspendeeinrichtungen aus 16 Europäischen Mitgliedsländern oder EFTA Ländern
Project Participants and Centers (www.eu-q-blood-sop.de):
Eduardo Fernandez-Zincke, Tapani Piha and Caroline Trouet (EC, European Commission, Directorate
C, Bruessels, Belgium) Inge Buyse and Philippe Vandekerckhove, HBRK (Belgium) Svetla Bakalova
and Andrey Andreev, NBT (Bulgaria), Zoe Sideras MOH (Cyprus); Petr Turek, GTH (Czech Republic);
Tatjana Plahhova and Riima Niidas, EBS (Estonia); Leslie Sobaga, Alain Beauplet and Claudine Hossenlopp
EFS (France); Martin Gorham and Alan Slopecki NBS (UK), Klára Barótine-Tóth and Eszter
Miskovits, HNBT (Hungary); Sveinn Gudmundsson BTS (Iceland); Marie O’Connell and William
Murphy, IBTS (Ireland); Hamisa Jane Hassan ISS (Italy), Frances M. Delaney (Luxemburg), Alex Aquilina
IBT (Malta); Magdalene Letowska and Elzbieta Lachert, IHBT (Poland); Carmen Tatu, FMP (Romania);
Brian McClelland, Anne Forrest and Ian Franklin, SNBTS (Scotland), Angus McMillan
Douglas, AMD (Scotland).
Förderung durch Mittel der Europäischen Kommission: Directorate C, Public health program on ”quality and
safety of blood”, Project Grant Agreement No. 2004217.
Laufzeit des Projektes 01.10.2005 – 31.06.2007
Weitere Informationen
www.equal-blood.eu

Europäisches Projekt EU-Blood-Inspection (EuBIS): Entwicklung von
Standards und Kriterien entsprechend Direktive 2002/98/EC und
2005/62/EC für die Inspektion von Blutspendeeinrichtungen
Summary
Qualitätssicherung in der Blutversorgung
EuBIS, the European Blood Inspection System, is a project funded by the European Commission under its 2006 Call
for Proposals and within the framework of its Public Health Programme (2003 – 2008) addressing the quality and
safety of blood. The project aims to develop pan-European standards and criteria for the inspection of blood establishments.
These requirements are intended for use not only by those responsible for the operation of blood establishments
but by those in charge of inspecting them, in compliance with relevant European Union (EU) legislation.
(www.eubis-europe.eu).
EuBIS is coordinated by the German Red Cross Blood Donor Service with the participation of 25 collaborating partners
from 19 Member States, cooperative working partnerships with five organisations and three projects, affiliations
with six partners involved in conducting its inspection survey, and is supported by the European Blood Alliance.
Launched in August 2007, the project has three-year duration.
Project objectives and deliverables
The project scope is defined in Area 2.2.4 of the work plan 2006 ensuring equivalent recognition of inspections of
blood establishments among all member states through the development and implementation of commonly accepted
criteria and standards leading to comparable quality systems and inspection procedures.
It will deliver this through the development of:
1. an inspection manual for blood establishments,
2. an inspector training programme, which will assist the inspection of blood establishments and will develop
common inspection criteria that are accepted among the member states.
This inspection manual will address the responsibilities of blood establishments, including those that carry out routine
activities and those that are highly specialised. It will give European guidelines for national institutions or authorities
performing inspections based on minimum requirement for good practice, based on the requirements set out in
directive 2002/98/EC and its technical annexes.
The strategic objectives are to:
1. enable that blood components are collected and prepared to a consistently high standard of safety across
Europe.
2. define requirements for the quality management system for blood establishments based on the directive
2005/62/EC in order to prepare blood establishments for inspections.
3. develop pan European standards and criteria for the inspection of blood establishments based on GMP guidelines
to assist national inspections in implementing the directive 2002/98/EC and its technical annexes.
4. establish a common benchmark system for deviations and improvements to allow comparative analysis of inspections
between member states or European regions. This benchmark system should develop practical assistance
and advice to optimise processes based on good practice among blood establishments.
5. develop a training programme for inspectors to implement common interpretations of inspection standards
across Europe. This training programme also intends to strengthen the exchange of information and knowledge
on blood establishment quality system GMP standards between the national institutions and authorities performing
inspections.
51

Forschungsbericht 2007 – 2008
52
Abbildung 1: EuBIS (European
blood inspection and
quality management system)
participants from 19 European
member and EFTA
states.
Recognising that several inspection criteria and programmes in health care area had already been established, the
EuBIS project from the outset consulted these sources and conferred with the responsible authors. These included:
- the Joint Accreditation Committee of the International Society of Cellular Therapy (ISCT) and the European Group
for Blood and Marrow Transplantation (EBMT) (jointly referred to as JACIE),
- the Pharmaceutical Inspection Convention and Pharmaceutical Inspection Co-operation scheme (jointly referred
to as PIC/S),
- the European Medicines Agency (EMEA).
Moreover, EuBIS has collaborated and exchanged ideas with the EUSTITE (European Union Standards and Training
for the Inspection of Tissues Establishments) project, co-financed under the 2005 Work Plan of the EU’s Public Health
Programme. EuBIS has drawn extensively from EUSTITE’s ”Guidelines for the Inspection of Tissue and Cell Procurement
and Tissue Establishments” and this manual is complementary to it. It has also been in contact with the
national competent authorities in the member states and the International Plasma Fractionation Association (IPFA).

Abbildung 2: EuBIS-Project
working and decision making
structure including the linking
activities to external consortiums
as described in Annex I
of the Grant Agreement.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Medizinische Geschäftsführung
Projektleiter Prof. Dr. med. Erhard Seifried (Projekt Leader),
Prof. Dr. med. Christian Seidl (Project Coordinator)
Mitarbeiter MUDr. Walid Sireis (Project Manager)
Dr. Petra Skrablin (Assitant Project Manager)
Dr. Thea Müller-Kuller (Assistant Project Manager)
Jeannine Douverne (Assistance)
Roger Fleck (Administrative and Financial Manager)
Qualitätssicherung in der Blutversorgung
53

Forschungsbericht 2007 – 2008
Kooperationen Project Participants and Collaborating Partners
EU European Commission – Directorate C (Public Health and Risk Assessment) (Brüssel)
Public Health Executive Agency (PHEA) (Luxemburg)
BSDBH –Germany DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
(Project Coordinator) (German Red Cross Blood Donation Service)
BTS - Iceland Landspitalinn Hàskòlasjuùkrahùs - Blóðbankinn (Icelandic University Hospital)
SIDC – Czech Republic Vedoucí oddělení klinických praxí a dohledu nad zpracováním biologických materiálů.
Státní ústav pro kontrolu léčiv (State Institute for Drug Control)
DHCSS - Malta Directorate of Health Care Services Standards, Government of Malta
EBS - Estonia Põhja-Eesti Reginaalhaigla Verekeskus (North-Estonian Regional Hospital Blood Centre)
EFS - France Etablissement Français du Sang (French Blood Establishment)
FOK - Czech Republic Fakultni nemocnici Ostrava Krevni centrum (Blood center)
HBRK - Belgium Het Belgische Rode Kruis (Belgian Red Cross)
IBTS – Ireland Irish Blood Transfusion Service
FMP – Romania Universitatea de Medicina si Farmacie "Victor Babes" Timisoara
(University of Medicine and Pharmacy "Victor Babes" Timisoara)
HNBT – Hungary Országos Vérellátó Szolgálat (Hungarian National Blood Transfusion Service)
IHT – Poland Instytut Hematologii I Transfuzjologii (Institute of Haematology and Blood Transfusion)
IMB – Ireland Irish Medicines Board - Blood & Tissue Section
ISS - Italy Istituto Superiore di Sanita, Centro Nazionale Sangue
MSC - Spain DG Salud Pública. Ministerio de Sanidad y Consumo (Madrid)
represented by Centro Vasco de Transfusion (San Sebastian)
MSP -Romania Ministerul Sanatatii Publice (Ministry of Public Health)
MOH - Cyprus Υϖουργείο Υγείας της Κυϖριακής Δηµοκρατίας -
Іατρικές Υϖηρεσίες κσι Υϖηρεσίες Δηµόσιας Υγείας
(Ministry of Health of the Republic of Cyprus - Medical and Public Health Services)
NBS - United Kingdom National Blood Authority, National Health Service Blood and Transplant (England and North Wales)
NBT - Bulgaria НАЦИОНАЛЕН ЦЕНТЪР ПО ХЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ
(National Centre of Hematology and Transfusiology)
PEI - Germany Paul-Ehrlich Institut (Federal Government Institution)
RPDA - Germany Regierungspräsidium Darmstadt (State Governmental Institution)
Sanquin - The Netherlands Stiching Sanquin Bloedvoorziening (Sanquin Blood Supply Foundation)
ZRS - Slovenia Zavod Republike Slovenije za transfuzijsko medicino (Blood Transfusion Centre of Slovenia)
AMP - Slovenia Javna agencija RS za zdravila in medicinske pripomočke
(Agency for medicinal products and medical devices)
TILAK - Austria Zentralinstitut für Bluttransfusion und Immunologische Abteilung, Universitätsklinikum Innsbruck
Cooperative Working Partnerships
CoE - EDQM Council of Europe - Blood Transfusion & Organ Transplantation activities. European Directorate for
the Quality of Medicines and HealthCare EDQM – CD-P-TS, Strasbourg, France
EBA European Blood Alliance (Executive office in Amsterdam), The Netherlands
JACIE JACIE Accreditation Office - EBMT Secretariat, Spain
KMF Koch-Metschnikow Forum (KMF), МЄЧНИКОВ-КОХ-ФОРУМ (МКФ)
an initiative of the Petersburg Dialogue. (Germany and Russia)
WHO World Health Organisation (WHO) Regional Office for Europe (Copenhagen), Denmark
DOMAINE Project DOMAINE Project, Nijmegen and Amsterdam, The Netherlands
EUSTITE Project EUSTITE – Project, Italy
Optimal Blood Use Project EU Optimal Use of Blood Project, United Kingdom
54
AFFILIATED PARTNERS
Uni-Graz - Austria Universitätsklinik für Blutgruppenserologie und Transfusionsmedizin (Austria)
BMGFI - Austria Bundesministerium (BMGFI)
AGG - Belgium Federal Agentschap voor Geneesmiddelen en Gezondheidsproducten, (Belgium)
BDA - Bulgaria Bulgarian Drug Agency (Bulgaria)
DMA - Denmark Danish Medicines Agency (Denmark)
AFFSAPS - France Agence française de sécurité sanitaire des produits de santé (France)

MoH - Latvia Ministry of Health, Health Statistics and Medical Technologies State Agency (Latvia)
MoH - Liechtenstein Amt für Gesundheit (Health Ministry) (Liechtenstein)
ASST - Portugal Autoridade para os Serviços de Sangue e da Transplantação, (Portugal)
ITM – Rep. Macedonia Institute of Transfusion Medicine (Republic of Macedonia)
Socialstyrelsen - Schweden The National Board of Health and Welfare, Socialstyrelsen (Sweden)
SIDC - Slovakia State Institute for Drug Control (SIDC), Bratislava (Slovakia)
Swissmedic - Switzerland Swiss Agency for Therapeutic Products (Swissmedic), Bern (Switzerland)
MHRA – United Kingdom Medicines and Healthcare Products Regulatory Agency (United Kingdom)
Förderung Mittel aus der Europäische Kommission, Grant Agreement No. 2006202
DG Sanco, Directorate C. Public Health and Risk Assessment
Laufzeit 01.09.2007 - 01.09.2010
Weitere Informationen
www.eubis-europe.eu
Qualitätssicherung in der Blutversorgung
55

Forschungsbericht 2007 – 2008
Europäisches Projekt Optimal USE of Blood:
Project background
In recent years the risks to patients arising from a deficiency in the blood component itself have been greatly reduced.
This success resulted from a huge investment of resources in improved screening of donor testing and improved
processing of donated blood. It has also resulted from the introduction of directive 2002/98/EC and its
supporting directives.
However, haemovigilance studies have shown that there remain significant risks to patients resulting from failures in
transfusion process (therapeutic use of blood components). These risks arise from failures in the transfusion of the
right unit of blood to the right patient at the right time and in the right condition as well as transfusions that are not
given according to sound clinical indications and appropriate guidelines. In addition, the more rigorous screening of
potential donors introduced in recent years for safety reasons has both reduced the supply and increased the cost of
blood, resulting in a high cost to the health care system of failing to adopt optimum use.
Target of the Project and general Objectives
This project shares best practice on training in optimal use of blood components by developing and sharing a tool kit
that can be used by a partnership of staff in blood establishments, hospital blood banks and hospitals therapeutic
departments, for the benefit of patients. To encourage the optimal use of blood components across Europe through
sharing of information and best practice on training in the use of these components. In this way the project will assist
the development of a European quality management system for therapeutic use of blood components.
Optimal use requires that blood components are used safely, effectively and efficiently. Optimal use will provide the
following benefits:
- Improve safety for donor through reducing unnecessary bleeding of donors.
- Improve safety for patient through improving transfusion process and reducing unnecessary transfusion of blood.
- Improve effectiveness of health services by allowing scarce blood components to be used in the most therapeutically
beneficial way for patients.
- Improve efficiency of health services by reducing inefficient use of resources.
Results
The project’s specific objectives are to:
1. Survey the current situation in participating states in order to identify variations across Europe in blood usage,
adverse effects, therapeutic practices and training and to identify good practice. The survey will seek to identify
good practice.
2. Develop a tool kit in form of a manual that will facilitate implementation across Europe of best practice, raising
awareness and training of health care staff about the use of blood components. The manual will comprise:
56
Methods for monitoring and understanding those hospital processes that determine whether or not a patient receives
the correct blood component, correctly transfused at the right time. Purpose of this is to identify, within the
local hospital, transfusion activities that create the greatest risks for patients.

Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Methods to train those hospital staff, who are critical to the transfusion process, particularly in high-risk activities.
Methods for obtaining, analysing and presenting to clinicians comparative information on quantities of blood
components transfused for defined patient groups. Purpose of this is to raise awareness amongst clinicians
(doctors or nurses) of the variety of blood use in apparently similar situations. Pilot projects have proven this to
be one of the most effective methods of changing practice.
3. Develop a project website that will facilitate:
- Sharing of best practice.
- Provision of a critically reviewed evidence base for optimal transfusion practice.
- Development of the tool-kit.
57

Forschungsbericht 2007 – 2008
Abbildung: EU-Optimal Blood Use Project (www.optimalblooduse.eu) and delegates at the inaugural project meeting held in Edinburgh
from May 9th to 10th, 2007
Back row (left to right): Dr Dragoslav Domanovic (Slovenia), Prof Christian Seidl (Germany), Prof Ian Franklin (Scotland), Angus MacMillan
Douglas (European Blood Alliance), Dr Kjell Titlestad (Denmark), Dr Vincenzo De Angelis (Italy), Dr Christof Jungbauer (Austria), Dr
Simon Stanworth (England)
Front row (left to right): Merredith Hart (Scotland), Diane Creigton (Scotland), Dr Laura Castro (Portugal), Dr Guenther Wittauer (Austria),
Dr Brian McClelland (Scotland), Dr Georges Andreu (France), Elaine Arthur (Scotland), Dr Riin Kullaste (Estonia), Dr Petr Turek (Czech
Republic) and Liz Pirie (Scotland).
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Medizinische Geschäftsführung
Projektleiter Scottish National Blood Transfusion Service (UK)
Kooperationspartner – Germany:
Prof. Dr. med. Dr. h. c. Erhard Seifried (Project partner),
Prof. Dr. med. Christian Seidl (Project partner)
Mitarbeiter –
Kooperationen Weitere Kooperationspartner siehe Projekt Homepage unter www.optimaluseblood.eu
Förderung durch Mittel der Europäischen Kommission: DG Sanco, Directorate C, Public Health Program on
”quality and safety of blood”.
Laufzeit des Projektes 01.04.2007 – 31.03.2010
Weitere Informationen
www.optimalblooduse.eu
58

Automatisiertes Screeningverfahren zum Nachweis
granulozytärer Antikörper
Hintergrund und Projektbeschreibung
Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Granulozytäre Antikörper können schwerwiegende Transfusionsreaktionen wie z. B. die Transfusionsassoziierte Lungeninsuffizienz
(TRALI) verursachen. Somit kommt dem Vorhandensein von granulozytären Antikörpern in den Blutprodukten,
wie z. B. Plasmen eine große Bedeutung zu. Die Untersuchung einer hohen Anzahl von Blutprodukten auf
granulozytäre Antikörper mit den bisherigen Verfahren GIFT und GAT (granulozyte agglutination test) ist aufgrund des
hohen Zeitaufwandes und der Notwendigkeit großer Mengen an Testzellen nicht möglich.
In der täglichen Routine wurde bereits das Verfahren Flow GIFT (flow cytometric granulocyte immunofluorescence)
zur schnellen Detektion von granulozytären Antikörpern mittels Durchflusszytometrie etabliert. Um die Abarbeitung
der Proben zu standardisieren und zu rationalisieren, wird in dem vorliegenden Projekt die Untersuchung der granulozytären
Antikörper mittels automatisiertem Flow GIFT durchgeführt.
Ziel dieses Projektes liegt darin, über 1.000 Blutproben von Spenderinnen mit und ohne Schwangerschaftsanamnese
auf granulozytäre und HLA-Klasse I und II Antikörper zu untersuchen. Hierbei sollen Kenntnisse über das automatisierte
Verfahren bezüglich des Prozessablaufes für den späteren Einsatz in der Routine in großem Umfang der Spenderuntersuchung
wie auch Informationen über Frequenz der granulozytären und HLA-Klasse I und II Antikörpern bei
den Spenderinnen gewonnen werden.
Verteilung der Antikörper-
Spezifitäten von Spenderinnen
mit Schwanger schafts-
anamnese
Wichtigste Ergebnisse
HLA-I + II
n= 6 (9,1%)
HLA II
n= 20 (30,3%)
HNA-AK
n= 3 (4,6%)
je 1x anti-3,
anti-2, anti-1b
HLA I
n= 35 (53%)
HNA-AK
n= 2 (3%)
noch nicht
näher spezifiziert
541 Spenderinnen wurden bisher untersucht, davon waren 367 Spenderinnen mit bzw. 174 ohne Schwangerschaftsanamnese.
66 von 367 (18 %) Spenderinnen mit Schwangerschafts anamnese waren positiv in Flow GIFT (n = 5;
1,4 %) und HLA ELISA mit HLA I (n = 35; 9,5 %), HLA II (n = 20; 5,4 %), HLA I + II (n = 6; 1,63 %). Interessanterweise
konnten bei drei Spenderinnen ohne Schwangerschaftsanamnese anti-HLA Klasse I Antikörper (n = 2) und anti-HNA-
1b-Antikörper (n = 1) nachgewiesen werden.
59

Forschungsbericht 2007 – 2008
Automated screening for detection of granulocyte antibodies with a novel assay
Granulocyte associated antibodies can cause allo- or autoimmune granulocytopenia. Since granulocyte alloantibodies
can lead to severe pulmonary transfusion reactions (TRALI) or febrile transfusion reactions, they also play an important
part in blood transfusion. Investigation of a large number of blood donor samples using standard granulocyte
immunofluorescence (GIFT) and granulocyte agglutination test (GAT) proved to be difficult to perform due to the time
consuming process and the large number of test cells required. Here we describe the novel Flow-GIFT method, (flow
cytometric granulocyte immunofluorescence), which is able to detect rapidly granulocyte antibodies with automation
of pipetting of samples and flow cytometric analysis. We investigate about 1000 female blood donors with and without
pregnancy on granulocyte using this automatisation.
Standort Mannheim
Arbeitsgruppe Spenderscreening
Projektleiter Dr. med. X. D. Nguyen
Mitarbeiter Frau Dr. Dostmann, Frau Schulz-Linkholt (MTA)
Kooperationen Frau PD Dr. B. Flesch, Institut für Transfusionsmedizin, Universitätsklinikum Schleswig-Holstein,
Campus Kiel
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Laufzeit des Projektes 01.01.2008 – 31.12.2008
Weitere Informationen
Eichler H, Nguyen XD, Roelen D, Celluzzi CM, McKenna D, Pamphilon D, Blair A, Read EJ, Takahashi TA, Szczepiorkowski
ZM; Biomedical Excellence for Safer Transfusion Collaborative. Multicenter study on in vitro characterization
of dendritic cells. Cytotherapy 2008;10:21-29.
Nguyen XD, Müller-Berghaus J, Kälsch T, Schadendorf D, Borggrefe M, Klüter H. Differentiation of monocyte-derived
dendritic cells under the influence of platelets.Cytotherapy 2008; 10: 720-729.
60

Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Dokumentation der photochemischen Pathogeninaktivierung von
Thrombozytenkonzentraten unter Verwendung von Amotosalen und
UVA-Licht mittels PCR und Bioanalyzer
Hintergrund
Mit der Einführung photochemisch behandelter, pathogeninaktivierter Thrombozytenkonzentrate in die Routine stellt
sich die Frage nach einer möglichen Qualitätskontrolle, die die Effizienz dieses Verfahrens dokumentiert.
Die bisherigen Möglichkeiten beschränken sich auf die Messung der Bestrahlungsdauer und -intensität des UVA-
Lichts, sowie der Bestimmung des Amotosalengehalts und der Photoprodukte mittels HPLC-Methode. Da diese
Messmethode sehr komplex und aufwendig ist, kann sie z. Zt. nur in einem Speziallabor durchgeführt werden.
Wir konnten in Vorarbeiten zeigen, dass mittels PCR-Verfahren die Effizienz der Pathogeninaktivierung dokumentiert
werden kann. Hierfür haben wir ein PCR-System unter Verwendung von mitochondrialer DNA etabliert:
Das PCR-System besteht zum einen aus einem Fragment, das klein genug ist, damit statistisch gesehen Kreuzvernetzungen
zwischen Genom und Amotosalen ausbleiben und somit unabhängig von der photochemischen Behandlung
diese Sequenz in der PCR amplifiziert werden kann. Dieses Fragment dient als interne Kontrolle zum Nachweis
einer korrekten PCR.
Zum anderen haben wir ein Fragment ausgewählt, das groß genug ist, damit Kreuzvernetzungen zwischen Genom
und Amotosalen stattfinden. Diese Kreuzvernetzungen bedingen eine Inhibition der PCR, so dass die korrekt stattgefundene
photochemische Behandlung nachgewiesen wird.
Bisher erfolgte die qualitative Auswertung der PCR-Ergebnisse anhand der Agarosegelelektrophorese.
Projektbeschreibung
Mit den aktuellen Untersuchungen haben wir eine quantitative Auswertung der PCR-Ergebnisse mittels Bioanalyser
etabliert und standardisiert.
Abbildung A: Auswertung der
PCR-Ergebnisse aus einer
Probe vor photochemischer
Pathogeninaktivierung. Darstellung
des kleinen Fragmen-
A
Vor
PCT
tes, d.h. der internen PCR-
Großes Fragment
Kontrolle zum Nachweis der
korrekten PCR sowie des großen
Fragmentes, d.h. dem
Kleines Fragment
Amplicon, das den Nachweis
für die korrekte Behandlung B
Nach
erbringen soll. In dieser Probe
lassen sich beide Fragmente
PCT
nachweisen.
Abbildung B: Auswertung der
Großes Fragment
PCR-Ergebnisse aus einer
Probe nach photochemischer
Pathogeninaktivierung. Dar-
Kleines Fragment
stellung des kleinen Fragmentes, d.h. der internen PCR-Kontrolle zum Nachweis der korrekten PCR sowie des großen Fragmentes,
d.h. dem Amplicon, das den Nachweis für die korrekte Behandlung erbringen soll. In dieser Probe lässt sich das große Fragment als
Zeichen der stattgefundenen Amotosalen-Genom-Kreuzvernetzung deutlich abgeschwächt nachweisen.
61

Forschungsbericht 2007 – 2008
Wichtigste Ergebnisse
Wir konnten zeigen, dass die Auswertung der PCR-Ergebnisse mittels Bioanalyser möglich ist. Der Cut off Wert (Inaktivierungsfaktor)
berechnet als Quotient aus der „area under the curve“ der beiden Fragmente vor und nach der photochemischen
Behandlung weist allerdings noch eine große Streubreite auf.
Nachdem aktuell die Zulassung für pathogeninaktivierte Thrombozytenkonzentrate durch das Paul-Ehrlich-Institut erteilt
wurden, sollen nun größere Datenmengen zur Auswertung erhoben werden.
Summary
62
P1
Kleines Fragment
P1
Die beiden Kurvendarstellungen
einer Probe vor photochemischer
Behandlung (rot)
und nach photochemischer
Behandlung (blau) überereinander
gelegt: Aus der „area
under the curve“ der beiden
Fragmente vor und nach der
photochemischen Behandlung
kann ein Quotient berechnet
werden
(Inaktivierungsfaktor).
We could demonstrate that the bioanalyser is compatible for documentation of PCR results. Until now investigations
show a wide range for a cut off value estimated from values gained from samples taken after versus before photochemical
treatment. With regard to routine preparation of photochemically treated platelet concentrates we can now
collect a higher amount of data for calculation of the cut off level.
Standort Mannheim
Arbeitsgruppe Pathogeninaktivierung
Projektleiter Dr. med. Karin Janetzko
Mitarbeiter Frau K. Hinz, MTA
Weitere Informationen
k.janetzko@blutspende.de
P2
P2
Großes Fragment
Inaktivierungsfaktor:
P2 : P1
P2 : P1
Nach PCT
Vor PCT

Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Einfluss des Mirasol®-Pathogen-Reduktionsverfahrens auf den
Thrombozytenmetabolismus und die Aktivierung der Thrombozyten
Hintergrund
Das Mirasol®-Pathogen-Reduktionsverfahren auf Basis von Riboflavin in Kombination mit UVB-Bestrahlung ist ein
weiteres Verfahren, das für die Inaktivierung von möglichen kontaminierenden Pathogenen bei Thombozytenkonzentraten
eingesetzt werden kann.
Diese Verfahren befindet sich in einigen europäischen Ländern bereits in Phase-III-Studien. In Deutschland sind
hierzu erste in-Vitro Studien durchgeführt worden.
Projektbeschreibung
Wir haben den Einfluss des Verfahrens auf die Thrombozytenqualität im Vergleich zu Standard-Apheresethrombozytenkonzentraten
in einer Studienserie untersucht. Das Design der einzelnen Studien unterschied sich hinsichtlich der
initialen Lagerungszeit der Thrombozytenkonzentrate vor Durchführung der Pathogeninativierung:
Serie I: Das Thrombozytenkonzentrat (6.0 x 10e11, resuspendiert in 450 ml autologem Plasma) wurde zunächst zwei
Stunden ohne Agitation gelagert. Anschließend wurde das Thrombozytenkonzentrat in zwei Einzelpräparate à 225 ml
aufgeteilt. Eins der Einzelpräparate wurde nicht weiter behandelt (Kontrollprodukt = C-PC). Bei dem zweiten Produkt
schloss sich das Pathogen-Reduktionsverfahren unmittelbar an (Testprodukt = T-PC).
Serie II/III: Die Thrombozytenkonzentrate wurden nach initialer zweistündiger Lagerung ohne Agitation und nach der
Aufteilung weitere zwei (Serie II) bzw. sechs Stunden (Serie III) unter Agitation gelagert, bevor die Pathogen-Reduktionsbehandlung
erfolgte.
Serie IV: Die Thrombozytenkonzentrate wurden nach initialer zweistündiger Lagerung ohne Agitation und nach der
Aufteilung über Nacht unter Agitation gelagert. Die Pathogen-Reduktionsbehandlung erfolgte am darauffolgenden
Tag innerhalb von 24 Stunden nach Apherese.
Zur Beurteilung der Thrombozytaktivierung wurde der Zelloberflächenmarker CD62p mit und ohne TRAP (Thrombinrezeptoraktivatorprotein)-Aktivierung
bestimmt. Der Thrombozytenmetabolismus wurde anhand der Glukoseverbrauchs-,
der Laktatproduktionsrate und des pH-Wertes beurteilt. Die Untersuchungen wurden über einen
Lagerungszeitraum von fünf Tagen durchgeführt.
Wichtigste Ergebnisse
Serie I: Das Pathogen-Reduktionsverfahren führte zu einem pH-Abfall auf 6.8 ± 0.2 (vs 7.4 ± 0.1 (C-PC) an Tag 5.
Parallel dazu kam es zu einem erhöhten Glukoseverbrauch 0.069 ± 0.016 vs. 0.035 ± 0.006 sowie einer erhöhten
Laktatproduktion von 0.126 ± 0.031 vs. 0.063 ± 0.011 mmol/10e12plt/hr (C-PCs). Die maximale Thrombozytenaktivierbarkeit
unter Verwendung von TRAP lag für T-PC niedriger (50 ± 11 vs 62 ± 14 %). Die Basisaktivierung bei diesen
Präparaten war höher (35 ± 12 vs. 28 ± 15 %). Eine verlängerte initiale Lagerungszeit hat keinen Einfluss auf die
Ergebnisse (Serie II/III/IV).
Schlussfolgerung: Das Pathogen-Reduktionsverfahren führt zu einem gesteigerten Thrombozytenmetabolismus und
Zellaktivierung unabhängig von der initialen Lagerungszeit. Thrombozyten, resuspendiert in autologem Plasma, können
maximal bis Tag 5 gelagert werden.
63

Forschungsbericht 2007 – 2008
Summary
Evaluation of different preparations procedures of pathogen reduction technology (Mirasol®) treated platelets collected
by plateletpheresis
Pathogen reduction treatment (PRT) leads to an increase of platelet metabolism and activation independent of the
length of the initial rest times. PCs resuspended in autologous plasma should be stored at maximum up to day 5.
Abbildung 1: Serie IV (n = 6): T-PC - CD62p Expression (%) mit Abbildung 2: Serie IV (n = 6): C-PC - CD62p Expression (%)
und ohne TRAP Behandlung. * p < 0,05 mit und ohne TRAP Behandlung. * p < 0,05
Standort Mannheim
Arbeitsgruppe Pathogeninaktivierung
Projektleiter Dr. K. Janetzko
Mitarbeiter Frau K. Hinz, MTA
Kooperationen Dr. Susanne Marschner, CaridianBCT Biotechnologies, Lakewood, CO 80215, USA
Förderung 54.898,- €
Laufzeit des Projektes zwei Jahre
Weitere Informationen
Janetzko K, Hinz K, Marschner S, Goodrich R, Klüter H: Evaluation of different preparations procedures of pathogen
reduction technology (Mirasol®) treated platelets collected by plateletpheresis. Transfusion Medicine and Hemotherapy,
in press.
64
CD62p (%)
100
80
60
40
20
Test units CD62 versus CD62 with TRAP
* * *
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
PRT treated unit without TRAP
PRT treated unit with TRAP
*
days

Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Nicht-invasive quantitative Bestimmung der Resterythrozytenzahl in
Thrombozytenkonzentraten mittels Sensormessung
Hintergrund und Projektbeschreibung
Die Bestimmung der Hämolyserate stellt einen entscheidenden Qualitätskontrollparameter bei Erythrozytenkonzentraten
dar. Diese kann semiquantitativ makroskopisch anhand einer Hämolysefarbskala bestimmt werden, sofern das
Erythrozytenkonzentrat erneut verwendet werden soll. Die Bestimmung der Hämolyserate kann darüber hinaus z. Zt.
quantitativ nur unter Eröffnung und damit Vernichtung des Erythrozytenkonzentrates erfolgen. Die Arbeitsgruppe
PD. Dr. Meinke, Klinik für Dermatologie, Venerologie und Allerologie, Charité-Universitätsmedizin Berlin und Dr. Helfmann,
Laser- und Medizin-Technologie GmbH, Berlin, hat einen Sensor entwickelt, mit dem die nicht-invasive, quantitative
Bestimmung der Hämolyserate möglich ist.
Aktuell soll darüber hinaus die Resterythrozytenzahlmessung in Thrombozytenkonzentraten oder Plasma quantitativ
ohne Eröffnung des Blutproduktes möglich sein.
Die Messung erfolgt am Schlauchsegment des Blutproduktes. Das Segment wird mehrmals gestrippt, um den Segmentinhalt
mit dem gesamten Blutprodukt gut zu mischen. Der Schlauch wird anschließend in die Messvorrichtung
des Sensors gelegt. Der Sensor misst die Lichttransmission in diesem Segmentabschnitt bei vier Wellenlängen
(810 nm Infrarot, 680 nm Rot, 570 nm Grün und 424 nm Blau). Die Verwendung der unterschiedlichen Wellenlängen
ermöglicht das Herausrechnen von möglichen Störeinflüssen. Diese können z.B. durch unterschiedliche Schlauchgeometrien
oder -materialien der verschiedenen Lagerungsbeutel bedingt sein.
Aus den Messwerten bei den unterschiedlichen Wellenlängen wird nach einem definierten Algorithmus vom Sensor
direkt der Hämoglobingehalt von freiem und gebundenem Hb sowie die Erythrozytenzahl errechnet.
Gemeinsam mit unserer Arbeitsgruppe soll der Prototyp des Sensors zu einem in der Routine verwendbaren Messgerät
optimiert werden.
Hierzu sind aktuell folgende Versuchsreihen in Vorbereitung:
Bestimmung der Resterythrozytenzahl bei Standard-Thrombozytenkonzentraten (TK) (bisherige FACS-Messmethode
versus Sensor)
Bestimmung der Resterythrozytenzahl bei Thrombozytenkonzentraten gespikt mit unterschiedlichen Erythro zytenkonzentrationen
(bisherige FACS-Messmethode versus Sensor)
Bestimmung der Resterythrozytenzahl bei Thrombozytenkonzentraten mit unterschiedlichen Thrombozytenzahlen
(bisherige FACS-Messmethode versus Sensor)
65

Forschungsbericht 2007 – 2008
Abbildung 1: Darstellung des Messvorgangs mittels Sensor
Standort Mannheim
Arbeitsgruppe Qualitätskontrolle
Projektleiter Dr. K. Janetzko
Mitarbeiter K. Hinz, MTA
Kooperationen PD Dr. Meinke, Klinik für Dermatologie, Venerologie und Allerologie, Charité-Universitätsmedizin
Berlin
Dr. Helfmann, Laser-und Medizin-Technologie GmbH, Berlin,
Förderung –
Laufzeit des Projektes zwei Jahre
Weitere Informationen
k.janetzko@blutspende.de
66

Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Qualitätssicherung der derzeit empfohlenen
Rhesus-Typisierungsstrategie in den deutschsprachigen Ländern
Hintergrund und Projektbeschreibung
Die Arbeitsgruppe wurde von der Deutschen Gesellschaft für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie (DGTI) am
10. Februar 1998 mit der Führung des „Rhesus-Immunisierungs-Registers“ beauftragt. In diesem Register werden
Fälle von Anti-D-Immunisierungen bei D-positiven Personen gesammelt und molekularbiologisch aufgeklärt.
Klinische Probleme sind durch einige wenige RHD-Allele bedingt. Meist handelt es sich um Personen mit partial Doder
einigen wenigen seltenen weak D-Typen, die durch normales Antigen D immunisiert werden. Die D-Kategorie VI
(DVI) ist darunter die wichtigste. Deshalb werden monoklonale Anti-D-Antikörper für die Typisierung empfohlen, die
nicht mit DVI reagieren. Dieses Vorgehen ist seit 1996 unverändert in den deutschen Hämotherapie-Richtlinien implementiert.
Die Träger von DVI werden daher bewusst „falsch negativ“ typisiert, um eine Transfusion von D-positivem
Blut mit der wahrscheinlichen Folge einer Anti-D-Immunisierung zu verhindern.
Das Ziel ist es, einen Überblick über mögliche Probleme bei den derzeitigen Transfusionsverfahren zu bekommen,
und, falls erforderlich, Vorschläge für verbesserte Typisierungs- und Transfusionsstrategien zu erarbeiten.
Verteilung der molekularen
weak D-Typen in Transfusionsempfängern
mit anti-D-
Immunisierungen. Insgesamt
wurden 31 Beobachtungen
seit 1998 unter Patienten mit
weak D-Phänotypen berichtet.
Patienten mit den häufigen
weak D-Typen wiesen nur
Auto-anti-D auf (n = 24; weiß
und grau). Einzelne weak, D-
Typen, wie weak D-Typ 4.2,
11 und 15, die allesamt unter
Europäern selten sind, ließen
eine Allo-anti-D-Immunisierung
zu (n = 4; schwarz und
gestrichelt).
Wichtigste Ergebnisse
Im Gegensatz zu partial D wurde bisher keine Allo-Anti-D-Immunisierung bei weak D Typ 1, Typ 2 oder Typ 3 beobachtet.
Es ist aus klinischer Sicht überaus vorteilhaft, dass es sich um die häufigsten weak D-Allele handelt, die zusammen
annähernd 90 % aller weak-D-Typen in Deutschland ausmachen. Diese Patienten können mit D-positivem
Blut transfundiert werden. Damit wird der unnötige Einsatz von D-negativen Erythrozytenpräparaten bei diesen Patienten
vermieden. Mit diesem Vorgehen können bis zu 5 % aller D-negativen Erythrozytenpräparate eingespart und
völlig problemlos durch D-positive ersetzt werden, um Engpässe in der Versorgung mit D-negativen Blutpräparaten
zu mindern.
Bis Ende 2008 wurden 125 Proben in das Register aufgenommen und deren molekulare und serologische Abklärung
jeweils zeitnah auf einer speziellen Internetseite dokumentiert.
67

Forschungsbericht 2007 – 2008
Summary
Unlike partial D, no anti-D isoimmunisation has yet been reported for weak D type 1, 2 or 3. From a clinical perspective,
it is helpful that this involves the most common anti-D alleles, which make up almost 90 % of all weak
D types in Germany since these patients can receive D positive blood transfusions and do not require D negative
products. This procedure saves up to 5 % of all D negative erythrocyte products since they can perfectly well be
replaced by D positive products, thus avoiding bottlenecks in the supply of D negative blood products.
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Molekulare Diagnostik erythrozytärer Antigene
Projektleiter Prof. Dr. med. Willy A. Flegel
Mitarbeiter Dr. med. Ingeborg von Zabern
Anita Link, Hedwig Erne, Gabriele Braun (MTA)
Kooperationen Mitglieder der Sektion 5 Immunhämatologie/Gentechnik der DGTI
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Laufzeit des Projektes 01.02.1998 – 31.12.2008
Weitere Informationen
68
Flegel WA. How I manage donors and patients with a weak D phenotype. Curr Opin Hematol 13(2006)476-483
Flegel, W. A.: Genetik des Rhesus-Blutgruppensystems. Deutsches Ärzteblatt 104(2007)A651-A657
Internetseite des Rhesus Immunisierungsregister: http://www.uni-ulm.de/~wflegel/RH/RIR/

Qualitätssicherung D-negativer Erythrozyten-Präparate:
Erkennen von DEL-Phänotyp und chimärem Blut
Hintergrund und Projektbeschreibung
Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Mit genetischer Diagnostik für das RHD-Gen werden unter vermeintlich D-negativen Spendern etliche Blutspender
mit weak D- oder DEL-Bluten aufgedeckt, um diese Blute nur noch D-positiven Patienten zu transfundieren. Ohne
genetische Diagnostik werden immer wieder D-negative Transfusionsempfänger durch das Antigen D solcher Blutspenden
immunisiert. Bisher als D-negativ verkannte Spender, deren Erythrozyten einen D-/D+-Chimärismus aufweisen,
können ebenso sicher entdeckt werden. Ein lebenslanger Chimärismus kann bei Zwillingsschwangerschaften
mit gemeinsamem Blutkreislauf auftreten.
Jede Transfusion solcher Blutspenden kann eine Anti-D-Immunisierung bewirken, weil sie jeweils mehrere Milliliter
Erythrozyten mit völlig normalem D-positiven Phänotyp enthalten. Diese Beimengung von D-positivem Blut kann man
mit keiner serologischen Routinemethode sondern ausschließlich mit genetischer Diagnostik nachweisen. Jede Anti-
D-Immunisierung hat zumindest bei Frauen im gebärfähigen Alter und Mädchen eine erhebliche klinische Bedeutung.
Ein Morbus hämolyticus neonatorum durch Anti-D wäre im Fall D-positiver Schwangerschaften wahrscheinlich.
RHD-Gen positive Spender und RHD-Genvarianten (Allele) in den Jahren 2003 bis 2007. Die Anzahl der serologisch Antigen D-negativen
aber RHD-Gen-positiven Spender pro Jahr ist dargestellt (weiße Säulen). Daneben wird die Anzahl der unterschiedlichen RHD-
Allele (schraffiert) und die im jeweiligen Jahr neu entdeckten bisher unbekannten RHD-Allele (schwarz) gezeigt. Die Gesamtzahl der im
Jahr 2003 untersuchten D-negativen Spender belief sich auf 6.313 (9.690 in 2004, 10.202 in 2005; 8.287 in 2006 und 8.023 in 2007).
Flegel et al. Transfusion 2009, im Druck
69

Forschungsbericht 2007 – 2008
Wichtigste Ergebnisse
In dem Institut Ulm wird die RHD-Genotypisierung unter neuen D-negativen Blutspendern (ca. 750.000 Blutspenden
pro Jahr) als Routineverfahren seit Januar 2002 angewendet. Zunächst wurden die Spenden im Ulmer Einzugsgebiet
untersucht. Bereits nach einem halben Jahr konnten alle D-negativen Erstspender Baden-Württembergs in die Untersuchung
einbezogen werden. Seit Januar 2007 werden diese Spender Hessens ebenso zentral im Institut Ulm untersucht.
Bis einschließlich Dezember 2007 wurden 46.037 Spender molekular untersucht und 96 Spender identifiziert,
wovon 47 Spender dem D+ Spenderpool zugeordnet wurden. Dieses originär Ulmer Verfahren wird inzwischen in etlichen
Einrichtungen national und international eingesetzt und wurde dort wiederholt veröffentlicht. Ebenso wird das
Verfahren vom Institut Ulm als Service angeboten und eine solche Dienstleistung ist im Rahmen einer internationalen
Kooperation für 2009 angebahnt.
Ungefähr einer unter 500 scheinbar D-negativen Blutspendern weist ein RHD-Allel auf. Ungefähr einer unter 1.000
scheinbar D-negativen Blutspendern trägt einen DEL-Phänotype und wird permanent den D-positiven Blutspendern
zugeordnet.
Summary
At the blood centre in Ulm RHD genotyping of D negative first-time donors (750,000 donations/year) has been a routine
procedure since January 2002. About one in 500 seemingly D negative blood donors carry an RHD allele. About
one in 1,000 seemingly D negative donors express an DEL phenotype and should be permanently moved to the D
positive blood donor pool.
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Molekulare Diagnostik erythrozytärer Antigene
Projektleiter Prof. Dr. med. Willy A. Flegel
Mitarbeiter Dr. med. Ingeborg von Zabern
Marianne Lotsch (MTA)
alle für den Blutspender-Arbeitsplatz eingewiesenen medizinisch-technischen Assistenten
Kooperationen P. Bugert, C. Geisen, G. Holzberger, E. A. Scharberg, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg -
Hessen, Institute Mannheim, Frankfurt, Kassel und Baden-Baden
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Laufzeit des Projektes seit 01.01.2002 fortlaufend
Weitere Informationen
70
Flegel, W.A., von Zabern, I., Wagner, F.F.: Six years’ experience performing RHD genotyping to cvonfirm D– red
blood cell units in Germany for preventing anti-D immunizations. Transfusion 49(2009) im Druck
Flegel, W.A.: Blood group genotyping in Germany. Transfusion 47(2007)47S-53S
Flegel, W. A.: Genetik des Rhesus-Blutgruppensystems. Deutsches Ärzteblatt 104(2007)A651-A657
Internetseite: http://www.uni-ulm.de/~wflegel/RH/

Qualitätssicherung in der Blutversorgung
Sicherheit und Effizienz bei ambulanter Therapie mit leukozyten -
depletierten Erythrozytenkonzentraten
Hintergrund und Projektbeschreibung
Die chronische Erythrozytentransfusionstherapie ist ein wichtiger Teil des Gesamtmanagements vieler hämatologischer
und onkologischer Erkrankungen. Viele der bisherigen Daten zu möglichen Nebenwirkungen wie Allosensibilisierung
oder Transmission viraler Erkrankungen stammen aus der Zeit vor Einführung der allgemeinen
Leukozytendepletion und sensitiverer Methoden der Virusdiagnostik. Wir initiierten daher eine unizentrische Beobachtungsstudie,
um die Effizienz und Sicherheit der ambulanten Transfusionstherapie bei erwachsenen Patienten,
insbesondere in der Langzeittransfusionstherapie zu reevaluieren. In diesem Rahmen wurden Patientencharakteristika
sowie die Art und Anzahl der transfundierten Präparate erfasst. Zusätzlich wurden die Ferritin-Level, die erythrozy
tären allo-Antikörper, der CMV-/HBV-/HCV-/HIV-Status zu Beginn der Aufnahme der ambulanten Trans fusionstherapie
und im Verlauf mindestens halbjährlich kontrolliert. Die Therapieeffizienz wurde mittels der Überprüfung der
Vitalparameter und des Blutbildes vor und nach der Transfusion sowie durch die Anamnese der klinischen Symptome
überprüft.
Erythrozytäre allo-AK bei Erstvorstellung
und im Verlauf
der chron. EK-Transfusionstherapie
Anzahl
Anzahl
4
3
2
1
0
3
2
1
0
Erythrozytäre Allo-Ak Erstvorstellung
Anti-Lu(a) Anti-Kp(a) Anti-E Anti-Fy(a) Anti-Jk(a) Anti-Cw Anti-c
Erythrozytäre
allo-Antikörper
bei Erstvorstellung
im Verlauf
Erythrozytäre Alloimmunisierung unter Transfusionstherapie
Anti-Kp(a) Anti-E Anti-C Anti-Lu(a) Anti-Wr(a) Anti-D
Gesamt
(n = 247)
7 (2.8 %)
6 (2.4 %)
Ohne Vortransfusion
(n = 66)
4 (6.1 %)
----
Hämatologische
Grunderkrankung
(n = 164)
6/7 (86 %)
6/6 (100%)
71

Forschungsbericht 2007 – 2008
Wichtigste Ergebnisse
Es wurden insgesamt 247 Patienten (147 Männer/100 Frauen) mit einem medianen Alter von 65 Jahren (17 bis
95 Jahre) untersucht. Die Grunderkrankungen verteilten sich auf hämatopoietische Erkrankungen (n = 164), solide
Tumore (n = 55), Eisenmangelanämien (n =14), renale Anämien (n = 8) and andere (n = 10). 48 Patienten waren
stammzelltransplantiert, davon waren 23 Patienten autolog, 25 allogen sowie drei Patienten autolog und allogen
transplantiert worden. Die mediane Dauer der ambulanten Transfusionstherapie lag bei 256 Tagen (1 bis 4954 Tage).
Bei 82 Patienten lag die Dauer der regelmäßigen Transfusionstherapie bei mindestens einem Jahr. Diese Patienten erhielten
im Median sechs Erythrozytenkonzentrate. Das Maximum lag bei 213 Erythrozytenkonzentraten. Bei der ersten
ambulanten Transfusion waren 118 Patienten CMV-IgG positiv, 74 Patienten Anti-HBs positiv, 29 Patienten
Anti-HBc-IgG positiv, vier Patienten HBV-PCR positive, zwei Patienten HCV-positiv and kein Patient HIV-positiv. Sieben
Patienten (vier ohne eine Transfusionsvorgeschichte, sechs mit hämatologischer Grunderkrankung) hatten erythrozytäre
allo-Antikörper. Während der chronischen Transfusionstherapie wurde bei vier Patienten (3 %) nach einem
Median von 48 nicht CMV-getesteten Blutprodukten eine CMV-Serokonversion beobachtet. Bei einem der Patienten
trat eine CMV- und HCV-Serokonversion nach allo-PBSCT auf. Bei sechs Patienten (2,4 %) zeigten sich neue erythrozytäre
Allo-Antikörper (2 x Anti-Kp(a), Anti-Lu(a), Anti-Wr(a), 2 x Anti-C, Anti-D, 2 x Anti-E). Interessanterweise
handelte es sich dabei ausschließlich um Patienten mit hämatologischer Grunderkrankung. Insgesamt wurden nur
sechs Transfusionsreaktionen nach Erythrozytenkonzentratgabe beobachtet, keine davon war schwerwiegend. Bei
den 82 Patienten, die länger als ein Jahr regelmäßig transfundiert wurden zeigte sich ein medianer Ferritinanstieg von
666 ng/ml. Es gab keinen Hinweis auf einen Abfall der klinischen Effizienz, berechnet als die Differenz zwischen post-
Transfusions-Hb und prä-Transfusions-Hb. Zusammenfassend bestätigen die erhobenen Daten die ambulante Transfusionstherapie,
auch in der Langzeittherapie, als ein sicheres und effizientes Therapieregime. Die
Alloimmunisierungsrate ist im Vergleich zu den Daten aus der Zeit vor Einführung der Leukozytendepletion geringer.
Eine HBV-/HCV-/HIV-Testung vor der ersten Transfusion ist zur Dokumentation des Status vor Beginn einer chronischen
Hämotherapie zu empfehlen.
Unter chronischer Erythrozytenkonzentrattransfusion ist regelmäßig das Vorliegen einer Hämosiderose zu überprüfen,
um gegebenenfalls die Chelattherapie einleiten zu können. Die Bestätigung der erhobenen Daten an einem größeren
Patientenkollektiv ist geplant.
Ein Teilprojekt der Arbeitsgruppe ist die Teilnahme an der „multizentrischen offenen Studie zur Wirksamkeit und Verträglichkeit
von oral verabreichtem ICL670 bei Patienten, die an einem Myelodysplastischen Syndrom mit niedrigem
oder INT-1 Risiko erkrankt sind und eine transfusionsbedingte Eisenüberladung aufweisen“. Die Studie befasst sich
mit der Untersuchung der Sicherheit und Effizienz der oralen Eisenchelattherapie (Exjade) bei MDS-Patienten.
Safety of outpatient long term red blood cell (RBC) transfusions with leukocyte depleted RBC units
Introduction: Long-term transfusion support is an important part in overall management of many haematological and
oncology disorders. Studies addressing adverse events like allosensitisation or transmission of infectious disease
have been performed in cohorts of long-term transfusion dependent patients. However, many of these studies do no
longer reflect current practices since they have been performed before adoption of a universal leukoreduction and
before implementation of measures for further reduction of transfusion transmitted infections. Therefore we performed
an observational single centre study to reassess safety and efficacy of transfusion therapy in adult outpatients,
many of which received with long term transfusion therapy.
Methods: Analysis of patient (pt) characteristics and transfused units of red blood cell (RBC) and platelet units. Ferritin-levels,
antibodies and CMV-/HBV-/HCV-/HIV-status were checked every six months. Therapy efficacy was evaluated
by blood count and vital parameters before and after transfusion as well as by questions about clinical symptoms
addressed to the patients (pts). Results: characteristics of the examined 247 pts.: 147 male, 100 female; median age:
65 years (17 to 95 years); underlying diseases: haematopoietic diseases (n = 164), solid tumors (n = 55), iron deficiency
anemia (n = 14), renal anemia (n = 8) and other (n = 10). 48 pts had undergone stem cell transplantation (SCT),
23 pts autologous SCT, 25 pts allogenic SCT and 3 pts both. Median duration of transfusion therapy: 256 days
(1 to 4954 days). In 82 pts chronic transfusion continued for at least one year. Median number of transfused RBC
units: 6 (0 to 213). At first outpatient transfusion 118 pts were CMV-IgG positive, 74 pts Anti-HBs positive,
29 pts Anti-HBc-IgG positive, four pts HBV-PCR positive, two pts HCV-positive and one pt HIV-positive; seven pts
(four with out transfusion history, six with haematologic diseases) had erythocyte allo-antibodies. During transfusion
therapy CMV-seroconversion was observed in four pts (3 %) after a median of 48 not CMV-tested blood products.
72

Qualitätssicherung in der Blutversorgung
One patient CMV- and HCV-seroconverted after allo-PBSCT. In six pts (2.4 %) with hematologic disorders erythrocyte
allo-antibodies were newly diagnosed (2x Anti-Kp(a), Anti-Lu(a), Anti-Wr(a), 2 x Anti-C, Anti-D, 2 x Anti-E).
Six transfusion reactions were observed, none was severe. In the 82 pts with RBC transfusions > 1 year a median
ferritin increase of 666 ng/ml was observed. There was no hint for a decrease of clinical efficiency of RBC transfusions
during observation interval.
Conclusions: Our data show that outpatient transfusion therapy is safe and efficient. Alloimmunization rate was
lower compared to earlier reports before universal leukoreduction. We recommend a routine HBV-/HCV-/HIV-testing
before first transfusion. Ferritin should be checked routinely at least every six months.
As a subproject we attend on a mulitcentre study about efficiency and safety of ICL670 (Exjade) in MDS-patients.
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Klinische Hämotherapie
Projektleiter Dr. med. Britta Höchsmann
Mitarbeiter Stephanie Runzheimer (Doktorandin), Dr. med. Astrid Marx-Hoffmann, Dr. med. Markus Wiesneth,
Prof. Dr. med. Hubert Schrezenmeier
Kooperationen Prof. W. A. Flegel, Institut Ulm, Dr. U. Mayr-Wohlfahrt, Institut Ulm
Förderung Novartis (für Teilprojekt Eisenchelator-Studie)
Laufzeit des Projektes 2007 – 2009
Weitere Informationen
Heimpel H., Höchsmann B., Wiesneth M.: Therapie mit Eythrozytenkonzentraten bei chronischer Anämie; Hämotherapie,
Ausgabe 7: 32-43 (2006)
Runzheimer S, Platow S, Wiesneth M, Mayr-Wohlfahrt U, Flegel WA, Schrezenmeier H, Höchsmann B: Safety of
outpatient long term red blood cell (RBC) transfusions with leukocyte depeted RBC units; Onkologie, 31 (4):193
(2008)
Runzheimer S, Platow S, Wiesneth M, Mayr-Wohlfahrt U, Flegel WA, Schrezenmeier H, Höchsmann: Alloimmunization
and CMV-Transmission in outpatient long term transfusion therapy with leukocyte depleted RBC units;
Transfusion Medicine & Hemotherapy, 35 (1): 28-29 (2008)
73

Forschungsbericht 2007 – 2008
74

2 Stammzellen und Zelltherapie
A
B
CD8
CD8
0.03
0.65
Stammzellen und Zelltherapie
vor Transfer 10 Tage 28 Tage 3 Monate 4 Monate 6 Monate
8.46 27.1
22.7
25.9
13.5
1.93
MHC Multimer
6.22 16.8 18.2
8.04
IFN-γ
75

Forschungsbericht 2007 – 2008
Homing und Mobilisation unreifer hämatopoietischer Zellen
Hintergrund und Projektbeschreibung
Die Beschreibung der molekularen Mechanismen des Knochenmarkhomings unreifer hämatopoietischer Zellen nach
Transplantation sowie der Mobilisation unreifer hämatopoietischer Zellen aus dem Knochenmark in das Peripherblut
nach Behandlung mit geeigneten Pharmaka sind Voraussetzung für die Verbesserung dieser derzeit noch sehr ineffizienten,
kritischen Prozesse bei der klinischen Stammzelltransplantation. Derartige Untersuchungen, bevorzugt im
isogenen oder xenogenen Mausmodell, aber auch in Kollaboration mit der AG Kiem in Seattle, W A, im Primatenmodell,
sind der thematische Schwerpunkt der AG Dr. Bönig. Derzeit arbeiten wir über die Rolle der Signalverarbeitung
von Gi-Protein-Signalen in hämatopoietischen Zellen, die Rolle von Integrin-Matrix Interaktionen, sowie kritische Eigenschaften
der Knochenmarksmatrix bei der Bildung der hämatopoietischen Nische.
Wichtigste Ergebnisse
Differenzielle Effekte der alpha6-Integrin Blockade für das Homing verschiedener Stammzellpopulationen: Abhängig
von der differenziellen Expression von alpha6-Integrin auf Knochenmarks-, Peripherblut- und Nabelschnurblut-
CD34+ Zellen von Menschen und nicht-humanen Primaten verbessert die Blockade von alpha6-Integrin die Effizienz
des Knochenmarkhomings im Xenotransplantationsmodell um mehr als 50 % (Bonig et al. Stem Cells Dev. 2008).
Mobilisation unreifer hämatopoietischer Zellen mit dem CXCR4-Antagonisten AMD3100: Eine klinisch relevante Mobilisation
unreifer hämatopoietischer Zellen kann durch Dauerinfusion von AMD3100 erreicht werden. Die Eigenschaften
der so mobilisierten Zellen wurden detailliert beschrieben (Bonig et al. Exp Hematol, in press), insbesondere
wurde erstmals, im Widerspruch zur bisherigen Lehrmeinung, demonstriert, dass die Mobilisation aus Zellpools erfolgt,
welche im Vergleich zur restlichen Knochenmarkspopulation eine minimale Zellzyklusaktivität besitzt. Weiterhin
wurde die additiv-synergistische Mobilisationsaktivität von anti-funktionellen anti-alpha4-Antikörpern bzw. genetischem
Knock-out von alpha4 mit AMD3100 demonstriert, was zeigt, dass unabhängige molekulare Mechanismen für
die Mobilisationseffekte verantwortlich sind (Bonig et al. Stem Cells, in press).
Homing and mobilisation of immature hematopoietic cells
Two critical components of hematopoietic stem cell transplantation, i.e. mobilisation of donor cells and donor cell homing
to bone marrow after transplantation, are mechanistically poorly understood, which constitutes a significant impediment
to the rational development of manipulation strategies to enhance the poor efficiency of these processes.
In our ongoing quest to delineate these mechanisms, we are currently studying roles of Gi protein signal processing
in hematopoietic cells, roles of integrin-mediated cell-matrix interactions, and microenvironmental cues to the
functional integrity of the hematopoietic niche. Thus we recently described species- and cell source-dependent differential
roles of the alpha6-integrin in bone marrow homing, and studied in detail mobilisation with the functional
CXCR4 antagonist AMD3100, including properties of immature cells mobilised in this fashion.
Standort DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen, Institut Frankfurt
Arbeitsgruppe Dr. med. Bönig
Projektleiter Dr. med. Bönig
Mitarbeiter Dipl. biol. D. Chudziak, Dipl. biol. K. Dauber, S. Orban, Zahnärztin, Dr. phil. nat. G. Spohn
Kooperationen Prof. Dr. sci. med. Th. Papayannopoulou, University of Washington, Seattle, WA, Prof. R.J. Lefkowitz,
Duke University, Durham, NC, Prof. Dr. med. Y.M. Kim, University of Southern California, USCH, Los
Angeles, CA, Prof. Dr. med. T. Lehrnbecher, JWGU Frankfurt, Prof. Dr. med. H.P. Kiem, Fred-Hutchinson-Cancer-Research
Center, Seattle, WA, P.D. Dr. med. R. Henschler, DRK-BSD Frankfurt
Förderung Deutsche Krebshilfe e.V.
Laufzeit des Projektes bis 09/2011
Weitere Informationen
h.boenig@blutspende.de
76

Regulation des Zirkulationsverhaltens Mesenchymaler
Stammzellen (MSCs)
Hintergrund und Projektbeschreibung
Stammzellen und Zelltherapie
Mesenchymale Stammzellen (MSCs) können aus einer Reihe von Geweben isoliert werden, und hervorragend in Kultur
vermehrt werden. Sie stellen daher eine therapeutisch interessante Quelle für zelluläre Therapien dar. Obwohl
MSCs in Kultur als fest adhärente Zellschicht mit einer Fibroblasten gleichen Morphologie wachsen, zeigen sie dennoch
auch nach intravenöser Gabe (Transfusion) wichtige therapeutische Effekte, z.B. immunmodulatorische Wirkungen
oder eine Verbesserung des Angehens transplantierter blutbildender Stammzellen.
Wir haben uns daher der Aufgabe gestellt, die Mechanismen genauer zu erforschen, mit denen MSCs mit der Gefäßwand
interagieren, mit denen sie ein derzeit noch nicht genauer verstandenes gewebstypisches „Homing“ -Verhalten
erreichen könnten.
Als therapeutisch relevante Zielgewebe fokussiert das Projekt auf
(i) solide Tumoren, zur Modulation der Tumorgefäßbildung (Tumorangiogenese) und
(ii) sekundäre lymphatische Organe, zur Modulation des Immunsystems.
„Homing“ (= Austreten aus dem Blutstrom) von in Kultur expandierten
humanen Mesenchymalen Stammzellen (MSCs, markiert durch Pfeile),
die vor Infusion mit einem roten Fluoreszenzfarbstoff markiert wurden,
in die Leber im Tiermodell 24 Stunden nach Transplantation. Blau
markiert sind Zellkerne, grün Endothelzellen (= Auskleidung der Blutgefäße).
Fluoreszenz-mikroskopische Aufnahme, Vergrößerung
400 fach.
Wichtigste Ergebnisse
Leber
Blutgefäß
In den Jahren 2005 und 2006 fanden wir bereits, dass MSCs über den P-Selektin-vermittelten Weg auf Blutgefäßwänden
sowohl in vitro und in vivo rollen können, sowie das VLA-4 Adhäsionsmolekül verwenden können, das entscheidend
das „Homing“ transplantierter Stammzellen vermittelt. Nunmehr gelang es zu zeigen, dass Chemokine die
Aktivierung des VLA-4 Rezeptors verstärken können. Hierbei können MSCs auf ein überraschend breites Repertoire
an Chemokinrezeptoren zurückgreifen.
Mögliche Defekte bestehen hingegen in der Aktivierung sogenannter „beta2-Integrine“ und von L-Selektin. Beide Rezeptorwege
sind für einen Eintritt von Lymphozyten und antigenpräsentierenden (z.B. dendritischen) Zellen in Entzündungsareale
wie auch in sekundäre lymphatische Organe essentiell. Mögliche Defekte auf diesem Aktivierungsweg
werden nun weiter aufgeklärt. Ein wichtiger möglicher Wiederaustrittsweg von MSCs aus Lymphknoten, Stimulation
über den Sphingosin-1-Phosphat-Rezeptoren, kann jedoch in MSCs sehr gut aktiviert werden und wird über die Suppression
der Aktivierung der kleinen GTPase Rho aktiviert.
77

Forschungsbericht 2007 – 2008
Summary
Mesenchymal Stem Cells (MSCs) are found in many tissues, can be reliably isolated from a number of sources and
expanded in culture with ease. Therefore, they are an attractive cellular therapy product. This project focuses on the
elucidation of adhesion receptors which govern the entry and exit of MSCs into target tissues. We have charcterised
the ability of MSCs to roll and adhere on endothelial cells using P-selectin and VLA-4 receptor pathways and, more
recently, the ability of a plethora of chemokines to activate VLA-4 mediated adhesion of MSCs under shear stress
conditions. Other pathways including beta2 Integrins and L-selectin are potentially disabled, and the underlying defects
need to be furher investigated.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Stammzellbiologie
Projektleiter PD Dr. med. Reinhard Henschler, Dr. med. Rudolf Richter
Mitarbeiter Dr. med. Erika Deak, Dr. phil. nat. Brigitte Rüster, Melanie Giesen, Victoria Lang
Kooperationen PD Dr. D. Dilloo, Universität Düsseldorf, Prof. Dr. J. Seißler, Ludwig-Maximilians-Universität, München,
Prof. Dr. J. Priller, Universitätsklinikum Charité Berlin.
Förderung Bundesministerium für Bildung und Forschung (BMBF),
Förderschwerpunkt „Zellbasierte Regenerative Medizin“ (01GN0525)
Laufzeit des Projektes 01.09.2005 – 31.03.2012
Weitere Informationen
78
Ruster, B., Gottig, S., Ludwig, R.J., Bistrian, R., Muller, S., Seifried, E., Gille, J., Henschler, R. (2006) Mesenchymal
stem cells (MSCs) display coordinated rolling and adhesion behavior on endothelial cells. Blood 108:3938-3944.
P unescu V, Deak E, Herman D, Siska IR, T nasie G, Bunu C, Anghel S, Tatu CA, Oprea TI, Henschler R, Rüster B,
Bistrian R, Seifried E. In vitro differentiation of human mesenchymal stem cells to epithelial lineage. J Cell Mol
Med. 2007 May-Jun;11(3):502-8.
Jaganathan BG, Ruester B, Dressel L, Stein S, Grez M, Seifried E, Henschler R. Rho inhibition induces migration
of mesenchymal stromal cells. Stem Cells. 2007 Aug;25(8):1966-74. Epub 2007 May 17.
http://www.gesundheitsforschung-bmbf.de/de/1195.php

Erythrozyten aus Stamm- und Vorläuferzellen
Hintergrund und Projektbeschreibung
Stammzellen und Zelltherapie
Die ex vivo Expansion von Stammzellen zu Erythrozyten bietet die Möglichkeit, möglichst selektiv erythropoietische
Zellen in Kultur herzustellen. Solche Zellen könnten angewendet werden (1) bei Patienten mit Unverträglichkeiten
gegen praktisch alle zur Verfügung stehenden Erythrozytenkonzentrate aufgrund von irregulären Antikörpern gegen
hochfrequente Antigene, oder als (2) möglichst universelle Quelle zum Beispiel für Blutgruppe 0, Rhesus (D) negative
Erythrozyten. Stamm- und undifferenzierte Vorläuferzellen werden aus dem Knochenmark oder dem peripheren Blut
isoliert und in vitro in Gegenwart hämatopoietischer Wachstumsfaktoren gezielt zur Proliferation und Differenzierung
in die rote Blutzellreihe stimuliert (Abb. 1).
Abb. 1: Schema der Differenzierung erythrozytärer Zellen aus hämatopoietischen
Stammzellen. Die Reifung von hämatopoietischen
Stammzellen zu Erythrozyten erfolgt über verschiedene Differenzierungs-Zwischenstufen:
HS = pluripotente hämatopoietische Stammzelle;
LV = Lymphopoietische Vorläuferzelle; MV = Myelopoietische
Vorläuferzelle; GMV = Granulopoietische/Monozytopoietische
Vorläuferzelle; EV = Eosinophile Vorläuferzelle; MEV = Megakaryozytäre/Erythroide
Vorläuferzelle; N = Normoblast; E = Erythrozyt.
Wichtigste Ergebnisse
In den Jahren 2007 und 2008 wurde ein in vivo Modell etabliert um zu untersuchen, inwieweit in Kultur erzeugte erythrozytäre
Vorläuferzellen in einem anämischen Organismus in der Lage sein könnten, funktionierende Sauerstoffträger
zu bilden. Hierfür wurde das bis 2006 entwickelte auf humanen Zellen basierende Kulturprotokoll auf murine
Knochenmarkstammzellen übertragen. Verschiedene Reifungsstufen erythrozytärer Vorläuferzellen wurden durchflusszytometrisch
hinsichtlich der Expression potentiell relevanter Adhäsionsmoleküle untersucht. Die Funktion eines
dieser Rezeptoren, des von allen Integrinen auf diesen Vorläuferzellen am stärksen exprimierten VLA-4 Rezeptors,
wurde in vitro im Durchflusskammer-Modell unter Scherdruckbedingungen validiert. Im Mausmodell in anämischen
w/wv-Mäusen und in normalen Mäusen zeigte sich die Fähigkeit sowohl undifferenzierter wie auch relativ weit ausdifferenzierter
erythrozytärer Vorläuferzellen, sehr selektiv in blutbildende Gewebe wie Knochenkark, Milz und Leber
einzuwandern.
Summary
Ex vivo expansion of stem cells to erythrocytes provides an approach to selectively generate erythropoietic cells in
culture. Such cells could be of value (i) for patients with incompatibilities due to the presence of antibodies against
high frequency antigens on red cells, or (ii) as a universal source for e.g. Blood Group 0, Rhesus (D) negative red
cells. Stem and undifferentiated progenitor cells are isolated from bone marrow or peripheral blood and culture-expanded
into a majority of erythropoietic cells in the presence of a combination of hematopoietic growth factors including
Erythropoietin.
LV
GMV
HS
EV
MV
N
E
79

Forschungsbericht 2007 – 2008
Abb. 2: Durchflusszytometrische Analyse der Induktion des erythrozytären Reifungsmarkers Glycophorin A während der Differenzierung
von primitiven hämatopoietischen Vorläuferzellen in Gegenwart Erythropoiese stimulierender Wachstumsfaktoren. Für vier Tage vorkultivierte
unreife CD34+ Vorläuferzellen aus dem peripheren Blut von G-CSF stimulierten Spendern exprimieren den Transferrin-Rezeptor
CD71 hoch, jedoch kaum Glycophorin A. Mit zunehmendem Grad der Differenzierung zu Erythrozyten in Differenzierungsmedium wird
Glycophorin A exprimiert, die Oberflächenexpression von CD71 nimmt ab.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Stammzellbiologie
Projektleiter PD Dr. med. Reinhard Henschler
Mitarbeiter Dipl. Biotechnol. Christine Ströbele, Dipl. Biol. Christian Hintze
Kooperationen Prof. Dr. J. Hescheler, Institut für Neurophysiologie, Universität zu Köln
Förderung Industriemittel
Laufzeit des Projektes 01.10.2005 – 31.08.2008
Weitere Informationen
80
CD71
Unreife Vorläuferzelle
75,2%
17,1%
Tag 4
2,1%
5,7%
Glycophorin A
erythrozytärer Reifungsmarker
CD71
Unreife Vorläuferzelle
Tag 19
42,9% 10,6%
7,0%
39,6%
Glycophorin A
erythrozytärer Reifungsmarker
Reifungsmarker
Hintze C., Rüster B., Ströbele C., Göttig S., Seifried E. Henschler R.. Adhesion and Homing Function of Erythrocytic
Progenitor Cells as Prerequisite for Their Use as Erythrocytic Substitution Therapy. Transfus Med Hemother
2008;35(suppl 1):19:31

Homing von Stamm- und Vorläuferzellen in Tumorgewebe
Hintergrund und Projektbeschreibung
Stammzellen und Zelltherapie
Stamm- und Vorläuferzellen aus dem Knochenmark leisten einen wesentlichen Beitrag zur Entstehung von Gefäßen
während der Tumorbildung. Ohne ihre Einwanderung in Tumorgewebe ist die Gefäßneubildung von Tumoren nur eingeschränkt
oder gar nicht möglich. Es wurde gezeigt, dass durch Transplantation von Stamm- und Vorläuferzellen,
die mit einem „Suicide“ (=Selbstmord)-Gen ausgerüstet sind, das Tumorwachstum im Tiermodell negativ beeinflusst
werden kann.
Kleine GTPasen der Rho- und Rap-Familie sind als intrazelluläre Signalmoleküle insbesondere an der Aktivierung der
Zelladhäsion und Migration beteiligt. In dem vorliegenden Projekt soll die Rolle solcher kleiner GTPasen in blutbildenden
Vorläuferzellen und in Endothelzellen für die Tumorgefäßbildung aufgeklärt werden. Für die Untersuchungen werden
Mausstämme verwendet, denen Gene sogenannter Rac- und Rap-GTPasen fehlen. In vitro-Untersuchungen mit
den genetisch veränderten Vorläufer- und Endothelzellen dienen zur Klärung verantwortlicher Adhäsionsmoleküle und
zur Identifizierung von Steuerungsmechanismen für ein verbessertes „Homing“ in Tumore und/oder die Mobilisierung
aus dem blutbildenden Knochenmark. Ziel ist die Entwicklung einer Zelltherapie zur Suppression des Tumorwachstums
durch in Kultur expandierte hämatopoietische Vorläuferzellen.
Einbau von aus dem Knochenmark
stammenden blutbildenden
Zellen in einen subkutanen
Tumor, dargestellt durch Anfärbung
aus dem Knochenmark
stammender Zellen mittels des
Transgens Grün Fluoreszierendes
Protein (GFP) in grün. Blutgefäße
sind durch Anfärbung
des CD31 Proteins in rot sichtbar
gemacht. Vergrößerung
400-fach.
Wichtigste Ergebnisse
Es wurde aufgeklärt, dass die untersuchten Vorläuferzellen mit einer wesentlich anderen Dynamik und Kinetik in Tumoren
einwandern als in blutbildende Gewebe, wenn ihnen die Rac1-GTPase fehlt. Dabei ist vor allem der durch das
Chemokin Stromal Derived Factor (SDF)-1 vermittelte Adhäsions- und Migrationsmechanismus betroffen. Im Falle der
Abwesenheit des Rac2-Gens tritt dagegen eine Verbesserung der Einwanderung in Tumorgewebe gegenüber Wildtyp-Zellen
ein.
Die Steuerung der Einwanderung sowohl blutbildender, wie aber auch endothelialer Vorläuferzellen wird weiterhin
auch durch Modulation der Rap1A GTPase beeinflusst werden. Auch ist die Gefäßneubildung direkt über die Aktivierbarkeit
der GTPasen Rap1A und B abhängig.
81

Forschungsbericht 2007 – 2008
Summary
The contribution of bone marrow-derived progenitor cells (BM-PCs) to vessel growth in malignant and ischemic tissues
is increasingly being recognised. Consolidating evidence suggests that BM-PCs complement neovascularisation
by in situ-differentiation into endothelial cells of newly shaped vessels and/or by releasing angiogenic growth
factors at tumour sites. Pertinent to these data, we have recently observed that BM-PCs also localise to metastatic
sites of cancer. As BM-PCs preferentially home to tumour sites in different experimental tumour models, they may
constitute suitable cellular carriers for gene therapy to target tumour growth.
As important molecular switches of a wide range of signal transduction pathways, Rho GTPases (with particular importance
of Rac1 and Rac2) have been demonstrated to regulate the homing efficiency of hematopoietic stem/progenitor
cells (HPCs). At the same time, Rho GTPase engagement in both endothelial cells (ECs) and in circulating
populations coordinates adhesion and transendothelial migration. Hence, manipulation of Rho GTPase activities in
BM-PCs and host ECs is likely to affect the ability of BM-PCs to home to angiogenic sites and to modulate neovascularisation.
We therefore hypothesise that the activity of distinct Rho GTPases in BM-PCs and host ECs will decisively
control the recruitment efficiency of BM-PCs to local tumour and metastatic sites.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Stammzellbiologie
Projektleiter PD Dr. med. Reinhard Henschler, gemeinsam mit Prof. Dr. J. Gille, Zentrum der Dermatologie und Venerologie
Mitarbeiter Dipl. Biol. Stephan Göttig
Dr. rer. nat. A. Jochheim-Richter
Olga Nilmaer
Olga Röder
Christine Zimmermann
Kooperationen Prof. Dr. Jens Gille, Zentrum der Dermatologie und Venerologie, Klinikum der J. W. Goethe-Universität
Frankfurt (gemeinsame Projektleitung)
Prof. Dr. Stefanie Dimmeler, Dr. E. Chavakis, Medizinische Klinik III, Zentrum der Inneren Medizin, Klinikum
der J. W. Goethe –Universität Frankfurt
Prof. Dr. Thomas Wieland, Institut für Pharmakologie, Universität Mannheim.
PD Dr. Jürgen Scheele, Universitätsklinikum Freiburg (Brsg.)
Förderung Deutsche Forschungsgemeinschaft
Laufzeit des Projektes 01.7.2005 – 30.12.2009
Weitere Informationen
82
Gille J, Heidenreich R, Pinter A, Schmitz J, Boehme B, Hicklin DJ, Henschler R, Breier G. Simultaneous blockade
of VEGFR-1 and VEGFR-2 activation is necessary to efficiently inhibit experimental melanoma growth and metastasis
formation. Int J Cancer 120:1899-1908 (2007).
Carmona G, Göttig S, Orlandi A, Scheele J, Bäuerle T, Jugold M, Kiessling F, Henschler R, Zeiher AM, Dimmeler
S, Chavakis E. Role of the small GTPase Rap1 for integrin activity regulation in endothelial cells and angiogenesis.
Blood. 2009 Jan 8;113(2):488-97. Epub 2008 Sep 19.
http://www.transregio23.de

Leukämieentwicklung im präklinischen Modell
Hintergrund und Projektbeschreibung
Stammzellen und Zelltherapie
Leukämien sind sehr schwere Erkrankungen und noch immer nur in einem Teil der Erkrankten heilbar. Als Angriffspunkte
für die Therapie kommt derzeit neben der Polychemotherapie die Stammzelltransplantation zum Einsatz. Es
bestehen darüber hinaus aussichtsreiche Ansätze für weitere zelluläre Immuntherapien.
Wissenslücken bestehen vor allem in der Charakterisierung der sog. „Leukämischen Stammzellen“, d.h. denjenigen
Zellen, die die Fortentwicklung einer Leukämie vermitteln. Die Arbeitsgruppe beschäftigte sich in den Jahren 2007
und 2008 im Rahmen zweier drittmittelgeförderter Forschungsprojekte mit dieser Frage.
(1) Innerhalb der von der Dr. Mildred Scheel-Stiftung der Deutschen Krebshilfe geförderten Forschergruppe „Pathologische
Genprodukte und ihre Wirkmechanismen“ erfolgte die zentrale Bearbeitung der präklinischen Modelle zur
Leukämieentwicklung in Mäusen.
(2) Innerhalb des von der Deutschen José Carreras-Leukämiestiftung geförderten Projektes „Die Stammzellen der
Leukämie“ wurden in Zusammenarbeit mit der Medizinischen Klinik II am Klinikum der Johann Wolfgang Goethe-
Universität Frankfurt (Dr. M. Ruthardt) für ausgesuchte leukämogene Onkogene sog. Leukämie-initiierende Zellen
durch Oberflächenmarker charakterisiert.
Das Projekt möchte einen Beitrag zur Etablierung geeigneter präklinischer Modelle der am Standort Frankfurt untersuchten
und therapierten Leukämiezelltypen leisten. Diese dienen im Forschungsverbund und universitätsübergreifend
in internationalen Kooperationen vor allem der Erarbeitung neuer Therapieansätze unter Einbeziehung
sogenannter „Biologicals“. Neue Erkenntnisse weisen auf eine hierarchische Ordnung von verschiedenen undifferenzierten
Zellpopulationen in Leukämien, möglicherweise auch generell in Tumoren, hin. Da für die Heilung von Leukämien
eine dauerhafte Eliminierung der leukämischen Stammzellen – als Subpopulation der Gesamtheit der
leukämischen Zellen eines Organismus – von grundlegender Bedeutung sein dürfte, sollen hier die sogenannten Leukämie-initiierende
Zellen (L-IC) näher charakterisiert werden. Es werden neue Erkenntnisse zum Phänotyp von L-IC
und der Steuerung ihres Überlebens und malignen Wachstums erwartet. Diese Daten sollen die Voraussetzungen für
die Entwicklung von Therapieverfahren zur Bekämpfung von Leukämien in Patienten verbessern, indem sie die Entwicklung
von präferentiell auf die Bekämpfung von Leukämie-Stammzellen ausgerichteten Therapien ermöglichen.
83

Forschungsbericht 2007 – 2008
Kandidaten-Zellpopulationen für leukämische Stammzellen in dieser Studie: LT-HSC (Langzeit-aktive Hämatopoietische Stammzellen)
und ST-HSC (Kurzzeit-aktive Hämatopoetische Stammzellen) mit den Phänotypen Linienmarker (Lin)-Sca1+c-kit+flk2- bzw. Lin-Sca1+ckit+flk2-.
Weiterhin werden Multipotente Progenitorzellen (MPP), „Common Myeloid Progenitors“ (CMP) und Granuloyzten-Makrophagen-Progenitorzellen
(GMP) als mögliche Ursprungszellen induzierter Leukämien untersucht. Weitere Abkürzungen: MEP,
Myeloerythrozytäre Progenitorzellen, CLP, „Common Lymphoid Progenitor“, Pro-DC/-T/-B/-NK Pro-dendritische/-T/-B/-NK Zellen.
Nach Passegue et al. 2001
Wichtigste Ergebnisse
Es wurden erstmalig aus einer Hand in einem Mausmodell sowohl myeloische und lymphatische akute Leukämien erzeugt.
Überraschend konnte neben den Versuchen mit den etablierten onkogenen Fusionsprodukten Bcr-Abl, PML-
RAR , DEK-CAN, AML1-ETO, MLL-AF4) auch durch reziproke Translokationsprodukte (Onkogene: Abl-Bcr, AF4-MLL)
Leukämien erzeugt werden. Leukämie-initiierende Zellen trugen ein Oberflächenmarker-Profil von sehr primitiven hämatopoietischen
Zellen, sog. „Langzeit-repopulierenden hämatopoietischen Stammzellen“. Im Gegesatz hierzu konnten
durch Transduktion und Transplantation sog, „Kurzzeit-repopulierender“ Stammzellen“ mit zwei leukämogenen
Onkogenen nur eingeschränkt Leukämien generiert werden. Dies spricht für die Natur der akuten Leukämie als
Stammzellerkrankung. Es liegen Genexpressionsprofile der aufgereinigten Leukämie-initiierenden Zellen vor, die zur
Identifizierung weiterer Zelloberflächenmarker und in der Leukämieentstehung beteiligter Signalwege ausgewertet
werden.
Summary
To date, common standards for the modelling of leukemia in mice have not been set. Rather, individual research
groups have generally adapted murine models to their needs. Moreover, both transgenic and “transduction-transplantation”
models have been developed; their results remain difficult to compare. The current project aims at defining
standards for reproducible leukemia induction, and at defining cell surface markers for leukemic stem cells.
Leukemia arose form a very small population of very primitive progenitors, carrying a cell surface marker phenotype
Lineage (negative), Stem Cell Antigen (positive), c-kit (positive), flk2 (negative).
84
Erythro- I
ThromboGranulozytenzytenzyten Lin-Sca1 + c-kit + flk2- Lin-Sca1 + c-kit + flk2- Lin-Sca1 + c-kit + flk2 +
Lin-Sca1 + c-kit + flk2 +
Makro- dendritische T-Lympho- NK- B-Lymphophagen
Zellen zyten Zellen zyten

Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Stammzellbiologie
Projektleiter PD Dr. med. Reinhard Henschler
Stammzellen und Zelltherapie
Mitarbeiter Dr. phil. nat. Brigitte Rüster (wissenschaftliche Mitarbeiterin) Sabrina Boehme (MTA)
Kooperationen PD Dr. M. Ruthardt, Medizinische Klinik II Hämatologie, Onkologie, Rheumatologie, Zentrum der
Inneren Medizin, Klinikum der J. W. Goethe-Universität Frankfurt (gemeinsame Projektleitung).
Dr. Markus Rojewski, Institut für Klinische Transfusionsmedizin, DRK-Blutspendedienst, Ulm
Prof. Dr. Rolf Marschalek, Zentrum der Pharmazie und Biochemie, J. W. Goethe –Universität
Dr. Elena Puccetti, Institut für Molekularbiologie, Philipps-Universität Marburg
Dr. Manuel Grez, Chemotherapeutisches Forschungsinstitut Georg Speyer-Haus Frankfurt
Prof. Dr. M.L. Hansmann, Institut für Pathologie, Klinikum der J.W.Goethe-Universität Frankfurt
Förderung Dr.-Mildred-Scheel-Stiftung der Deutschen Krebshilfe e.V
Deutsche José Carreras Leukämie-Stiftung e.V.
Laufzeit des Projektes 01.09.2007 – 31.10.2011
Weitere Informationen
Zheng X, Seshire A, Ruster B, Bug G, Beissert T, Puccetti E, Hoelzer D, Henschler R, Ruthardt M. Arsenic but not
all-trans retinoic acid overcomes the aberrant stem cell capacity of PML/RARalpha-positive leukemic stem cells.
Haematologica. 92:323-331 (2007)
Bistrian R, Dorn A, Möbest D, Rüster B, Ludwig R, Scheele J, Seifried E, Martin H, Henschler R. Shear Stress-
Mediated Adhesion of Acute Myeloid Leukemia (AML) and KG-1 Cells to Endothelial Cells Involves Functional
P-selectin. Stem Cells Dev. 2008 Dec 23. [Epub ahead of print]
Pramanik K, Trüpschuch S, Greiner A, Ruthardt M, Henschler R, Müller AM. The aorta-gonad-mesonephros-derived
stroma cell line DAS104-4 induces differentiation of leukemic cells. Leuk Res. 2008 May;32(5):781-9.
Bug G, Schwarz K, Schoch C, Kampfmann M, Henschler R, Hoelzer D, Ottmann OG, Ruthardt M. Effect of histone
deacetylase inhibitor valproic acid on progenitor cells of acute myeloid leukemia. Haematologica. 2007
Apr;92(4):542-5.
Zheng X, Seshire A, Rüster B, Bug G, Beissert T, Puccetti E, Hoelzer D, Henschler R, Ruthardt M. Arsenic but not
all-trans retinoic acid overcomes the aberrant stem cell capacity of PML/RARalpha-positive leukemic stem cells.
Haematologica. 2007 Mar;92(3):323-31.
http://www.blutspende.de/forschung_entwicklung/wissenschaftliche_
arbeitsgruppen/fs_stammzellenleukaemie.php
http://www.blutspende.de/forschung_entwicklung/wissenschaftliche_arbeitsgruppen/fs_mausmodelle_
leukaemie.php
85

Forschungsbericht 2007 – 2008
Langzeit-Sicherheitsbeobachtung im Rahmen der Gewinnung allo gener
Blutstammzellen (alloPBSC) von gesunden Fremdspendern nach
Vorbehandlung mit rhuG-CSF (Filgrastim oder Lenograstim)
Hintergrund und Projektbeschreibung
Die Transplantation hämatopoietischer Stammzellen (HSC) gesunder, HLA-kompatibler Fremdspender ist ein etabliertes
Heilverfahren für eine Vielzahl maligner, aber auch vermehrt nicht-maligner Erkrankungen. Die mit Abstand häufigste
Anwendung erfolgt bei Patienten mit Leukämien. Die Stammzellen werden heute meist nach Vorbehandlung
der Spender mit Wachstumsfaktoren (G-CSF) mittels maschineller Stammzellapherese aus dem Venenblut abgesammelt.
Alternativ kann die klassische Knochenmark-Entnahme in Vollnarkose durchgeführt werden. Dabei wird Knochenmarksblut
aus dem Beckenknochen des Spenders abgesaugt.
Die Auswahl der Entnahmetechnik mittels Apherese oder Knochenmark-Punktion erfolgt primär aufgrund der Bedürfnisse
des Patienten. Spenderpräferenz und Spendertauglichkeit werden ebenfalls bei dieser Entscheidung berücksichtigt.
Um eine maschinelle Absammlung von blutbildenden Stammzellen aus dem Venenblut in ausreichender Zahl überhaupt
zu ermöglichen, ist zunächst eine Mobilisierung dieser Zellen aus dem Knochenmark notwendig. Hierzu werden
zwar seit Jahren rekombinante humane Granulozyten-Kolonie-stimulierende Faktoren (rhuG-CSF) bei Patienten
eingesetzt. Für gesunde Fremdspender liegen allerdings weiterhin unzureichende Langzeit-Sicherheitsdaten vor. Die
Hersteller der G-CSF-Präparate und §§ 8 bzw. 9 des Transfusionsgesetzes (TFG) sehen die Durchführung der Mobilisierung
und Entnahme peripherer HSC im Rahmen von Aufklärung, Einwilligung, Vorbehandlungsplan, ärztlicher Kontrolle
und Vorbehandlungsprotokoll inklusive Meldung unerwünschter Ereignisse vor.
Zur systematischen Erfassung potenzieller Langzeit-Effekte einer solchen Stammzellspende werden seit 2002 über
190 Fremdspender aus der am Institut Frankfurt angesiedelten deutschen Stammzellspenderdatei Rhein-Main und
Nord beobachtet. Alle Spender werden voruntersucht. Weitere Untersuchungen erfolgen vor, während und nach der
Apherese sowie einen Monat, ein, drei sowie fünf Jahre nach der Spende nachuntersucht. Der Prüfplan inklusive
Spenderinformation und Einwilligungserklärung ist von der Ethikkommission des Klinikums der Johann Wolfgang
Goethe-Universität Frankfurt am Main geprüft und freigegeben worden.
Wichtigste Ergebnisse
In Übereinstimmung mit der aktuellen Literatur sind bislang bei keinem der über 190 in die Studie eingeschlossenen
und bis zu fünf Jahren nachuntersuchten Stammzell-Spender schwerwiegende unerwünschte Wirkungen (UAW) aufgetreten,
so dass wir gesunde Fremdspender vor Stammzell-Apherese zwischenzeitlich mit guten eigenen Daten beraten
können. Ein endgültiges Studienresultat für alle freiwilligen Stammzellspender, die dann jeweils über fünf Jahre
nachuntersucht sein werden, liegt Ende 2012 vor. Für die über 800 Stammzell-Apheresen, die wir hier in Frankfurt pro
Jahr durchführen, können aber bisherige Trends und Zwischenergebnisse schon heute direkt in die tägliche ärztliche
Beratung neuer Stammzellspender einfließen. Eine Folgestudie ist in Planung und wird die Erfahrungen und Zwischenresultate
dieser Studie berücksichtigen.
Summary
In accordance with current literature, this long-term safety study revealed no serious adverse events in more than
190 healthy volunteer haematopoietic stem cell (HSC) donors followed for up to five years after stem cell apheresis
to date. The preliminary study data guide us, when we give advice to our volunteer HSC donors. Five-year follow-up
data for all 190 HSC donors will be available in late 2012. But even today, trends and interim analyses of this study
serve as information in the daily counselling with annually more than 800 HSC donors here in the Frankfurt institute.
A successor to this study is currently beeing designed and will consider results of the interim analysis of this study
86

Anzahl [n]
80
70
60
50
40
30
20
Standort Frankfurt
Knochenmark- und periphere Stammzell-Entnahmen bei
Spendern aus der Frankfurter Datei 2001-2008
kumulativ 2001-2008:
PBSC-E: 245
KM-E: 66
� Entnahmen: 311
Beginn der
Studie
Arbeitsgruppe Stammzell-Transplantation
5
14
19
10
0
0
6 8
4
7
7
8
12 14
2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008
Jahr
Stammzellen und Zelltherapie
Projektleiter Dr. med. Markus M. Müller und PD Dr. med. Torsten Tonn
Mitarbeiter Dr. med. Heike Bialleck, Dr. med. Jörg Schüttrumpf,
Dr. med. Susanne Bräuninger, Dr. med. Halvard Bönig
Kooperationen PD Dr. med. Hans Martin (Medizinische Klinik II – KMT des Klinikums der Johann Wolfgang Goethe-
Universität Frankfurt am Main)
Laufzeit des Projektes 2002 – 2012
40
58
46
PBSC-E
KM-E
�: 6 13 18 26 47 66 58 77
PBSC-E: Periphere Blutstammzell-Entnahmen mittels Apherese [n]; KM-E: Knochenmark-Entnahmen aus dem Beckenkamm [n]
63
87

Forschungsbericht 2007 – 2008
Adoptive Immuntherapie der chronischen CMV-Infektion nach allogener
Knochenmark- oder peripherer Blutstammzelltransplantation:
eine Phase I/II-Studie
Hintergrund und Projektbeschreibung
Die CMV-assoziierte Erkrankung stellt eine der häufigsten und bedrohlichsten Komplikationen nach allogener
Stammzelltransplantation dar. CMV-seropositive Transplantatempfänger und/oder Patienten, die ein Transplantat von
einem seropositiven Spender erhalten, entwickeln in 60 % eine CMV-Infektion nach allogener Stammzelltransplantation
und wiederum 40 – 50 % dieser Patienten eine CMV-Erkrankung. Die Letalität der manifesten CMV-Erkrankung,
insbesondere der interstitiellen Pneumonie, beträgt trotz einer kombinierten Therapie mit Ganciclovir und CMV-Hyperimmunglobulin
50 – 70 %. Aufgrund dieser hohen Mortalität wurden Interventionsstrategien zur Vermeidung der
symptomatischen CMV-Infektion entwickelt. Im Rahmen dieser Phase I/II Studie soll die Toxizität aber auch die Effektivität
einer adoptiven Immuntherapie mit Streptamer-selektionierten, CMV-spezifischen CD8+ T-Zellen evaluiert werden.
Patienten nach allogener Knochenmark- oder peripherer Blutstammzell-Transplantation, die nach CMV-Antigen-
Nachweis auf eine 14-tägige antivirale Therapie mit Ganciclovir nicht ansprechen und einen CMV-positiven Spender
haben, sollen mit CMV-CD8+ T-Zellen behandelt werden. Die Gewinnung der CMV-spezifischen CD8+ T-Zellen wird
bei erstem Auftreten einer Virämie eingeleitet. Nach dem Immuntransfer sollen die Studienteilnehmer im Rahmen der
KMT-Nachsorge auf ihre CMV-spezifische Immunrekonstitution hin untersucht werden, um Risikofaktoren für die
späte CMV-Erkrankung und das Ansprechen auf die Immuntherapie zu dokumentieren. Die Studie wird von der Studiengruppe
„klinische Zelltherapie“ der DGHO inhaltlich unterstützt und so haben sich bereits mehr als acht große
Transplantationszentren in Deutschland der Studie angeschlossen. Die Abteilung Zellseparation des Instituts Frankfurt
hat die Isolation der CMV-spezifischen Zellen im klinischen Maßstab etabliert und übernimmt diese Aufgabe zentral
für alle an der Studie beteiligten Zentren.
Wichtigste Ergebnisse
88
Anreicherung von CMV-spezifischen T-Lymphozyten mittels Immunmagnetverfahren
(Clinimacs) und Streptamer-Technologie in der Reinraumanlage
des Instituts Frankfurt.
Es konnte gezeigt werden, dass sich mit Hilfe der Streptamer-Technologie CMV-spezifische T-Lymphozyten im klinischen
Maßstab vom jeweiligen Stammzellspender hochrein isolieren lassen. Bisher im Rahmen der Studie behandelte
Patienten, die nach einer Transplantation an einer vital bedrohlichen CMV-Infektion litten, zeigten nach
Verabreichung kleinster Dosierungen CMV-spezifischer Spenderlymphozyten eine Rekonstitution der zellulären Immunantwort
gegen das Zytomegalievirus. Die Rekonstitution der CMV-spezifischen T-Zellantwort ging in den Patienten
mit einem drastischen Abfall der CMV-Virämie einher.

A
B
CD8
CD8
0.03
0.65
Stammzellen und Zelltherapie
Monitoren CMV pp65417-426 HLA-A*0701-spezifischer CD3 + CD8 + T-Zellen.
PBMCs eines Patienten nach adaptiver T-Zell Therapie wurden mittels anti-CD3 Pacific Blue, anti-CD8 APC-Alexa750, anti CD19-PE-
Alexa 610, CMV pp65417-426 HLA-B*0701 Streptamer-PE und Propidium Iodide (PI) gefärbt (Abbildung A). Lebende periphere CD3+ T
Lymphozyten werden mittels Gatings identifiziert und die Frequenz CMV-spezifischer CD19/PIneg CD3+ T Lymphozyten vor und nach
verschiedenen Zeitpunkten des adaptiven T-Zell Transfer wird gezeigt, um den Erfolg der T-Zell Therapie zu überwachen.
Die Funktionalität der CMV pp65-spezifischen T-Zellen wurde mittels Provokations-Assay und anschließender intrazellulärer Zytokinfärbung
gezeigt (Abbildung B). PBMCs wurden mit CMV pp65417-426 HLA-B*0701 Peptid in Gegenwart von anti-CD28 und anti-CD49d für
sechs Stunden bei 37° C und 5 % CO2 stimuliert und anschließend mit anti-CD3 Pacific Blue, anti-CD8 PE und anti-IFN� FITC intrazellulär
gefärbt. Tote Zellen wurden mittels EMA gefärbt und aus der Analyse der IFNg-produzierenden T-Zellen ausgeschlossen (nicht gezeigt).
Die Frequenz funktioneller IFN�-produzierender lebender CD3 + T-Lymphozyten vor und nach verschiedenen Zeitpunkten des
adaptiven T-Zell Transfer wird gezeigt (Abbildung B).
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Somatische Zelltherapie
Projektleiter PD Dr. med. Torsten Tonn
Mitarbeiter Dr. Marcus Odendahl, Dipl. Ing. biotech. Nicola Schüly, Nadine Sorg (TA), Dipl. Ing. Biotech. Katrin
Führer (studentische Hilfskraft)
Kooperationen Prof. Dr. Hermann Einsele, Medizinische Klinik, Universitätsklinikum Würzburg
Prof. Dr. Dirk Busch, Med. Mikrobiologie, Technische Universität München
Dr. Lothar Germeroth, Stage Pharmaceuticals, Göttingen
Studiengruppe klinische Zelltherapie der deutschen Gesellschaft für Hämatologie Onkologie (DGHO)
Förderung Intern/Stage Pharmaceuticals
Laufzeit des Projekts Seit 2002
Weitere Informationen
vor Transfer 10 Tage 28 Tage 3 Monate 4 Monate 6 Monate
8.46 27.1
22.7
25.9
13.5
1.93
MHC Multimer
6.22 16.8 18.2
8.04
IFN-γ
Tonn T. Zelltherapie – von der Entwicklung zur Routine. Hämotherapie 2004;3:R1-R8.
Schrezenmaier H, Müller MM, Reinhard P, Wiesneth M, Tonn T, Seifried E. Zelltherapie mit Granulozyten, Lmyphozyten
und natürlichen Killerzellen. Hämotherapie 2006;6:4-19.
Michael Knabel, Tobias J. Franz, Matthias Schiemann, Anna Wulf, Brigitte Villmow, Burkhard Schmidt, Helga
Bernhard, Hermann Wagner and Dirk H. Busch. Nature Medicine 8, 631 – 637 (2002)
89

Forschungsbericht 2007 – 2008
Zielgerichtete Killerzellen für die zelluläre Krebs-Immuntherapie
(RETARGET-IT)
Hintergrund und Projektbeschreibung
Ziel dieses präklinischen Forschungsvorhabens ist die Entwicklung und Evaluierung humaner natürlicher Killerzellen
(NK-Zellen) mit Spezifität für die ErbB2/HER2 Rezeptor-Tyrosinkinase als neue zelluläre Immuntherapie für die Behandlung
des Medulloblastoms und anderer ErbB2 exprimierender Tumoren mit höherer Inzidenz, wie Ovarial- und
Prostatakarzinomen, sowie Mammakarzinomen, die nicht auf die Behandlung mit Herceptin ansprechen. Durch
Transduktion mit einem unter GMP-Bedingungen produzierten retroviralen Vektor werden genmodifizierte Varianten
der klinisch einsetzbaren humanen NK-Zelllinie NK-92 erzeugt, die einen optimierten und humanisierten, ErbB2-spezifischen
Antigenrezeptor tragen. Diese zielgerichteten NK-92 Zellen werden molekular und funktionell charakterisiert.
Ihre antitumorale Aktivität, Zielzell-Spezifität und mögliche unspezifische Toxizitäten werden in in vitro Experimenten
und in Medulloblastom Xenograft-Modellen sowie ErbB2-transgenen Mausmodellen in vivo bestimmt. Definierte, für
die Entwicklung hin zu klinischen Anwendungen geeignete Zellklone werden ausgewählt. Ein GMP-gemäßes Protokoll
für die Zell-Expansion wird erarbeitet, und die erforderliche Herstellungserlaubnis für zielgerichtete NK-92 wird
beantragt und eingesetzt zur Herstellung einer Master-Zellbank und einer Working-Zellbank. Im Rahmen des Verbundvorhabens
sollen präklinische Daten zu ErbB2-spezifischen NK-92 Zellen in einer Form erarbeitet werden, die
anschließend eine behördliche Genehmigung ihres Einsatzes in nachfolgenden klinischen Studien ermöglicht.
2. Forschungsgegenstand und Ziele
Übergeordnetes Ziel des Verbundvorhabens ist die präklinische Entwicklung und Evaluierung humaner NK-Zellen mit
Spezifität für die ErbB2/HER2 Rezeptor-Tyrosinkinase als neue zelluläre Immuntherapie für die Behandlung des Medulloblastoms
(MB) und anderer ErbB2 exprimierender Tumoren. Die hauptsächlichen Ziele des Vorhabens sind im
Einzelnen
(1) die Generierung klinisch einsetzbarer retroviraler Vektoren zur Expression eines humanisierten chimären Antigenrezeptors
(CAR) mit Spezifität für ErbB2 und die Etablierung eines GMP-gemäßen Protokolls für die Transduktion humaner
NK-92 NK-Zellen,
(2) die Untersuchung der Tumorlokalisierung und antitumoralen Aktivität unter GMP-Bedingungen produzierter zielgerichteter
NK-92 Zellen gegen MB und andere ErbB2 exprimierende Tumoren sowie die Bestimmung möglicher Nebenwirkungstoxizitäten,
(3) die Etablierung eines GMP-gemäßen Protokolls für die Expansion zielgerichteter NK-92 Zellen und der Erhalt der
hierzu notwendigen Herstellungserlaubnis, und
(4) die Herstellung einer Master-Zellbank und Working-Zellbank solcher ErbB2-spezifischer NK-92 Zellen. Im Rahmen
des Verbundvorhabens sollen präklinische Daten zu ErbB2-spezifischen NK-92 Zellen in einer Form erarbeitet werden,
die anschließend eine behördliche Genehmigung ihres Einsatzes in nachfolgenden klinischen Studien ermöglicht.
Die beabsichtigte Entwicklung von NK-Zellen mit Spezifität für Medulloblastome und andere ErbB2 exprimierende
Tumoren basiert auf einer direkten Verbindung einer Antikörperdomäne zur Erkennung von Tumorzellen mit NK-Zellen,
dem für die Antikörper-abhängige, zellvermittelte Zytotoxizität (ADCC) wichtigsten Zelltyp. Dadurch könnten
mögliche, für ein schlechtes Ansprechen auf die Therapie mit monoklonalen Antikörpern mitverantwortliche ADCC-
Defekte in Tumorpatienten umgangen werden. Hierbei werden im Rahmen des Vorhabens vor allem genmodifizierte
Derivate der humanen NK-92 Zelllinie als Effektorzellen eingesetzt.
90

Stammzellen und Zelltherapie
Dargestellt ist eine durch Expression von chimären Antigenrezeptoren (3, ScFv) (links) auf eine Krebszelle (rechts) zielgerichtete
NK-Zelle. Das tumorspezifische Antikörperfragment (3, ScFv) erkennt und bindet das Tumorantigen (4, z.B. ErbB2) und führt dann über
die mit dem Antikörperfragment verbundene Signaltransduktionskette (5) zur Auslösung der lytischen Aktivität der NK-Zelle. An deren
Ende steht die Verdauung der Krebszelle durch die von den NK-Zellen freigesetzten Enzyme Perforin und Granzyme (6)
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Somatische Zelltherapie
Projektleiter PD Dr. med. Torsten Tonn, Prof. Dr. Winfried Wels
Mitarbeiter Dr. rer. nat. Marcus Odendahl, Dipl. Ing. biotech. Nicola Schüly, Nadine Sorg (TA)
Kooperationen Prof. Dr. Klingemann, Tufts New England Medical Center, Boston (USA)
Priv. Doz. Dr. U. Koehl, Päd. Hämato-Onkologie, Universität Frankfurt/Main
Dr. Manuel Grez, Prof. Dr. Wels, beide: Chemotherapeutisches Forschungsinstitut Georg-Speyer
Haus, Frankfurt am Main
Förderung Förderinitiative des BMBF „Innovative Therapieverfahren auf molekularer und zellulärer Basis“, Verbundprojekt
„Retarget-It“, Förderkennzeichen: 01GU0707; Beginn 10/2008
Weitere Informationen
Tonn T, Seifried E. Natural Killer Cells for the treatment of Malignancies. Transfusion Medicine and Hematotherapy.
2006; 33: 144-9
Romanski A, Bug G, Becker S, Kampfmann M,Seifried E, Hoelzer D, Oliver G. Ottmann, Tonn T. Multiple mechanisms
of resistance to NK cell-mediated cytotoxicity are not operable in Acute Lymphoblastic Leukemia. Exp Hematology
2005: 3(3):344-52
Koehl U, Sorensen J, Esser R, Zimmermann S, Gruttner HP, Tonn T, Seidl C, Seifried E, Klingebiel T, Schwabe D.
IL-2 activated NK cell immunotherapy of three children after haploidentical stem cell transplantation. Blood Cells
Mol Dis. 2004:33(3):261-6.
Uherek C, Tonn T, Uherek B, Becker S, Schnierle B, Klingemann HG, Wels W. Retargeting of natural killer-cell cytolytic
activity to ErbB2-expressing cancer cells results in efficient and selective tumor cell destruction. Blood.
(2002):100(4):1265-73.
91

Forschungsbericht 2007 – 2008
Antwort von hämatopoietischen Stamm- und Progenitorzellen auf die
Bestrahlung mit hochenergetischen schweren Ionen
Hintergrund und Projektbeschreibung
Die besondere biologische Wirksamkeit von Schwerionenstrahlung beruht auf ihren charakteristischen physikalischen
Eigenschaften. Insbesondere das invertierte Dosisprofil erlaubt bei der Anwendung von schweren Ionen in der Krebstherapie
eine hohe Dosisdeposition in tief liegenden Tumoren, während die Dosisdeposition im gesunden Gewebe
entsprechend niedrig ist und dieses weitgehend geschont wird. Die Abschätzung des Gesundheitsrisikos ionisierender
Strahlung basiert auf experimentellen Studien, in denen chromosomale Veränderungen untersucht werden. Als
Untersuchungsobjekte dienen vor allem periphere Lymphozyten, bei denen in Abhängigkeit von der eingesetzten
Dosis und der Qualität der Strahlung eine Population geschädigter Zellen durch Apoptose abstirbt (Meijer et al.,
1998), um die genetische Stabilität zu sichern (Di Leonardo et al., 1994, Linke et al. 1997, Nasonova et al. 2001). Andererseits
wird das Auftreten klonaler Aberrationen in Lymphozyten von Spendern berichtet, die viele Jahre nach
Strahlenexposition untersucht wurden (Littlefield et al., 1997, Amenomori et al., 1985). Die hier vorgestellten Ergebnisse
befassen sich mit dem Auftreten von Apoptose in hämatopoietischen Stamm- und Progenitorzellen (HSPCs)
nach Bestrahlung mit Kohlenstoffionen im Vergleich zu herkömmlicher Röntgenstrahlung.
Abbildung 1: Morphologie von apoptotischen CD34+ HSPCs im TUNEL assay. Die Kerne apoptotischer Zellen zeigen eine grüne Fluoreszenz
(unten) während die gegengefärbten Kerne blau erscheinen (oben). Manche Zellen zeigten eine normale Morphologie (a), während
andere typische apoptotische Merkmale zeigten, zum Beispiel das Einstülpen der Membranen (b), DNA-Kondensation (c),
Formation apoptotischer Körper (d) oder zum Teil abgebaute Kerne mit schwachem Signal (e).
Material und Methoden
Um das Auftreten von Apoptose zu untersuchen, wurden HSPCs aus Apheresaten von gesunden, G-CSF mobilisierten
Spendern angereichert. Nach der Anreicherung von C34+ HSPCs über immunmagnetische Säulen (Miltenyi Biotech)
wurden die Zellen mit Röntgen oder Kohlenstoffionen bestrahlt (Gesellschaft für Schwerionenforschung).
Hierbei wurden für die Bestrahlung mit Kohlenstoffionen Energien verwendet, welche die Bestrahlung im Tumorbett
(100 MeV/u, Linear Energie Transfer = LET 29 keV/µm) sowie direkt im Tumor (114-158keV/µm, 60-85keV/µm) simulieren.
Die Kultivierung erfolgte im Suspensionsmedien unter Zugabe entsprechender Wachstumsfaktoren. Die Apoptoserate
wurde durch Markierung von Einzelstrang- oder Doppelstrangbrüchen in den bestrahlten Zellen
(TUNEL-Assay) bestimmt (mikroskopische Auswertung).
92

Stammzellen und Zelltherapie
Abbildung 2: Kinetik strahleninduzierter Apoptose in CD34+ angereicherten HSPCs nach der Bestrahlung mit Röntgen (n = 1-4, links),
29 keV/µm Kohlenstoffionen (n = 1-3, Mitte) oder 60-85 keV/µm Kohlenstoffionen (n = 1, rechts). Zu den angegebenen Zeitpunkten
wurde die Frequenz der apoptotischen Zellen (apoptotische Index) mit Hilfe des TUNEL assays in Kombination mit morphologischen
Merkmalen bestimmt.
Ergebnisse
In dieser Arbeit wurde das Auftreten von Apoptose in HSPCs nach der Bestrahlung mit Röntgen und Kohlenstoffionen
untersucht. Die typischen morphologischen Merkmale von apoptotischen Zellen wurden für alle Strahlenqualitäten
beobachtet und sind in Abbildung 1 dargestellt. Die Frequenz der apoptotischen Zellen (apoptotischer Index)
nach Bestrahlung wurde mit Hilfe des TUNEL Assays bestimmt und ist in Abbildung 2 dargestellt. Zu Beginn der Kultivierung
zeigten in den unbestrahlten Zellen nur ca. 2 % der Population apoptotische Merkmale. Nach der Bestrahlung
mit Röntgen nahm die Frequenz der apoptotischen Zellen in Abhängigkeit der Dosis und der Kultivierungszeit
zu. Bereits 6 h nach Bestrahlung traten morphologische Veränderungen in Kombination mit positiven TUNEL Signalen
auf. 24 h nach der Bestrahlung konnten 20 % apoptotische Zellen nachgewiesen werden. Zu frühen Zeitpunkten
(12 h) waren die Kohlenstoffionen effektiver (Relative biologische Wirksamkeit 1.4 – 1.7), zu späteren Zeitpunkten war
die Frequenz apoptotischer Zellen vergleichbar und es konnten keine Unterschiede zwischen den Strahlenqualitäten
bestimmt werden. Das Auftreten von Apoptose wurde zu ausgewählten Dosis- und Zeitpunkten im Durchflusszytometer
bestimmt (Daten nicht gezeigt) und konnte die Ergebnisse der mikroskopischen Auswertung bestätigen.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Somatische Zelltherapie
Projektleiter PD Dr. med. Torsten Tonn
Mitarbeiter Dipl. Ing. (FH) Daniela Becker
Kooperationen Gesellschaft für Schwerionenforschung (Abteilung Biophysik) in Darmstadt, Dr. Claudia Fournier /
Dr. Sylvia Ritter / Prof. Dr. Marco Durante (Abteilungsleiter) Fachbereich der Pharmakologie,
Johann Wolfgang Goethe-Universität Frankfurt am Main, Prof. Dr. Rolf Marschalek
Förderung Forschungsprojekt Nr. 178 der Gesellschaft für Schwerionenforschung
Laufzeit des Projektes 01.02.2007 – 31.01.2010
93

Forschungsbericht 2007 – 2008
Doppel-blinde, randomisierte, kontrollierte Studie zur Erfassung des
Effektes einer intrakoronaren Applikation von Knochenmark-
Progenitorzellen auf die koronare Flussreserve bei Patienten mit
akutem Koronarsyndrom „REPAIR-AMI ACS“.
Hintergrund und Projektbeschreibung
Das akute Koronarsyndrom subsummiert einen fließenden Übergang von der instabilen Angina pectoris über den
Nicht-ST-Hebungsinfarkt zum akuten ST-Hebungsinfarkt. In der genannten Reihenfolge kommt es zu progredienter
Ischämie, begleitet von typischer Angina pectoris und/oder Dyspnoe, und Ischämie-bedingt zum Untergang von
Myokardgewebe mit der Freisetzung myokardialer Marker wie Troponin T. Experimentelle Daten zeigen, dass durch
die Applikation von Knochenmark-Progenitorzellen Neovaskularisation von ischämischem Gewebe induziert werden
kann. Experimentelle Studien im Hinterlauf-Ischämiemodell konnten darüber hinaus nachweisen, dass sich der Blutfluss
in ischämischen Arealen nach einer Progenitorzelltherapie substantiell verbessert. In der TOPCARE-AMI Studie
konnte vier Monate nach Progenitorzelltherapie eine Normalisierung der zuvor reduzierten CFR im Infarktgefäß auf
das Niveau des Referenzgefäßes beobachtet werden. Diese Normalisierung der CFR ist im Vergleich zu historischen
Kontrollen ein ungewöhnlicher Befund, der darauf hindeuten könnte, dass die applizierten Progenitorzellen tatsächlich
an einer Neovaskularisation beteiligt sind. Vergleichbare Befunde wurden in der doppelblinden, Placebo-kontrollierten
Doppler-Substudie der REPAIR-AMI Studie erhoben. Auch hier war die Gabe von Progenitorzellen bei
Patienten nach akutem, reperfundiertem Myokardinfarkt mit einer Normalisierung der CFR in der mit Progenitorzellen
behandelten Koronararterie verbunden. Schließlich führte die intrakoronare Infusion von zirkulierenden, endothelialen
Progenitorzellen nach Wiedereröffnung eines chronisch verschlossenen Koronargefäßes zu einer signifikant verbesserten
endothelialen Funktion, einhergehend mit einer verbesserten linksventrikulären Pumpfunktion im Vergleich zur
Placebo-Behandlung. Zusammenfassend könnten diese Daten auf einen möglichen Wirkmechanismus der Progenitorzelltherapie
hinweisen, d.h. eine Verbesserung des geschädigten Endothels mit konsekutiver Verbesserung der endothelialen
Funktion, sowie eine verbesserte Neovaskularisation im Stammzell-behandelten myokardialen Areal.
Im Rahmen der hier geplanten kombinierten Phase I/II Studie (Repair-AMI ACS) soll untersucht werden, ob eine intrakoronare
Applikation autologer, aus dem Knochenmark gewonnener Progenitorzellen zu einer Verbesserung der koronaren
Flussreserve bei Patienten mit NSTEMI führt. Die Studie wird als 2-zentrische (Kardiologien des
Universitätsklinikums Frankfurt und Leipzig), doppelblinde, randomisierte, Placebo-kontrollierte klinische Studie der
Phase I/II an Patienten mit NSTEMI durchgeführt. Es ist geplant, 100 Patienten einzuschließen. Die Studienmedikation
besteht aus autologen Knochenmarkprogenitorzellen und wird durch den DRK-Blutspendedienst (Institut Frankfurt)
hergestellt. Als primärer Endpunkt der Studie wurde die Zunahme der koronaren Flussreserve im Infarktgefäß
zwischen Baseline und Follow Up (vier Monate) definiert.
Wichtigste Ergebnisse
Die Ergebnisse der Studie können erst nach einer Entblindung durch das Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie
ausgewertet werden.
94

Flowchart der REPAIR-AMI ACS Studie
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Abtlg. Zellseparation und somatische Zelltherapie
Stammzellen und Zelltherapie
Projektleiter PD Dr. med. Torsten Tonn (Zellprozessierung); Prof. Dr. A. Zeiher (Leiter der klinischen Studie, PI)
Mitarbeiter PD Dr. Birgit Assmus, Dipl. biotech Nicola Schüly, Cristiane Vetter, Nadine Sorg
Kooperationen Prof. Dr. S. Dimmeler / Prof. Dr. A. Zeiher, Kardiologie, Universitätsklinikum Frankfurt am Main,
Dr. Sandra Erbs, Prof. Dr. G. Schuler, Kardiologie Universität Leipzig / Herzzentrum
Förderung Exzellenzinitiative des Bundes und der Länder; „Cardiopulmonary System“ der Universitäten Gießen
und Frankfurt (09/2006)
Transantlantic Network of Excellence for Cardiac Regeneration (Leduq Foundation)
Laufzeit des Projekts 12 Monate
95

Forschungsbericht 2007 – 2008
Weitere Informationen
96
S. Erbs, A. Linke, V. Schaechinger, B. Assmus, H. Thile, KW Diederich, K. Hoffmann, S. Dimmeler, T. Tonn, R.
Hambrecht, A. Zeiher, G. Schuler. Restoration of microvascular function in the infarct-related artery by intracoronary
transplantation of bone marrow progenitor cells in patients with acute myocardial infarction: the „doppler
substudy“ of the REPAIR-AMI trial. Circulation
FH Seeger, T. Tonn, Krzossok N, AM Zeiher, S. Dimmeler. Cell isolation procedures matter: a comparison of different
isolation protocols of bone marrow mononuclear cells used for cell therapy in patients with acute myocardial
infarction. Eur Heart J 2007; 28(6):766-72
B. Assmus, J. Honold, V. Schächinger, M. B. Britten, U. Fischer-Rasokat, R. Lehmann, C. Teupe, K. Pistorius, H.
Martin, N. D. Abolmaali, T. Tonn, S. Dimmeler, and A. M. Zeiher. Transcoronary transplantation of progenitor cells
in patients with persistent left ventricular dysfunction after myocardial infarction: a randomized controlled trial
(TOPCARE-CHD). N Engl J Med. 2006;355(12):1222-32.
Schaechinger V, Erbs S, Elsasser A, Haberbosch W, Hambrecht R, Holschermann H, Yu J, Corti R, Mathey DG,
Hamm CW, Suselbeck T, Assmus B, Tonn T, Dimmeler S, Zeiher AM; Repair-AMI Investigators. Intracoronary bone
marrow-derived progenitor cells in acute myocardial infarction. N Engl J Med. 2006; 355(12):1210-21
Schaechinger V, Tonn T, Dimmeler S , Zeiher AM. Bone Marrow derived progenitor cell therapy in need of proof of
concept: Design of the Reinfusion of Enriched Progenitor Cells and Infarct Remodeling in acute myocardial infarction
(RPAIR-AMI) Trial. Nature Clin Practice Cardiovascular Medicine. 2006:3:23-28
T. Tonn, N. Krzossok, W. Siegel, E. Seifried. Regulatorische Aspekte zur Gewinnung und Herstellung von Stammzellen.
In: Stammtzelltherapie in der Kardiologie- Stand und Perspektiven: Hersg. S. Dimmeler und AM Zeiher.
UNI-MED, 2005, ISBN 3-89599-800-1

Isolation und Charakterisierung endothelialer Vorläuferzellen aus
Nabelschnurblut, Subprojekt des Teilprojektes C3 „Analysis of the
multistep nature of homing and incorporation of circulating progenitor
cells during tumor angiogenesis“ im Rahmen des TR-SFB 23
Hintergrund und Projektbeschreibung
Stammzellen und Zelltherapie
Angiogenese beschreibt den Prozess der postnatalen Blutgefäßneubildung. Dies ist ein notwendiger Prozess bei der
Heilung von Wunden, bei der Bildung der Plazenta, beim Menstruationszyklus und bei der Ovulation. Leider spielt
Angiogenese auch eine wichtige Rolle bei der Vaskularisierung maligner Tumoren und Metastasen.
Ein essentieller Schritt während der Angiogenese ist die Rekrutierung endothelialer Zellen an den Ort der mikrovaskulären
Proliferation. Ausgehend aus existierenden Gefäßen können reife Endothelzellen migrieren und proliferieren, um
neue Gefäße zu formieren. Neuere Forschungserkenntnisse konnten demonstrieren, dass endotheliale Vorläufer- bzw.
Stammzellen aus der Zirkulation rekrutiert werden, und sich am Prozess der Neo-Angiogenese beteiligen. Insbesondere
in der Therapie pathologischer Angiogenese und Vaskularisierungsstörungen bieten daher die endothelialen Vorläuferzellen
viele Möglichkeiten der Intervention.
Im Rahmen des Projektes wurden zunächst Techniken zur Isolierung endothelialer Vorläuferzellen aus Nabelschnurblut
etabliert und das Differenzierungspotential dieser Zellen zunächst in vitro analysiert. Im Weiteren wurden diverse
in vitro Assays etabliert, die das Migrationsverhalten der Endothelvorläuferzellen analysieren helfen. Weiterführend
wurde das Wanderungsverhalten und die Integration dieser Zellen, vergleichend zu maturen Endothelzellen der Nabelschnurvene
und embryonalen endothelialen Vorläuferzellen, in einem Tumorangiogenese-Modell analysiert.
Wichtigste Ergebnisse
Im Gegensatz zu Knochenmark, scheint Nabelschnurblut Endothelvorläuferzellen zu enthalten, die in Zellkultur zu
phänotypisch reifen Endothelzellen ausreifen. Wir nennen diese Zellen spät auswachsende (late-outgrowth) Endothel-
Kolonie-bildende Zellen (ECFC). Diese Zellen zeichnen sich durch eine typische endotheliale Morphologie aber auch
typische funktionelle Charakteristika aus, die sich von reifen Zellen unterscheiden lassen. Die proliferative Kapazität
dieser Zellen differiert zu reifen Endothelzellen der Nabelschnurvene (HUVEC). Im Gegensatz zu diesen reifen Zellen
zeichnen sich die ECFC nicht nur durch stärkere Expansion sondern auch durch eine leicht verstärkte Expression der
Stammzellmarker CD34, CD133 und VEGFR-2 aus. Insbesondere weitergehende funktionelle Studien werden weitere
Einsichten in die Hierarchie der endothelialen Vorläuferzellen ergeben.
In tierexperimentellen Studien, ergab sich eine verstärkte Aktivität des Homings und Engraftments der ECFC, im Vergleich
zu unkultivierten Vorläuferzellen und HUVEC. Zukünftige Studien werden die molekularen Mechanismen, die
hieran beteiligt sind, näher charakterisieren.
In vitro Gefäßbildung (links) und Nachweis der Expression von von-Willebrand-Faktor (rechts) von EPDC isoliert aus dem humanen
Nabelschnurblut.
97

Forschungsbericht 2007 – 2008
Summary
Mature endothelial cells are terminally differentiated cells with a low proliferation potential. Accumulating data suggest
that the peripheral blood contains a unique subtype of circulating, bone marrow derived cells exploiting the capacity
of embryonal angioblasts. These cells have the capacity to proliferate and differentiate into mature endothelial
cells. According to this potency they were termed endothelial progenitor cells (EPC). After prolonged culture a monolayer
with typical endothelial morphology is obtained consisting of cells with a mature endothelial phenotype and
function: late outgrowth endothelial colony forming cells (ECFC).
EPC may contribute to new blood vessel formation and thus promote neovascularisation during tissue ischemia, vascular
trauma or tumour growth. However the molecular and cellular mechanisms underlying EPC recruitment are
poorly understood. To analyse the hierarchy of EPC, ECFC and mature endothelial cells in terms of the multistep nature
of homing and incorporation into the tumour vasculature, we isolated and characterised EPC and ECFC from
umbilical cord blood comparing them with embryonal EPC.
Standort Mannheim
Arbeitsgruppe Zell- und Immuntherapie
Projektleiter PD Dr. P Vajkoczy (Klinik für Neurochirurgie, Universitätsklinikum Mannheim);
Prof. Dr. Harald Klüter, Dr. Karen Bieback
Mitarbeiter Susanne Elvers-Hornung
Kooperationen AG von PD Dr. P. Vajkoczy, insbesondere Mara Vinci
Partner des TR-SFB
Förderung DFG TR-SFB 23 (Kosten Gesamtprojekt 353.000 €)
Laufzeit des Projektes 01.09.2005 – 31.08.2009
Weitere Informationen
98
www.transregio23.info
Vorträge und Poster im Zusammenhang mit TR-SFB internen Veranstaltungen: (Kick-Up Meeting: K. Bieback;
Summer-School: M. Vinci, K. Bieback; Statusmeeting: P. Vajkoczy; Subgroupmeeting: M. Vinci, K. Bieback)
Extern:
Bieback K, Klüter H: Non-Hematopoietic Stem and Progenitor Cells Derived From Umbilical Cord Blood. Frontiers
in Cord Blood Science, Ed. N. Bhattacharya; P. Stubblefield, Springer Verlag London Limited 2009
Bieback K, Vinci M, Elvers-Hornung S, Czabanka M, Klüter H, Vajkoczy P: In vitro and in vivo anlysis of the tumor
targeting capacities of CD34+ derived cord blood endothelial progenitor cells. O8.3. Transfus Med Hemother
35(S1) (2008)
Bieback K, Vinci M, Elvers-Hornung S, Czabanka M, Blaske T, Klüter H, Vajkoczy P: Studying the Multistep Process
of Endothelial Progenitor Cell Homing to the Tumour Vasculature. 4th ITERA – Life-Sciences Forum Workshop.
Maastricht 12. – 15.10. 2008

OsteoCord Bone from Blood: Optimised isolation, characterisation
and osteogenic induction of mesenchymal stem cells from umbilical
cord blood
Hintergrund und Projektbeschreibung
Stammzellen und Zelltherapie
Für die Heilung ausgedehnter Knochendefekte stellt das Tissue Engineering einen erfolgversprechenden Ansatz dar.
Die für das Tissue Engineering von Knochen einzusetzenden Zellen sollten neben ihrer Immunkompatibilität einfach
und in ausreichenden Mengen isolierbar sowie in der Lage sein, den osteogenen Phänotyp auszubilden. Aufgrund
ihres Differenzierungspotentials sowie der im Gegensatz zu bereits differenzierten Zellen (Osteoblasten) hohen Proliferationskapazität
in vitro stellen mesenchymale Stammzellen (MSC) eine vielversprechende Zellpopulation für diesen
Ansatz dar.
Ziel des von der Europäischen Union geförderten Verbundprojektes ist es, mesenchymale Stammzellen (MSC) aus
dem humanen Nabelschnurblut zu isolieren, expandieren und insbesondere ihr osteogenes Differenzierungspotential
zu optimieren, und ihre Eignung für den therapeutischen Knochenersatz zu analysieren. Durch die Verbundpartner
werden genomische, proteomische und Bioimpedanz-Profile, vor und nach osteogener Differenzierung erstellt, im
Vergleich zu Knochenmark-MSC aber auch embryonalen Stammzellen. Zudem werden Veränderungen des Immunophänotyps
aber auch der Alloreaktivität bestimmt. Als Riskoabschätzung erfolgt zudem eine Bestimmung der Telomerlängen
und der Telomeraseaktivität. Die osteogene Differenzierung von MSC auf unterschiedlichen Scaffolds wird
in tierexperimentllen Studien evaluiert. Neuartige Expansionstechniken, Bioreaktoren sowie biomimetrische Scaffolds,
werden mit klinischen scale-up Prozeduren kombiniert.
Wichtigste Ergebnisse
Unsere Arbeitsgruppe verfolgt in diesem Konsortium folgende Projekte:
1. Die Etablierung einer Nabelschnurblut-MSC Bank, um Zellen in ausreichender und definierter Qualität und Quantität
den Verbundpartner zur Verfügung zu stellen. Parallel werden MSC aus Knochenmark und Fettgewebe als Aliquots
in einer Zellbank asserviert und für Vergleiche zur Verfügung gestellt.
2. Mesenchymale Stammzellen werden als hypoimmunogen und immunsuppressiv beschrieben. Dies impliziert,
dass MSC möglicherweise ohne Immunsuppressiva allogen transplantiert werden können. Nabelschnurblut-MSC
wurden jedoch noch nie im Vergleich zu Knochenmark-MSC auf ihre immunmodulierenden Eigenschaften untersucht.
Notwendige Methoden, um diesen Vergleich in vitro zu tätigen, wurden etabliert. Derzeitige Daten deuten
auf eine universelle immunregulatorische Kapazität von MSC unabhägig von der Gewebsquelle hin.
3. Der translationelle Ansatz des Projektes beinhaltet auch scale-up Prozeduren und die Etablierung GMP-konformer
Herstellungsprozesse für MSC. In einem ersten Schritt wurden SOPs für die Isolation und Expansion von
MSC erstellt. In einem zweiten Schritt erfolgt die Evaluierung FBS-freier Expansionsmedien supplementiert durch
humane alternative Komponenten (siehe hierzu Projekt START-MSC).
Summary
There is an urgent clinical requirement for appropriate bone substitutes that are able to replace current autologous
and allogenic grafting procedures for the repair of diseased or damaged skeletal tissues. Mesenchymal stem cells
(MSCs), found predominantly in the bone marrow, are able to differentiate into osteogenic, chondrogenic, adipogenic
and tenogenic lineages, thus offering considerable therapeutic potential for tissue engineering applications. However,
invasive extraction procedures and insufficient viable cell yields have necessitated the identification of alternative tissue
sources of MSCs. Growing evidence suggests that umbilical cord blood (UCB) contains a population of rare
MSCs that are able to undergo multilineage differentiation.
The aim of this proposal is to optimise the isolation and expansion of MSCs from human UCB (CB-MSCs). The differentiation
capacity of CB-MSCs will be examined, with a specific focus on osteogenesis. The CB-MSCs will be characterised
by genomic, proteomic and bioimpedance profiling, pre- and post-osteogenic differentiation, and
compared to MSCs isolated from human bone marrow as well as embryonic stem cells. Full bioinformatics integra-
99

Forschungsbericht 2007 – 2008
tion of datasets will allow us to identify specific and/or novel signalling factors associated with CB-MSCs. The immunophenotype
and alloreactivity of CB-MSCs will be determined. Comparative analyses of the population doubling
times, telomere length and telomerase activity will identify the lifespan of CB-MSCs in culture. Novel expansion techniques
will be combined with scale-up procedures and the generation of CB-MSC lines for banking using optimised
cryopreservation protocols. In vitro and in vivo biocompatibility assays using a range of biomimetic scaffolds will be
exploited, complementing in vivo homing and engraftment models.
Our integrated approach using existing and complementary expertise will provide a timely and thorough evaluation of
CB-MSCs and define appropriate routes for their therapeutic implementation.
Standort Mannheim
Arbeitsgruppe Zell- und Immuntherapie
Projektleiter Dr. Karen Bieback
Mitarbeiter Andrea Hecker, Susanne Kern, Asli Kocaömer, Anh-Thu Ha, Monika Latta
Kooperationen OsteoCord-Verbund: Dr. PG. Genever, Departments of Biology, Philosophy and Sociology, University
of York, UK; Prof. Kassem, Department of Endocrinology, University Hospital of Odense, Denmark;
JS. Andersen, Center for Experimental Bioinformatics (CEBI), Department of Biochemistry and Molecular
Biology, University of Southern Denmark, Odense, Denmark: Dr. H. Thielecke Fraunhofer Institute
for Biomedical Engineering, Germany; Dr. L. Buttery, School of Pharmacy, University of
Nottingham, UK; Dr. H Cruz, ECBio- R&D in Biotechnology,S.A., Oeiras, Portugal; Dr. R. Quirk, RegenTec
Ltd, BioCity Nottingham, Pennyfoot Street, Nottingham, UK
V. Mailaender, H. Schrezenmeier: Institut für Klinische Transfusionsmedizin und Immungenetik Ulm
K.Schallmoser, D. Strunk: Medizinische Universität Graz, Abt. Blutgruppen Serologie und Transfusionsmedizin,
Graz, Österreich
Förderung RP der Europäischen Union
Laufzeit des Projektes 01.01.2006 – 31.12.2008, verlängert bis 31.03.2009
Weitere Informationen
100
http://www.bonefromblood.org
Kocaoemer A, Kern S, Klueter H, Bieback K: Human AB-Serum as well as Thrombin-activated Platelet-Rich-
Plasma are suitable Alternatives to Fetal Calf Serum for the Expansion of Mesenchymal Stem Cells from Adipose
Tissue. Stem Cells. 2007 Jan 25; [Epub ahead of print]
Maercker C, Rogge T, Mathis H, Ridinger H, Bieback K: Development of live cell chips to monitor cell differentiation
processes. Eng Life Sci 8(1):33-39 (2008)
Bieback K, Kern S, Kocaömer A, Ferlik K, Bugert P: Comparing mesenchymal stromal cells from different human
tissues: bone marrow, adipose tissue and umbilical cord blood. Biomed Mater Eng. 2008;18(1 Suppl):S71-6.
Bieback K, Schallmoser K, Klüter H, Strunk D: Clinical Protocols for the Isolation and Expansion of Mesenchymal
Stromal Cells. Transf Med Hemother: 35(4): 286-295 (2008).

Standardisierung für die Regenerative Medizin (START-MSC)
Stammzellbank mesenchymaler Stammzellen aus Nabelschnurblut
und Entwicklung GMP-konformer Prozessierungstechniken
Hintergrund und Projektbeschreibung
Stammzellen und Zelltherapie
Das Fehlen von international gültigen Standards und Protokollen, die der „Guten Herstellungspraxis“ (Good Manufacturing
Practice, GMP) entsprechen, erscheint als die größte Hürde bei der Umsetzung experimenteller Ergebnisse
in klinischen Applikationen. Daher ist es das Ziel des Konsortiums START-MSC, Standards und Richtlinien zu definieren,
die erstens eine standardisierte Gewinnung von MSC und daraus abgeleiteter Hepatozyten und Kardiomyozyten
ermöglichen und zweitens eine systematische Charakterisierung dieser Zellen im Vergleich zu MSC aus Knochenmark
und reifen Hepatozyten und Kardiomyozyten erlauben.
Um diese Ziele zu erreichen, wurde eine Stammzellbank aus Nabelschnurblut (cord blood, CB) abgeleiteten MSC
aufgebaut. Die Grundlage hierfür ist eine standardisierte Isolation, Expansion und Qualitätskontrolle dieser Zellen.
Anschließend wurden sie in Kooperation mit den Verbundpartnern im Vergleich mit MSC aus Knochenmark und Fettgewebe
systematisch charakterisiert.
Die klinische Relevanz und die Perspektive einer klinischen Anwendbarkeit erfordert die Entwicklung standardisierter
und validierter Protokolle. Da es derzeit weltweit jedoch kein etabliertes, validiertes robustes System für die Isolation
und Expansion von MSC gibt, das frei ist von bovinem Serum (FBS), wurde eine Vielzahl humaner Blutprodukt-abgeleiteter
Komponenten auf Ihre Eignung, MSC zu isolieren und zu expandieren, untersucht. Der Ersatz xenogener Faktoren,
insbesondere des FBS, sehen wir als eine Grundvoraussetzung für eine zukünftige klinische Anwendung
gemäß der internationalen GMP-Standards an.
Wichtigste Ergebnisse
Für die Stammzellbank wurden MSC unter standardisierten Bedingungen aus humanem Nabelschnurblut isoliert,
expandiert und grundlegend charakterisiert. Im Rahmen der Qualitätskontrolle erfolgte eine durchflusszytometrische
Charakterisierung der Markerexpression, um eine Kontamination mit hämatopoietischen und/oder endothelialen
Zellen auszuschließen. Das Differenzierungspotential wurde anhand von in vitro Differenzierungstesten in die osteogene,
adipogene und chondrogene Richtung quantifiziert. Von allen MSC-Chargen erfolgte eine Überprüfung auf
Sterilität und Kontrolle auf Mykoplasmenkontamination. Im Anschluss an die Qualitätsüberprüfung wurden diese
Zellen kryokonserviert und entsprechende Aliquots werden den Partnern über den gesamten Verlauf der Projektphase
zur Verfügung gestellt.
Bovines Serum, das derzeit noch als essentielle Komponente von MSC Isolations- und Expansionsmedien gilt, wurde
durch humane alternative Supplemente ersetzt, um internationalen GMP-Standards konforme Verfahren zur Isolation
und Expansion zu entwickeln. Ergebnisse an MSC aus Lipoaspirat zeigten, dass sowohl humanes Serum als auch
thrombin-aktiviertes plättchenreiches Plasma in der Lage sind, die Isolation und Expansion von MSC zu gewährleisten.
Die Expansion von Lipoaspirat-MSC wurde durch die alternativen humanen Zusätze gegenüber bovinem Serum
als Vergleich sogar signifikant erhöht, ohne die Differenzierbarkeit zu beeinträchtigen (Kocaömer et al. STEM CELLS
2007). Im Gegensatz dazu zeigte sich bei MSC aus dem Knochenmark keine gesteigerte Proliferation. Bei Knochenmark-abgeleiteten
MSC, erwiesen sich im Vergleich zu bovinem Serum, humanes AB-Serum und thrombin-aktiviertes
plättchenreiches Plasma als gleichwertig. Humanes Plättchenlysat jedoch hatte einen eindeutig wachstumsstimulierenden
Effekt, ohne das Differenzierungspotential zu beeinträchtigen. Dies deutet darauf hin, dass MSC aus unterschiedlichen
Gewebsquellen unterschiedliche Suszeptibilität gegenüber waschstumsfördernden Faktoren zeigen.
Diese zu identifizieren wird das Ziel weiterführender Studien sein.
101

Forschungsbericht 2007 – 2008
Summary
There is a lack of international valid standards and protocols hampering the translation of research protocols into a
GMP-compliant manufacturing process of MSC. To achieve this, we established a cell bank of cord blood, adipose
tissue and bone marrow derived MSC. These cells processed and defined according to standardised protocols are
used by the collaborating partners for further analysis.
With regard to clinical exploitation, there is a demand for GMP-compliant protocols for MSC manufacturing. At the
moment, however, most isolation and expansion protocols for clinical-scale production of MSC use culture media
supplemented with Fetal Calf Serum. The first step therefore is to avoid the use of Fetal Calf Serum in the isolation
and expansion medium of MSC. Our aim was to compare the effectiveness of human serum and platelet factors in
promoting MSC growth with FCS. We decided to use pooled human AB-Serum (AB-HS) instead of autologous serum
because for clinical use an “off-the-shelf” product which is available in large quantities is more desirable. After testing
several protocols for the derivation of a platelet-factor rich supernatant, we chose thrombin-activated Platelet-
Rich-Plasma (tPRP) pooled from AB donors as the most suitable supplement. With both cell populations, adipose
tissue-derived MSC and bone marrow-derived MSC, we observed that the human alternatives served as suitable alternatives
in isolating and expanding MSC, maintaining their phenotype, immune phenotype and differentiation potential.
Standort Mannheim
Arbeitsgruppe Zell- und Immuntherapie
Projektleiter Prof. Dr. Harald Klüter, Dr. Karen Bieback
Mitarbeiter Asli Kocaömer, Andrea Hecker, Anh-Thu Ha, Marianna Karragianni
Kooperationen START-MSC-Verbund: AG Prof. Ho, Medizinische Klinik V der Universität Heidelberg, Abteilung Hämatologie,
Onkologie und Rheumatologie; AG Dr. Besser, Max-Delbrück- Zentrum für Molekulare
Medizin Berlin; AG Prof. Franke Deutsches Krebsforschungszentrum Heidelberg; AG Prof. Müller; Institut
für medizinische Strahlenkunde und Zellforschung , Universität Würzburg; AG PD Dr. Stamm;
Klinik und Poliklinik für Herzchirurgie, Universität Rostock; AG Prof. Ott, Abteilung Gastroenterologie,
Hepatologie und Endokrinologie der Medizinischen Hochschule Hannover; Prof Dresel, PROGEN
Biotechnik GmbH
V. Mailaender, H. Schrezenmeier: Institut für Klinische Transfusionsmedizin und Immungenetik Ulm
K. Schallmoser, D. Strunk: Medizinische Universität Graz, Abt. Blutgruppen Serologie und Transfusionsmedizin,
Graz, Österreich
Förderung BMBF
Laufzeit des Projektes 01.09.2005 – 30.8.2008, verlängert bis 02.2009
Weitere Informationen
102
http://start-msc.de
Kocaoemer A, Kern S, Klueter H, Bieback K. Human AB-Serum as well as Thrombin-activated Platelet-Rich-
Plasma are suitable Alternatives to Fetal Calf Serum for the Expansion of Mesenchymal Stem Cells from Adipose
Tissue. Stem Cells. 2007 Jan 25; [Epub ahead of print]
Nesselmann C, Ma N, Bieback K, Wagner W, Ho A, Konttinen YT, Zhang H, Hinescu ME, Steinhoff G: Mesenchymal
stem cells and cardiac repair. J Cell Mol Med. 12(5B):1795-810 (2008).
Bieback K, Schallmoser K, Klüter H, Strunk D:Clinical Protocols for the Isolation and Expansion of Mesenchymal
Stromal Cells. Transf Med Hemother: 35(4): 286-295 (2008).

Vergleichende Analyse mesenchymaler Stammzellen aus
Knochenmark, Nabelschnurblut oder Fettgewebe
Hintergrund und Projektbeschreibung
Stammzellen und Zelltherapie
Mesenchymale Stammzellen (MSC) sind adulte Stammzellen und können aus unterschiedlichen Geweben gewonnen
werden. Sie sind multipotent, unterstützen die Hämatopoiese, sind nicht immunogen und weisen ausgeprägte immunregulatorische
Aktivitäten auf. Mit diesen Eigenschaften ausgezeichnet, stellen sie eine Alternative zu embryonalen
Stammzellen dar, um sie beispielsweise für zelltherapeutische Zwecke autolog oder allogen einzusetzen. Die
ursprünglichste und am besten charakterisierte Quelle für MSC ist Knochenmark (bone marrow, BM. Neuere und weniger
gut charakterisierte alternative Quellen sind z.B. Nabelschnurblut (cord blood, CB) und Fettgewebe (adipose
tissue AT). Zentrales Thema des Projektes ist die vergleichende Analyse der MSC aus den drei unterschiedlichen
Quellen.
Hierbei werden zum einen Profile der Gen- und Proteinexpression undifferenzierter MSC erstellt, um idealerweise
einen Marker identifizieren zu können, der die prospektive Isolation von MSC erlaubt.
Für den klinischen Einsatz ist insbesondere das Differenzierungspotential von MSC von Interesse. Daher überprüfen
wir quantitativ und qualitativ die Expression von Differenzierungsmarkern in Zellen die durch Zugabe bestimmter
Faktoren linien-spezifisch differenziert werden. In weiteren Schritten untersuchen wir die Kinetik der Differenzierung,
um eine bessere Einsicht in die Kaskaden der Differenzierungsprozesse zu erhalten. Dies bietet die Möglichkeit einer
Optimierung im Rahmen des Tissue-Engineerings, z.B. durch Modifikationen der biomimetischen Scaffolds.
Die Sicherheit der Therapie mit MSC ist ein weiterer wichtiger Punkt unserer Analysen. Daher wurden in den vergangenen
Jahren sensitive Testsysteme entwickelt, um z.B. eine Kontamination mit Mykoplasmen im Verlauf der Expansionskultur
zu überprüfen. Darüber hinaus analysieren wir derzeit, ob die Langzeitkultur negative Effekte auf die
Qualität der MSC hat. Daher überprüfen wir das Seneszenzverhalten, die Verkürzung der Telomerlängen und die
mögliche Expression von Telomerase als Anzeichen einer spontanen Transformation/Immortalisierung der Zellen in
Kultur.
Eine Vielzahl von offenen Fragen
müssen noch beantwortet
werden, bevor sich eine
klinische Anwendung mit mesenchymalen
Stammzellen
etabliert: z.B.: Aus welchen
Quellen lassen sich MSC isolieren
und unterscheiden sie
sich? Welchen Einfluss haben
Grunderkrankungen, z.B. Diabetes,
auf die MSC-Qualität?
Wie lässt sich ein MSC-Produkt
standardisiert herstellen
und welche Produktspezifikation
gilt es zu erreichen? Wie
verhalten sich MSC in dreidimensionalen
Matrizes, die
z.B. für die Rekonstruktion
von Knochen vonnöten sind?
Wie lässt sich das Anwachsen
eines MSC-Präparates nachweisen?
103

Forschungsbericht 2007 – 2008
Wichtigste Ergebnisse
In den vergangenen Jahren konnten wir feststellen, dass sich MSC aus Knochenmark, Fettgewebe und Nabelschnurblut
funktionell relativ wenig unterscheiden. Sie zeichnen sich durch starke Expansions- und Differenzierungsfähigkeit
aus. Unterschiedlich sind allerdings die Frequenzen der MSC in den einzelnen Quellen. Basierend auf unsren Erfahrungen
enthält Lipoaspirat MSC in höchster Zahl, gefolgt von Knochenmark und dann von Nabelschnurblut. Bei der
Analyse des Gesamt-Transcriptoms ergaben vorläufige Untersuchungen jedoch frappierende Unterschiede in der
Genexpression. Ob sich diese auch im Proteom feststellen lassen, werden weiterführende Untersuchungen zeigen.
Beim Differenzierungs potential fiel lediglich auf, dass unter identischen Kulturbedingungen vermehrte MSC aus Nabelschnurblut
keine Anzeichen einer adipogenen Differenzierung zeigen. Erste molekulare Analysen deuten darauf
hin, dass ein essentieller Schritt in der Differenzierungskaskade blockiert scheint.
Insbesondere die Arbeiten zur chondrogenen Differenzierung, konnten durch Unterstützung der Kooperationspartner
Einblicke in die Regulation der chondrogenen Differenzierungs kaskade generieren (Gößler et al. und Prante et al.).
In einem weiteren Kooperationsprojekt mit der Augenklinik des Universitätsklinikums Mannheim entwickeln wir Protokolle,
die eine gerichtete Differenzierung humaner MSC aus dem Lipoaspirat in retinales Pigmentepithel erlauben.
Diese Zellen sind als Folge der altersbedingten Makuladegeneration nicht mehr funktionsfähig, so dass Patienten
unter Erblindung leiden.
Einige wenige Publikationen deuten an, dass MSC in Kultur transformieren können. Unsere vorläufigen Ergebnisse
implizieren jedoch, dass MSC in Langzeitkultur replikativer Seneszenz unterliegen. Dies wird gestützt durch eine Verkürzung
der Telomerlängen als Folge der Kultur und durch das Fehlen der Telomerase-Aktivität.
Summary
104
Mesenchymale Stammzellen
verfügen über ein weites Differenzierungspotential.
Daher
sind es attraktive Kandidaten
für zell-basierte Ansätze insbesondere
des Tissue Engineerings.
The main focus of our research activities is dedicated to investigate the origin and biological properties of post-natal
mesenchymal stem cells (MSC) that form supportive connective tissues such as fat, bone, and cartilage but also the
hematopoiesis-supporting stroma. We have previously identified different MSC populations from a variety of adult
tissues including bone marrow, umbilical cord blood, and adipose tissue. These MSC can be expanded in culture as
potential therapeutic agents for the repair of either connective tissue defects or as hematopoiesis supportive stroma.

Stammzellen und Zelltherapie
In the first instance we were interested in revealing whether MSC derived from different tissue organs exhibit similar
MSC characteristics. Gene and protein expression profiles revealed that despite comparable functional characteristics,
MSC derived from the three tissues differ strongly.
The safety of clinical MSC application is evaluated since a few publications indicated that longterm culture of MSC
can pose a risk of transformation. Our own preliminary data however imply, that MSC suffer from replicative senescence,
induced by telomere shortening.
Standort Mannheim
Arbeitsgruppe Zell- und Immuntherapie
Projektleiter Dr. Karen Bieback
Mitarbeiter Dr. sc. hum. Susanne Kern, Dr. rer. nat. Sandra Kühl, Andrea Hecker, Marianna Karagianni, Viet Anh-
Thu Ha, Melanie Ficht, Monika Latta
Kooperationen Universitäts-HNO-Klinik Mannheim (Dr. U. Gößler)
Neurologische Klinik, Medizinische Fakultät Mannheim (Dr. M. Fatar, Dr. M. Stroik)
Augenklinik des Univeritätsklinikums Mannheim (Dr. S. Kühl, Dr. U. Vossmerbäumer);
Institut fur Laboratoriums- und Transfusionsmedizin, Herz und Diabeteszentrum NRW, Universitatsklinik
der Ruhr-Universitat Bochum, Bad Oeynhausen (Dr. C. Götting)
DRK-BSD Frankfurt (Dr. R. Henschler)
DRK-BSD ulm (Prof. Dr. Schrezenmeier, Dr. V. Mailänder)
IKET Tübingen (Dr. R. Schäfer)
Stem cell research unit Graz (Prof. Dr. D. Strunk)
Förderung Teilprojekte werden anteilig finanziert durch BMBF und EU
Laufzeit des Projektes 01.09.2005 – fortlaufend
Weitere Informationen
Kern S, Eichler H, Stoeve J, Klüter H, Bieback K: Comparative analysis of mesenchymal stem cells from bone
marrow, umbilical cord blood, or adipose tissue. Stem Cells 24:S.1294-1301 (2006).
Bieback K, Kern S, Kocaömer A, Ferlik K, Bugert P: Comparing mesenchymal stromal cells from different human
tissues: bone marrow, adipose tissue and umbilical cord blood. Biomed Mater Eng. 2008;18(1 Suppl):S71-6.
Nesselmann C, Ma N, Bieback K, Wagner W, Ho A, Konttinen YT, Zhang H, Hinescu ME, Steinhoff G: Mesenchymal
stem cells and cardiac repair. J Cell Mol Med. 12(5B):1795-810 (2008).
Fatar M, Stroick M, Griebe M, Marwedel I, Kern S, Bieback K, Giesel FL, Zechmann C, Kreisel S, Vollmar F,
Alonso A, Back W, Meairs S, Hennerici MG: Lipoaspirate-derived adult mesenchymal stem cells improve functional
outcome during intracerebral hemorrhage by proliferation of endogenous progenitor cells stem cells in intracerebral
hemorrhages.Neurosci Lett 443(3):174-8 (2008)
Prante C, Bieback K, Funke C, Schon S, Kern S, Kuhn J, Gastens M, Kleesiek K, Gotting C: The formation of extracellular
matrix during chondrogenic differentiation of mesenchymal stem cells correlates with increased levels
of xylosyltransferase I. Stem Cells 24: S. 2252-61 (2006)
Goessler UR, Bugert P, Bieback K, Stern-Straeter J, Bran G, Sadick H, Hörmann K, Riedel F: In vitro-Analysis of
Integrin-Expression in Stem-Cells from Bone Marrow and Cord Blood during Chondrogenic Differentiation. J Cell
Mol Med. Aug 4 (2008)
Goessler UR, Bugert P, Bieback K, Stern-Straeter J, Bran G, Hörmann K, Riedel F: Integrin expression in stem
cells from bone marrow and adipose tissue during chondrogenic differentiation. Int J Mol Med 21(3):271-9 (2008).
Gössler UR, Bieback K, Bugert P, Heller T, Sadick H, Hörmann K, Riedel F:In vitro analysis of integrin expression
during chondrogenic differentiation of mesenchymal stem cells and chondrocytes upon dedifferentiation in cell
culture. Int J Mol Med. 17:301-307 (2006).
Gössler UR, Bugert P, Bieback K, Bag S, Sadick H, Klüter H, Hörmann K, Riedel F: A comparison of the gene expression
patterns of human chondrocytes and chondrogen differentiated mesenchymal stem cells for tissue engineering.
HNO. 54:258-266 (2006).
105

Forschungsbericht 2007 – 2008
Aptamer-basierte Isolation von mesenchymalen Stammzellen und
deren Detektion mittels MRT
Hintergrund und Projektbeschreibung
Mesenchymale Stammzellen (MSC) sind eine vielversprechende Zellquelle für die zelluläre Kardiomyoplastie. Wir
haben kürzlich eine neue spezifische Methode, basierend auf der Aptamer-Technik, zur Isolation von MSC beschrieben.
Die so isolierten Zellen stehen unmittelbar nach der Isolation „frisch“ zur Transplantation zur Verfügung. In der
vorliegenden Arbeit wird die Detektion mittels MRT von frisch isolierten und hiernach intrakoronar und intramyokardial
transplantierten MSC evaluiert. Hierbei wird erstmals der Einsatz einer kombinierten Aptamer-basierten Isolations-
und Markierungstechnik für Zellen beschrieben.
Knochenmark (KM) wurde von gesunden Schweinen entnommen, die Tiere wurden getötet und das Herz in ein ex
vivo-Perfusionsmodell überführt. Während der kalten Ischämiezeit wurden die MSC aus dem KM mittels MSC-spezifischen
Aptameren, an die Dynabeads® gekoppelt waren, innerhalb von zwei Std. immunomagnetisch isoliert. Zur
histologischen Identifikation wurden die Zellen zusätzlich mit PKH26 angefärbt. Ca. 3 x 10E6 frisch Aptamer-isolierte
Zellen wurden in den Ramus interventricularis anterior (RIVA), 5 x 10E5 Zellen wurden direkt intramyokardial, nachdem
ein Defekt im bewussten Areal gesetzt wurde (Kryo-Narbe), appliziert. 3 x 10E6 der Aptamer-isolierten Zellen
wurden einer weiteren Charakterisierung (FACS sowie Differenzierungsprozeduren) zugeführt. 20 h nach stattgehabter
Zell-Transplantation erfolgten MRT-Untersuchungen des Herzens mittels eines klinisch eingesetzten 3,0 T Ganzkörper-Scanners
(Magnetom Trio, Siemens, Deutschland). Im Anschluss wurden histologische Untersuchungen
durchgeführt.
Links: MRT eines Schweineherzens (Längsachse). Die großen Suszeptibilitätsartefakte sind durch die Clips bedingt, die das Areal markieren,
in welchem die MSC appliziert wurden. Der schwarz gefleckte Bereich von Signalauslöschungen korreliert gut mit dem Versorgungsgebiet
der Koronararterie, über welche die Fe-Aptamer-markierten MSC appliziert wurden.
Rechts: MRT eines Schweineherzens (T2 -gewichtete flash 3D Sequenz [TR 30 ms, TE 10 ms, Auflösung: 0,5 x 0,5 x 0,5 mm, Matrix
256 x 256).
Der weiße Pfeil markiert den Bereich, in welchem die Fe-Aptamer-markierten MSC über die Koronararterie appliziert wurden. Der
schwarze Pfeil markiert den Bereich, in welchem Fe-Aptamer-markierten MSC direkt in das Myocard (Kryo-Narbe) appliziert wurden.
Wichtigste Ergebnisse
Durchschnittlich wurden 7 x 10E6 Zellen aus 120 ml KM isoliert. Die Zellen wurden in Kultur genommen und zeigten
MSC-typische Eigenschaften. In der MRT konnten reproduzierbare Suszeptibilitätsartefakte von überraschend exzellenter
Qualität im RIVA-Perfusionsareal sowie in der Kryo-Narbe generiert werden. Die histologischen Untersuchungen
der Biopsien zeigten PKH26 positive Zellen in den Bereichen, die in der MRT positiv waren, wohingegen in den
Kontroll-Biopsien (negativ in der MRT) keine Zellen nachweisbar waren.
Die immunomagnetische Isolation von MSC mittels an spezifische Aptamere gekoppelte Magnetpartikel ist einfach
durchführbar, effektiv und kombiniert spezifische Zellseparations- und Markierungstechniken im Sinne einer „one
stop shop“-Strategie.
106

Aptamer-based isolation and subsequent imaging of mesenchymal stem cells by MRI
Stammzellen und Zelltherapie
Mesenchymal Stem Cells (MSC) seem to be a promising cell source for cellular cardiomyoplasty. We recently developed
a new aptamer-based specific selection of MSC to provide these cells “ready to transplant” directly after isolation.
Here we evaluated the tracking by MRI of just isolated and freshly transplanted MSC into the heart using one
short ex vivo selection step combining specific aptamer-based isolation and labeling of the cells.
Bone marrow (BM) was collected from healthy pigs, the animals were euthanized and the heart was placed in a perfusion
model. During cold ischemia, immunomagnetic isolation of MSC from the BM by MSC-specific aptamers labeled
with Dynabeads® was performed within 2 h. For histological identification the cells were additionally stained with
PKH26. Approx. 3 x 106 of the freshly aptamer-isolated cells were injected into the ramus interventricularis anterior
(RIVA) and 5 x 10E5 cells were injected directly into myocardial tissue after damaging the respective area by freezing
(cryo-scar). 3 x 10E6 of the aptamer-isolated cells were kept for further characterisation (FACS and differentiation assays).
20 h after cell transplantation MRI of the heart using a clinical 3.0 Tesla whole body scanner (Magnetom Trio,
Siemens, Germany) was performed followed by histological examinations.
The average yield of sorted cells from 120 ml BM was 7 x 10E6 cells. The cells were cultured and presented MSClike
properties. MRI showed reproducible artifacts within the RIVA-perfusion area and the cryo-scar with surprising
excellent quality. The histological examination of the biopsies showed PKH26 positive cells within the areas which
were positive in the MRI in contrast to the control biopsies.
The immunomagnetic separation of MSC by specific aptamers linked to magnetic particles is feasible, effective and
combines specific separation- and labeling technique to an “one stop shop” strategy.
Left: MR images of the long axis of a porcine heart. The large susceptibility artifact is a standard surgical clip which helped to define the
areas of cell application. Note the wedge shaped area of signal extinction which correlated well with the distribution of magnetically labeled
MSC given via the right coronary artery.
Right: T2 star weighted flash 3D sequence (TR 30 ms, TE 10 ms, resolution 0.5 x 0.5 x 0.5 mm, Matrix 256 x 256). In the area highlighted
by the white arrow magnetically labeled MSC which were applied via the coronary artery are visible. The black arrow in the
upper part of the image highlights an area with magnetically labeled MSC which were injected directly into the myocardium (cryo scar)
107

Forschungsbericht 2007 – 2008
Standort Institut für Klinische und Experimentelle Transfusionsmedizin (IKET), Tübingen
Arbeitsgruppe Labor für Mesenchymale Stammzellen
Projektleiter Dr. med. R. Schäfer
Mitarbeiter Ursula Hermanutz-Klein
Kooperationen PD Dr. H.P Wendel (Abt. f. Thorax-, Herz- und Gefäßchirurgie, UKT), Dr. K. Guo (Abt. f. Thorax-,
Herz- und Gefäßchirurgie, UKT), Dr. B. Neumann (Abt. f. Thorax-, Herz- und Gefäßchirurgie, UKT), Dr.
V. Voth (Abt. f. Thorax-, Herz- und Gefäßchirurgie, UKT), T. Walker (Abt. f. Thorax-, Herz- und Gefäßchirurgie,
UKT), Dr. A.M. Scheule (Abt. f. Thorax-, Herz- und Gefäßchirurgie, UKT), Dr. T.O. Greiner
(Abt. f. Thorax-, Herz- und Gefäßchirurgie, UKT), PD Dr. J. Wiskirchen (Abt. f. Radiologische Diagnostik,
UKT), Dr. R. Kehlbach (Abt. f. Radiologische Diagnostik, UKT), Dr. J. Pintaske (Abt. f. Radiologische
Diagnostik, UKT)
Förderung Fortüne-Programm Universität Tübingen (fortüne F.1351478.1, F.1351478.2)
Laufzeit des Projektes 2006 – 2007
Weitere Informationen
108
Schäfer R, Wiskirchen J, Guo K, et al.
Aptamer-based isolation and subsequent imaging of mesenchymal stem cells in ischemic myocard by magnetic
resonance imaging.
Rofo. 2007 Oct;179(10):1009-15.

Stammzellen und Zelltherapie
Sicherheitsstudien zur Markierung von mesenchymalen Stammzellen
mit eisenhaltigen Nanopartikeln
Hintergrund und Projektbeschreibung
Unter Berücksichtigung des Strahlenschutzes, der örtlichen Auflösung sowie der Gewebepenetration erscheint die
Magnetresonanztomographie (MRT) unter Verwendung spezieller Zellmarkierungsmechanismen (z. B. mittels auf Ferrit
basierenden Kontrastmitteln) ein Verfahren darzustellen, das gute Voraussetzungen zur in vivo-Nachverfolgung von
Zelltherapeutika nach der Transplantation bietet. Das Gewebegesetz fordert, dass an Zelltherapeutika bezüglich Qualität
und Sicherheit die höchsten Anforderungen zu stellen sind. Das vorliegende Projekt dient, neben der Optimierung
von Markierungsprotokollen für Stammzellen, der Evaluation des Risikoprofils von Ferritpartikeln bei der
Markierung von Stammzellen. Hierzu wurden unterschiedliche Markierungsprotokolle (Fe-Partikel mit und ohne
Transfektionsagentien) entwickelt und in vitro sowie in vivo mögliche Auswirkungen auf die Biologie von mesenchymalen
Stammzellen (MSC) bzw. den Krankheitsverlauf im Tiermodell untersucht.
Hochregulation des Transferrinrezeptors an der Zelloberfläche (a), Reduktion der Koloniebildungsrate (b) und der Migrationskapazität (c)
von MSC. In vivo-Krankheitsverlauf im Rattenmodell (Experimentelle Allergische Encephalomyelitis = Modellerkrankung für Multiple
Sklerose) (d) Rot: Fe-markierte MSC; Blau: unmarkierte MSC; schwarz: Kontrolltiere, die keine MSC erhielten.
Wichtigste Ergebnisse
a b c
4
3
e
r
o
c
S
2
1
0
MSC JPR-MSC control
Time [day]
1 6 11 16 21 26 31 36
d
Je nach Markierungsprotokoll werden die Fe-Nanopartikel sofort in die MSC aufgenommen, oder erst nach einer initialen
Komplexierungsphase auf der Zelloberfläche. Die Markierung von MSC mit Fe-Nanopartikeln führt zur Beeinflussung
des Eisenstoffwechsels der MSC sowie zu einer Reduktion der Koloniebildungsrate und der
Migrationskapazität von MSC. In vivo führt die Applikation von Fe-markierten MSC zur Verschlechterung des Krankheitsverlaufs
im Rattenmodell (Experimentelle Allergische Enzephalomyelitis, eine Modellerkrankung für Multiple
Sklerose). Weitere funktionelle Untersuchungen sowie die Entwicklung von sicheren Markierungsprozeduren sind geplant.
109

Forschungsbericht 2007 – 2008
Safety studies on iron nanoparticle based labeling of mesenchymal stem cells
Magnetic Resonance Imaging (MRI) is a most suitable technique for the in vivo tracking of iron labeled stem cells.
Prior to the application to the human system it is crucial to develop standardised and safe labeling protocols of stem
cells. The major goals of the project are the optimisation of labeling protocols of mesenchymal stem cells (MSC) and
the evaluation of the risk profile of iron nanoparticles used for the labeling of MSC. We developed various labeling
protocols (iron nanoparticles with and without transfection reagents) and investigated possible effects on MSC in
vitro and in vivo effects in a rat model. Depending on the respective labeling protocol the iron naoparticles were immediately
taken up into the MSC or initially complexed on the surface of the MSC. Labeling of MSC with iron nanoparticles
influenced the iron metabolism of the MSC, reduced the ability of colony formation and reduced the
migration capacity of the MSC. The application of MSC labeled with iron nanoparticles aggravated the clinical symptoms
in experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE, an animal model of multiple sclerosis). Additional functional
investigations and the development of safe labeling procedures are ongoing.
Up-regulation if the transferrin receptor on the surface of MSC (a), reduction of the ability of colony formation (b) and the migration capacity
(c) of MSC. Disease course of rats suffering from EAE (d), red: Fe-labeled MSC; blue: unlabeled MSC; black: control animals.
Standort Institut für Klinische und Experimentelle Transfusionsmedizin (IKET), Tübingen
Arbeitsgruppe Labor für Mesenchymale Stammzellen, interdisziplinäre AG „Molecular Stem Cell Imaging (MSCI)“
Projektleiter Dr. med. R. Schäfer
Mitarbeiter Cand. med. G. Siegel, Cand. med. M. Müller, Dipl. Biol. M. Ayturan, Ursula Hermanutz-Klein, M. Hirlinger,
M. Rädlein
Kooperationen PD Dr. J. Wiskirchen (Abt. f. Radiologische Diagnostik, UKT), Dr. R. Kehlbach (Abt. f. Radiologische
Diagnostik, UKT), Dr. R. Bantleon (Abt. f. Radiologische Diagnostik, UKT), Dr. J. Pintaske (Abt. f.
Radiologische Diagnostik, UKT), Dr. T. Kluba (Orthopädische Klinik, UKT), Prof. H. Wolburg (Inst. f.
Pathologie, Univ. Tübingen), S. Conrad (Inst. f. Anatomie, Univ. Tübingen), Prof. K. Dietz (Inst. f. Biometrie,
Univ. Tübingen), Prof. R. Weissert (Hertie Institut f. Klinische Hirnforschung Tübingen)
Förderung Fortüne-Programm Universität Tübingen (fortüne F.1351478.1, F.1351478.2)
Laufzeit des Projektes 2006 – 2008
110
a b c
4
3
e
r
o
c
S
2
1
0
MSC JPR-MSC control
Time [day]
1 6 11 16 21 26 31 36
d

Weitere Informationen
Stammzellen und Zelltherapie
Schäfer R, Kehlbach R, Müller M, Bantleon R, Kluba T, Ayturan M, Siegel G, Wolburg H, Hermanutz-Klein U, Markulin
M, Northoff H, Dietz K, Claussen CD, Wiskirchen J
Labeling of human mesenchymal stromal cells with superparamagnetic iron oxide leads to a decrease in migration
capacity and colony formation ability.
Cytotherapy 2009 Feb 3:1-11. [Epub ahead of print]
Schäfer R, Ayturan M, Bantleon R, Kehlbach R,Siegel G, Pintaske J,Conrad S, Wolburg H, Northoff H, Wiskirchen
J, Weissert R
The Use of Clinically Approved Small Particles of Iron Oxide (SPIO) for Labelling of Mesenchymal Stem Cells Aggravates
Clinical Symptoms in Experimental Autoimmune Encephalomyelitis and Influences their in vivo Distribution
Cell Transplantation 2008; 17:923-941.
Schäfer R, Kehlbach R, Wiskirchen J, et al. Transferrin Receptor Upregulation: In Vitro Labeling of Rat Mesenchymal
Stem Cells with Superparamagnetic Iron Oxide
Radiology. 2007 Aug; 244(2):514-23.
111

Forschungsbericht 2007 – 2008
Präventive und therapeutische CMV-Peptid-Vakzinierung
bei Patienten nach allogener hämatopoietischer Stammzell -
transplantation
Hintergrund und Projektbeschreibung
Cytomegalie-Virus (CMV)-assoziierte Erkrankungen stellen eine häufige und lebensbedrohliche Komplikation nach allogener
hämatopoietischer Stammzelltransplantation dar. Antivirale Substanzen zur Prophylaxe und Therapie sind
zum Teil mit deutlichen Nebenwirkungen verbunden, so dass neue Behandlungsformen wie z. B. Vakzinierungskonzepte
angestrebt werden. Da sich Peptid-Vakzinierungsstrategien bei hämato-onkologischen Malignomen als sicher
und effektiv erwiesen haben, soll in dieser klinischen Studie eine präventive und therapeutische Vakzinierung mit dem
CMV-spezifischen Protein pp65 erfolgen. Ziel ist eine spezifische T-Zell-Immunreaktion gegen CMV. Die Peptid-Vakzinierung
soll eine lang anhaltende CMV-spezifische CD8-positive zytotoxische T-Zellimmunität induzieren, bedrohliche
CMV-Pneumonien verhindern und damit die Prognose nach allogener Stammzelltransplantation verbessern.
Voraussetzung für die klinische Studie ist eine Herstellungserlaubnis für die CMV-Vakzine nach dem Arzneimittelgesetz.
Im Rahmen des Projektes werden hierzu die entsprechenden Unter suchungen zur Qualität der Ausgangsstoffe
sowie der Wirksamkeit, Unbedenklichkeit und Lagerbarkeit durchgeführt und die Spezifikation und Dosierung des
Impfstoffes festgelegt.
Wichtigste Ergebnisse
112
Cytomegalie-Virus:
Schematischer Aufbau
(G. Cohen, 2007)
Für die klinische Studie zur CMV-Peptid-Vakzinierung wurden umfangreiche Laborunter suchungen zur Etablierung,
Validierung und behördlichen Genehmigung zur Herstellung des Impfstoffes durchgeführt und ein positives Votum
der Ethikkommission Ulm eingeholt. Das Immun-Monitoring in der CMV-Multimer-Technik wurde weiter entwickelt
und die CMV-Peptid-Vakzine mit neu etablierten Bio-Assays mit in vitro-Untersuchungen validiert. Nach Erhalt der
behördlichen Genehmigung für die Impfstoff-Herstellung sind bei den Patienten insgesamt vier Vakzinierungen in
zweiwöchigen Abständen geplant. Ziel ist die Prüfung der Sicherheit, der CMV-spezifischen Immunreaktion mittels T-
Zell-Funktionsassays sowie der Nachweis der klinischen Wirksamkeit durch molekularbiologische Begleituntersuchungen.

Stammzellen und Zelltherapie
Preventive and therapeutic CMV-peptide vaccination study of patients after allogeneic haematopoetic stem
cell transplantation
This clinical study aims at an enhanced specific T-cell response against CMV using the CMV-specific peptide pp65
for preventive and therapeutic vaccination of patients at high risk for CMV infection. Having reached the consent of
the ethics committee extensive laboratory analyses were performed for the approval of the developed vaccine by the
regulatory authorities. Four vaccinations at bi-weekly intervals are scheduled. Monitoring consists of multiple bio-assays
and the assessment of CMV-specific T-cell responses in vitro. A reduction of virus load in vivo and overall safety
of the procedure will also be evaluated.
Schema der Antigenpräsentation und Immunantwort Therapiestrategie der Peptid-Vakzinierung
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Zelluläre Immuntherapie und Stammzelltransplantation
Projektleiter Prof. Dr. med. Michael Schmitt und Dr. med. Markus Wiesneth
Mitarbeiter Marlies Götz (MTA)
Birgit Maccari (MTA)
PD Dr. med. Jochen Greiner (Wissenschaftler)
Dr. med. Georg Härter (Wissenschaftler)
Dr. med. Peter Schauwecker (Wissenschaftler)
Dr: med. Anita Schmitt (Wissenschaftler)
Prof. Dr. med. Hubert Schrezenmeier (Ärztlicher Direktor)
Kooperationen Klinik für Innere Medizin III
Universitätsklinikum Ulm
Förderung Bundesministerium für Bildung und Forschung (BMBF)
Laufzeit des Projektes 01.11.2007 – 31.10.2010
Weitere Informationen
Yao, J., Bechter, C., Wiesneth, M., Härter, H., Götz, M., Germeroth, L., Guillaume, P., Hasan,
F., von Harsdorf, S., Mertens, T., Michel, D., Döhner, H., Bunjes, D., Schmitt, M., Schmitt, A.:
Multimer staining of cytomegalovirus phosphoprotein 65-specific T cells for diagnosis and therapeutic purposes:
A comparative study.
Clin Infect Dis. 46 (10): 96-105 (2008)
Schmitt, A., Ono, Y., Bechter, C., Yao, J., Götz, M., Maccari, B., Schauwecker, P., Wiesneth, M., Schmitt, M.:
Peptide vaccine preparation and validation with a bio-assay.
50th Annual Meeting – American Society of Hematology (ASH), San Francisco, California (USA) (2008)
Blood 112(11): No. 5444 (2008)
Schmitt, A., Einsele, H., Grigoleit, G., Busch, D., Germeroth, L., Tonn, T., Wiesneth, M., Rojewski, M., Marx, M.,
Odendahl, M., Bechter, C., Fei, F., Yu, Y., Chen, B., von Harsdorf, S., Döhner, H., Schrezenmeier, H., Bunjes, D.,
Schmitt, M.:
Adoptive CMVpp65 Specific CD8+ T cell transfer to post-transplant patients with the Streptamer technology.
Gemeinsame Jahrestagung der Deutschen, Österreichischen und Schweizerischen Gesellschaften für Hämatologie
und Onkologie, Wien (2008)
Onkologie 31: Suppl. 4, 27 (No. V63) (2008)
113

Forschungsbericht 2007 – 2008
Deutsches Register für Stammzelltransplantationen
Hintergrund und Projektbeschreibung
Das Deutsche Register für Stammzelltransplantationen erfasst im Auftrag der Deutschen Arbeitsgemeinschaft für
Blut- und Knochenmarktransplantationen (DAG-KBT) alle in Deutschland durchgeführten allogenen und autologen
Stammzelltransplantationen. Das Register wird in Zusammenarbeit von ZKRD und Institut für Transfusionsmedizin in
Ulm in Kooperation mit DRST-Einrichtungen in Essen (Prof. Dr. D. W. Beelen; PD Dr. H. Ottinger) und Frankfurt (Pädiatrisches
Register) (Prof. Dr. T. Klingebiel) geführt. Neben dem Aufbau eines vollständigen Datenbestandes zur
Qualitätssicherung und als Basis von Studienplanungen im Stammzelltransplantationsbereich verfolgt das DRST
spezifische Fragestellungen zur Optimierung der allogenen Stammzelltransplantation.
Entwicklung der Fallzahlen von allogenen Stammzelltransplantationen mit verwandten und unverwandten Spendern in Deutschland im
Zeitraum von 1998 bis 2007.
114
Anzahl
2000
1800
1600
1400
1200
1000
800
600
400
200
0
Allogene Ersttransplantationen in Deutschland 1998 - 2007:
Nutzung von Knochenmark (KM) und
peripherem Blut (PB) als Stammzellquelle
559
896
1055 1051 1225
1100 1093
559 521 383 329 316 314
1614
288 289
1739
1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007
Jahr
266
1847
KM
PB
264

Wichtigste Ergebnisse
Stammzellen und Zelltherapie
Die Zahl der im DRST registrierten allogenen Transplantationen ist auf über 13.400 angestiegen, mit Akuter Myeloischer
Leukämie als eindeutig häufigster Transplantationsindikation. Die Zahl registrierter autologer Transplantationen
beträgt über 26.500. Somit ist nach der Aufbauphase des DRST, in welcher die Datenerfassung im Vordergrund
stand, eine Basis für Auswertungen der Transplantationsergebnisse auf nationaler Basis geschaffen. Das DRST führte
entsprechend in den letzten zwei Jahren Analysen zu den folgenden Fragestellungen durch:
– Ergebnisse der allogenen Stammzelltransplantation bei chronisch myeloischer Anämie, vor allem mit Vergleich
von Standardkonditionierung und Konditionierung reduzierter Intensität,
– Einsatz von Ganzkörperbestrahlung in der Konditionierung und Vergleich von alleiniger Chemokonditionierung mit
Bestrahlungs-basierter Konditionierung,
– Ergebnisse der allogenenen Transplantation bei aplastischer Anämie in Abhängigkeit von Spendertyp und
Stammzellquelle,
– Vergleich peripherer Blutstammzellen und Knochenmark als Stammzellquelle in der Pädiatrie,
– Risikoanalyse transplantationsassoziierter Mortalität bei Kindern,
– Retrospektive Analyse der allogenen Zweittransplantation bei AML-Rezidiv nach allogener Ersttransplantation,
– Weitere Auswertungen, u. a. zur Transplantation bei Lymphomen, ALL, AML und CML werden zur Zeit durchgeführt.
Summary
Since 1998 the number of allogeneic stem cell transplantations in Germany has increased steadily. In the meantime
more than 13,400 allogeneic and more than 26,500 autologous transplantations are registered in the database of the
German Registry for Stem Cell Transplantation (DRST). This forms the basis to conduct analyses of transplant results
on a national basis. Several studies have been performed (transplant in CML, pediatric transplant; Aplastic Anemia;
second allogeneic transplant after relapse). Several other analyses are ongoing.
In 2007 64 % of allogeneic transplantations were performed with stem cells from unrelated donors. 87 % of allogeneic
stem cell transplants were performed with peripheral blood stem cells, 12.5 % with bone marrow. Cord blood
was only rarely used (2007 n = 8). The DRST has successfully established itself as national registry for haematopoietic
stem cell transplantation in Germany. It provides the basis for quality assurance methods and can serve as a platform
for scientific studies with the aim of further improvement of stem cell transplantation.
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Deutsches Register für Stammzelltransplantation (DRST)
Projektleiter Dr. Dr. C. Müller; Prof. Dr. H. Schrezenmeier
Mitarbeiter Dr. Dr. C. Müller (ZKRD), Frau S.Allgaier, Frau S. Müller, Frau Feldmann, Frau Neidlinger
Kooperationen Prof. W. Beelen, PD Dr. H. Ottinger, Universitätsklinik Essen
Prof. Dr. T. Klingebiel, Unversitätsklinik Frankfurt
Förderung Deutsche José Carreras Leukämie-Stiftung e.V.
Laufzeit des Projektes aktuelles Projekt: 01.01.2006 – 31.12.2009
Weitere Informationen
Ottinger H., Müller C., Beelen D.W., Ehninger G., Schmitz N., Zander A., Schrezenmeier H.: Entwicklungen in der
hämatopoietischen Stammzelltransplan tation. Daten des Deutschen Registers für Stammzelltransplantationen.
Deutsches Ärzteblatt 103(37): A2381-AA2386 (2006)
Weitere Informationen finden sich auf der DRST-Internetseite: www.drst.de
Jahresbericht 2007 (auf www.drst.de abrufbar) mit Ergebnissen der o.g. Auswertungen und DRST-bezogenen
Publikationen.
115

Forschungsbericht 2007 – 2008
Genetische Markierung und Modifikation von hämatopoietischen
und mesenchymalen Stammzellen zum direkten in vivo-Nachweis und
Verbesserung des Therapieeffektes
Hintergrund und Projektbeschreibung
Die mögliche Regeneration ischämisch geschädigten Gewebes, z. B. bei Myokardinfarkt oder zerebralem Insult,
durch Applikation autologer hämatopoietischer Stammzellen wird weiterhin kontrovers diskutiert. Um ein „Homing“
adulter Stammzellen in vivo direkt nachweisen zu können, wurde eine transiente, genetische Markierung von CD34positiven
Blutstammzellen mit Elektroporation für die klinische Anwendung etabliert. Basierend auf diesen Ergebnissen
erfolgt derzeit eine Weiterentwicklung mittels mRNA-Transfektion zur Modifikation von Stammzelleigenschaften,
insbesondere dem „Migrations- und Homing-Verhalten“ sowohl hämatopoietischer als auch mesenchymaler Stammzellen.
Expression und Vitalität der CD34+ Zellen nach genetischer Markierung mit LNGFR
Wichtigste Ergebnisse
Für die genetische Markierung von hämatopoietischen (PBSC) und mesenchymalen Stammzellen (MSC) wurde die
Elektroporation mit Plasmid DNA Delta-LNGFR (Low Affinity Nerve Growth Factor Receptor) für den klinischen Einsatz
etabliert. Die Transfektionseffizienz betrug bei peripheren Blutstammzellen mit cDNA bis zu 45 %. Mit mRNA ließ
sich die Transfektionseffizienz sowohl bei hämatopoietischen als auch bei mesenchymalen Stammzellen auf 90 %
steigern, ohne dass es zu einer Beeinträchtigung der Viabilität und der Proliferations-Fähigkeit der Zellen kam.
In vitro assays zeigten eine normale Ausdifferenzierung der transfizierten MSC zu Adipozyten, Chondrozyten und Osteoblasten.
Für das Verfahren der mRNA Nucleofektion, das zur Modifikation des „Migrations- und Homing-Verhaltens“
adulter Progenitorzellen geplant ist, wurde inzwischen vom Deutschen Patent- und Markenamt die Erteilung
eines Patentes beschlossen.
116
FACS nach 3 h
Mock
LNGFR
44%
Immunhistochemie
% % positive positive cells cells
% viable cells
50 50
40 40
30 30
20 20
10 10
0 0
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Expressionskinetik
LNGFR LNGFR expression expression of transfected of transfected CD34CD34positivepositive PBSC PBSC
4 4 h h 36 36 h h 84 84 h h
time
time
120 120 h h 200 200 h h
Vitalitätskinetik
Vitalitätskinetik
Viability of Viability deltaLNGFR of deltaLNGFR transfected transfected CD34 CD34
positive positive PBSCs
PBSCs
4 h
80
70
60
50
40
30
20
10
0
4 h 36 h 36 h 84 h 84 h 120 h 200 h
120 h 200 h
time
% viable cells
time
Mock
Mock
LNGFR
LNGFR

Summary
Stammzellen und Zelltherapie
There is an ongoing debate about the impact and mechanism of tissue repair by autologous stem cells. Especially
questions about homing and integration of hematopoietic stem cells into the damaged tissue are not yet solved in
humans. Therefore a transient genetic labelling of CD34 positive peripheral stem cells by electroporation of plasmid
DNA Delta-LNGFR (low affinity nerve growth factor receptor) was established. While plasmid DNA showed a transfection
efficiency of up to 45 %, mRNA transfection was even more effective with about 90 % in hematopoietic as
well as in mesenchymal stem cells (MSC) without affecting viability and proliferation of the cells. In vitro assays
showed a normal differentiation of transfected MSC into adipocytes, chondrocytes and osteoblasts. In the future genetic
modification of stem cells should improve migration and homing for an enhanced therapeutic effect. For the
procedure of genetic modification by mRNA nucleofection a patent has been granted by the German Patent and
Trade Mark Office.
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Zelluläre Immuntherapie und Stammzelltransplantation
Projektleiter Prof. Dr. med. Jan Torzewski und Dr. med. Markus Wiesneth
Mitarbeiter PD Dr. med. Jochen Greiner, Dr. rer. medic. Markus Rojewski,
Dr. med. Klaus Schwarz, Dr. hum. biol. Juliane Wiehe
Kooperationen Klinik für Innere Medizin II, Klinik für Innere Medizin III, Universitätsklinikum Ulm
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen und Universitätsklinikum Ulm
Laufzeit des Projektes seit 01.2003, fortlaufend
Weitere Informationen
Greiner, J., Wiehe, J., Wiesneth, M., Zwaka, T.P., Prill, T., Schwarz, K., Bienek-Ziolkowski, M., Schmitt, M., Döhner,
H., Hombach, V., Torzewski, J.:Transient genetic labeling of human CD34-positive hematopoietic stem cells using
nucleofection. Transfus Med Hemother 31: 136-141 (2004)
Wiehe, J.M., Zimmermann, O., Greiner, J., Homann, J.M., Wiesneth, M., Hombach, V., Torzewski, J.: Labeling of
adult stem cells for in vivo-application in the human heart. Histol Histopathol. 20 (3): 901-906 (2005)
Greiner, J., Torzewski, J., Ponsaerts, P., Rojewski, M.T., Kronawitter, D., Schrezenmeier, H., Hombach, V., Döhner,
H., Schmitt, M., Wiesneth, M., Zimmermann, O., Wiehe, J.M.: Highly efficient mRNA- and cDNA-based transient
gene delivery into human progenitor cells. 48th Annual Meeting - American Society of Hematology (ASH), Orlando,
Florida (USA). Blood 108 (No. 11): 464b (No. 5471) (2006)
117

Forschungsbericht 2007 – 2008
Bedeutung der oxidativen Wirkung von eosinophilen Granulozyten auf
den biologischen Effekt von nekrotischem Tumormaterial hinsichtlich
der Reifung von dendritischen Zellen und der Proliferation von
mesenchymalen Stammzellen
Hintergrund und Projektbeschreibung
Solides Tumorgewebe geht typischerweise durch Nekrose zu Grunde und setzt DAMPs (damage associated molecular
patterns) frei, die neben der Leukozyteneinwanderung und Aktivierung von dendritischen Zellen (DCs) auch die
Neovaskularisierung und Proliferation des umgebenden (Tumor-) Gewebes induzieren. DAMPs beeinflussen somit
das „Tumor Microenvironment“ wesentlich. Bedeutsam hierbei könnte auch die stimulatorische Wirkung von DAMPs
auf mesenchymale Stammzellen (MSCs) insofern sein, als MSCs im Stande sind, eine Immunsuppression zu bewirken.
Die immunsuppressive Wirkung von MSCs basiert unter anderem auf der Expression des Enzyms indoleamindeoxygenase
(IDO), das L-Tryptophan in L-Kynurenin konvertiert.
Die erhöhte Konzentration von eosinophilen Granulozyten (Eos) im Blut (Bluteosinophilie) oder im Gewebe (Gewebseosinophilie)
zeigt sich nicht nur bei Autoimmunerkrankungen, Allergien und Parasitosen sondern auch im Rahmen
von Transplantatabstoßungsreaktionen und im Rahmen von Tumorabwehrreaktionen. Einwanderung von Eos ins
Transplantat spricht für eine Abstoßungsreaktion, konsistent mit dieser Beobachtung ist die Gewebseosinophilie bei
Kolorektalkarzinomen mit einer signifikant besseren Prognose bezüglich des Überlebens und der Metastasierungsrate
verbunden. Freigesetzte Faktoren aus nekrotischem (Tumor-) Gewebe – also DAMPs – wirken chemotaktisch auf
Eos und regen sie in hohem Maße zur O2-Radikalbildung an, was wiederum zu Oxidation dieser DAMPs führen kann.
Oxidierte DAMPs verlieren ihre stimulatorische Wirkung auf Eos. Wir konnten bereits zeigen, dass Eos im Stande sind
die Maturierung von DCs zu katalysieren.
Ziel der Studie ist die Überprüfung der Bedeutung Eos-induzierter Oxidation von DAMPs hinsichtlich der Induktion
der Reifung von dendritischen Zellen (DCs) und ihrer Polarisierung (DC1 vs. DC2), der Proliferation von mesenchymalen
Stammzellen (MSCs) und der Expression des immunsuppressiven Enzyms Indoleamindeoxygenase (IDO) durch
diese. Sollten wir zeigen können, dass Eos durch Oxidation von DAMPs ihre immunsuppressive und proliferationsinduzierende
Wirkung im „Tumor-microenvironment“ hemmen, öffnen sich therapeutische Optionen, die eine oxidierende
Umgebung des Tumorgewebes favorisieren und ggf. die Implikation zur Folge hätten, Eosinophile bzw.
eosinophil-spezifische Zytokine und Chemokine (IL-5, Eotaxin) bei Tumor-Vakzinierungsstrategien einzusetzen. Durch
ihre Eigenschaft vom nekrotischen Material angelockt zu werden verbunden mit der relativ kurzen Lebensdauer
(ca. 24 bis 48h) bieten Eos eine Option zum lokalen und relativ gut steuerbaren Einsatz durch Transfusionen.
Wichtigste Ergebnisse
Es ist bereits beschrieben, dass Eosinophile im nekrotischen Tumorgewebe akkumulieren. Wir untersuchten den stimulierenden
Effekt von nekrotischem Tumorzellmaterial (DAMPs) auf Eosinophile und konnten zeigen, dass das Lysat
aus Tumorgewebe dosisabhängig eine Degranulation von Eosinophilen bewirkt, gemessen wurde der Verlust des intrazellulären
„major basic protein“ (MBP) durch FACS-Analyse wie auch die Konzentration der freigesetzten „eosinophil
peroxidase“ (EPO) im Überstand (Abb. 1). Um sicherzustellen, dass es sich um nekrotisches (vs. apoptotisches)
Material handelt, bestätigten wir unsere Daten durch Verwendung eines DAMP-Proteins (HMGB1), das spezifisch bei
Nekrose (nicht bei Apoptose) freigesetzt wird. Interessanterweise verliert das Tumorlysat seine Wirkung, sobald es
H2O2 in einer Konzentration (0,08 mM) ausgesetzt wurde, die normalerweise im entzündlichen Gewebe herrscht
(Abb. 1). Wir konnten nachweisen, dass Eos sehr sensitiv auf nekrotisches Material durch Ankurbelung ihrer O2-Radikalbildung
(oxidativer Burst) reagieren. Im Vergleich zu unstimulierten Eos steigern bereits 100 lysierte Zellen/ml die
Produktion von O2-Radikalen um das sieben-fache, der Effekt ist nach fünf Minuten zu sehen und erreicht das Maximum
nach 30 Minuten. Neutrophile hingegen reagierten nicht auf die Stimulation mit DAMPs (Abb. 2). Die verwendete
Konzentration von H2O2 erzeugte allein keine Degranulation (nicht hier gezeigt).
Als Proliferationsstimulus zur Expansion von MSCs wird Thrombozytenlysat verwendet. Diese Methode wird im Rahmen
eines standardisierten Verfahrens zur MSC-Expansion für spätere klinische Anwendung bei uns im Hause durchgeführt.
Wir konnten aber nachweisen, dass sich das Thrombozytenlysat durch Lysat von anderen Zellen (HCT-116
118

Stammzellen und Zelltherapie
kolorektale Zell-Linie) ersetzen lässt (Abb. 3), hierbei wurden MSCs für sieben Tage mit humanem AB-Serum verschiedener
Konzentrationen allein und in Anwesenheit von verschiedenen Konzentrationen des Lysats von HCT-
Zellen inkubiert. Die Proliferation wurde mittels DNA-bestimmung (CytoQuant) ermittelt. Lysat erhöht die Proliferation
von MSC in Anwesenheit vom Serum (1 bis 20 %) signifikant, während es allein keinen Einfluss hat.
Oxidierte DAMPs verlieren ihre
Wirkung auf Eosinophile
Oxidative impact of eosinophilic granulocytes on biologic activity of necrotic tumour material on maturation
of dendritic cells and on proliferation of mesenchymal stem cells.
Summary
DAMPs induzieren O2-Generierung
durch Eos
DAMPs verstärken die Proliferation von MSCs
Solid neoplastic tissue is typically associated with necrotic cell death leading to release of damage associated molecular
patterns (DAMPs). Released DAMPs from tumour cells serve as danger signals to the host and induce not only
leukocyte infiltration and maturation of dendritic cells (DCs) but also enhance neovascularisation and proliferation of
adjacent (tumor-) tissue. Thus, DAMPs have a significant impact on tumour microenvironment. DAMPs serve as potent
chemoattractants to eosinophilic granulocytes (Eos) and enhance their oxidative burst leading to generation of
reactive oxygen species (ROS) which are capable of oxidizing DAMPs. Oxidized DAMPs lose their capacity to further
stimulate Eos. We are focussing on the biologic impact of Eos-induced oxidation of DAMPs regarding to the possibly
modified capacity of these danger signals to induce DC maturation and polarisation towards DC1 vs DC2 on the one
hand, and their impact on inducing proliferation of mesenchymal stem cells as well as inducing upregulation of the
immunosuppressive enzyme (indoleamine dioxygenase) by MSCs, on the other hand.
119

Forschungsbericht 2007 – 2008
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Biologische Rolle der Eosinophilen im soliden Tumorgewebe
Projektleiter Dr. med. R. Lotfi
Mitarbeiter Gloria Herzog, Anne Meister, Karin Fuchs, Ghasem Solgi, Gisela Baur
Kooperationen - Arbeitsgruppe M.T. Lotze und P. Kalinski (Hillmann Cancer Center, Pittsburgh, U. S. A.), die klinische
Studien zur DC-basierte Vakzinierungen durchführen
- Arbeitsgruppe J.J. Lee (Mayo Clinic Arizona, Scottsdale, U. S. A.), die über hypereosinophile und
Eosinophil-knock-out Mäusen verfügt und an dem Thema Charakterisierung der Rolle der Eosinophilen
im Tumorgewebe arbeitet.
Förderung Mittel des DRK-Blutspendedienstes Baden-Württemberg - Hessen und des Universitätsklinikums
Ulm
Laufzeit des Projektes seit 01.04.2007
Weitere Informationen
120
Lotfi R, Lee JJ, Lotze MT. Eosinophilic granulocytes and damage-associated molecular pattern molecules
(DAMPs): role in the inflammatory response within tumors. J Immunother 2007;30:16-28.
Lotfi R, Herzog GI, DeMarco R et al. submitted. Eosinophils Oxidize Damage Associated Molecular Pattern Molecules
[DAMPs] Derived From Stressed Cells. The Journal of experimental medicine 2009
Lotfi R, Lotze MT. Eosinophils induce DC maturation, regulating immunity. Journal of leukocyte biology
2008;83:456-460.

Stammzellen und Zelltherapie
Markierung von Stammzellen für die Detektion von Migration
sowie Beeinflussung der Differenzierung von Stammzellen durch
Nanopartikel als Drug-Delivery-System
Hintergrund und Projektbeschreibung
Eine wesentliche Voraussetzung, um die Wirkung neuer Zelltherapeutika zu verbessern, ist das Verständnis des Verbleibs
der applizierten Zellen sowie die gezielte Beeinflussung der Differen zierung der Stammzellen.
Im ersten Teil des Projekts werden zur Markierung von mesenchymalen Stammzellen und anderen Zellpopulationen
Nanopartikel verwendet, welche als „dual reporter“ Partikel sowohl einen Fluoreszenzfarbstoff als auch Eisenoxid-
Partikel enthalten. Dadurch ist es möglich, die so markierten Zellen mittels FACS und Laser-Scanning-Mikroskopie
(LSM) und gleichzeitig auch mittels Kernspintomographie zu untersuchen, um das Homing- und Migrationsverhalten
in vivo darzustellen. Es werden sowohl klinisch zugelassene als auch in Zusammenarbeit mit dem Institut für Organische
Chemie III der Universität Ulm und dem Max-Planck-Institut (MPI) für Poly merfoschung Mainz (Prof. Dr. Katharina
Landfester) speziell hergestellte Partikel verwendet und Interak tionen dieser neuartigen Materialien mit Zellen
nachgewiesen.
In einem weiteren Teilprojekt wird die gezielte Beeinflussung der Differenzierung von MSCs in der Nähe von Hartimplantaten
(z. B. Hüftkopfimplantaten, Zahnstifte) durch eine Oberflächen beschichtung der Metallimplantate untersucht.
Ortsständige MSCs bzw. zusätzlich zum Implantat applizierte MSCs sollen an der Oberfläche des
Metallimplantats dahingehend beein flusst werden, dass sie osteoblastär differenzieren, d. h. die adipogene und
chondrogene Diffe renzierung gehemmt wird. Außerdem sollen Osteoklasten in ihrer Funktion gehemmt werden. Dies
soll durch ein mehrschichtiges System aus Bürstenpolymeren und Kalziumapatit-Schicht (Prof. Dr. Dirk Volkmer, Anorganische
Chemie II, Ulm) sowie Nanopartikeln als Drug-Delivery-System (Prof. Dr. Katharina Landfester, Organische
Chemie III, Ulm, und MPI für Polymer for schung, Mainz) für Osteoklasteninhibitoren sowie Differenzierungsfaktoren für
die osteogene Richtung der MSCs erreicht werden. In einer weiteren Kooperation wird die erreichte erhöhte Festigkeit
der Knochenstruktur durch die Arbeitsgruppe von Prof. Dr. Anita Ignatius (Institut für Unfallchirurgische Forschung
und Biomechanik Ulm) untersucht.
Darstellung der Oberlächenmodifikation von Metallimplantaten zur gezielten Beeinflussung der MSC Differenzierung:
Wichtigste Ergebnisse
Ti
Oberlächen-
Aktivierung
Ti
Biokmpatible
Bürstenpolymere
Oberflächenmodifikation von Implantaten
CaP
Schicht
Nanopartikel als
Drug Delivery
Ti Ti Ti
Durch gezielte Veränderung der Oberflächeneigenschaften von superparamagnetischen Nano partikeln konnten die
wesentlichen Faktoren für eine Aufnahme dieser Kontrastmittel in Zellen bestimmt werden. Das polymere Material
bestimmt die Aufnahmekinetik (z .B. viel raschere Auf nahme von Polyisopren – im Vergleich zu Polystyrol-Partikel).
CaP
Hydrogel Hydrogel
Drug-delivery System
121

Forschungsbericht 2007 – 2008
Die Oberflächenladung der Parti kel ist ebenfalls – in Abhängigkeit vom Zielzelltyp – ein wesentlicher Parameter, welcher
die Effi zienz und Kinetik der Partikelaufnahme beeinflusst. In Studien zur subzellulären Lokalisation wurden die
Partikel vor allem in Endosomen gefunden. Die Aufnahme der Nanopartikel ist ein Energie-abhängiger Prozess unter
Beteiligung von Dynamin und F-Aktin. Makropinozytose spielt eine Rolle bei der Aufnahme positiv geladener Partikel.
Clathrin-coated pits spielen hin gegen eine untergeordnete Rolle.
Im zweiten Teilprojekt konnten die ersten Schichten der Bürstenpolymere sowie Nanopartikel in MSC-Zellkulturen getestet
werden. Die bisher getesteten, nicht-wirkstoffhaltigen Schichten bzw. Nanopartikel zeigen als Leerpartikel
keine Zytotoxiziät. Das Differenzierungspotential bleibt mit diesen nicht-wirkstoffhaltigen Nanopartikeln erhalten, so
dass nun die Beladung von Substan zen zur gezielten Beeinflussung der Differenzierung begonnen werden kann.
Summary
Superparamagnetic nanoparticles can be loaded into different clinically interesting cell types and can be detected in
vitro and in animal models enabling studies on migration and homing of e.g. mesenchymal stem cells. This should
enhance the assessment of cell therapeutics and should booster the development of better cell populations with a
higher therapeutical impact.
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Zelluläre Immuntherapie und Stammzelltransplantation
Projektleiter Dr. med. Volker Mailänder/Prof. Dr. H. Schrezenmeier
Mitarbeiter Steffen Lorenz (Biologie Doktorand), J.Dausend (Doktorandin), Karin Fuchs (MTA), T. Becker (MTA),
M. Lorenz
Kooperationen Max-Planck-Institut für Polymerforschung, Mainz (Prof. Dr. K. Landfester);
Institut für Organische Chemie III, Universität Ulm
Klinik für Innere Medizin II (Prof. Dr. V. Rasche).
Klinik für Dermatologie und Allergologie (Prof. Dr. Scharffetter-Kochanek; Dr. A. Sindrilaru)
Anorganische Chemie II, Ulm, Prof. Dr. Dirk Volkmer
Organische Chemie III, Ulm und MPI für Polymerforschung, Mainz, Prof. Dr. Katharina Landfester
Institut für Unfallchirurgische Forschung und Biomechanik, Prof. Dr. Anita Ignatius
Förderung DFG Schwerpunktprogramm (SPP1104, MA 3271/1)
Bausteinprojekt der Medizinischen Fakultät Universität Ulm (P.871)
Landesstiftung Baden-Württemberg (P-LS-Biomat/02)
Laufzeit des Projektes DFG Schwerpunktprogramm: 01.07.2004 – 30.09.2006
Bausteinprojekt: 01.01.2005 – 31.12.2007;
EU-Kommission (7th Framework Programme CASCADE ab 01.2009).
Landesstiftung Baden-Württemberg: 01.01.2008 – 31.12.2010
Weitere Informationen
122
Weiss CK, Lorenz MR, Landfester K, Mailänder V (2007) Cellular uptake behavior of unfunctionalized and functionalized
PBCA particles prepared in a miniemulsion. Macromol Biosci 7: 883-896. [IF 2,831]
Lorenz M, Kohnle MV, Dass M, Walther P, Höcherl A, Ziener U, Landfester K, Mailänder V (2008) Synthesis of fluorescent
polyisoprene nanoparticles and their uptake into various cells. Macomol. Biosci. 8: 711-727. [IF 2,831]
Mailänder V, Lorenz M, Musyanovych A, Holzapfel V, Fuchs K, Wiesneth M, Walter P, Landfester K, Schrezenmeier
H (2008) Carboxylated superparamagnetic iron oxide particles labelled cells intercellularly without transfection
agents. Mol Imaging Biol 10: 138-146. [IF 2,951]
Musyanovych A, Schmitz-Wienke J, Mailänder V, Walther P, Landfester K (2008) Preparation of biodegradable polymer
nanoparticles by miniemulsion technique and their cell interactions. Macromol Biosci 8: 127-139. [IF 7,677]
Dausend J, Musyanovych A, Dass M, Walther P, Schrezenmeier H, Landfester K, Mailänder V (2008) Uptake mechanism
of oppositely charged fluorescent nanoparticles in HeLa cells. Macromol Biosci 8: 1135-1143. [IF 2,831]
Weiss, C-K, Kohnle, M-V, Landfester K, Hauk T, Fischer D, Schmitz-Wienke, J, Mailänder V (2008) The first step
into the brain: Uptake of NIO-PDCA nanoparticles by endothelial cells in vitro and in vivo, and direct evidence for
the blood-brain barrier permeation. Chem Med Chem 3: 1395-1403. [IF 2,825]

Knochenmarkstammzellen zur intrakoronaren Therapie
bei akutem Myokardinfarkt im Rahmen einer randomisierten,
placebo-kontrollierten, doppelt-blinden Studie
Hintergrund und Projektbeschreibung
Stammzellen und Zelltherapie
Die bisherigen Untersuchungen zur intrakoronaren Applikation von autologen Knochenmark stammzellen zur Therapie
eines akuten Myokardinfarktes ergaben unterschiedliche Ergebnisse. Darüber hinaus ist der potentielle Mechanismus,
der zur Verbesserung der links-ventrikulären Ejektionsfraktion und der Myokardregeneration führen soll, weiterhin
unklar.
In Kooperation mit der Klinik für Innere Medizin II des Universitätsklinikums Ulm wurde zur weiteren Abklärung des
potentiellen Therapieeffektes von Knochenmarkstammzellen eine randomisierte, placebo-kontrollierte, doppelt-blinde
Studie mit intrakoronarer Applikation von autologen Knochenmarkstammzellen bei Patienten mit schwerem akutem
Myokardinfarkt durchgeführt. Hierzu wurden die behördlichen Genehmigungen für das Herstellungsverfahren und die
klinische Studie sowie ein positives Votum der Ethikkommission Ulm eingeholt. Wesentlicher Bestandteil dieser Studie
war neben einer standardisierten, GMP-gerechten Herstellung von Knochenmarkstammzellen die Etablierung
eines adäquaten Placebopräparates mit autologen Erythrozyten des Patienten. Für die klinische Erfolgs -
beurteilung wurden zusätzlich hoch auflösende Bildgebungsverfahren (MRT) zur Auswertung des Infarktareals und
der Wandmotilität sowie verschiedene Funktionsparameter wie die links-ventrikuläre Ejektions fraktion eingesetzt.
Stammzellpräparation im Reinraum Zellgehalt der Stammzellpräparate
Wichtigste Ergebnisse
Für die klinische Studie wurde ein Standardverfahren zur GMP-gerechten Herstellung von autologen Knochenmarkstammzellen
sowie eines visuell nicht unterscheidbaren Placebo präparates etabliert. Bisher wurden insgesamt
49 Patienten mit einer 2 : 1 Randomisation Stammzellen : Placebo im Rahmen dieser randomisierten, placebo-kontrollierten,
doppelt-blinden Studie behandelt. Bei keinem der Patienten traten unerwünschte Nebenwirkungen nach
der intrakoronaren Applikation der Stammzellen bzw. des Placebopräparates auf. Alle Präparate wurden auf ein fixes
Volumen von 15 ml nach Ficoll-Separation und Waschen zur intrakoronaren Applikation eingestellt. Die Zellzahl der
Stammzellpräparate betrug im Mittel 4,5 ± 1,5 x 10E8 NC mit 0,8 ± 0,4 % CD34 und 0,4 ± 0,2 % CD133 und
0,16 ± 0,11 % VEGFR. Die colony assays zeigten im Mittel 181 ± 81 BFU-E und 36 ± 16 CFU-GEMM pro 10E5 NC.
Die Viabilität betrug 99 ± 1 %.
In dem Projekt konnte gezeigt werden, dass die Methode zur Knochenmarkpräparation sehr zuverlässig und sicher
ist und sich diese Präparate auch für klinische Studien zur Markierung und Transfektion von Stammzellen eignen. Zur
Zeit erfolgt die klinische Auswertung mit Langzeitbeobachtung der Myokardregeneration und Funktion der Studienpatienten.
1,40
1,20
1,00
0,80
0,60
0,40
0,20
0,00
0,45 ± 0,15
NC
x109
0,80 ± 0,35
CD34
%
0,41 ± 0,23
CD133
%
0,16 ± 0,11
VEGFR
%
123

Forschungsbericht 2007 – 2008
Intracoronary stem cell therapy in patients with acute myocardial infarction:
A randomized, double-blind, placebo-controlled trial.
In pilot studies conflicting results have been reported regarding improvement of myocardial regeneration after intracoronary
application of autologous bone marrow stem cells. A randomized, placebo controlled, double-blind study
was performed in cooperation with the Clinic of Internal Medicine II of the University Hospital Ulm. Overall 49 patients
randomized 2 : 1 stem cells : placebo were treated. Side effects were not observed, demonstrating that the
stem cell preparation is a safe procedure encouraging further manipulatory steps such as labeling and transfection of
stem cells. Clinical outcome and myocardial regeneration is currently being evaluated.
Myokardinfarkt mit Gefäßläsion vor (links) und nach (rechts) Stentimplantation
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Zelluläre Immuntherapie und Stammzelltransplantation
Projektleiter Dr. med. Volker Mailänder und Dr. med. Markus Wiesneth
Mitarbeiter Andrea Brink (MTA), Birgit Maccari (MTA), Dr. med. Peter Schauwecker (Wissenschaftler),
Dr. med. Klaus Schwarz (Wissenschaftler), Prof. Dr. med. Hubert Schrezenmeier (Ärztlicher Direktor)
Kooperationen Prof. Dr. med. Jochen Wöhrle, Klinik für Innere Medizin II
Dr. med. Martin Bommer, Klinik für Innere Medizin III
Universitätsklinikum Ulm
Förderung Mittel des DRK-Blutspendedienstes Baden-Württemberg - Hessen und des Universitätsklinikums Ulm
Laufzeit des Projektes 01.08.2005 – 31.12.2008
Weitere Informationen
124
Wöhrle, J., Merkle, N., Mailänder, V., Nusser, T., Schauwecker, P., Torzewski, J., Bommer, M., Wiesneth, M.,
Schrezenmeier, H., Hombach, V.:
Intracoronary stem cell therapy in patients with acute myocardial infarction:
A randomized, double-blind, placebo-controlled trial.
American College of Cardiology - 58th Annual Scientific Session, Orlando, March 2009; submitted.
Schachinger, V., Erbs, S., Elsasser, A., Haberbosch, W., Hambrecht, R., Holschermann, H., Yu, J.,
Corti, R., Mathey, D.G., Hamm, C.W., Suselbeck, T., Assmus, B., Tonn, T., Dimmeler, S.,
Zeiher, A.M.:
Intracoronary bone marrow-derived progenitor cells in acute myocardial infarction.
N Engl J Med 355: 1210 (2006)

Validierung eines neuen Zellseparators Spectra Optia WBC zur
Sammlung autologer peripherer Blutstammzellen für die
Transplantation von Patienten nach Hochdosis-Chemotherapie
Hintergrund und Projektbeschreibung
Stammzellen und Zelltherapie
Die Transplantation autologer hämatopoietischer Stammzellen ist inzwischen fester Bestandteil vieler Therapieschemata
maligner und nicht-maligner Erkrankungen. Zur Transplantation werden nicht mehr wie früher Knochenmarkstammzellen,
sondern heute vorwiegend periphere Blutstammzellen verwendet, die mithilfe eines Zellseparators
(Zytapherese) bei den Patienten gewonnen werden. Entscheidend ist eine sichere und effektive Sammlung der
Stammzellen, deren Quantität und Qualität gegebenenfalls eine Mehrfachtransplantation und eine rasche hämatopoietische
Rekonstitution nach myeloablativer Therapie gewährleisten muss. Zur Verbesserung des Zytaphereseverfahrens
bei der Entnahme der peripheren Blutstammzellen wurde von der Firma Caridian BCT ein neuer Zellseparator
„Spectra Optia WBC“ entwickelt, der in Kooperation mit der Klinik für Innere Medizin III des Universitätsklinikums
Ulm in einer klinischen Studie validiert und optimiert wird. Hierzu werden bei den Patienten zumindest zwei Zytapheresen
durchgeführt. Die erste Stammzellapherese erfolgt mit dem neuen Zellseparator-Typ, die zweite mit dem Standard-Modell
zur Gewinnung eines Back up-Präparates, das der Sicherheit des Patienten und als Vergleich mit der
bisherigen Präparatequalität dient.
Kassettenset des Spectra Optia Zellseparators zur Stammzellsammlung
Wichtigste Ergebnisse
Zur Validierung des neuen Zellseparators im Rahmen der klinischen Anwendung wurde ein positives Votum der Ethikkommission
Ulm eingeholt. Bei bisher 24 Patienten wurden nach Chemotherapie und G-CSF-Stimulation zumindest
zwei Stammzellapheresen mit den beiden Zellseparatortypen, dem neuen und dem Standardmodell zum Vergleich
durchgeführt. Alle Zytapheresen verliefen komplikationslos. Die Handhabung des neuen Zellseparators ist durch eine
vereinfachte Menüführung sehr bedienerfreundlich und sicher. Durch ein kompaktes Kassettenset des neuen Spectra
Optia WBC Zellseparators (siehe Abb.) wird das extrakorporale Volumen und somit die Kreislaufbelastung des
Patienten deutlich reduziert.
125

Forschungsbericht 2007 – 2008
Im Vergleich der beiden Zellseparatortypen wurden neben den apherese-spezifischen Parametern folgende Parameter
erhoben und ausgewertet:
126
Sammel- und Extraktionseffizienz der CD34-positiven Blutstammzellen
Reinheit des Präparates in Bezug auf Erythrozyten-, Granulozyten- und Thrombozytenkontamination
Viabilität und Gehalt an kolonie-bildenden Vorläuferzellen vor und nach Kryokonservierung
Regeneration der Hämatopoiese nach autologer Transplantation.
Die mit dem neuen Zellseparator gewonnenen und kryokonservierten Präparate zeigten nach Auftauen und autologer
Retransplantation eine regelrechte und rasche Regeneration der Empfängerhämatopoiese. Die Retransfusionen verliefen
alle komplikationslos. Nach zwischen zeitlicher Optimierung der Software des neuen Zellseparators „Spectra
Optia WBC“ und nach Abschluss der Validierungsstudie erfolgt eine detaillierte Auswertung sämtlicher Zytaphereseund
Qualitätsparameter der Stammzelltransplantate.
Validation study to evaluate the performance of the new Cell Separator Spectra Optia WBC for autologous peripheral
blood stem cell collection
Autologous peripheral blood stem cells collected by apheresis are routinely used for haematopoietic reconstitution in
patients receiving myeloablative therapy. To improve the safety and efficacy of stem cell collections a new cell separator
Spectra Optia WBC has been developed. For validation of technical improvements at least two apheresis procedures
were performed in 24 patients following chemotherapy and G-CSF-mobilization of stem cells. For the first
apheresis the new Spectra Optia separator was used and the second apheresis was done by the standard system.
The stem cell collections by the Spectra Optia WBC were safe and effective and the transplantation of these products
showed a fast and complete haematopoietic reconstitution in patients after myeloablative therapy. Parameters
of the apheresis procedures and the products collected with both systems will be compared in details in the ongoing
study.
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Zelluläre Immuntherapie und Stammzelltransplantation
Projektleiter Dr. med. Peter Reinhardt und Dr. med. Markus Wiesneth
Mitarbeiter Sabrina Lindner (Operator)
Katrin Flor (Operator)
Heiko Lux (Operator)
Dr. med. Peter Schauwecker (Wissenschaftler)
Dr. med. Klaus Schwarz (Wissenschaftler)
Kooperationen Prof. Dr. med. Donald Bunjes
Klinik für Innere Medizin III
Universitätsklinikum Ulm
Förderung Caridian BCT Europe NV
Laufzeit des Projektes 15.03.2008 – 28.02.2009
Weitere Informationen
Reinhardt, P., Schauwecker, P., Maccari, B., Schrezenmeier, H., Wiesneth, M.:
Higher CD 34+ cell counts in poor mobilizers through every-other-day HPC-collection.
Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie,
Mannheim (2004)
Transfus Med Hemother 31: Suppl. 3, 9 (No.SP 503) (2004)
Wiesneth, M.:
Collection and processing of hematopoietic stem cells.
Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie,
Mannheim (2004)
Transfus Med Hemother 31: Suppl. 3, 9 (No.SP 501) (2004)

Untersuchungen zu mesenchymalen Stammzellen: Isolierung,
Charakterisierung, Differenzierung, Seneszenz, GMP-konforme
ex vivo Expansion und Migrations-Monitoring
Hintergrund und Projektbeschreibung
Stammzellen und Zelltherapie
Ein Schwerpunkt der Arbeitsgruppe besteht in der Etablierung der Therapie mit nicht-hämatopoietischen adulten
Stammzellen aus dem Knochenmark (Dr. M. Wiesneth, Dr. V. Mailänder, Dr. M. Rojewski). Hierbei stehen die Suche
nach geeigneten Parametern zur prospektiven Isolie rung dieser mesenchymalen Stamm-/Stromazellen (MSC) mittels
Hochgeschwindigkeits-Zellsortierung (FACSAria), die GMP-konforme Isolierung und Expansion von mesenchymalen
Stammzellen in einem (semi-)geschlossenen Zellkultursystem sowie die Verwendung von Medien und Medien zusätzen
nicht-tierischen Ursprungs (z. B. humanes Plättchenlysat) im Vordergrund. Die detaillierte durchflusszytometrische
Charakterisierung, das Seneszenzverhalten und die Untersuchung des Differenzierungspotentials von MSC
bilden einen weiteren Schwerpunkt der Arbeitsgruppe. Diese Untersuchungen stehen auch im Zusammen hang mit
der Etablierung einer Qualitätskontrolle expandierter MSC für den klinischen Einsatz und Entwicklung neuer Anwendungsgebiete.
Weitere Forschungsschwerpunkte sind die Untersuchung der immunsuppressiven Eigenschaf ten von
MSC sowie die Migration und das Homing von MSC durch einen nicht-invasiven Nachweis von superparamagnetischen
Nanopartikeln (siehe separate Projektbeschreibung).
Wichtigste Ergebnisse
Ein GMP-konformes Expansionssystem befindet sich in Evaluation. Für die Expansion von MSC kann auf Reagenzien
zurückgegriffen werden, die nicht tierischen Ursprungs (Lysat humaner Thrombozyten, PLP) sind. Assay-Systeme zur
funktionellen Charakterisierung der MSC durch Nachweis der Immunmo dulation, zur Quantifizierung der Proliferation
sowie zur immunphänotypischen Charakterisierung (siehe Tabelle) wurden etabliert.
In einem Verbundprojekt mit dem Institut für Unfallchirurgische Forschung, den Instituten für Organische Chemie III
und Anorganische Chemie II der Universität Ulm untersuchen wir in einem von der Landesstiftung Baden-Württemberg
geförderten Projekt, wie sich multifunktionale Coatings auf Hartgewebsimplantaten auf die Zellen in der Grenzfläche
Implantat/umliegendes Gewebe auswirken.
In Vorarbeiten für ein EU-gefördertes Projekt (CASCADE) zum Einsatz von MSC in der Thera pie chronischer Wunden
wird die Interaktion von MSC mit entzündlichen Komponenten, insbe sondere Makrophagen und Monozyten untersucht.
Oberflächenmarker
Expression
Oberflächenmarker
Expression
Oberflächenmarker
Expression
Oberflächenmarker
Expression
CD1a - CD14 - CD33 - CD54 - CD69 - CD106 - CD146 + CD263 -
CD3 - CD15 - CD34 - CD55 + CD73 + CD114 - CD154 - CD264 -
CD4 - CD16 - CD38 - CD56 - CD80 - CD117 - CD166 + CD271 -
CD8 - CD19 - CD40 - CD58 - CD83 - CD120a - CD178 ± FLAER +
CD9 + CD24 - CD44 + CD59 + CD86 - CD120b - CD184 - MDR -
CD10 - CD25 - CD45 - CD61 - CD90 + CD133 - CD235a - MHC I +
CD11c - CD29 + CD48 - CD63 + CD95 + CD140a + CD261 - MHC II -
CD13 + CD31 - CD49a - CD66b - CD105 + CD140b + CD262 + SSEA4 -
Übersicht über die Oberflächenmarker-Expression von MSC. Die Expression der angegebenen Oberflächenmarker wurde durchfluss zytometrisch
bestimmt, um ein geeignetes Expressionsprofil für die Charakterisierung expandierter MSC für die klinische Anwendung
definieren zu können. +: Expression nachweisbar; -: keine Expression nachweisbar. ±: schwache oder Präparate- bzw. Passagen-abhängige
Expression nachweisbar; FLAER: FITC-gekoppeltes Aerolysin; MDR: P-Glykoprotein; MHC I: HLA-A, HLA-B, HLA-C; MHC II:
HLA-DP, HLA-DQ, HLA-DR; SSEA4: Stage Specific Embryonic Antigen (siehe: M. T. Rojewski, B. M. Weber, H. Schrezenmeier (2008).
Phenotypic Characterization of Mesenchymal Stem Cells from various Tissues. Transfusion Medicine and Hemotherapy 35, 168-184.)
Oberflächenmarker
Expression
Oberflächenmarker
Expression
Oberflächenmarker
Expression
Oberflächenmarker
Expression
127

Forschungsbericht 2007 – 2008
Summary
Our group is establishing a closed system for GMP compliant expansion of human adult mesenchymal stem cells ex
vivo without the need for reagents of animal origin. This is manda tory for the clinical application of these cells. Besides
this main topic, we are characterising mesenchymal stem cells in detail and analyse their characteristics, mainly
their differentiation and migration potency and their ability to interact with other cells and nano particles. Nanoparticles
are used for non-toxic labeling to track migration of mesenchymal stem cells in vivo.
Vergleich des Differenzierungspotentials expandierter MSC aus Knochenmark: Die MSC wurden von in fötalem Kälber serum (FBS) bzw.
in filtriertem Plättchenlysat (PLP) isoliert und expandiert. Das adipogene (Oil Red O/Hematoxylin-Färbung), chondrogene (Methylenblau
Löffler) und osteogene (alkalische Phosphatase) Differenzierungspotential wurde untersucht. Kontrollen: undifferenzierte, gefärbte Ansätze
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Zelluläre Immuntherapie und Stammzelltransplantation
Projektleiter Dr. V. Mailänder, Prof. Dr. H. Schrezenmeier, Dr. rer. medic. Markus Rojewski
Mitarbeiter Gisela Baur (MTLA), Thomas Becker (MTLA), cand. rer. nat. Julia Dausend, cand. med. Eva Hennel,
Karin Fuchs (UTA), Anika Schrade, cand. med. Barbara Weber
Kooperationen Institut für Organische Chemie III / Max-Planck-Institut für Polymerforschung, Mainz (Prof. Dr. K.
Landfester)
Institut für Unfallchirurgische Forschung und Biomechanik (Prof.Dr.A.Ignatius)/Institut für Org.Chemie
III/Institut für Anorganische Chemie II (Prof.Dr.D.Volkmer).
Klinik für Dermatologie und Allergologie, Universität Ulm (Prof. Dr. K. Scharffetter-Kochanek, Dr. A.
Sindrilaru, S. Wieschalka)
Förderung EU-Kommission; Landesstiftung Baden-Württemberg;
Bundesministerium für Bildung und Forschung (BMBF)
Medizinische Fakultät, Universität Ulm
Laufzeit des Projektes seit 01.01.2003 – 2011
128
adipogen
chondrogen
osteogen
Isolierung und Expansion in FBS Isolierung und Expansion in PLP
Kontrolle Differenzierung Kontrolle Differenzierung

Weitere Informationen
Stammzellen und Zelltherapie
M. T. Rojewski, B. M. Weber, H. Schrezenmeier (2008). Phenotypic Characterization of Mesenchymal Stem Cells
from various Tissues. Transfusion Medicine and Hemotherapy 35, 168-184
J. M. Wiehe, P. Ponsaerts, M. T. Rojewski, J. M. Homann, J. Greiner, D. Kronawitter, H. Schrezenmeier, V. Hombach,
M. Wiesneth, O. Zimmermann, J. Torzewski (2007). mRNA-mediated gene delivery into human progenitor
cells promotes highly efficient protein expression. Journal of Cellular and Molecular Medicine 11(3), 521-530
V. Mailänder, E. Hennel, M. Flören, M. Rojewski, M. Wiesneth, H. Reichel, H. Schrezenmeier (2007). MSC from AA
patients exert a normal immunosuppression in vitro. Bone Marrow Transplantation 39(S1), S188
V. Mailänder, C. Häckel, G. Baur, M. Rojewski, M. Wiesneth, H. Schrezenmeier (2007). Platelet lysate: variation of
processing methods and effectiveness in expansion of mesenchymal stem cells. Transfusion Medicine and Hemotherapy
34(S1), 65
129

Forschungsbericht 2007 – 2008
130

3 Transplantationsmedizin und Immungenetik
Transplantationsmedizin und Immungenetik
131

Forschungsbericht 2007 – 2008
AML-Pilotstudie und Einführung der NK-Zell-Typisierung
vor Stammzelltransplantation
Hintergrund und Projektbeschreibung
Bei der Behandlung von bösartigen Erkrankungen des blutbildenden Systems (z.B. Leukämien) hat die Transplantation
von allogenen (= vom Fremdspender) hämatopoetischen Blutstammzellen stark an Bedeutung gewonnen, zumal
mittels moderner molekularbiologischer Technik eine hohe Gewebeübereinstimmung zwischen Patient und Spender
gewährleistet werden kann.
Neben der Transplantation von Blutstammzellen von Spendern mit hoher Gewebeverträglichkeit ist es insbesondere
bei der Transplantation von Kindern gelungen, die haploidente Transplantation von Stammzellen von Verwandten
(insbesondere Eltern und Geschwister), bei denen Empfänger und Spender nur in einem (von zwei) Haplotyp der
HLA-Gene übereinstimmen, klinisch zu etablieren. Hierdurch ist es möglich geworden, jedes Kind, das einer Stammzelltransplantation
bedarf, mit einem Spender zu versorgen.
Ziel des Projektes ist die Bewertung der Natürlichen Killer-(NK)-Zellen des Transplantats für den klinischen Verlauf
der allogenen und haploidenten Stammzelltransplantation. Hierfür werden diagnostische Methoden etabliert, sowie
klinische Indikationen definiert und der relevante Untersuchungsumfang festgelegt. In der ersten Phase des Projektes
wurden Methoden zur Analyse der Killerzell Immunglobulin-like Rezeptoren (KIR) etabliert und die Bedeutung von Differenzen
(Mismatch) zwischen KIR-Rezeptoren und deren HLA-Liganden (Abb. A) für den klinischen Verlauf bei der
akuten myeloischen Leukämie (AML) untersucht (Abb. B). In der nächsten Phase werden Zellassays zur Evaluierung
der zytotoxischen Aktivität von transplantierten NK-Zellen etabliert. Schließlich sollen die etablierten Methoden zur
Identifikation des bestmöglichen Transplantats dienen.
Wichtigste Ergebnisse
132
Abbildung A: Regulierung der
Anti-Tumor Aktivität von NK-
Zellen über inhibierende und
aktivierende Rezeptoren. Die
dominanten inhibitorischen
Signale werden u.a. über die
Rezeptoren KIR2DL1 und
KIR2DL2/3 vermittelt. Wird
auf der Tumorzelle ein Rezeptor-spezifischer
HLA-Ligand
nicht exprimiert, können aktivierende
Signale (z.B. über
MICA und den NKG2D Rezeptor)
die zytotoxische Aktivität
der NK-Zelle induzieren
und diese die Tumorzelle abtöten
(Missing-self Hypothese).
In einer verblindeten, retrospektiven klinischen Studie an 54 Patienten mit AML konnte die Missing-self Hypothese
bestätigt werden. Das Fehlen von HLA-Liganden auf der Tumorzelle bei Expression entsprechender inhibitorischer
KIR-Rezeptoren auf den NK-Zellen führt zu einem signifikanten Überlebensvorteil nach Transplantation. Diese
Patienten hatten einen kürzeren Krankenhausaufenthalt und ein längeres ereignisfreies Überleben. Derzeit wird eine
prospektive Untersuchung von erwachsenen Patienten mit malignen hämatologischen Erkrankungen nach Stammzelltranspantation
durchgeführt.

Transplantationsmedizin und Immungenetik
Abbildung B: Überlebenskurven von Patienten mit akuter myeloischer Leukämie und mit (AML – ≥ 1KIR/HLA-C1/2 MM) oder ohne
(AML – 0 KIR/HLA-C1/2 MM) KIR2DL – HLA-Cw Mismatch.
Summary
The outcome of bone marrow transplantation depends on the histocompatibility between donor and recipient.
A major target to assess histocompatibility are human leukocyte antigens (HLA). Current molecular techniques allow
to establish and perform high resolution testing for histocompatibility.
In addition to peripheral stem cell and/or bone marrow transplantation from matched donors, therapeutic protocols
have been developed in order to transplant stem cells from HLA haploidentical donors.
The present project aims to identify, HLA and KIR differences that are relevant for the clinical outcome of stem
cell/marrow transplantation. The joint with partners from the University Hospital, Centre of Internal medicine, Department
of Haematology-Oncology and Pediatric Stem Cell transplantation focused on cellular mechanisms and the development
of diagnostic tools for a better pre-transplant testing and post-transplant monitoring of patients.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Transplantationsimmunologie und Hämogenetik
Projektleiter Prof. Dr. med. Christian Seidl
Mitarbeiter Dr. med. Rudolf Richter, Dr. rer. nat. Petra Skrablin
Anja Graumnitz (cand. dent.), Anja Goodwin (MTA)
Kooperationen Zentrum für Innere Medizin, Medizinische Klinik III – Bereich Hämatologie – Onkologie (Teilprojekt 1
PD Dr. med. H. Martin)
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
weiterführende Finanzierung durch Antragstellung bei der Deutschen Forschungsgemeinschaft (DFG)
Laufzeit des Projektes 01.01.2007 – 31.12.2010
133

Forschungsbericht 2007 – 2008
Die Deutsche Stammzellspenderdatei
Rhein-Main, Rhein-Neckar und Nord.
Ausbau und Neugestaltung der regionalen Stammzell- und Knochenmarkspenderdateien
in Hessen, Rhein-Neckar und Nord.
Hintergrund und Projektbeschreibung
Die Blutstammzellspenderdatei des DRK-Blutspendedienstes Hessen, Institut Frankfurt und Institut Kassel wurde Anfang
der 90 Jahre als Arbeitsinitiative am Klinikum der Johann Wolfgang Goethe-Universität gegründet. 1993 erfolgte
die der Knochenmarkspender-Datei am Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie in Mannheim.
Seit 1996 ist die Datei Mitglied der Arge-KMSB und hat seit ihrer Gründung mehr als 70.0000 (Hessen) und 25.000
(Mannheim) Blutstammzell- und Knochenmarkspender registriert. Mehrere Hundert Stammzellspenden zur Therapie
von an Leukämie (Blutkrebs) erkrankten Patienten werden durch freiwillige Spender der Stammzellspenderdatei
Rhein-Main und Rhein-Neckar zur Verfügung gestellt. In zahlreichen Aktionen und Spenden sind in den zurückliegenden
15 Jahren umfangreiche finanzielle Mittel für die Untersuchung und Registrierung dieser Spender gesammelt
worden. Neben freiwilligen Blutspendern finden sich alle Bevölkerungsgruppen in der Datei vertreten. Die Arbeit wird
hierbei maßgeblich unterstützt durch zahlreiche Helfer, ehrenamtliche Mitarbeiter, Verwandte und Freunde von Patienten,
den Patienten-Initiativen sowie den unzähligen freiwilligen Spendern.
Ziel des Projektes ist die Außendarstellung der DRK-Blutspendedienst-Spenderdatei(en) zu verbessern und gleichzeitig
die regionale Struktur der bereits vorhandenen Einrichtungen hervorzuheben. Weiterhin soll durch die überregionale
Zusammenarbeit die regionale Organisation und Logistik verstärkt werden sowie eine gezielte
Informationsplattform für interessierte Spender sowie Patienten und Familienangehörigen zur Verfügung gestellt werden.
Wichtigste Ergebnisse
Im Rahmen der Fusion zwischen dem DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen und dem DRK-Blutspendedienst
Nord (Lütjensee/Schleswig) wurden seit 2006 einzelne Blutstammzell-/Knochenmarkspender-Typisierungsaktionen
durch den DRK-Blutspendededienst Nord in Kooperation mit der Knochenmark- und Stammzell spender -
datei Rhein-Main durchgeführt. Die positiven Erfahrungen in der Zusammenarbeit beider Dateien haben dazu bewogen
2007 ein erweitertes Konzept zur langfristigen Kooperation der beteiligten Dateien zu erarbeiten. Von einem der
in Nord rekrutierten Spender wurde bereits eine Stammzellspende in Frankfurt abgenommen.
Die Knochenmark- und Stammzellspenderdateien in den Instituten in Frankfurt und Kassel des DRK Blutspendedienstes
Baden-Württemberg - Hessen hatten 2006 ein umfangreiches Konzept zur Neugestaltung ihrer Außendarstellung
unter Leitung von Herrn Professor Dr. Seidl erarbeitet. Ein wesentlicher Bestandteil dieses Konzeptes war
eine deutliche Marketing- und Medienkommunikation zur Darstellung der Ziele, Aufgaben und Leistungen der
Stammzellspenderdateien und die Gestaltung eines eigenen „Marken“-Logos als „Wort- und Bild-Marke“ zur eindeutigen
Identifizierung und gleichzeitigen Motivation von Spender.
Die Bezeichnung „Deutsche Stammzellspenderdatei (DSSD)“ mit regionalen Zusätzen, wie z.B. „Rhein-Main“ und
„Nord“ ermöglicht die Wahrung der regionalen Strukturen innerhalb der verschiedenen DRK-Blutspendedienst Dateien
bei gleichzeitiger Stärkung der überregionalen Kompetenz. Durch gezielte Darstellung der „Deutschen Stamm-
134

Transplantationsmedizin und Immungenetik
zellspenderdatei“ als Initiative des Deutschen Roten Kreuzes soll eine klare Imageaufwertung in dem Tätigkeitsprofil
des DRK-Blutspendedienstes erfolgen. Hierzu gehört auch die Integration in die Online-Kommunikation der DRK-
Blutspendedienst-Websites, die Entwicklung von Werbe- und Medienmaterial, wie z.B. Flyer- Broschüren und Plakate.
Der Bezug zum DRK-Blutspendedienst sollte weiterhin innerhalb der Homepage der Deutschen Stammzellspenderdatei
durch die Integration des DRK-Logos und Links zwischen den DRK Internetseiten sichergestellt werden.
Informationen für Spender-, Ärzte-, Sponsoren- und Presse sind unter www.stammzellspenderdatei.de zugänglich.
Dies schließt die Möglichkeit ein, Adressen und Kontaktdaten von Spendern zu aktualisieren, Spendenzahlungen vorzunehmen
oder Informationsmaterial für die Registrierung als Stammzell- oder Knochenmarkspender anzufordern.
Ausgehend von diesem Konzept wurde 2007 eine Erweiterung der Organisationsstruktur und Logistik zwischen den
Mitarbeitern der regionalen Dateien in Hessen und Nord erstellt; einheitliche Einverständniserklärungen und Informationsmaterial
erarbeitet sowie die Werbemaßnahmen für die Aktion „Blutspender werden Stammzellspender“ abgestimmt.
Die Einbindung der Knochenmarkspenderdatei Rhein-Neckar wurde Ende 2008 in Abstimmung mit Herrn Professor
Dr. Klüter begonnen. In diesem Erweiterungskonzept ist auch die Nabelschnurblutbank in Mannheim unter Leitung
von Herrn PD Dr. Müller-Steinhardt eingeschlossen. Neben der Rekrutierung von freiwilligen Stammzell- und Knochenmarkspendern
wird ein Schwerpunkt der Werbekampagnen in der Entwicklung eines gezielten Blutspenderbindungskonzeptes
liegen. Die Erweiterung des Dachmarken-Konzeptes „Deutsche Stammzellspenderdateien“ soll
Anfang 2009 abgestimmt werden.
Abbildung 1: Darstellung der
Deutschen Stammzellspenderdatei
im Internet
(www.stammzellspenderdatei.de)
135

Forschungsbericht 2007 – 2008
Standort Frankfurt, Mannheim, Lütjensee und Schleswig
Arbeitsgruppe Deutsche Stammzellspenderdatei
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie, Frankfurt und Kassel
Institut Schleswig und Lütjensee, DRK-Blutspendedienst Nord,
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie, Mannheim
Projektleiter Prof. Dr. med. Christian Seidl
Deutsche Stammzellspenderdatei, Institut Frankfurt
Projektpartner Prof. Dr. med. Harald Klüter (DSSD-Rhein-Neckar), Institut Mannheim
PD Dr. med. Michael Müller-Steinhardt (DSSD-Nabelschnurblut),
Institut Mannheim-Nabelschnurblutbank
Dr. Gerd. Holzberger (DSSD-Kassel) Institut Kassel
Frau Sigrid Zoeller (DSSD-Rhein-Main), Institut Frankfurt
Frau Andrea Schaefer (DSSD-Rhein-Main), Institut Frankfurt
Frau Daniela Griffiths (DSSD-Rhein-Neckar), Institut Mannheim
Herr Frank Stötzer (DSSD-Rhein-Neckar), Institut Mannheim
Geert Geusendam (DRK-Nord und DSSD-Nord), Institut Lütjensee
Dr. Sabine Kraas (DRK-Nord und DSSD-Nord), Institut Schleswig
Kooperationen DRK-Blutspendedienst Hessen, Institut Kassel
DRK-Blutspendedienst Nord, Institut Lütjensee, Institut Schleswig
Förderung durch Mittel des DRK-Blutspendedienstes
Laufzeit des Projektes 01.01.2007 – 01.04.2009
Weitere Informationen
136
www.stammzellspenderdatei.de
Abbildung 2: Informationsflyer
und Broschüre zur Deutschen
Stammzellspenderdatei

Immunregulation von natürlichen Killerzellen und
Krankheitsprädisposition bei Autoimmunität
Hintergrund und Projektbeschreibung
Transplantationsmedizin und Immungenetik
Autoimmunität ist geprägt durch eine „fehlgeleitete Immunantwort“, die zur Zerstörung von körpereigenen Strukturen
führt. Die Folge davon ist eine Vielzahl von Autoimmunerkrankungen, die das Leben wesentlich einschränken oder
gar verkürzen können. Charakteristisch ist dabei, dass T-Zellen gegen Peptidfragmente völlig normaler Proteine reagieren.
Die Aufklärung der Struktur der HLA-Moleküle spielt daher sowohl bei der Transplantation blutbildender Stammzellen
als auch bei der Entwicklung von Autoimmunerkrankungen eine entscheidende Rolle. Beispiele hierfür sind die rheumatoide
Arthritis (RA), bei der fehlregulierte aktivierte Lymphozyten normales Gewebe selbst angreifen oder zur Bildung
von autoaggressiven Antikörpern anregen. Dies geschieht auch beim juvenilen Diabetes mellitus (IDDM), bei
dem der Organismus Antikörper gegen die insulinproduzierenden C-Zellen erzeugt. In den letzten Jahren wurden von
der Frankfurter Arbeitsgruppe ein Verbundforschungsprojekt etabliert mit den Abteilungen für Rheumatologie (Medizinische
Klinik III) und Endokrinologie (Medizinische Klinik I) am Klinikum der Johann Wolfgang Goethe-Universität
und dem Rheumazentrum Rhein-Main (Frankfurt-Wiesbaden-Schlangenbad) mit dem Ziel immunregulatorische Mechanismen
an Kollektiven von klinisch gut definierten Patienten zu untersuchen. Schwerpunkt der Frankfurter Arbeitsgruppe
am Institut für Transfusionsmedizin ist die Untersuchung der Wirkmechanismen von Natürlichen
Killerzellen (NK) in der Pathophysiologie von Autoimmunerkrankungen. Im Vordegrund steht hierbei
der insulinpflichtige Diabetes Mellitus Typ I
die Psoriasis Arthritis.
Darstellung der Interaktion zwischen Natürlichen Killerzellen (NK) und Zielzellen (z.B. nach Infektionen) NK-Zellen sind hierbei ein
wesentlicher Bestandteil der zellulären Immunantwort im Rahmen der natürlichen Immunität. Die zytotoxische Reaktion der NK-Zellen
wird durch den Kontakt Inhibierender NK-Zell-Rezeptoren mit HLA-Klasse I Merkmalen auf der Zielzelle beeinflusst.
Wichtigste Ergebnisse
Die auf Chromosom 19 lokalisierten Gene für die Rezeptoren von NK-Zellen (NKR) agieren aktivierend und inhibierend
und besitzen eine wesentliche Funktion in der Regulation von NK-Zellen und T-Zellen. Veränderungen in der Ver-
137

Forschungsbericht 2007 – 2008
teilung zwischen aktivierenden und inhibierenden NKR könnten eine Prädisposition für Autoimmunerkrankungen darstellen.
In verschiedenen internationalen Studien wurde hierbei das Konzept des „missing ligands“ mit gleichzeitigem
Vorhandensein von „hyporeaktiven NK-Zellen“ postuliert.
Im Forschungsverbund Psoriasis Arthritis wurde in dem zurückliegenden Projekt untersucht, inwieweit die Expression
von KIR auf T-Zellen das zytotoxische Repertoire verändert. Interessant ist auch die Beobachtung, dass sich bei
RA-Patienten CD4+ CD28- T-Zellen vermehrt finden, die KIR exprimieren. Dies könnte funktionell eine Verbindung
zwischen natürlichem und erworbenem Immunsystem darstellen. Die Untersuchungen an Patienten mit Rheumatoider
Arthritis, Studienkollektiv mit früh-manifestem stark entzündlichem Verlauf (SIMERA-Studie) und Studienkollektiv
mit regulärem oder extra-artikulärem Krankheitsverlauf (GENRA-Studie) sind abgeschlossen. In Kooperation mit der
Abteilung für Endokrinologie sind die Untersuchungen an Patienten mit Typ I Diabetes mellitus ebenfalls in der Phase
der Zwischenauswertung. Der Einfluss von HLA-NKR-Differenzen in der Pathophysiologie der Erkrankung wird auch
weiterhin untersucht. Im Rahmen eines beantragten Forschergruppenkonzeptes soll hierbei auch die Möglichkeit der
Toleranzinduktion durch hochdosierte Gabe von Vitamin D klinisch geprüft werden.
Durchflusszytometrische
Messung der Verteilung von
weißen Blutzellen, differenziert
nach Lymphozyten und
Natürlichen Killerzellen (CD56
positiv). Die Untersuchungen
zeigen den unterschiedlichen
Aktivierungszustand von NK-
Zellen anhand der Messung
von Oberflächenrezeptoren,
wie z.B. dem Molekül NKp30
Summary
The project is focused on the genetic and functional interaction between human leukocyte antigens and killer cell immunoglobulin-like
receptors in autoimmunity and transplantation. Autoimmune diseases studied include collaborative
projects on patients with rheumatoid arthritis, psoriasis arthritis and juvenile diabetes mellitus. The project has also
been focused to establish an easy and reliable typing method for NK cell receptor genes and to define NKR predisposing
to disease pathogenesis including a clinical trial on the application of Vitamin D for tolerance induction.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Abteilung Transplantationsimmunologie und Hämogenetik
Projektleiter Prof. Dr. med. Christian Seidl
Mitarbeiter Dr. med. Rudolf Richter, Dr. rer. nat. Petra Skrablin, Yaron Unger (cand. med.), Christine Wild (cand.
med.)
Kooperationen Kooperationsprojekt für den Bereich Autoimmunität mit der Abteilung für Rheumatologie (Medizinische
Klinik III) und Endokrinologie (Medizinische Klinik I), Universitätsklinikum Frankfurt, dem Universitätsklinkum
Mainz und der Deutschen Klinik für Diagnsotik (DKD), Wiesbaden
Institut für Pharmakologie, Bereich Immunpharmakologie, Universitätsklinikum Frankfurt (Prof. Dr. H.
Radeke)
Klinische Studienleitung Vitamin D Prophylaxe (Medizinische Klinik I, Prof. Dr. K. Badenhopp)
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Strukturelle Mittel der Universität Frankfurt am Main
Forschungsmittel der Universität Frankfurt am Main
Laufzeit des Projektes 01.01.2007 – 31.12.2010
138

Transplantationsmedizin und Immungenetik
Immunrekonstitution nach Blutstammzelltransplantation:
Entwicklung von Methoden und Untersuchungsstrategien für
HLA- und KIR-Differenzen im Rahmen der Gewebeverträglichkeit
bei Blutstammzelltransplantation
Hintergrund und Projektbeschreibung
Bei der Behandlung von bösartigen Erkrankungen des blutbildenden Systems (z.B. Leukämien) hat die Transplantation
von allogenen (= vom Fremdspender) hämatopoietischen Blutstammzellen stark an Bedeutung gewonnen, zumal
mittels moderner molekularbiologischer Technik eine hohe Gewebeübereinstimmung zwischen Patient und Spender
gewährleistet werden kann. Neben der Transplantation von Blutstammzellen von Spendern mit hoher Gewebeverträglichkeit
ist es gelungen, die haplo-identische (= halb-identische) Stammzelltransplantation, also die Transplantation
von Stammzellen, bei denen Empfänger und Spender nur in einem Haplotyp der HLA-Gene übereinstimmen,
klinisch zu etablieren. Es ist hierdurch möglich geworden, jedes Kind, das einer Stammzelltransplantation bedarf, mit
einem Spender zu versorgen. Ziel des Projektes ist, die Bedeutung von HLA- und KIR-Differenzen für den klinischen
Verlauf nach Blutstammzelltransplantation zu erarbeiten. Schwerpunkte sind die Etablierung von diagnostischen Methoden,
die Festlegung des relevanten Untersuchungsumfanges sowie die klinische Indikationsstellung.
Teil A: Hautefflureszenzen als Zeichen einer bestehenden Transplantat-gegen-Empfänger-Erkrankung (GVHD-Graft versus host disease)
auch Blutstammzelltransplantation. Teil B: Unterschiedlicher Wirkmechanismus und Rezeptorgruppen von Natürlichen Killer Zellen.
Wichtigste Ergebnisse
Die klinischen und experimentellen Untersuchungen werden in zwei Teilprojekte gegliedert durchgeführt. Das Teilprojekt
1 umfasst eine retrospektive und prospektive Untersuchung von erwachsenen Patienten mit malignen hämatologischen
Erkrankungen nach BSZT.
Im Teilprojekt 2 werden Patienten nach HLA-kompatibler und partiell (haploidenter) HLA-kompatibler BSZT zur Behandlung
kindlicher Leukämien und genetischer Erkrankungen eingebunden.
Teilprojekt 1: NK-Zell-Matching/Mismatching im Rahmen der Blutstammzelltransplantation
Studienkollektive (1) Patienten nach allogener BSZT (Universitätsklinikum Frankfurt), (2) Patienten nach allogener
BSZT (externe Kliniken).
Teilprojekt 2: Untersuchung der Aktivität von Natürlichen Killerzellen (NK) gegen Leukämie- und Tumorzellen nach
Stammzelltransplantation bei Kindern: Interaktion von NK-Zellen und Dendritischen Zellen zur Steigerung der
Zytotoxizität.
Studienkollektiv: Pädiatrische Patienten nach BSZT (Universitätsklinikum Frankfurt)
139

Forschungsbericht 2007 – 2008
Primäre klinische Endpunkte für die Beurteilung des klinischen Verlaufes sind: allgemeines Überleben (OS – overall
survival), krankheitsfreies Überleben (DSF – desease free survival), therapieassoziierte Mortalität (TRM – transplant
related mortality), akute und chronische Transplantat-gegen-Empfänger-Erkrankung (GVHD – Graft versus host
disease) und Rezidiv der Grunderkrankung (relapse).
Summary
140
Obere Abbildung – NK-Zell
Tumorlyse: Interaktion zwischen
HLA-Antigenen und
KIR-Rezeptoren mit nachfolgend
vermittelter Lyse von
Tumorzellen.
Untere Abbildung – Densitometrische
plots: Prozentualer
Anteil von Monozyten
und eosinophilen Granulozyten
nach Infusion von haploidentischen
NK-Zellen bei
zwei Patienten mit Neuroblastom.
SS = side scatter (granularity),
CD45 = leukocyte
common antigen (Huenecke
S, et al, 2008 submitted)
The outcome of bone marrow transplantation depends on the histocompatibility between donor and recipient.
A major target to assess histocompatibility are human leukocyte antigens (HLA). Current molecular techniques allow
to establish and perform high resolution testing for histocompatibility.
In addition to peripheral stem cell and/or bone marrow transplantation from matched donors, therapeutic protocols
have been developed in order to transplant stem cells from HLA haploidentical donors.
The present project aims to identify, HLA and KIR differences that are relevant for the clinical outcome of stem
cell/marrow transplantation. The joint with partners from the University Hospital, Centre of Internal Medicine, Department
of Hematology-Oncology and Pediatric Stem Cell transplantation focused on cellular mechanisms and the development
of diagnostic tools for a better pre-transplant testing and post-transplant monitoring of patients.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Transplantationsimmunologie und Hämogenetik
Projektleiter Prof. Dr. med. Christian Seidl (Teilprojektleiter/Kooperationspartner)
Mitarbeiter Dr. med. Rudolf Richter, Dr. rer. nat. Petra Skrablin, Anja Graumnitz (cand. dent.)
Kooperationen Zentrum für Innere Medizin, Medizinische Klinik III – Bereich Hämatologie – Onkologie (Teilprojekt 1
PD Dr. med. H. Martin) Zentrum für Kinder- und Jugendmedizin – Klinik III, Schwerpunkt Hämatologie,
Onkologie und Stammzelltransplantation (Teilprojekt 2 – Dr. U. Köhl, Prof. Dr. P. Bader, Prof. Dr.
Th. Klingebiel)
Förderung Hilfe für Krebskranke Kinder Frankfurt e.V.
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Forschungsmittel der Universität Frankfurt am Main
Laufzeit des Projektes 01.01.2006 – 31.12.2010

Transplantationsmedizin und Immungenetik
Verbesserung der Gewebeverträglichkeit durch Bestimmung von
Minor Histokompatibilitätsantigenen und NOD2/CARD15
Hintergrund und Projektbeschreibung
Zur Behandlung maligner hämatologischer Erkrankungen wird seit Jahrzehnten erfolgreich die Transplantation von
allogenen (= vom Fremdspender) Blutstammzellen eingesetzt. Von großer Bedeutung für den Erfolg der allogenen
Stammzelltransplantation ist die hohe Übereinstimmung der HLA-Gewebemerkmale zwischen Patient und Spender,
die heutzutage mittels moderner molekularbiologischer Techniken gewährleistet wird.
Aufgrund der intensiven Erforschung der Stammzelltransplantation wurden weitere Merkmale bei dem Patienten und
dem Transplantat identifiziert, die für den klinischen Verlauf der Transplantation von Bedeutung sein können. Zu diesen
gehören die Minor-Histokompatibilitätsantigene (mHag) und das Molekül NOD2/CARD15, ein Rezeptor für die
bakterielle Zellwandkomponente Muramyldidpeptid.
Minor-Histokompatibilitätsantigene (mHag) in der Stammzelltransplantation: Klinische und experimentelle Studien
zeigen, dass nach Stammzelltransplantation der Graft-versus Leukämie (GvL)-Effekt hocheffektiv zur Remission und
Eradikation der malignen Erkrankung beitragen kann. Man geht heute davon aus, dass mHag-Moleküle für den GvL-
Effekt maßgeblich verantwortlich sind. mHag-Moleküle werden in der Bindungstasche von HLA-Molekülen gebunden
und so den Spenderlymphozyten präsentiert. Für den GvL-Effekt sind insbesondere solche mHag-Moleküle von Bedeutung,
die spezifisch auf Leukozyten exprimiert werden und aufgrund eines Sequenzunterschiedes zwischen
Transplantat und Empfängergewebe von den Spenderleukozyten als fremd erkannt werden. Hierdurch werden die
Spenderlymphozyten aktiviert, die dann den Tumorzelltod induzieren (Abb. A).
NOD2/CARD15 in der Stammzelltransplantation: In Voruntersuchungen wurde gezeigt, dass der NOD2/CARD15
Polymorphismus von Bedeutung für die transplantationsassoziierte Mortalität nach Stammzelltransplantation ist.
Ursächlich wird eine verminderte Aktivität des NOD2/CARD15-Rezeptors bei den Genvarianten NOD2-SNP8,
NOD2-SNP12, NOD2-SNP13 gesehen. Entsprechend der Endotoxin-Hypothese wird vermutet, dass durch eine verminderte
Immunreaktion im Bereich des Gastrointestinaltraktes bakterielle Endotoxine in das Blut gelangen, die über
eine Induktion der Cytokin-Expression die GvHD nach Transplantation unterstützen.
Abb. A: GvL- und GvHD-Effekt nach allogener Stammzelltransplantation. T-Zellen, die hämatopoietisch restringierte mHAG erkennen,
induzieren einen selektiven GvL-Effekt. T-Zellen mit Spezifität für ubiquitär expremierte mHag verursachen dagegen eine GvHD und
können zum GvL-Effekt beitragen.
141

Forschungsbericht 2007 – 2008
Ziele sind die Etablierung von Methoden zur Charakterisierung von mHag-Molekülen und zur Charakterisierung des
Genpolymorphismus des NOD2/CARD15-Gens (Abb. B). In ersten retrospektiven Studien an einer Kohorte von
100 Patienten des Transplantationszentrums der Hämatologie/Onkologie der Universitätsklinik Frankfurt wird die Relevanz
der mHag-Moleküle und des NOD2/CARD15-Genpolymorphismus für den Transplantationsverlauf evaluiert.
Ziel des Projektes ist die Einführung der Methoden in die Routinediagnostik zur Identifikation des optimalen Transplantates.
Abb. B. 50 Probanden wurden mittels quantitativer RT-PCR auf NOD2/CARD15-Genvarianten untersucht. Bei etwa 10 % der Probanden
wurde eine Variation identifiziert. Zur Bestätigung des Ergebnisses wurden die entsprechenden Genbereiche sequenziert. Hier ist
beilspielhaft die Sequenzierung der SNP13 NOD2/CARD15-Genvariante bei einem Probanden und eine Kontrollsequenz dargestellt.
Wichtigste Ergebnisse
Ergebnisse des Projektes: Zu Beginn des Projektes wurde eine SSP-Methode zur Charakterisierung von mHag-Molekülen
etabliert und mit der Charakterisierung von mHag-Molekülen bei Patienten und Spender begonnen. Weiterhin
wurden quantitative RT-PCR Methoden zur Detektion der NOD2-SNP8-, NOD2-SNP12-, NOD2-SNP13-Genvarianten
und als Bestätigungsdiagnostik die Sequenzierung der SNPs im Labor etabliert.
Summary
The outcome of stem cell transplantation depends on the histocompatibility between donor and recipient. Major
targets to assess histocompatibility are the human leukocyte antigens (HLA). Current molecular techniques allow the
establishment and performance of high resolution testing for histocompatibility.
In addition further molecular characterisitics of the recipients and donors have been identified, which are suggested
to be of significance for the outcome of stem cell transplantation.
142

Transplantationsmedizin und Immungenetik
The present project aims to develop in-house methods to characterise minor histocompatibility antigens and
NOD2/CARD15 polymorphism of the donor and the recipient. In retrospective clinical studies the significance of
these two molecular characteristics will be evaluated for the patients of the transplant centres of the University
Clinics Frankfurt. The final goal of the project is the establishment of these methods for routine diagnostics to identify
the optimal stem cell transplant for a patient.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Abteilung Transplantationsimmunologie und Hämogenetik
Projektleiter Prof. Dr. med. Christian Seidl (Teilprojektleiter der Forschergruppe)
Mitarbeiter Dr. med. Rudolf Richter, Dr. rer. nat. Petra Skrablin
Kooperationen Pädiatrische Hämatologie-Onkologie (Prof. Dr. P. Bader, Prof. Dr. Th. Klingebiehl),
Johann Wolfgang Goethe-Universitätsklinikum
Erwachsenen Hämatologie-Onkologie (PD. Dr. H. Martin, Prof. Dr. H. Serve),
Johann Wolfgang Goethe-Universitätsklinikum
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
weiterführende Finanzierung durch Antragstellung bei der Deutschen Forschungsgemeinschaft (DFG)
Forschungsmittel der Universität Frankfurt am Main
Industriemittel Fa. Bayer / Sonstige Mittel
Europäische Kommission Aktenzeichen (AZ)
Deutsche Forschungsgemeinschaft (AZ)
Bundesministerium für Bildung und Forschung (AZ)
Laufzeit des Projektes 01.01.2007 – 31.12.2010
143

Forschungsbericht 2007 – 2008
Individuell angepasste Immunsuppression nach allogener
Transplantation durch molekulardiagnostisches Immunmonitoring
Hintergrund und Projektbeschreibung
Der Calcineurinhemmer Cyclosporin A (CsA) hat entscheidend zu verbesserten Transplan tatüberlebenszeiten beigetragen.
Neben der immunsuppressiven Wirkung hat das Medika ment allerdings erhebliche Nebenwirkungen. CsA
muss nach dem Blutspiegel dosiert wer den, da es derzeit keine sensitiven, praktisch durchführbaren Methoden gibt,
um den Grad der Immunsuppression eines Patienten individuell funktionell zu bestimmen. Obwohl die gegen wärtig
praktizierte empirische Dosierung sicherlich für die Mehrzahl der Patienten akzeptabel ist, gibt es keine Erkenntnisse
inwieweit dies einem optimalen Zustand der Immunsuppres sion entspricht. Während eine zu niedrige Dosierung klinisch
erfassbar ist, kann eine Über dosierung nicht erkannt werden, gehäufte Infektionen und ein erhöhtes Tumorrisiko
sind die Folge.
Wichtigste Ergebnisse
Wir haben eine Methode entwickelt, welche den Grad der Suppression von NFAT-regulierten Genen zwei Stunden
nach CsA Einnahme als Marker für den individuellen Grad der Immunsup pression nutzt. Patienten reagierten individuell
sehr unterschiedlich auf gleiche Dosen von CsA, wobei der Grad der funktionellen Immunsuppression des einzelnen
Patienten relativ konstant, bei gleichbleibendem Medikamentenspiegel ist. Der Vergleich der mittleren
Restaktivität gemessen an zwei verschiedenen Zeitpunkten bei 81 Patienten zeigte eine intra-individuelle Variabilität
von 9 %. Bei Spiegeln unter 600 µg/L zeigte sich eine eindeutige und statistisch höchst signifikante Korrelation zwischen
Medikamentenkonzentration und Inhibition der Genexpression. Bei höheren Plasmaspiegeln von CsA ging
diese Abhängigkeit in ein Plateau über, das heißt hohe Konzentrationen von CsA bewirken keine weitere Steigerung
der Immunsuppression. Da die toxischen Nebenwirkungen mit hohen Dosen zunehmen, kann umgekehrt vermutet
werden, dass es möglich ist, durch Dosisreduktion toxische Nebenwirkungen zu reduzieren ohne signifikant den
funktionellen Grad der Immunsuppression zu beeinträchtigen. Mit dem funktionellen Monitoring der Immunsuppression
durch CsA kann damit individuell eine Dosis bestimmt werden, welche die Balance zwischen Effektivität und Nebenwirkung
optimiert. Bei Patienten nach Nierentransplantation konnten wir zeigen, dass stark immunsupprimierte
Patienten ein signifikant erhöhtes Risiko für Tumorerkrankungen haben. In einer Studie mit 55 älteren Patienten lag
die Inzidenz für Hauttumore bei 25 %. Die mediane Restaktivität NFAT regulierter Gene lag in dieser Gruppe bei 5 %,
während sie in der Vergleichsgruppe 12 % betrug. Das erhöhte Tumorrisiko im untersuchten Patientenkollektiv
konnte weder aus der Dosierung noch aus der ansonsten routinemäßig durchgeführten Bestimmung des CsA-
Spiegels im Blut abgeleitet werden.
Mittels ROC-Analyse konnte ein kritischer Wert von 15 % Restaktivität der Transkription errechnet werden, bei dem
die Zahl der Komplikationen deutlich ansteigt. Dieser Wert gilt nicht nur für Erwachsene sondern auch für pädiatrische
Patienten. In einer prospektiven Studie untersuchten wir 40 pädiatrische Nierentransplantat-Empfänger unter
CsA-Therapie in der stabilen Phase nach Transplantation. Die mittlere NFAT-Restaktivität betrug bei diesen Patienten
32 ± 18 %, die interindividuelle Variabilität lag bei 24 %. Eine NFAT-Restaktivität < 15 % war mit einer erhöhten Infektionsrate
assoziiert (p < 0,05). In der ROC-Analyse zeigte sich eine bessere Diskriminierung bezüglich der Infektanfälligkeit
(P < 0.05) mittels des pharmakodynamischen NFAT-Assays gegenüber der klassischen pharmakokinetischen
Peak-Spiegel Bestimmung.
80 % aller von uns untersuchten Patienten mit Infektionen und malignen Erkrankungen haben eine mittlere NFAT-
Restaktivität von unter 15 %. Aus diesen Beobachtungen ergibt sich erstmalig eine Orientierung für die Dosierung
von CsA, welche den Grad der Immunsuppression berücksichtigt. Patienten mit erhöhtem Risiko für Infektionen und
Tumore können rechtzeitig identifiziert werden. Dies ist von großer praktischer Bedeutung, da ca. 20 % aller transplantierten
Patienten nach zehn Jahren eine maligne Erkrankung entwickeln und Tumore mittlerweile die häufigste
Todesursache transplantierter Patienten darstellen. Wir sind dieser Hypothese in einer klinischen Studie nachgegangen.
Bei 20 Patienten mit stabiler Transplantatfunktion wurde die CsA-Dosis in zwei Schritten um jeweils 15 % reduziert.
Bei diesen Patienten erhöhte sich die Restaktivität im Median von 6,3 % auf 21,3 %, während sich im
Kontrollkollektiv die Expression nicht veränderte (7,5 % zu 5,9 %) Die Nierenfunktion blieb in der dosisreduzierten
Gruppe konstant, verschlechterte sich aber signifikant in der Kontrollgruppe. Ebenfalls verbesserte sich der Blutdruck
in der dosisreduzierten Gruppe. Bisher zeigen Patienten mit einer Restaktivität von ca. 20 – 30 % keine erhöhte
Inzidenz von Transplantatabstoßungen.
144

Summary
Individualised immunosuppressive therapy
Transplantationsmedizin und Immungenetik
At present it is unclear which dose of Cyclosporine A (CsA) is optimal with respect to immu nosuppressive efficacy
and drug specific side effects at the level of the individual patient. Recently we proposed the quantitative assessment
of NFAT regulated gene expression in peripheral lymphocytes as a new tool to measure the individual degree of
immunosuppres sion by CsA. We could demonstrate that a significant correlation exists between suppression of
NFAT-regulated genes and clinical complications such as infections and malignancies. Almost 90 % of all patients
that developed complications related to the long-term immunosuppression with CsA showed a residual NFAT-regulated
gene expression below 15 %. Patients with a residual NFAT-gene expression below this cut-off value (which
means with a stronger immunosuppression) had significantly more malignancies compared to patients with residual
NFAT activity above 15 %. Analysing a subgroup of elderly patients (> 60 years) at least 36 months after kidney
transplantation, 14 of 55 patients developed non-melanoma skin cancers (squamous cell carcinoma, basal cell carcinoma).
Residual NFAT-regulated gene expression was significantly lower in patients with skin cancer compared to
patients without skin cancer. Despite the difference in the relative reduction of residual gene expression, both C0 and
C2 CsA blood levels were comparable in patients with and without skin cancer. Assessment of the individual CsA induced
gene expression, therefore, reflects more accurately the patient’s response to CsA.
The availability of a quantitative, quick laboratory test for an assessment of the individual functional activity of immunocompetent
cells that are crucial for transplant rejection, defense against viral infection and tumor surveillance
along with the ability to adjust doses of immunosuppressive agents such that patients are largely protected against
malignant disease and/or viral infection while maintaining a stable allograft function represent an enormous breakthrough
in transplantation medicine and advances our attempts to individualise treatment in transplanted patients.
Standort Heidelberg
Arbeitsgruppe Molekulare Immundiagnostik
Projektleiter Dr. med. Thomas Giese
Mitarbeiter Daniela Merklinger (BTA), Simone Fomuki (MTA), Dieter Stefan (BTA)
Kooperationen Prof. Dr. med. Martin Zeier, Nephrologie Heidelberg
Prof. Dr. Jan Schmidt, Chirurgie Heidelberg
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Laufzeit des Projektes 01.01.2007 – 31.12.2008
Weitere Informationen
Giese, T., M. Zeier, P. Schemmer, W. Uhl, M. Schöls, T. Dengler, M. Buechler, and S. Meuer. 2004. Monitoring of
NFAT-regulated gene expression in the peripheral blood of allograft recipients: a novel perspective toward individually
optimized drug doses of cyclosporine A. Transplantation 77:339-344.
Sommerer, C., M. Konstandin, T. Dengler, J. Schmidt, S. Meuer, M. Zeier, and T. Giese. 2006. Pharmacodynamic
monitoring of cyclosporine a in renal allograft recipients shows a quantitative relationship between immunosuppression
and the occurrence of recurrent infections and malignancies. Transplantation 82:1280-1285.
Sommerer, C., W. Hartschuh, A. Enk, S. Meuer, M. Zeier, and T. Giese. 2008. Pharmacodynamic immune monitoring
of NFAT-regulated genes predicts skin cancer in elderly long-term renal transplant recipients. Clin Transplant
22:549-554.
Sommerer, C., T. Giese, J. Schmidt, S. Meuer, and M. Zeier. 2008. Ciclosporin A tapering monitored by NFAT-regulated
gene expression: a new concept of individual immunosuppression. Transplantation 85:15-21.
145

Forschungsbericht 2007 – 2008
Entwicklung einer Multiplex-PCR zur IL-6 Promotor-Genotypisierung
und Charakterisierung der IL-6 Produktion bei Hämodialysepatienten
in Abhängigkeit vom IL-6 Genotyp
Hintergrund und Projektbeschreibung
IL-6 ist ein zentrales Zytokin mit einer Vielzahl von unterschiedlichen Funktionen, wie z.B. der Induktion der Akut-
Phase Reaktion. Wie in der Literatur bereits beschrieben sind im Promoterbereich des IL-6 Gens mehrere Punktmutationen
beschrieben worden und es konnten -597/-572/-174 Genotypen identifiziert werden, denen man eine
funktionelle Bedeutung für die IL-6-Genexpression zuschreibt. Unsere eigene Arbeitsgruppe konnte zunächst eine
Assoziation zwischen IL-6 -597/-572/-174 Genotyp und Transplantatüberleben nach allogener Nierentransplantation
nachweisen. In einer aktuellen Arbeit fanden wir ferner einen Hinweis auf eine funktionelle Relevanz für die Gen -
expression bei gesunden Blutspendern.
Ziel dieses Projekts ist zunächst eine technisch weniger aufwendige Multiplex PCR-SSP Methode zu entwickeln, da
die bisher etablierte Methode zur Bestimmung des IL-6 -597/-572/-174 Genotyps 12 PCR-SSP-Ansätze erfordert.
In einem zweiten Teil der Arbeit sollen nach der Validierung der Methode anhand von bereits typisierten DNA-Proben
aus Lübeck, Hämodialysepatienten auf der Warteliste für eine Nierentransplantation untersucht werden und es soll
geklärt werden, ob in Analogie zu gesunden Blutspendern ein Zusammenhang mit der IL-6 Genexpression vorliegt.
Dies könnte für eine verbesserte individuellere Risikoabschätzung vor Transplantation von großer Bedeutung sein.
Wichtigste Ergebnisse
Die Etablierung und Validierung einer technisch deutlich verbesserten und damit weniger aufwendigeren IL-6
Gen otypisierung konnte bereits erfolgreich anhand von 200 Proben abgeschlossen werden. Die Charakterisierung
der IL-6 Produktion bei Hämodialysepatienten auf der Warteliste zur allogenen Nierentransplantation läuft zurzeit
noch. Eine erste Zwischenauswertung ergab jedoch einen Trend zu niedrigeren IL-6 Plasmakonzentration bei Trägern
des IL-6 -597/-572/-174GGG Haplotyps. Eine Erweiterung des Patientenkollektivs wird gerade geprüft. Ferner sollen
Stimulationsversuche ergänzt werden, um diese Daten zu bestätigen.
Development of a rapid multiplex-PCR for IL-6 promoter genotyping and characterisation of the
IL-6 production in haemodialysis patients
IL-6 is considered to play a key-role in the allogeineic immune response. Since several single nucleotide polymorphisms
(SNP) are present in the promoter region of the IL-6 gene, it would be of interest to know, whether these SNP’s
have a functional impact on IL-6 production of haemodialysis patients (potential candidates for kidney transplantation).
It is the aim of this study to develop a rapid and simple multiplex-PCR testing for IL-6 promoter genotyping and characterise
the IL-6 production of haemodialysis patients with respect to the IL-6 promoter genotype. This could be of
great value in order to identify patients with an increased risk for allograft rejection after kidney transplantation.
Standort Mannheim
Arbeitsgruppe IL-6 und Transplantation
Projektleiter PD Dr. med. Michael Müller-Steinhardt
Mitarbeiter Prof. Dr. rer. nat. Peter Bugert, Frau cand. med. Friederike Schulte
Kooperationen Klinik für Nephrologie Universitätsklinikum Mannheim
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Laufzeit des Projektes 2007 – 2009
Weitere Informationen
146
Doss F, Menard J, Hauschild M, Kreutzer HJ, Mittlmeier T, Müller-Steinhardt M, Müller B. Elevated IL-6 levels in
the synovial fluid of osteoarthritis patients stem from plasma cells. Scand J Rheumatol 2007; 36: 136-139.
Müller-Steinhardt M, Ebel B, Härtel C. The impact of interleukin-6 promoter -597/-572/-174genotype on interleukin-6
production after lipopolysaccharide stimulation. Clin Exp Immunol 2007; 147: 339-45.

Etablierung der klinischen Inseltransplantation
Hintergrund und Projektbeschreibung
Transplantationsmedizin und Immungenetik
Die Transplantation Langerhans’scher Inseln ist ein neuartiger, kurativer Therapieansatz für Typ I Diabetiker mit instabiler
Blutzuckerkontrolle trotz intensivierter Insulintherapie. Der dazu erforderliche minimal invasive Eingriff ist für den
Patienten unkompliziert und daher insbesondere für Diabetiker interessant, die mit konventioneller Substitutions -
therapie nicht zufriedenstellend eingestellt werden können und die für eine Pankreastransplantation nicht in Frage
kommen.
Nur wenige Zentren sind weltweit in der Lage, diese Therapieoption anzubieten. Neben der unentbehrlichen Expertise
in der Inselgewinnung ist der Mangel an geeigneten Spenderorganen zur Zeit limitierend für die breitere Anwendung
des Verfahrens. Die Zahl der Inseltransplantationen nahm weltweit seit der Publikation der ersten mit der
Pankreastransplantation vergleichbaren klinischen Ergebnisse (Edmonton-Protokoll) im Jahr 2000 deutlich zu, brach
aber im Jahr 2007 dramatisch ein, da das von der Mehrzahl der Zentren verwendete Enzym zum Verdau des Spenderorgans
wegen möglicher BSE-Risiken nicht mehr einsetzbar war. Für das Jahr 2008 wurde die Zahl der Inseltransplantationen
auf weltweit 20 geschätzt, wovon eine in Tübingen durchgeführt wurde.
Das Tübinger Inselzellprojekt ist eine Kooperation zwischen der chirurgischen Universitätsklinik und dem Zentrum für
Klinische Transfusionsmedizin (ZKT), wobei dem ZKT die technisch anspruchsvolle Herstellung und Prüfung der Inseln
und der Chirurgie die Betreuung der Patienten zufällt. Das ZKT hält die bundesweit einzige Herstellungserlaubnis
für Langerhans’sche Inseln nach §13 AMG. Die Organvermittlung erfolgt über Eurotransplant.
Sobald ein Spenderpankreas einem Tübinger Patienten zugewiesen wird, beginnt das rufbereite Inselteam des ZKT
mit den Vorbereitungen für die Prozessierung. Sobald das Organ dann in Tübingen eintrifft, beginnt die 12-stündige
Isolationsprozedur zur Inselgewinnung im Reinraumlabor des ZKT. Kurz zusammengefasst wird das Ausgangsmaterial
zunächst von Fremdgewebe wie Milz, Dünndarm und Fett befreit und über den Ductus pancreaticus mit Verdauungsenzymen
perfundiert. Der Verdau findet in einer spezialgefertigten Edelstahlkammer unter mechanischer
Unterstützung statt und wird engmaschig mikroskopisch überwacht. Die freigesetzten Inseln werden im an schlie -
senden Nachverdau ausgespült, gewaschen und für die folgende Reinigung konditioniert.
Die Reinigung erfolgt auf einem kontinuierlichen Dichtegradient, wobei das geringfügig schwerere exokrine Pankreasgewebe
abgereichert wird. Nach weiteren Waschschritten liegt das fertige Inselzellpräparat vor.
Bevor dieses zur Anwendung am Menschen freigegeben werden kann, muss es in der Qualitätskontrolle auf Gehalt
(Dithizonfärbung), Reinheit (Ratio Insulin: Amylase), Wirksamkeit/„Potency“ (glukoseabhängige Insulinsekretion) und
Sicherheit (Sterilität & bakterielle Endotoxine) geprüft werden.
Inselprozessierung: Fr. Abel
beim Schütteln der Ricordikammer
zur mechanischen
Verdauunterstützung
147

Forschungsbericht 2007 – 2008
Wichtigste Ergebnisse
Das primäre Ziel der Prozessimplementierung umfasste sowohl die Erfüllung der GMP-Anforderungen als auch die
Prozessanpassung des ursprünglich am Schweinemodell etablierten und validierten Verfahrens, aber auch das Sammeln
von Expertise und die Einarbeitung von Mitarbeitern zum Einrichten einer 24h-Rufbereitschaft.
Die nachfolgende Abbildung zeigt die Ergebnisse der Inselpräparationen. Man erkennt klar den Verlauf der Lernkurve
an den steigenden Ausbeuten an Inseln. Die letzte Isolation wurde erstmalig transplantiert. Der Patient zeigt eine stabile
endogene Insulinsekretion und eine deutlich verbesserte Blutzuckerkontrolle. Die zum Erreichen der Insulinfreiheit
üblicherweise erforderliche zweite Transplantation steht in Kürze an.
Implementation of a pancreatic islet transplantation programme
With the publication of the Edmonoton protocol in 2000, the transplantation of pancreatic islets became a real alternative
to whole organ transplant offering advantages as minimal invasive intervention. But still obstacles as organ
shortage and sophisticated isolation procedures make islet transplantation a niche therapy for highly selected type I
diabetes mellitus patients.
The centre for clinical transfusion medicine is licensed for islet manufacture by the pharmaceutical surveillance. Having
gone through the indispensable learning curve, the ZKT conducted now the first successful transplantation,
which was one out of 20 transplantations realised worldwide in 2008.
Standort ZKT
Arbeitsgruppe Waidmann
Projektleiter Dr. Marc Waidmann
Mitarbeiter Roland Klaffschenkel, Martina Abel, Anne Rau, Doris Deppisch
Kooperationen Universitätsklinikum Tübingen; Klinik für Allgemein- und Viszeralchirurgie
Förderung Hausmittel
Laufzeit des Projektes fortlaufend
148
IEQ
500.000
400.000
300.000
200.000
100.000
Weitere Informationen
0
Inselausbeute
Stim.Index
marc.waidmann@med.uni-tuebingen.de
Ausbeute & Funktionalität
04.02.2008 18.02.2008 22.04.2008 29.10.2008 03.12.2008
Präparation
3
2,5
2
1,5
1
0,5
0
Stim. Index
Rote Balken: Ausbeute an Inseläquivalenten
(IEQ)
Grüne Balken: Stimulatorischer
Index = Insulinsekretion
nach statischer Inkubation mit
16 mM: 3 mM Glukose

Einfluss von immunologisch relevanten Nicht-HLA-
Genpolymorphismen in der Stammzelltransplantation
Hintergrund und Projektbeschreibung
Transplantationsmedizin und Immungenetik
Die Stammzelltransplantation ist ein therapeutisches Verfahren, welches immer breitere An wendung findet. Allerdings
besteht eine erhebliche transplantationsassoziierte Morbidität und Mortalität, wobei vor allem die „Graft-versus-
Host-Reaktion“ (GvHD), Abstoßung und Rezi dive der Grundkrankheit von Bedeutung sind.
Gene immunologisch relevanter Moleküle, wie z. B. Zytokine oder NOD/CARD bzw. NK-KIR, sind in geringem Maße
polymorph. Meistens handelt es sich dabei um den Austausch ein zelner Nukleotide (SNP), jedoch können auch Deletionen,
Insertionen und andere Verände rungen des Gens vorkommen. In der Regel ist der Genpromoter betroffen, allerdings
sind auch Polymorphismen in Exons beschrieben worden. Einige SNP wurden als funktionell relevant
beschrieben, da sie in den meisten Fällen mit dem Transkriptionsmaß bzw. der Funktionalität des Genproduktes
korrelieren. Dies könnte bei der Stammzelltransplantation zu unterschiedlicher Ausprägung der immunologischen
Mechanismen führen und letztendlich mit dem Ausgang der Transplantation korrelieren. Bei SNP, bei denen der Polymorphismus
eine Auswirkung auf die Struktur des daraus resultierenden Proteins hat, vermutet man eine gewisse Immunogenität
der Proteinvariante, die somit als Ziel für eine GvH-Reaktion bzw. eine Abstoßung dienen könnte. Man
spricht dann von „Minor-Antigenen“, die in diesem Zusammenhang auch beschrieben werden.
Eine besondere Gruppe von interessanten Genpolymorphismen stellen die KIR-Gene dar. Hierbei handelt es sich um
Gene, die für Rezeptoren auf den NK-Zellen kodieren. Diese Rezeptoren können NK-Zellen aktivieren bzw. inhibieren.
Eine Interaktion zwischen den inhi bitorischen NK-KIR-Rezeptoren und bestimmten HLA-Gruppen, meist HLA-C, ist
beschrie ben worden. Über die funktionellen Abläufe von aktivierenden KIR-Rezeptoren ist gegenwär tig wenig Information
vorhanden. Die Anzahl der KIR-Gene sowie die KIR-Gene selbst sind ebenfalls polymorph. Der Polymorphismus
und die Assoziation mit den KIR-Rezeptor liganden (HLA-C) wurde in mehreren kleineren Studien als funktionell
relevant in der Stammzelltransplantation beschrieben.
In unserem Projekt wird ein gut charakterisiertes, großes Patienten-/Spender-Kollektiv von ca. 400 nicht verwandten
Stammzelltransplantationspatienten für eine Reihe von Zytokin-, Minor, NOD/CARD- und KIR-Genen getestet. In
einer retrospektiven Analyse wird der Trans plantationserfolg, die GvH und Relapse-Inzidenz sowie das Patientenüberleben
mit den ver schiedenen Parametern korreliert.
Wichtigste Ergebnisse
Für die Bestimmung der entsprechenden Polymorphismen konnten wir Verfahren etablieren. Für die Typisierung der
KIR-Gene bzw. von definierten Minor-Anti genen wird die PCR-SSP-Methode mit bereits existierenden, kommerziellen
Reagenzien eingesetzt. Für die Testung von 20 Zytokinen-SNPs sowie für die NOD/CARD-Polymorphismen wurde
ein In-Haus-Verfahren, basierend auf der Luminex-Technologie entwickelt, vali diert und für die Testung eingesetzt
(Abb. 1). Die bisherigen Ergebnisse weisen keinen Einfluss des Spender- bzw. Empfänger-Genotypen für die getesteten
NOD2/CARD15 SNPs (rs206684 (SNP8), rs2066845 (SNP12) und rs5743293 (SNP13)) auf das Patientenüberleben
nach Transplantation (Abb. 2). Die Auswertung der Zytokin-SNP befindet sich gegenwärtig in der finalen Phase.
Summary
In this project the influence of non-HLA gene polymorphisms shall be correlated with the incidence for GvH, relapse,
and patient survival following stem cell transplantation from an unrelated donor. We introduced methods based on
the PCR-SSP principle for the detection of KIR as well as minor antigen polymorphisms. In addition, we developed a
Luminex based method for the detection of 20 SNPs in 13 different cytokine genes, as well as NOD/CARD SNPs.
Over 200 donor recipient pairs have been typed for the cytokine genes as well as the NOD/CARD genes so far. The
preliminary analysis of our data did not show an independent effect of NOD2/CARD15 mutations in the outcome of
unrelated HSCT. Statistical analyses concerning the impact of the 20 Cytokine and the NOD2/CARD15 SNP on patient
survival as well as relapse and engraftment are on the way.
149

Forschungsbericht 2007 – 2008
Bestimmung des TNFa-SNP -308A/G mittels Luminex bei 52 Proben. Jeder rote Punkt stellt das Ergebnis der Hybridisierung des PCR-
Produktes eines Probanden mit spezifischen Son den dar. Hybridisierungssignale oberhalb des oberen Cut off stellen Personen dar, die
homozygot für die Variante -308 A sind. Signale unterhalb des unteren Cut off entsprechen einer Homozygotie für den Wildtyp (-308 G).
Die Signale im Mittelfeld stellen eine Hetero zygotie (-308 G/A) dar.
Kaplan-Meier 1-Jahres-Gesamtüberleben in Zusammenhang mit den NOD 13 Genotypen vom Spender und Empfänger. Ergebnisse
wurden eingeteilt in solchen mit „0 Diff“
wenn weder Spender noch Empfänger träger einer Mutation war und „1 Diff“
wenn mindestens eine Mutation entweder beim Patienten oder beim Spender detektiert wurde.
150
Quotient
3,000
2,500
2,000
1,500
1,000
0,500
TNFa -308A/G
0,000
0 10 20 30 40 50
Lfd Nr. der Probe
TNFa -308A/G
unterer Cut Off
oberer Cut Off

Standort Ulm
Arbeitsgruppe Transplantationsimmunologie
Projektleiter PD Dr. med. Joannis Mytilineos
Mitarbeiter Dipl. biol. Andrea Vigh, Dr. med. Daniel Fürst, Jens Putzbach, Kirsten Recker
Kooperationen Transplantationszentren: Ulm, Wiesbaden, Mainz, Berlin, Freiburg
Immunobiology Working Group innerhalb des CIBTR
Transplantationsimmunologische Abteilung, Universität Heidelberg
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Laufzeit des Projektes 01.06.2004 – 31.12.2009
Weitere Informationen
Transplantationsmedizin und Immungenetik
Merz A., Mytilineos J.: Zytokingenpolymorphismen bei Patienten mit AML, ALL und CML. 14. Jahrestagung der
Deutschen Gesellschaft für Immungenetik (DGI), Innsbruck, 12.-14.10.06 (Abstract No. P9)
Merz A., Skambraks A., Schrezenmeier H., Mytilineos J.: A PCR-SSP method for NOD2/CARD15 gene 3 SNP
analysis. 39th Annual Congress of the German Society for Transfusion Medicine and Immunohematology (DGTI),
Frankfurt, 19-22 September 2006. Transfus. Med. Hemother. 33 (S1): 53 (Abstract P7.3) (2006)
Putzbach J., Merz A., Schrezenmeier H., Mytilineos J.: Zytokin SNP-Diagnostik unter Verwendung der Luminex
„Flexmap Carboxy Bead“-Technologie. 14. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Immungenetik (DGI),
Innsbruck, 12.-14.10.06 (Abstract No P27)
Vigh A., Mytilineos J.: Cytokine gene polymorphisms in transplanted patients with AML, ALL and CML. Tissue
Antigens 69 (5): 466 (2007)
Andrea Vigh, Jens Putzbach, Hubert Schrezenmeier, Joannis Mytilineos: NOD2/CARD15 SNP genotyping by
Luminex and impact on the outcome of unrelated stem cell transplantation. Human Immunology, Volume 69,
Supplement 1, October 2008, Page S60.
Andrea Vigh, Jens Putzbach, Hubert Schrezenmeier and Joannis Mytilineos. Relevance of NOD2/CARD15
polymorphisms in the outcome of unrelated stem cell transplantation. DGHO, Wien, 2008
151

Forschungsbericht 2007 – 2008
Entwicklung von Reagenzien zur automatisierten Sequenz-basierten
HLA-Typisierung – Charakterisierung neuer sowie NULL-HLA-Allele
Hintergrund und Projektbeschreibung
Die molekularbiologischen Verfahren haben seit Anfang der 90er Jahre die HLA-Diagnostik zunehmend dominiert.
Neben den qualitativen Vorteilen gegenüber der Serologie gibt es eine Reihe von logistischen Überlegungen, die den
Ausbau dieser Verfahren erforderlich machten. Der enorme Polymorphismus im HLA-System und der kontinuierliche
Anstieg von neu entdeckten Allelen stellt für die diagnostischen Verfahren eine große Herausforderung dar, zumal für
das Feld der Stammzelltransplantation eine HLA-Klasse-I- und HLA-Klasse-II-hochauflösende Typisierung von großer
klinischer Bedeutung ist. Die gleichzeitig stetig stei gende Zahl von registrierten freiwilligen Knochenmarkspendern
sorgt für einen kontinuier lichen Anstieg der diagnostischen Leistungen in klinischen Histokompatibilitätslaboren in
Deutschland.
Wichtigste Ergebnisse
152
Kontinuierlicher Anstieg
der HLA-Antigen- und
Allelgruppen seit 1968.
Wir konnten Reagenziensätze für die hochauflösende Typisierung von HLA-A, -B, -C und DRB1 Allelen mittels
Sequenzanalyse entwickeln. H-Seq ABC, der HLA-Klasse I Typisierungssatz und der Herstellungsprozess wurden
durch eine benannte Stelle im Herbst 2006 zertifiziert (CE). Die Zertifizierung des HLA-DRB1 Typisierungssatzes
(H-Seq DRB1) ist kurz vor dem Abschluss. Ein HLA-DQB1 Sequenziersatz befindet sich im Moment in der Entwicklungsphase.
37 neue HLA-Allele wurden mit dieser Methode von unserer Arbeitsgruppe entdeckt und an die zentrale Registrierungsstelle
des Nomenklaturkomitees gemeldet. Im Schnitt entdeckt und meldet unsere Abteilung ein neues Allele
pro Monat. Die meisten davon konnten gut charakterisiert werden, und einige davon sind bereits publiziert worden
– weitere Publikationen diesbezüglich sind in Vorbereitung.
Insbesondere gilt das Interesse unserer Arbeitsgruppe der Epidemiologie und Charakterisierung von NULL-Allelen.
Wir konnten in einem Kollektiv von 10.000 Spendern aus der Ulmer Knochenmarkspenderdatei (KSS-Ulm) die Freuqenz
von Null Allelen auf 0,06 – 0,08 % bestimmen (sieben bis neun von 10.690 Individuen). In zwei Fällen konnten
wir Allele finden, die zwar offensichtlich nicht exprimiert werden, jedoch keine der bekannten NULL-Allele waren und
somit möglicherweise durch neue Mutationen in regulatorischen Bereichen entstanden sind. Gegenwärtig wird nach
den entsprechenden Mutationsstellen gesucht.

Transplantationsmedizin und Immungenetik
Neben der automatischen DNA-Isolation mittels eines auf Magnetpartikelchen basierenden Verfahrens, die in unserer
Abteilung eingeführt und validiert wurde, konnten sowohl die Aufreinigung der PCR-Produkte, das aufwendige Ansetzen
von Sequenzierreaktionen sowie die Reinigung und Fällung der Sequenzierprodukte vollkommen automatisiert
werden. Auch die automatische Auftragsgenerierung sowie die Übermittlung der hochauflösenden Typisierungsdaten
in die Labor-LIMS wurden eingefüht. Ein Konzept zur Automatisierung des PCR-Ansatzes befindet sich gegenwärtig
in Erprobung.
Summary
We developed reagents for high resolution HLA-A, -B, -C,
and -DRB1 typing by sequence-based typing (SBT). The
HLA-class I typing reagents (H-Seq ABC) have been
CE certified since fall 2006. The DRB1 reagents (H-Seq
DRB1) are in the certification process. A DQB1 Sequencing
set is under development. 37 new HLA alleles have been
discovered within our group and registered in the international
nomenclature database. Most of them have been characterised
in detail and some of them have been already
published. In average one new allele per month is being discovered
in our team. We have analysed the frequency of
NULL-Alleles in a cohort of registered bone marrow donors
from the Ulm bone marrow donor center. We found seven to
nine NULL alleles among 10.690 donors (0,06 – 0,08 %). In
two cases the alleles were obviously not present however,
none of the known NULL-Alleles could be found. We suspect
that in these two cases new mutations in regulatory
areas caused the loss of expression. We are currently searching
for these mutations.
The automatisation of the SBT line in our laboratory has also
come forward. We introduced a method which allows simultaneous
DNA isolation of 96 samples within one hour. In addition
we fully automatised the processes of PCR product
purification, sequence reaction setup, as well as sequence
reaction purification. The introduction of barcodes and of
suitable evalua tion software also made data interpretation
and result transfer easier and more effective. We are currently
evaluating a system for automatic PCR-setup.
Auflistung der neuen Allele, die im transplantationsimmunologischen
Labor des IKT Ulm entdeckt und charakterisiert wurden.
153

Forschungsbericht 2007 – 2008
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Transplantationsimmunologie
Projektleiter PD Dr. med. Joannis Mytilineos
Mitarbeiter
Kooperationen
Dr. med. Daniel Fürst, Dipl. biol. Andrea Vigh, Dr. med. K. Hirv, (ausgeschieden 02.2008),
A. Skambraks (MTA), G. Erne (MTA), cand. med. Michael Begovic
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Laufzeit des Projektes 01.04.2005 – 31.12.2010
Weitere Informationen
154
Hirv K., Pannicke U., Mytilineos J., Schwarz K.: Disulfide bridge disruption in the a2 domain of the HLA class I
molecule leads to low expression of the corresponding antigen. Human Immunology 67: 589-596 (2006)
Hirv K., Merz A., Schrezenmeier H., Mytilineos J.: High resolution HLA-A-, -B and Cw typing with an allele groupspecific
sequencing approach in hematopoietic stem cell transplant patients and their unrelated donors. 39th Annual
Congress of the German Society for Transfusion Medicine and Immunohematology (DGTI), Frankfurt, 19-22
September 2006. Transfus. Med. Hemother. 33 (S1): 53 (Abstract P7.2) (2006)
Hirv K., Mytilineos J.: Die Häufigkeit und Charakterisierung neuer HLA-Allele. 14. Jahrestagung der Deutschen
Gesellschaft für Immungenetik (DGI), Innsbruck, 12.-14.10.06 (Abstract No. P1)
Hirv K., Begovic M., Hees S., Flach C., Schrezenmeier H., Mytilineos J.: Estimated Frequency of HLA-A and HLA-
B low expression and null alleles in 10.690 donors of the Bone Marrow Donor Registry, Ulm. 22nd European Immunogenetics
and Histocompatibility Conference, Toulouse, 2 – 5 April, 2008. Tissue Antigens 71 (2008), 265-398
(279-0-37)
Hinrichs J., Lulai S., Neumann N., Figueiredo C., Hirv K., Blasczyk R., Horn P., Eiz-Vesper B.,: Discrimination of
NULL an low expression of HLA by cytokine induced secretion method using soluble HLA*30142.16. Jahrestagung
der DGI, Essen, 25.-27.09.2008, 16. Jahrestagung der DGI, Abstract-Buch, Page 46, P8
Mytilineos J., Begovic M., Schrezenmeier H., Hirv,K.: HLA-A and -B low expression and NULL Alleles in 10690
unrelated bone marrow donors. 34th ASHI Annual Meeting, Toronto, 27.-31.10.2008.
Human Immunology 2008 , 162-P, page 88

Detektion von TRALI-assoziierten Antikörpern
Hintergrund und Projektbeschreibung
Transplantationsmedizin und Immungenetik
Das TRALI-Syndrom (Transfusion-related acute lung injury) ist mit einer Inzidenz von 0,02 % (bezogen auf alle transfundierten
Präparate) und einer Mortalität von ca. fünf bis 20 % eine sehr seltene, jedoch lebensbedrohliche, immunologisch
ausgelöste transfusionsbedingte Komplikation. Das TRALI-Syndrom ist charakterisiert durch ein
nichtkardiogenes Lungenödem. Der Hauptverursacher eines TRALI-Syndroms sind Spender-Antikörper gegen
Granulozyten des Empfängers, die durch eine Transfusion übertragen wurden. Diese Antikörper können entweder
gegen HLA- oder HNA (= granulozytäre)-Antigene gerichtet sein. Beide Antikörpergruppen können eine Aktivierung
der Patientengranulozyten verursachen, wodurch während der Alveolarpassage Lungengewebe geschädigt wird und
somit ein Lungenödem entstehen kann. Um das TRALI-Risiko zu minimieren, wird seit Oktober 2007 in den Instituten
des DRK-Blutspendedienstes Baden-Württemberg - Hessen das Plasma von Apherese-Spendern (Plasma- bzw.
Thrombozytenapheresespender) auf HLA-Antikörper untersucht.
Wichtigste Ergebnisse
In unserer Abteilung wurden zwei Verfahren für die Testung von HLA-Klasse I und II Antikörpern eingeführt. Darüber
hinaus wurde eine �-Version eines auf der Luminex Technologie basierendes Produkt zur Detektion von HNA-Antikörpern
(HNA 1a, 1b, 1c, 2a, 4a) evaluiert.
Mittels ELISA getestete HLA Antikörper wurden in 29 % der Apheresespender mit und in 5 % der Spender ohne Immunisierungsanamnese
(Transfusion oder Schwangerschaft) nachgewiesen. Eine Testung mittels eines Luminex-basierten
HLA-Antikörper Detektionsverfahrens führte zu einer signifikanten Erhöhung der Positivitätsrate (48 %) bei
Spendern mit Immunisierungsrisiko (Abb. 1). Das Luminex-Nachweisverfahren war präziser als der ELISA-Test, da
über 60 % der ELISA/Luminex diskrepanten Fälle (n = 35 – 28 %) im ELISA basierten Spezifizierungsassay als reaktiv
bestätigt werden konnten. Die klinische Relevanz der erhöhten Sensitivität des Luminex Verfahrens bleibt jedoch ungeklärt
und wird in klinischem Material untersucht werden müssen. Bei Spendern mit Immunisierungsrisiko sind mittels
des Luminex-Verfahrens nachgewiesene HNA-Antikörper seltener als HLA-Antikörper (16 % vs. 50 %). Während
im gleichen Spenderkollektiv eine HLA-Immunisierung bei Frauen signifikant häufiger als bei Männern auftritt (58 %
vs. 5 %), scheint dies bei HNA-Antikörpern nicht der Fall zu sein. Letzteren sind gleich häufig auftretend bei beiden
Geschlechtern (w: 15 % vs. m: 18% – Abb. 2).
Insgesamt konnte mit dem Luminex-Verfahren bei 64 % der Frauen und 23 % der Männer mindestens ein Antikörper
(HLA-Klasse I oder Klasse II oder HNA) nachgewiesen werden. Weitere Untersuchungen sind erforderlich um zu beurteilen,
welche Bedeutung die Spezifität und Titer der Antikörper für das Risiko ein TRALI zu induzieren, haben.
Summary
TRALI is a rare, but serious complication in transfusion therapy with a high mortality rate. Alloreactive HLA and HNA
antibodies are implicated in an immune-mediated pathway triggering non-cardiac pulmonary edema. Rapid, reliable
and cost effective antibody screening for HLA and HNA antibodies could help to reduce the risk for TRALI by exclusion
of potentially sensitised donors. We used two different methods for the detection of TRALI associated antibodies,
ELISA and a Luminex based assay. In our study the prevalence of TRALI associated antibodies in females after
pregnancy or transfusion was shown to be even higher than demonstrated in previous studies based on ELISA techniques,
and affected 2/3 of all tested women. Whereas the prevalence of HLA-antibodies was significantly higher in
females after pregnancy/transfusion when compared with transfused men (58 % vs. 5 %), this was not the case for
HNA antibodies (15 % vs. 18 %). Luminex is suitable as a high throughput method for screening of HLA and HNA
antibodies, however, it will have to be clarified whether the increased sensitivity, when compared to ELISA techniques,
has a significantly better diagnostic impact on the manifestation of clinical TRALI cases.
155

Forschungsbericht 2007 – 2008
Abbildung 1: Inzidenz von HLA-Antikörpern (Klasse I und II) bei Apheresespendern mit Immunisierungsanamnese (Schwangerschaft
bzw. Transfusion). Für den Nachweis wurden ein ELISA- und ein Luminex-basiertes Verfahren eingesetzt. Eine signifikant höhere Sensitivität
des Luminex gestützten Verfahrens ist zu betrachten.
Abbildung 2: Inzidenz von HNA-Antikörpern (HNA-1a, 1b, 1c, 2a, 4a) bei männlichen und weiblichen Apheresespendern mit Immunisierungsanamnese
(Schwangerschaft bzw. Transfusion). Für die Testung wurde ein kommerzielles, Luminex-basiertes Verfahren eingesetzt.
156
Nachweis von HLA-Antikörpern bei Spendern mit Immunisierungsanamnese
ELISA vs LUMINEX
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
LUM ELISA
HLA-I + II Ak HLA-I+II Ak
neg
pos
HNA – Antikörper in Apherese-Spendern mit Immunisierungsrisiko
100%
80%
60%
40%
20%
0%
n=18
81,8%
n=4
18,2%
n=88
84,6%
n=16
15,4%
n=106
84,1%
n=20
15,9%
m w ges
neg
pos

Standort Ulm
Arbeitsgruppe Transplantationsimmunologie
Projektleiter PD Dr. med. Joannis Mytilineos
Transplantationsmedizin und Immungenetik
Mitarbeiter Dr. Fürst, Fr. Pabst, Fr. Petrek
Kooperationen Methodenvergleich mit anderen Standorten im BSD Baden-Württemberg - Hessen (Dr. U. Schulz,
Dresden, Dr. X.-D. Nguyen, Mannheim; Prof. Dr. Seidl, Frankfurt, Dr. Kraas, Lütjensee).
Laufzeit des Projektes 01.10.2007 – 31.12.2009
Weitere Informationen
HLA and HNA AB Screening In Apheresis-Donors With Suspected Risk for Induction of TRALI
D. Fürst, K. Pabst, P. Reinhardt, U. Mayr-Wolfahrt, R. Kress, K. Körner, M. Wiesneth, H. Schrezenmeier,
J. Mytilineos
Visuals of the European Clinical Histocompatibility Workshop, June 2008
COMPREHENSIVE ANTIBODY-SCREENING IN APHERESIS DONORS WITH SUSPECTED RISK FOR INDUCTION
OF TRALI.
D. Fürst, K. Pabst, P. Reinhardt, U. Mayr-Wolfahrt, R. Kress, K. Körner, M. Wiesneth, H. Schrezenmeier,
J. Mytilineos
P 6/8.03 Transfusion Medicine and Hemotherapy 2008 Vol.35, Supplement 1
157

Forschungsbericht 2007 – 2008
158

4 Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
159

Polymorphism map of the genes involved in blood coagulation
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Single nucleotide polymorphisms (SNPs) in genes of blood coagulation are quite common and impressively demonstrate
the genetic variation of haemostasis system in normal population. Some of these sequence variations are
known to influence the clinical manifestation of thromboembolic disorders or the efficacy of drugs acting in the coagulation
cascade. The present study investigates 400 alleles from most genes of the haemostasis system aiming an
almost quantitative identification of SNPs with a frequency of > 1%. The SNP data will be aggregated to haplotypes
which might be useful for the vision of assessing haemostatic risk profiles by biochip based diagnostic tools.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Molekulare Hämostaseologie
Projektleiter Dr. med. Christof Geisen
Mitarbeiter Jelena Farac (Doktorandin)
SaLan Nguyen (Doktorandin)
Katja Sittinger (Wissenschaftlerin)
Dr. rer. nat. Matthias Watzka (Wissenschaftler)
Sahar Zaghian (Doktorandin)
Kooperationen Prof. Dr. J. Oldenburg, Inst. für Exp. Hämatologie und Transfusionsmedizin, Universität Bonn
Prof. Dr. T. Wienker, Dr. M. Steffens, Abteilung für Genetische Epidemiologie, Universität Bonn
Förderung BMBF (Nationales Genomforschungsnetz 2)
Firma Baxter
Laufzeit des Projektes 01.02.2002 – 31.12.2008
Weitere Informationen
Geisen C, Watzka M, Sittinger K, Steffens M, Daugela L, Seifried E, Muller CR, Wienker TF, Oldenburg J (2005).
VKORC1 haplotypes and their impact on the inter-individual and inter-ethnical variability of oral anticoagulation.
Thromb Haemost. 2005 Oct; 94(4): 773-9.
Ivaskevicius V, Jusciute E, Steffens M, Geisen C, Hanfland P, Wienker TF, Seifried E, Oldenburg J (2005). GammaAla82Gly
represents a common fibrinogen gamma-chain variant in Caucasians. Blood Coagul Fibrinolysis Apr;
16(3): 205-208.
http://www.blutspende.de/forschung_entwicklung/wissenschaftliche_arbeitsgruppen/molekulare_
haemostaseologie.php
161

Forschungsbericht 2007 – 2008
Molekulare Diagnostik hereditärer Fibrinogen-Erkrankungen
Hintergrund und Projektbeschreibung
Hereditäre Fibrinogen-Erkrankungen werden in eine quantitative und qualitative Form unterteilt. Die quantitativen
Fibrinogen-Erkrankungen sind charakterisiert durch die Abwesenheit (Afibrinogenämie) oder die Reduktion (Hypofibrinogenämie)
des Plasma-Fibrinogens. Die qualitativen Fibrinogen-Erkrankungen werden definiert durch die Präsenz
einer abnormalen Fibrinogen-Variante im Plasma bei gleichzeitig normalen (Dysfibrinogenämie) oder reduzierten
(Hypodysfibrinogenämie) zirkulierendem Fibrinogen. Ursächlich für die Fibrinogen-Erkrankungen sind Mutationen, die
in den für die Fibrinogen-Ketten kodierenden Genen FGA, FGB und FGG vorliegen. Die hereditäre Dysfibrinogenämie
ist mit einem autosomal dominanten Übertragungsmuster, die hereditäre Afibrinogenämie mit einem autosomal rezessiven
Übertragungsmuster assoziiert. Die Hypofibrinogenämie repräsentiert das heterozygote Vorliegen der gleichen
Mutationen wie im Falle der Afibrinogenämie. Zurzeit sind ca. 450 für den Fibrinogen-Mangel ursächliche
Varianten beschrieben. Die klinische Manifestation der Erkrankung variiert von einer asymptomatischen Verlaufsform
über das Auftreten von Blutungen, Thrombosen oder Frühaborten. Einige Varianten sind mit einer Leberspeicherkrankheit
bzw. einer Amyloidose assoziiert. Die Diagnose der Fibrinogen-Erkrankung erfolgt durch Gerinnungstests,
die jedoch nicht zwischen den verschiedenen Fibrinogen-Varianten differenzieren und damit auch keine Aussage
über das Blutungs- oder Thrombose-Risiko ermöglichen.
Clinical and genetic variability of 40 families with dysfibrinogenemia
Wichtigste Ergebnisse
Bislang wurde eine effektive und schnelle Screening-Strategie für die Mutationssuche in den Fibrinogen-Genen,
basierend auf Labordaten und klinischen Angaben, entwickelt. In einem Kollektiv von ca. 60 Familien mit hereditärer
Afibrinogenämie bzw. Hypofibrinogenämie konnten 20 neue Varianten charakterisiert werden, deren Analyse zum
besseren pathophysiologischen Verständnis der Erkrankung beitragen. Die Genotyp-Phänotyp-Analyse in 40 Familien
mit Dysfibrinogenämie zeigte bestimmte Varianten auf, die vorwiegend im FGB- und FGG-Gen lokalisiert und mit
Thrombosen in jungen Jahren assoziiert waren. Die am häufigsten vorliegende Veränderung an AaArg16 (ca. in 50 %
aller Familien) war durch einen eher milden klinischen Verlauf charakterisiert. Ein deutlich erhöhtes Risiko bei Vorliegen
der Variante ergab sich jedoch für schwerwiegende, vor allem postoperative Blutungen. Die genetische Analyse
kann hier dazu beitragen, klinische Manifestationsformen in Abhängigkeit der vorliegenden Variante vorherzusagen
und Einfluss auf die Entwicklung präventiver Behandlungsstrategien zu nehmen.
162

Molecular diagnosis of hereditary fibrinogen abnormalities
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
A highly effective and easy mutation screening strategy for variants in the fibrinogen-genes based on laboratory parameters
and clinical infomation has been established. Molecular diagnosis of 20 new variants in approximately
60 families with hereditary afibrinogenemia or hypofibrinogenemia contributed to a better understanding for the
pathophysiology of fibrinogen deficiency. A genotype phenotype analysis in 40 families with dysfibrinogenemia identified
variants predominantly in the FGB and FGG gene that were highly associated with severe thrombosis at a very
young age. The majority of families with the most common mutation at amino acid position 16 of the Aa-chain (found
in approximately 50 % of dysfibrinogenemia families) did not have any clinical symptom, although the risk of bleeding
was higher, particularly after surgery. Thus, genetic analysis can help to predict the clinical manifestation with
reference to detected variants and to optimize preventive therapy strategies.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Molekulare Hämostaseologie
Projektleiter Dr. med. Christof Geisen
Mitarbeiter Maria Lim-Eimer (TA)
Kristina Feldt (TA)
Daniela Bott (TA)
Katja Sittinger (Wissenschaftlerin)
Sabine Wetzestein (TA)
Kooperationen Prof. Dr. med. J. Oldenburg, Inst. für Exp. Hämatologie und Transfusionsmedizin, Universität Bonn
Prof. Dr. med. E. Lindhoff-Last, Abt. für Angiologie, JWG-Universität Frankfurt
Dr. med. W. Miesbach, Hämophiliezentrum, JWG-Universität Frankfurt
PD Dr. med. W. Kreuz, Kinderklinik III, JWG-Universität Frankfurt
PD Dr. med. J. Ringwald, Inst. Für Transfusionsmedizin, Universität Erlangen
Dr. A. M. Lauricella, Fakultät für Naturwissenschaften, Buenos Aires
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Laufzeit des Projektes fortlaufend
Weitere Informationen
Sittinger K, Miesbach W, Ivaskevicius V, Heller C, Weiss D, Harbrecht U, Kappert G, Bidlingmaier C, Seifried E,
Oldenburg J, Geisen C (2008). The link between genetic diagnosis, coagulation tests and clinical phenotype in 34
patients with dysfibrinogenemia. Joint Annual Congress of the German Society for Transfusion Medicine and Immunohaematology
(DGTI), Düsseldorf, 16.-19. September 2008; Transfus Med Hemother 2008;35(suppl 1):1-96;
38 (V)
Ivaskevicius V, Jusciute E, Steffens M, Geisen C, Hanfland P, Wienker TF, Seifried E, Oldenburg J (2005).
GammaAla82Gly represents a common fibrinogen gamma-chain variant in Caucasians. Blood Coagul Fibrinolysis
Apr; 16(3): 205-208.
http://www.blutspende.de/forschung_entwicklung/wissenschaftliche_arbeitsgruppen/molekulare_
haemostaseologie.php
163

Forschungsbericht 2007 – 2008
Molekulare Diagnostik von erblich bedingten hämorrhagischen und
thromboembolischen Krankheitsbildern der Blutgerinnung
Hintergrund und Projektbeschreibung
Schwerwiegende Mangelzustände der Gerinnungsfaktoren Fibrinogen, Faktoren II, V, VII, X, XI, und XIII und damit
einhergehende erbliche Blutungsneigungen sind sehr selten und weisen Inzidenzen von nur 1 : 500.000 bis
1 : > 1.000.000 auf. Dagegen sind arterielle und venöse thromboembolische Ereignisse mit drei bis fünf Fällen pro
1000 Individuen und Jahr vergleichsweise häufige Ereignisse, wobei nur etwa jeder 20. Fall auf Mutationen in einem
Gen der inhibitorisch wirkenden Gerinnungsfaktoren (Antithrombin, Protein C, Protein S) verursacht wird. Wir haben
in unserem Labor die Protokolle für die molekulargenetische Untersuchung der genannten Gerinnungsfaktoren
etabliert, von denen nachfolgend der Faktor-XIII und der Faktor-VII exemplarisch angeführt sind.
Der Faktor-XIII vermittelt die kovalente Verknüpfung der Fibrinpolymere und ist damit essentiell für die Festigkeit des
Thrombus. Der schwere FXIII-Mangel ist mit 1 : 3.000.000 äußerst selten. Die Patienten können eine schwere Blutungssymptomatik
mit Gelenkblutungen und intrazerebralen Blutungen aufweisen.
Bei einer Gefäßverletzung stellt die Bindung von aktiviertem Faktor-VII (Faktor-VIIa) an Gewebethromboplastin
(„Tissue Factor“, TF) den entscheidenden Auslöser für die plasmatische Gerinnung dar. Der TF wirkt hierbei als
Kofaktor, der die Reaktionsgeschwindigkeit der Faktor-VIIa-vermittelten Aktivierung der Proenzyme Faktor-X und
Faktor-IX um Zehnerpotenzen steigert. Mit einer Inzidenz von 1 : 500.000 ist der Faktor-VII-Mangel vergleichsweise
häufig unter den seltenen Hämorrhagien
Lokalisation verschiedener Faktor-VII-Mutationen
Wichtigste Ergebnisse
Bislang wurden Protokolle für ein schnelles und sicheres Mutationsscreening aller klassischen prokoagulatorischen
und inhibitorischen Gerinnungsfaktoren etabliert und damit insbesondere Patientenkollektive mit Faktor-XIII-Mangel
und Faktor-VII-Mangel untersucht.
In Zusammenarbeit mit Prof. Seitz aus dem Paul-Ehrlich-Institut konnten die molekularen Ursachen bei 26 Patienten
mit Faktor-XIII-Mangel aus mehreren Ländern Europas identifiziert werden. Klinische Daten haben hierbei erstmals
gezeigt, dass auch heterozygote Mutationsträger mit Faktor-XIII-Spiegeln von etwa 50 % Blutungsneigungen und
Wundheilungsstörungen aufweisen können.
164

Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Darüber hinaus wurden in einem Kollektiv von 22 Familien mit Faktor-VII-Mangel die molekularen Ursachen ermittelt
und dabei insgesamt 37 Mutationen identifiziert, von denen sieben Mutationen nicht vorbeschrieben waren. Es zeigte
sich, dass die Mutationen bei fünf Familien in homozygoter, bei neun Familien in compound heterozygoter und bei
sieben Familien in heterozygoter Form vorlagen. Bei den Familien mit heterozygot vorliegender Mutation führten
funktionell wirksame Polymorphismen im Faktor VII-Gen zu einer weiteren Verminderung des Faktor-VII-Spiegels und
damit zur klinischen Manifestation der Blutungsneigung.
Summary
Protocols for the genetic analysis of most monogenetic haemorrhagic and thromboembolic disorders have been
established in our group. So far 26 patients with factor XIII deficiency from all over Europe have been characterized.
Of special interest is one female patient with a heterozygous missense mutation who showed symptoms of bleeding
and wound healing inspite of factor XIII levels in the range of 50 %. In another cohort of 22 patients with factor VII
deficiency 37 mutations could be found revealing five homozygous, nine compound heterozygous and seven heterozygous
mutations. In the families with heterozygous mutations the concomitant presence of polymorphisms led to
the clinical manifestation of the bleeding.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Molekulare Hämostaseologie
Projektleiter Dr. med. Christof Geisen
Mitarbeiter Daniela Bott (TA)
Daniel Delev (Doktorand)
Maria Lim-Eimer (TA)
Kristina Feldt (TA)
Dr. med. Anna Pavlova (Wissenschaftlerin)
Tina Werner (TA)
Katja Sittinger (Wissenschaftlerin)
Dipl.-Biol. Gabriele Spohn (Doktorandin)
Dr. rer. nat. Matthias Watzka (Wissenschaftler)
Sabine Wetzestein (TA)
Kooperationen Prof. Dr. med. J. Oldenburg, Inst. für Exp. Hämatologie und Transfusionsmedizin, Universität Bonn
Prof Dr. med. E. Lindhoff-Last, Abt. für Angiologie, JWG-Universität Frankfurt
Dr. med. W. Miesbach, Hämophiliezentrum, JWG-Universität Frankfurt
PD Dr. med. W. Kreuz, Kinderklinik III der JWG-Universität Frankfurt
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Laufzeit des Projektes fortlaufend
Weitere Informationen
Ahmed RP, Biswas A, Kannan M, Bhattacharya M, Geisen C, Seifried E, Oldenburg J, Saxena R (2005). First report
of a FVII-deficient Indian patient carrying double heterozygous mutations in the FVII gene. Thromb Res
115(6): 535-6.
Rost S, Geisen C, Fregin A, Seifried E, Muller CR, Oldenburg J (2006) Founder mutation Arg485Pro led to recurrent
compound heterozygous GGCX genotypes in two German patients with VKCFD type 1. Blood Coagul Fibrinolysis
17: 503-7
Pavlova A, El-Maarri O, Luxembourg B, Lindhoff-Last E, Kochhan L, Bruhn HD, Delev D, Watzka M, Seifried E, Oldenburg
J (2006) Detection of heterozygous large deletions in the antithrombin gene using multiplex polymerase
chain reaction and denatured high performance liquid chromatography. Haematologica 91: 1264-7
Delev D, Pavlova A, Heinz S, Blaise MC, Chandra T, Poetsch B, Seifried E, Oldenburg J (2008) Modelling and expression
studies of two novel mutations causing factor V deficiency. Thromb Haemost. 100(5):766-72.
Ivaskevicius V, Windyga J, Baran B, Bykowska K, Daugela L, Watzka M, Seifried E, Oldenburg J (2008) The first
case of combined coagulation factor V and coagulation factor VIII deficiency in Poland due to a novel
p.Tyr135Asn missense mutation in the MCFD2 gene. Blood Coagul Fibrinolysis. 19(6):531-534.
http://www.blutspende.de/transfusionsmedizin/labordiagnostik/frankfurt/molekulare_hamostaseologie.php
165

Forschungsbericht 2007 – 2008
Molekulargenetische Analysen bei Hämophilie A-Patienten zur
Analyse des Hemmkörperrisikos bei Anwendung von
ADVATE-FVIII-Konzentrat
Hintergrund und Projektbeschreibung
Die Hemmkörperbildung bei Patienten mit Hämophilie A stellt die schwerste Komplikation der Therapie mit Faktor-
VIII-Gerinnungskonzentraten dar. Etwa 20 bis 30 % aller schwer betroffenen Hämophilie A Patienten bilden meist zu
Beginn der Behandlung innerhalb der ersten 20 Expositionstage einen Hemmkörper. Dieser Hemmkörper neutralisiert
die Wirkung des substitutierten FVIII. Das Risiko der Hemmkörperbildung wird entscheidend durch Art und Lokalisation
der Mutation im Faktor-VIII-Gen bestimmt. Darüber hinaus wird das Hemmkörperrisiko möglicherweise durch die
Art der Applikation des FVIII-Präparats (kontinuierliche Infusion versus Bolusgabe) beeinflusst.
In einem Teil dieser Studie soll bei „Previously Untreated Patients“ (PUPs) der für die Hämophilie A ursächliche
Defekt im FVIII-Gen aufgeklärt werden. In einem weiteren Teil der Studie wird bei Hämophilie A-Patienten, die sich
einem Kniegelenksersatz unterziehen, eine Faktor-VIII-Gendiagnostik durchgeführt. Ergänzend wird der Einfluss von
Merkmalen des HLA-Systems auf die Hemmköperbildung untersucht.
Wichtigste Ergebnisse
166
Schematische Darstellung
des Faktor-VII-Proteins im
Tenase-Komplex
Der Pathomechanismus der Hemmkörperbildung basiert auf einer Immunantwort des Patienten in Form einer Anti-
FVIII-Alloantikörperbildung, da der zugeführte Faktor-VIII ein körperfremdes Protein darstellt. Seit kurzem ist bekannt,
dass der Typ der Mutation einen entscheidenden Einfluss auf das Risiko der Hemmkörperbildung hat. Unter Berücksichtigung
des Einflusses der Mutation im Faktor-VIII-Gen, lässt sich die Bedeutung weiterer Einflussfaktoren für das
Hemmkörperrisiko feststellen.

Inhibitorprävalenz in Abhängigkeit
vom Mutationstyp
Summary
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Inhibitor formation affects 20 to 30 % of patients with severe haemophilia A and represents the major complication of
substitution therapy with factor VIII concentrates. Since prophylactic treatment is not possible in those patients they
are at risk for progressive joint damage. The pathomechanism of inhibitor formation is only partly understood. Beside
the FVIII mutation determinants of the immune response genes have been suggested to play an important role for inhibitor
formation. In addition the application mode (continuous versus bolus infusion) may contribute to the risk of inhibitor
formation.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Molekulare Hämostaseologie
Projektleiter Dr. med. C. Geisen, Prof. Dr. med. Johannes Oldenburg
Mitarbeiter Maria Lim-Eimer (TA)
Katja Sittinger (Wissenschaftlerin)
Sabine Wetzestein (TA)
Kooperationen Prof. Dr. med. J. Oldenburg, Institut für Exp. Hämatologie und Transfusionsmedizin, Universität Bonn
Förderung Firma Baxter
Laufzeit des Projektes 01.10.2004 – 31.03.2009
Weitere Informationen
100
75
50
25
0
Hohes Risiko
Mehrere
Domänen
88%
Große Leichte Kette
Deletionen 40%
41%
Einzelne
Nonsense
31%
Intron 22
Inversionen Non A-Run
Domänen
25% Schwere Kette
21% 21%
Kleine
17%
Deletionen
16%
Niedriges Risiko
A-Run
3%
C1-C2
10%
Missense
5%
Non C1-C2
3%
Splice site
3%
Astermark J, Oldenburg J, Carlson J, Pavlova A, Kavakli K, Berntorp E, Lefvert AK (2006) Polymorphisms in the
TNFA gene and the risk of inhibitor development in patients with hemophilia A. Blood 108: 3739-45
Astermark J, Oldenburg J, Pavlova A, Berntorp E, Lefvert AK (2006) Polymorphisms in the IL10 but not in the
IL1beta and IL4 genes are associated with inhibitor development in patients with hemophilia A.
Blood 107: 3167-72
Oldenburg J, Pavlova A (2006) Genetic risk factors for inhibitors to factors VIII and IX.
Haemophilia 12 Suppl 6: 15-22
http://www.blutspende.de/transfusionsmedizin/labordiagnostik/frankfurt/molekulare_hamostaseologie.php
167

Forschungsbericht 2007 – 2008
Pharmakogenetik der oralen Antikoagulation
Hintergrund und Projektbeschreibung
Ein großes Problem beim klinischen Einsatz von Cumarinderivaten wie Phenprocoumon oder Warfarin ist seit jeher
das enge therapeutische Fenster. Bei einer Unterdosierung fehlt ein Schutz vor Thrombosen, bei einer Überdosierung
kann es leicht zu schweren Blutungen kommen. Weiter kompliziert wird die Therapie durch große Unterschiede in der
individuellen Cumarindosis. Neben partiell resistenten Patienten, die eine erhöhte Dosis zur Erreichung der gewün -
schten Antikoagulation benötigen, gibt es auch Fälle gesteigerter Sensitivität, bei denen eine orale Antikoagulation
schwer steuerbar oder sogar gänzlich unmöglich ist.
Ein großer Fortschritt hierbei war in 2004 die Identifizierung des VKORC1-Proteins (Vitamin-K-Epoxid-Reduktase
Untereinheit 1) als molekulares Target der Cumarine durch die Forschergruppen um Oldenburg und Stafford (Rost et
al., Nature, 2004, Li et al., Nature, 2004). Nun gelang unserer Gruppe die Identifizierung bestimmter funktioneller
VKORC1-Genvarianten, so genannter Haplotypen, die einen erheblichen Einfluss auf die Wirkung der Cumarinderivate
ausüben (Geisen et al., Thrombosis and Haemostasis, 2005).
Die von unserer Arbeitsgruppe gezeigten Ergebnisse belegen beispielhaft die zunehmende Bedeutung der Pharmakogenomik.
Das bessere Verständnis der individuellen Pharmakokinetik und -dynamik erlaubt Voraussagen über
erwünschte und unerwünschte Arzneimittelwirkungen. Unsere Ergebnisse lassen erwarten, dass in Zukunft auf der
Basis molekularer Marker eine individualisierte Dosierung der Cumarinderivate zu einer verbesserten Effizienz und
Sicherheit der oralen Antikoagulation beiträgt.
VKORC1-Haplotypen und ihre Verteilung in unterschiedlichen Ethnien (modifiziert nach Geisen et al. 2005)
Wichtigste Ergebnisse
Zunächst wurden durch Untersuchung der kompletten VKORC1-Genregion bei 200 gesunden Blutspendern die relevanten
Haplotypblöcke bei Westeuropäern identifiziert und quantifiziert. Der von uns als VKORC1*2 bezeichnete Haplotyp
erreicht eine Allelfrequenz von 42 %, während die Haplotypen VKORC1*3 und VKORC1*4 mit 38 % bzw. 20 %
vorkommen.
Die Analyse von Patienten mit ausgeprägt hohem (> 97,5 Perzentile) oder niedrigem Cumarin-Bedarf (< 2,5 Perzentile)
zeigte eine höchst signifikante Assoziation des VKORC1*2-Haplotypen mit der benötigten Wirkstoffdosis. So
wiesen 93 % der Cumarin-sensitiven Patienten den Genotyp VKORC1*2/*2 (homozygot) auf und die restlichen 7 %
waren heterozygot für den VKORC1*2-Haplotyp. Bei Cumarin-resistenten Patienten ergab sich ein entgegengesetztes
Ergebnis. Kein Patient trug den Genotyp VKORC1*2/*2, 14 % zeigten eine heterozygote Konstellation (Tab. 1).
In einem weiteren Patienten-Kollektiv von 61 Patienten mit stabiler Antikoagulation unter Phenprocoumon benötigten
Träger des Genotyps *2/*2 nur 10 mg Phenprocoumon pro Woche. Bei heterozygoten Patienten (*2/non*2) waren es
bereits 15 mg, und Patienten mit non*2/non*2-Genotyp mussten im Durchschnitt sogar 21 mg Phenprocoumon pro
Woche einnehmen, um im therapeutischen Dosisbereich zu bleiben.
168
B
VKORC1*4
VKORC1*3
Haplotype frequency
Europeans Africans Chinese
(GER) (AFR) (CHN)
VKORC1*2
VKORC1*4
VKORC1*3
VKORC1*1
VKORC1*2
VKORC1*3
VKORC1*2
VKORC1*2

Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Auch die schon länger bekannten inter-ethnischen Dosisunterschiede bei oraler Antikoagulation werden durch den
Haplotyp VKORC1*2 verursacht. So ist dieser Haplotyp, welcher bei Europäern mit einer Cumarinsensitivität assoziiert
ist, in chinesischen Populationen mit 95 % vertreten. Dies korreliert mit der in Ostasien im Vergleich zu Europa
deutlich verminderten Cumarindosis bei Thrombosepatienten. In afrikanischen Populationen kommt dieser Haplotyp
nur mit einer Frequenz von 14 % vor, die deutlich unter europäischen Populationen liegt und mit einer im Durchschnitt
höheren Cumarindosis einhergeht.
Cumarin-
sensitiv
n = 14
Cumarin-
resistent
n = 36
Kontrollen
n = 200
VKORC1-Haplotyp
Genotyp
*2/*2 13 (0,93) 0 35 (0,18)
*2/non*2 1 (0,07) 5 (0,14) 96 (0,48)
non*2/non*2 0 31 (0,86) 69 (0,34)
Allel Frequenz
*2 0,96 0,07 0,42
non*2 0,04 0,93 0,58
VKORC1*2-Genotyp – und Allel-Frequenzen bei Cumarin-sensitiven (< 10/ < 6 mg Warfarin / Phenprocoumon pro Woche)
und -resistenten Patienten (> 70/ > 42 mg Warfarin / Phenprocoumon pro Woche) (modifiziert nach Geisen et al. 2005).
VKORC1 haplotypes determine the inter-individual and inter-ethnical variability of oral anticoagulation
Coumarins are known for their high inter-individual and inter-ethnical variability of the dose-response association.
Recently, common SNPs of the VKORC1 gene (encoding the molecular target of coumarins, vitamin K epoxide
reductase) were shown to be associated with lower warfarin dose requirement. In order to clarify whether these SNPs
are part of more extended haplotypes, we established a comprehensive haplotype map of the entire VKORC1 gene
locus. VKORC1-haplotype association with coumarin dose requirement was analysed in different ethnical populations
and patient cohorts.
In 200 controls we identified 28 SNPs within the VKORC1 gene. Six SNPs formed three main haplotypes covering
more than 99 % of the genetic variability of VKORC1 (VKORC1*2: 42 %, VKORC1*3: 38 %, and VKORC1*4: 20 %).
SNPs associated with low warfarin dose (rs17878363, rs9934438) were in complete linkage disequilibrium with the
VKORC1*2 haplotype. Haplotype frequency in Africans and Chinese differed significantly from the European sample
(for VKORC1*2: Europeans 42 %, Chinese 95 %, Africans 14 %). In 61 unselected patients receiving phenprocoumon
c.-1639AA genotype patients (homozygous VKORC1*2) required less phenprocoumon (1.40 mg/d) than AG
(2.12 mg/d) and GG patients (3.02 mg/d).13 of 14 patients (93 %) with increased coumarin sensitivity but none of the
patients with partial coumarin resistance were c.-1639AA. Vice versa, the c.-1639G allele (present in the non
VKORC1*2 haplotypes) was found homozygous in 31 patients (86 %) with partial coumarin resistance but in none of
the patients with increased coumarin sensitivity.
In conclusion three main haplotypes represent more than 99 % of VKORC1’s genetic variability in Europeans.
VKORC1 haplotypes are strongly associated with the inter-individual and inter-ethnical variability of oral anticoagulation.
In future studies, VKORC1-haplotype testing may provide a clinically relevant predictor of coumarin dosing and
bleeding risk in oral anticoagulation.
169

Forschungsbericht 2007 – 2008
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Molekulare Hämostaseologie
Projektleiter Dr. med. Christof Geisen
Mitarbeiter Katja Sittinger (Wissenschaftlerin)
Kooperationen Prof. Dr. J. Oldenburg, Inst. für Exp. Hämatologie und Transfusionsmedizin, Universität Bonn
Prof. Dr. med. E. Lindhoff-Last, Abt. für Angiologie, JWG-Universität Frankfurt
PD Dr. med. S.W. Tönnes, Institut Institut für Forensische Toxikologie der JWG-Universität Frankfurt
Prof. Dr. T. Wienker, Dr. M. Steffens, Abteilung für Genetische Epidemiologie, Universität Bonn
Förderung BMBF (Nationales Genomforschungsnetz 2)
Firma Baxter
Laufzeit des Projektes 01.02.2002 – 31.12.2008
Weitere Informationen
170
Oldenburg J, Bevans CG, Fregin A, Geisen C, Müller-Reible C, Watzka M (2007) Current pharmacogenetic developments
in oral anticoagulation therapy: the influence of variant VKORC1 and CYP2C9 alleles. Thromb Haemost.
98(3):570-8.
Geisen C, Watzka M, Sittinger K, Steffens M, Daugela L, Seifried E, Muller CR, Wienker TF, Oldenburg J (2005).
VKORC1 haplotypes and their impact on the inter-individual and inter-ethnical variability of oral anticoagulation.
Thromb Haemost. 2005 Oct; 94(4): 773-9.
http://www.blutspende.de/forschung_entwicklung/wissenschaftliche_arbeitsgruppen/molekulare_
haemostaseologie.php

Faktor-IX-Varianten für die Behandlung der Hämophilie A
Hintergrund und Projektbeschreibung
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Eine Hauptkomplikation bei der Behandlung von Patienten mit Hämophilie A ist die Entstehung von inhibitorischen
Antikörpern gegen den therapeutisch substituierten Gerinnungsfaktor VIII (FVIII). Etwa 20 % der Patienten mit schwerer
Hämophilie A sind hiervon betroffen. Akute Blutungen bei diesen Patienten werden zurzeit mit so genannten „Bypassing
Agents“ behandelt. Diese bestehen aus bereits aktivierten Gerinnungsproteinen, wie aktiviertem FVII (FVIIa)
oder einem Gemisch aus verschiedenen aktivierten Gerinnungsfaktoren (FEIBA). Obwohl sich akute Blutungen gut
mit einer solchen Therapie behandeln lassen, ist die Möglichkeit einer prophylaktischen Therapie sehr eingeschränkt.
Dieses liegt zum einen an der schnellen Inaktivierung aktivierter Proteasen im Blut und einer damit verbundenen kurzen
Halbwertzeit, und zum anderen gibt es Bedenken, dass eine dauerhafte unspezifische Aktivierung des Gerinnungssystems
zu unerwünschter Gerinnselbildung führen könnte.
In dem hier vorgestellten Projekt entwickeln wir daher Gerinnungsfaktor IX (FIX)-Varianten, die unabhängig von ihrem
natürlichen Co-Faktor (FVIII) Aktivität aufweisen. Auf diese Weise möchten wir unter Umgehung von FVIII den natürlichen
Rückkopplungsmechanismus des intrinsischen Gerinnungssystems wie bei der physiologischen Gerinnung bei
Hämophiliepatienten wiederherstellen, um Prophylaxe und Therapie besonders für Inhibitorpatienten zu ermöglichen
bzw. sicherer zu gestalten. FIX-Varianten könnten außerdem statt des relativ großen FVIII-Proteins bei Gentherapieansätzen
für die Hämophilie A zum Einsatz kommen.
Bei der Umsetzung des Projektes setzen wir einen nicht-viralen Gentransferansatz im Mausmodell ein, der es uns ermöglicht,
die Effizienz der verschiedenen Varianten im lebenden Organismus zu überprüfen.
Wichtigste Ergebnisse
Insgesamt wurden 53 verschiedene Proteinvarianten, welche aufgrund von Daten der Proteinstruktur oder, -homologie
ausgewählt wurden, in eine von einem CMV Promotor getriebene Expressionskassette eingefügt, in Zellkultur
rekombinant exprimiert, ankonzentriert und in Bezug auf ihre Expressionsspiegel und Gerinnungsaktivität in humanem
Plasma hin untersucht. Mutationen, die zu einer gesteigerten Aktivität führten, wurden sukzessive miteinander
kombiniert, um so die Proteinvarianten mit den höchsten gewünschten Aktivitäten zu generieren. Es konnte eine
FIX-Variante identifiziert werden, bei der eine einzelne Aminosäurensubstitution (Variante T) zu einer FVIII unabhängigen
spezifischen FIX-Aktivität von 6 % führte (100 % entspricht der Aktivität von Wildtyp-FIX in Anwesenheit von
FVIII). Durch das Einfügen von zwei weiteren Mutationen (Variante ITV) konnte die Aktivität noch weiter auf 16 % erhöht
werden. Durch die Kombination dieser Varianten mit weiteren Mutationen, welche die spezifische FIX-Aktivität in
Anwesenheit von FVIII erhöhen (Variante ITAWV), konnte ein Molekül mit einer Aktivität von 22 % in Abwesenheit und
von 1600 % in Anwesenheit von FVIII erzeugt werden. Ein Überblick über die verschiedenen FIX-Varianten ist in Abbildung
1 dargestellt.
Eine Aktivität der Varianten konnte in Patientenplasma mit hochtitrigen inhibitorischen Anti-FVIII-Antikörpern für die
verschiedenen Varianten bestätigt werden. Mittels nicht-viralem Gentransfer konnten die Varianten in Mäusen exprimiert
werden. Auch im Tiermodell (FVIII-Knockout) bestätigte sich eine partielle Normalisierung der Gerinnungszeit,
eine protektive Wirkung Hinsichtlich des Blutverlustes in zwei verschiedenen Versuchen nach Schwanzamputation
und eine Normalisierung der Gerinnselbildung nach Laser-Verletzung kleiner Arteriolen.
171

Forschungsbericht 2007 – 2008
Übersicht der FIX-Varianten
aus dem Mutationen-Screening.
Die kleinen Quadrate
stellen den Mittelwert der
Faktor-IX-Aktivität in Anwesenheit
(Y-Achse) und in
Abwesenheit (X-Achse) von
Faktor-VIII einer Proteinvariante
dar (mit Standard -
fehler).
Factor IX Variants for the treatment of Hemophilia A
Summary
The treatment of patients with inhibitory antibodies remains a major challenge in haemophilia therapy. Although acute
bleedings can be treated by infusion of already activated proteases (FVIIa or activated prothrombin complex), prophylactic
treatment is difficult due to the short half lives of the therapeutics in use.
In this project, we could develop FIX proteins with up to 22 % FIX specific activity in absence of FVIII. We expressed
the variants in haemophilia A mice with and without inhibitory antibodies directed against FVIII and could show that
the variants shorten clotting times, prevent bleeding and enhance clot formation in theses animals.
These proteins could, therefore, be an alternative to common bypassing agents, with the advantage of being activated
directly at the site of injury. This would resemble physiologic clot formation, prevent the infusion of already
activated proteases, and make therapy safer. A zymogene FIX variant would presumably enable prophylactic substitution
therapy in inhibitor patients. Intriguingly, patients lacking FVIII could even be suitable for a gene transfer
approach using the smaller and less immunogenic FIX, for which gene therapy studies are far more promising at the
moment. Since these patients have normal FIX levels, further no immune response against a FIX variant would be
expected.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Gentherapie der Hämophilie
Projektleiter Dr. med. Jörg Schüttrumpf, PD Dr. med. Torsten Tonn
Mitarbeiter Dipl. Biol. Peter Milanov, Dipl.-Biol. Daniela Abriss
Kooperationen Dr. Manuel Grez, Biomedizinisches Forschungsinstitut Georg-Speyer-Haus, Frankfurt: Dr. Valder
Arruda, Dr. Rodney Camire und Dr. Katherine High, The Children’s Hospital of Philadelphia,
Philadelphia, Pennsylvania
Förderung Bayer Healthcare, Hemophilia Awards Program
Gesellschaft für Thrombose- und Hämostaseforschung, Rudolf-Marx-Stipendium
Stiftung Hämotherapie-Forschung
Laufzeit des Projektes 01.02.2008 – 31.06.2010
Weitere Informationen
172
F.IX Aktivität / F.IX:Ag (%)
2000
1800
1600
1400
1200
1000
800
600
400
200
WT
T ITV
ITAWV
0
0 5 10 15 20 25
F.VIII Bypassing Aktivität / F.IX:Ag(%)
Schuettrumpf J, Herzog RW, Schlachterman A, Kaufhold A, Stafford DW, Arruda VR. Factor IX Variants Improve
Gene Therapy Efficacy for Hemophilia B. Blood. 2005;105:2316-2323

Optimierung einer rekombinanten FVIII-Produktion in heterologen
Zellsystemen und Analyse des FVIII-Sekretionsweges
Hintergrund und Projektbeschreibung
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Die Komplexität des Blutgerinnungsfaktors FVIII bezüglich Konformation und posttranslationeller Modifikationen
erlaubt keine Expression des rekombinanten Proteins in bakteriellen Systemen, sondern bedarf der Expression in
Säugetierzellen, wie z.B. CHO (Chinese Hamster Ovary) oder COS (African Green Monkey Kidney) Zellen. In heterologen
Zellsystemen ist die Expression des rekombinanten FVIII jedoch um zwei bis drei Logstufen geringer als die Expression
anderer cDNAs, was im Wesentlichen auf vier Faktoren zurückzuführen ist:
1.) geringer mRNA-Level von FVIII,
2.) ineffiziente Translation der FVIII-mRNA-Transkripte,
3.) ineffizienter Transport des primären Translationsproduktes aus dem endoplasmatischen Retikulum (ER)
zum Golgi-Apparat,
4.) rasche Proteolyse des freien, ungebundenen FVIII-Proteins im Zellüberstand.
Ziel dieses Projektes ist es Faktoren und Zellen zu identifizieren, die eine physiologische und effiziente Expression
von Faktor-VIII in rekombinanten Systemen ermöglichen. Letztlich soll dieses Projekt darauf hinzielen, ein in Bezug
auf Faltung und Glykosilierung physiologisches Gerinnungsfaktor FVIII-Präparat rekombinant herstellen zu können.
Auswahl humaner Zelllinien mit entsprechendem Repertoire an posttranslationellen Enzymen
Entgegen der derzeitigen Vorgehensweise, tierische Säugerzellen für die Produktion von rekombinantem FVIII einzusetzen,
verspricht die Verwendung humaner Zellen aufgrund korrekter Glykosylierung und Faltung des komplexen
FVIII-Proteins eine Steigerung der Sekretion und somit Ausbeute des FVIII-Proteins. Dies ist insbesondere vor dem
Hintergrund relevant, dass eine derzeitige Therapie der Hämophilie A mit rekombinanten FVIII-Präparationen mit
einer Abwehrreaktion der behandelten Patienten im Sinne einer Hemmkörperbildung gegen das substituierte
FVIII-Protein assoziiert ist. Dies wird z.Zt. auch mit der nicht physiologischen Glykosilierung von FVIII in heute zur
Produktion verwendeten Hamsterzelllinien in Verbindung gebracht. Unsere Arbeitsgruppe versucht daher jene Gewebezellen
für eine rekombinante Expression des FVIII-Proteins zu verwenden, die auch physiologisch an der Bildung
von FVIII beteiligt sind. Hierzu zählen Hepatozyten und lebersinusoidale endotheliale Zellen (LSECs). Blutgefäßauskleidende
Endothelzellen werden ebenfalls untersucht, da sie hohe Mengen des von Willebrand-Faktors (vWF) bilden,
welcher für die Stabilität des FVIII von großer Bedeutung ist. Hier konnte unsere Arbeitsgruppe in der Vergangenheit
bereits endotheliale Vorläuferzellen (EPCs) stabil mit dem FVIII-Gen transduzieren und enorm hohe FVIII Expressionsraten
zeigen
Da die primären Zellen humanen Ursprungs (Hepatozyten, LSECs, EPCs) eine begrenzte Teilungs- und Lebensfähigkeit
aufweisen und sich in dieser Form nicht für eine pharmazeutische Produktion von rekombinantem FVIII-Protein
eignen würden, verfolgen wir das Ziel die verschiedenen Zelltypen zunächst zu immortalisieren. Die Immortalisierung
der Zellen erfolgt mittels Transfektion des Vektors pBudCE 4.1 (Invitrogen), der für die Proto-Onkogene Bmi-1 und
hTERT kodiert. Die Selektion stabiler Zellklone erfolgt mit Zeocin. Da die immortalisierten Zellen später für eine pharmazeutische
Produktion des FVIII-Proteins in Frage kommen, wurde das für die Immortalisierung verwendete
pBudCE-Plasmid unter GMP-Bedingungen synthetisiert, um eine spätere PEI-Zulassung zu ermöglichen.
Analyse des FVIII-Transportweges
Wir konnten zeigen, dass die Sekretion des FVIII-Proteins in physiologisch an der FVIII-Synthese beteiligten Zellen
(Hepatozyten) sehr viel effizienter abläuft als in häufig verwendeten Hamster- oder Nierenkarzinomzelllinien (Becker
et al. 2004). Die Untersuchung des intrazellulären Sekretionsweges und die Identifizierung von Faltungsproteinen
(Chaperonen), die für eine physiologische Sekretion von FVIII effizient sind, sollen einerseits eine effizientere FVIII-
Synthese ermöglichen, andererseits aber auch ein besseres Verständnis für genetische Ursachen der Hämophilie
ermöglichen.
173

Forschungsbericht 2007 – 2008
Auswahl humaner Zelllinien mit entsprechendem Repertoire an posttranslationellen Enzymen
174
A B
Herstellung eines Mini-
Circle DNA-Vektors.
Proliferations-Kapazität
und FVIII-Sekretionsrate
von endothelialen Vorläuferzellen
aus Nabelschnurblut
(EPCs) A Vergleich der
Proliferationsrate von FVIIItransduzierten
und Wildtyp
EPCs (SEW = Kontrollvektor
ohne FVIII-Transgen). B Zeitverlauf
der Sekretion an aktivem
FVIII von endothelialen
Vorläuferzellen nach lentiviraler
Transduktion an Tag 0
Unsere Arbeitsgruppe konnte zeigen, dass sich endotheliale Vorläuferzellen, die aus Stammzellen des Nabelschnurblutes
isoliert wurden, besonders geeignet sind, eine hocheffiziente rekombinante Expression des FVIII-Proteins in
vitro herbeizuführen. Das Verfahren wurde in Europa, den USA und Asien zum Patent angemeldet.
A C
B
Abbildung A und B: Nach
einem Temperaturblock von
vier Stunden bei 15 °C und
anschließendem Erwärmen
auf 37 °C wurden nach 10 Minuten
Transportbewegungen
von vesikulären Strukturen
vom peripheren ERGIC zum
perinukleären Golgi-Komplex
beobachtet.
In Abbildung C ist die Bewegung
eines Transportvesikels
durch einen Pfeilkopf hervorgehoben.
Abstand zwischen
den Bildern: Zwei Sekunden.
Maßstab 2 µm. (G) Durch Akkumulation
bei 20 °C wurden
peri nukleäre Strukturen sichtbar.
Maßstab 10 µm.

Analyse des FVIII-Transportweges
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Durch Analyse des intrazellulären Sekretionsweges von nativem Faktor-VIII in primären Leberzellen und rekombinantem
Faktor-VIII in COS-Zellen mittels konfokaler Lasermikroskopie, konnte unsere Arbeitsgruppe bereits wichtige Erkenntnisse
über den Sekretionsweg von FVIII in den verschiedenen Zellsystemen erlangen. So zeigte sich, dass es in
primären Leberzellen offenbar nicht zu einer Retention von FVIII im ER kommt, sondern dass FVIII effizient über den
klassischen Sekretionsweg ER, ER-Golgi Intermediate Compartment (ERGIC) und Golgi-Apparat freigesetzt wird. In
COS-Zellen dagegen bestätigte sich die Erkenntnis, dass ein Großteil des FVIII-Proteins im ER zurückgehalten wird
(s. Abb 1). Mit Hilfe von Kolokalisationsexperimenten konnten wir darüber hinaus erstmals zeigen, dass FVIII-Protein
für den Transport aus dem ER zum Golgi in COPI-beschichteten, tubulären Transportvesikeln verpackt wird. Neueste
Untersuchungen zeigen, dass der ER-Golgi-Transport für FVIII-Rezeptor vermittelt über den MCFD2-LMAN1-Komplex
erfolgt. Als Nächstes soll daher mittels RNAi die Rolle der B-Domäne bei dieser Interaktion untersucht werden.
Durch Ko-Immunpräzipitation „His-getaggter“-FVIII-Konstrukte sollen zudem weitere Interaktionspartner des
FVIII-Proteins bei der Synthese und Sekretion identifiziert werde.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Gentherapie der Hämophilie
Projektleiter PD Dr. med. Torsten Tonn
Mitarbeiter Dipl.-Biol. Daniela Abriss
Daniela Bott
Dipl.-Biol. Stefan Heinz
Dipl.-Biol. Stefanie Roth
Kooperationen Prof. Dr. Rainer Pepperkok, EMBL Heidelberg
Prof. Dr. Michael Ott, Zentrum für Innere Medizin, Mediz. Hochschule Hannover
Dr. med. Daniel Benten; Arbeitsgruppe Hepatologie und Zelltransplantation;
Universitätsklinikum Hamburg-Eppendorf
Förderung DFG Graduiertenkolleg GK1172 „Biologicals“ -Research, Development and Safety of
Biopharmaceutical
Forschungsmittel der Universität Frankfurt am Main
Laufzeit des Projektes 01.02.2006 – 31.01.2009
Weitere Informationen
Becker et al., Confocal microscopy analysis of native, full length and B-domain deleted coagulation factor FVIII
trafficking in mammalian cells. Thromb Haemost 2004; 92:23-35
Picanco –Castro V, Heinz S, Bott D, Behrmann M, Covas D, Seifried E., Tonn T. Rekombinant expression of coagulation
factor VIII in hepatic and non-hepatic cell lines stably transduced with third generation lentiviral vectors
comprising the minimal factor VIII promoter. Cytotherapy.2007;9:785-94
175

Forschungsbericht 2007 – 2008
Pharmakokinetik und thrombotische Aktivität von FVIII-Etablierung
und Analyse eines Mausmodells mit fluoreszenzgekoppelten FVIII
(FVIII-GFP)
Hintergrund und Projektbeschreibung
Ziel des Projekts ist es, die Pharmakokinetik und die thrombotische Aktivität von verschiedenen Gerinnungsfaktor-VIII
(FVIII)-Varianten zu untersuchen. Dies ist für den gentherapeutischen Einsatz sowie bei der Substitutionstherapie von
Hämophiliepatienten von Bedeutung. Da nur ein kleiner Teil des substituierten FVIII zur Korrektur des Hämophilie-
Phänotyps beiträgt und oft Unterschiede in der Kinetik der FVIII-Substitution bei verschiedenen FVIII-Präparationen
beobachtet wurden, soll in diesem Projekt eine genauere Analyse der Pharmakokinetik von FVIII im Hinblick auf
Organverteilung, Metabolismus und Clearance durchgeführt werden.
Die Verwendung von fluoreszenz-gekoppelten FVIII-Varianten (FVIII-GFP), welche zuvor bereits mit den entsprechenden
nicht-gekoppelten FVIII-Varianten in Hinblick auf ihre Gerinnungseigenschaften verglichen wurden, soll eine bessere
Darstellung der Kinetik im Organismus ermöglichen. So sollen FVIII-GFP-Varianten wie z.B. B-Domänen
deletiert, die Volllängenvariante, Varianten mit verlängerter Halbwertszeit und Varianten nach Inkubation mit vWF in
Hinblick auf ihre Biodistribution in hämophilen und hämostatisch normalen Mäusen untersucht werden. Unter anderem
soll im Zuge des Projekts auch die Beteiligung von FVIII an Thrombusbildung in vivo durch Verwendung von
fluoreszenz-gekoppelten FVIII in der Intravitalmikroskopie (siehe Abb.) beobachtet werden.
Mit diesen Untersuchungen erhoffen wir uns ein besseres Verständnis über die Pharmakokinetik von FVIII, was zu
einer effektiveren Hämophiliebehandlung bzw. zur Entwicklung der Gentherapie beitragen soll.
Abbildung A: Darstellung der FVIII-GFP Struktur nach Simulation mit dem Yamber2 Force Field Modell.
Abbildung B: Repräsentatives Bild einer Gerinnselbildung 4,5 Minuten nach Laser induzierter Gefäßverletzung. Bis zu drei verschiedene
Gerinnungskomponenten können gleichzeitig mittels intravitaler Videomikroskopie dargestellt werden.
Rot: Blutplättchen (Thrombozyten), Grün: tissue factor (tf), Blau: Fibrin, Gelb: tissue factor und Plättchen, Magenta: Fibrin und Plättchen,
Türkis: tissue factor und Fibrin, Weiß: Überlappung aller Komponenten. (Übernommen aus Gross et al 2005)
176
A B
FVIII
EGFP
Arterielles Gefäß
40 – 60 µm

Summary
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Fluorescent labeled coagulation factors have revealed important knowledge of their contribution to thrombus formation
after laser induced vascular injury in the microcirculation of living mice. The availability of FVIII-EGFP transgenic
haemophilia A knockout mice would be highly desirable to address several questions of FVIII gene therapy but also
the role of FVIII in thrombus formation. Therefore we fused B domain deleted and full length FVIII at its C-terminus to
the reporter gene coding for enhanced green fluorescent protein (EGFP) and demonstrated that this fusion does not
affect the specific procoagulant activity or intracellular processing of FVIII. In addition the fluorescent signal of the
EGFP moiety is readily given.
To analyse the impact of different target tissues for haemopilia gene therapeutic approaches, mice will be generated
that drive the FVIII-EGFP expression from liver, muscle and endothelial/haematopoietic lineage specific and ubiquitously
active promoter. Using these mice, the impact of recombinant FVIII expression in different organs/tissues on
the spatial and temporal distribution of FVIII protein, its fate and pharmacokinetics will be analysed in vivo. Moreover
this FVIII-EGFP transgenic mouse model will be used to analyse the impact of FVIII protein in vivo thrombus formation
using multichannel fluorescence intravital videomicroscopy together with laser induced endothelial injury as it
has been previously described for tissue factor.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Gentherapie der Hämophilie
Projektleiter PD Dr. Torsten Tonn
Mitarbeiter Dipl.-Biol. Stefan Heinz
Kooperationen University of Pennsylvania School of Medicine (Assistant Professor Valder R. Arruda)
Universitätsklinikum Frankfurt, Molekulare Hämatologie (Prof. H. von Melchner)
Förderung Finanziert über Hemophilia Awards Young career investigators award der Bayer Healthcare, USA
(Preisträger: Dipl.-Biol. Stefan Heinz)
Laufzeit des Projektes 01.01.2007 – 01.01.2009
177

Forschungsbericht 2007 – 2008
Toleranzinduktion durch nicht-viralen Gentransfer und zelluläre
Immunmodulation mittels mesenchymaler Stammzellen (MSCs) bei
der Hämophilie A
Hintergrund und Projektbeschreibung
Bei der Behandlung der Hämophilie A kommt es bei ca. 20 % der Patienten mit schwerem Krankheitsbild zur Bildung
inhibitorischer Antikörper gegen den infundierten Gerinnungsfaktor VIII (FVIII). Auch ein gentherapeutischer Ansatz
zur Behandlung der Hämophilie A birgt stets das Risiko einer Antikörperbildung. Und obwohl bei Patienten die einen
Inhibitor entwickelt haben, sehr gute Therapieerfolge mit der Immuntoleranztherapie erreicht werden können, ist die
Behandlung durch regelmäßige Gabe von hohen Dosierungen und FVIII aufwendig, häufig langwierig und ein erheblicher
Kostenfaktor. Unsere Arbeitsgruppe sucht aus diesem Grund nach alternativen Therapiemöglichkeiten.
Für mesenchymale Stromazellen des Knochenmarks wurde kürzlich gezeigt, dass sie einen tolerogenen Effekt haben
und im Rahmen von Transplantationen geeignet sind, eine Graft-versus-Host Reaktion zu verhindern. Vor diesem
Hintergrund soll untersucht werden, ob mesenchymale Stromazellen auch in Bezug auf die FVIII-Inhibitorspiegel
einen immunmodulatorischen Effekt aufweisen.
Wichtigste Ergebnisse
Es wurde ein gentherapeutischer Ansatz im Mausmodell etabliert, für den wir zeigen können, dass so genannte Minicircle-Vektoren
für den Leber-gerichteten Gentransfer von FVIII einen Vorteil in der Expressionsstärke und -dauer im
Vergleich zu herkömmlichen Plasmiden besitzen. Grundsätzlich konnten wir mit unserem Vektor und Expressionskonstrukt
eine über die Lebensspanne einer Maus persistierende konstante Expression nachweisen. Minicircles sind frei
von bakteriellen CpG-Motiven, von denen bekannt ist, dass sie immunstimulatorisch wirken. Abhängig von der applizierten
Vektor-Dosis kommt es trotzdem zu einer Immunantwort gegen das humane FVIII-Protein, welches ja an sich
schon hoch immunogen ist, (siehe Abb. 1). Die Immunantwort ist durch das Auftreten von hochtitrigen FVIII neutralisierenden
Antikörpern zumeist der Klasse IgG1 und dem gleichzeitigen Abfall der zirkulierenden FVIII-Spiegel im
Mausblut gekennzeichnet. Bemerkenswert ist, dass in einigen Tieren nach ca. drei bis vier Monaten ein Wiederanstieg
der FVIII-Spiegel und ein gleichzeitiges Absinken bis hin zum Verschwinden der inhibitorischen Antikörper zu
beobachten war. Die kontinuierliche FVIII-Expression in der Leber scheint somit ähnlich der Therapie im Menschen
durch dauerhafte Proteinexposition eine Immuntoleranz zu induzieren.
Das Modell eignet sich daher zur Untersuchung von drei verschiedenen Therapieansätzen: a) ein Gentransferansatz,
welcher nicht zur Antikörperbildung gegen FVIII führt; b) immunmodulatorische Therapieansätze zur Vermeidung der
Entstehung von inhibitorischen Antikörpern; c) Immunmodulation zur supportiven Therapie bei der Immuntoleranzinduktion.
Derzeit werden verschiedene Vektorkonstrukte und mesenchymale Stammzellansätze unter diesen Gesichtspunkten
auf ihr therapeutisches Potential hin untersucht.
Tolerance Induction by Non Viral Gene Transfer for Haemophilia A and Cellular Immunomodulation with
Mesenchymal Stem Cells
The formation of inhibitory antibodies to factor VIII (FVIII) is a major problem in the development of a gene therapy
strategy for haemophilia A and in the conventional treatment of the disease by protein infusion. Further, concerns
about vector immunogenicity and tumor formation using viral vectors have complicated advancing haemophilia gene
therapy from preclinical studies to patients. Therefore, non viral vectors could pose an alternative due to their excellent
safety profile. Recent advances in gene delivery and vector design have helped to overcome the initial low efficacy
of non viral gene transfer systems. However, circulating protein levels in the reported mice were only short lived
178

Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
due to the appearance of a neutralising antibody to the transgene three weeks after vector administration. In this
project we seek to better characterise the immune response induced through non viral FVIII gene transfer, further
reduce the immunogenicity of a non viral gene transfer approach, and use the non-viral gene transfer system for FVIII
as model to explore the potential of cellular immunomodulation using mesenchymal stem cells (MSCs).
10µg/mouse
N=6
50µg/mouse
N=7
F.VIII:Ag (% of normal)
FVIII-Expression nach nicht viralem Minicircle Gentransfer und dosisabhängige Entstehung von Anti-FVIII-Antikörpern.
Jede Linie repräsentiert den Expressionsspiegel bzw. Antikörperverlauf einer Maus.
Standort Frankfurt
Arbeitsgruppe Gentherapie der Hämophilie
Projektleiter Dr. med. Jörg Schüttrumpf, PD Dr. med.Torsten Tonn
Mitarbeiter Dipl. Biol. Daniela Abriss, Dipl.-Biol. Peter Milanov, Dipl.-Biol. Stefanie Roth
Kooperationen Dr. Manuel Grez, Biomedizinisches Forschungsinstitut Georg-Speyer-Haus, Frankfurt;
PD Dr. med. Reinhard Henschler, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen,
Institut Frankfurt
Förderung Prof. Heimburger Award, CSL-Behring
Graduiertenkolleg Biologicals der DFG, GK-1172
Stiftung Hämotherapie-Forschung
Laufzeit des Projektes 01.07.2008 – 31.6.2010
Weitere Informationen
80
60
40
20
0
80
60
40
20
0
0 10 20 30
0 10 20 30
Time (days)
Schüttrumpf J, Milanov P, Roth S, Seifried E, Tonn T. Non-viral gene transfer results in therapeutic factor IX levels
in haemophilia B mice, Haemost. 2008;1:S92-95
Anti-F.VIII IgG1 (ng/ml)
3000
2000
1000
0
3000
2000
1000
0 10 20 30
0
0 10 20 30
Time (days)
179

Forschungsbericht 2007 – 2008
Bestimmung der Natürlichen Killer-Zell-Aktivität im Vollblut
Hintergrund und Projektbeschreibung
Natürliche Killerzellen erfüllen eine wichtige Aufgabe in der frühen Immunabwehr gegen virale Infektionen und Krebs.
Die Aktivität dieser Immunzellen kann in vitro gemessen werden. Viele dieser Testmethoden verwenden jedoch gereinigte
NK-Zellen oder mononukleäre Zellen (PBMC) als Ausgangsmaterial. Daher ist das benötigte Blutvolumen für
eine solche Untersuchung relativ hoch (ca. 10 bis 20 ml als Minimum).
In pädiatrischen Patienten mit Verdacht auf einen primären Immundefekt ist teilweise auch eine Analyse der NK-Zell-
Aktivität wünschenswert. Eine solche Analyse ist bei besonders jungen Patienten jedoch durch das geringe verfügbare
Probenvolumen nur sehr eingeschränkt möglich. Für diesen Patientenkreis haben wir daher eine Methode zur
Bestimmung der NK-Zell-Aktivität im Vollblut entwickelt.
Wichtigste Ergebnisse
Wir haben eine Methode entwickelt, die mit ca. 3 bis 3,5 ml Vollblut eine vollständige Untersuchung der NK-Zell-Aktivität
ermöglicht. Dieser Ansatz erlaubt zudem die Bestimmung des Einflusses unterschiedlicher Zytokine oder anderer
löslicher Faktoren auf die NK-Zell-Aktivität. Dabei wird Vollblut 1/1 mit Zellkultur-Medium verdünnt und mit den
entsprechenden Zytokinen, z.B. IL-2 oder IL-12/IL-18, für 16h vorinkubiert.
Für die korrekte Interpretation funktioneller Daten ist die Kenntnis der NK-Zellzahl von größter Bedeutung. Die herkömmliche
Methode zur Bestimmung der NK-Zellzahl umfasst die Bestimmung der Leukozytenzahl im Differentialblutbild
und die Ermittlung des prozentualen Anteils der NK-Zellen mit Hilfe der Durchflusszytometrie. Der Einsatz
FITC-markierter beads bekannter Konzentration als internem Standard ermöglicht jetzt die direkte Bestimmung der
absoluten NK-Zellzahl aus Vollblut per FACS-Analyse. Dabei werden für eine Messung nur 0,1 ml Ausgangsmaterial
benötigt.
Der 51Cr-Freisetzungsassay gilt nach wie vor als Goldstandard für die Messung der zytotoxischen Aktivität von
NK- Zellen. Dabei werden NK-Zellen mit 51Cr-markierten Zielzellen in Kontakt gebracht. Im Anschluss wird
51Cr-Aktivität im Kulturüberstand bestimmt. Die Menge an freigesetztem 51Cr entspricht der Anzahl lysierter Zielzellen
und ist proportional zur zytotoxischen Aktivität der NK-Zellen. Der Einsatz von PBMC oder NK-Zellen erfordert
jedoch eine relativ große Menge an Ausgangsmaterial. Wir konnten die beschriebene Methode für den direkten
Einsatz von in Medium verdünntem Vollblut adaptieren und damit die Menge an benötigtem Ausgangsmaterial auf
0,3 ml Vollblut je Probe/Vorstimulation reduzieren. Der Vergleich zwischen PBMC und Vollblut ergab eine ähnliche
Aktivität der NK-Zellen, wobei PBMC ein geringfügig niedrigeres killing zeigten. Dieser Effekt beruht wahrscheinlich
auf der Aufreinigung der Zellen, die den cross talk zwischen NK-Zellen und anderen Zelltypen verhindern kann und
zum Verlust löslicher Faktoren wie Zytokine oder Wachstumsfaktoren führt. Die Verwendung von Vollblut ermöglicht
daher eine weniger artifizielle Umgebung für die NK-Zellen. Eine Einschränkung dieser Methode ist die Anwesenheit
von Erythrozyten im Assay. Diese können bei hoher Blut/Zielzellratio das Ernten des Kulturüberstandes und damit
die Stabilität des Assays beeinflussen. Daher ist der Einsatz aufgereinigter PBMC zu empfehlen, wenn die entsprechende
Probenmenge zur Verfügung steht.
Während der 51Cr-Freisetzungsassay die Anzahl lysierter Zielzellen ermittelt, erlaubt die Bestimmung der Oberflächenexpression
von CD107a per FACS Aussagen über die zytotoxische Aktivität individueller NK-Zellen. CD107a ist
auf der Membran-Innenseite zytotoxischer Granula lokalisiert und gelangt durch deren Fusion mit der Zellmembran
auf die Zelloberfläche. Es wurde gezeigt, dass die Relokalisation von CD107a zur Oberfläche mit der Degranulierung/Killing-Aktivität
isolierter NK-Zellen oder PBMC gegen Tumor-Zielzellen korreliert. Auf der Grundlage dieser
Arbeiten konnten wir die FACS-basierte Bestimmung der Degranulierung von NK-Zellen gegen Zielzellen im Vollblut
etablieren. Ein Vergleich mit PBMC ergab keine signifikanten Unterschiede zwischen beiden Ansätzen. Die Verwendung
von Vollblut ermöglicht die Analyse von mindestens drei unterschiedlich vorbehandelten Proben mit weniger als
1 ml Ausgangsmaterial.
180

Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Dieser FACS-basierte Ansatz ermöglicht ebenfalls die Bestimmung der IFNg-Produktion in individuellen NK-Zellen.
Hier konnte gezeigt werden, dass die Anzahl IFNg-positiver Zellen in Vollblut signifikant höher war als in PBMC, was
wahrscheinlich ebenfalls auf die weniger artifizielle Umgebung in Vollblut zurückzuführen ist.
Besonders in Patienten mit Verdacht auf einen primären Immundefekt ist eine umfassende Analyse der NK-Zell-Aktivität
wünschenswert. Diese ist jedoch besonders bei jungen Patienten durch das geringe verfügbare Probenvolumen
nur sehr eingeschränkt möglich. Durch den Einsatz von Vollblut anstelle von aufgereinigten Zellen ist es uns gelungen,
das benötigte Probenvolumen deutlich zu reduzieren und gleichzeitig eine weniger artifizielle Methode für die
Analyse der NK-Zell Aktivität zu entwickeln.
Summary
Natural killer (NK) cells represent the first line of defense against transformed or virally infected cells. Upon triggering
of activating receptors NK cells can respond by secreting cytokines such as interferon-g or tumor necrosis factor-a
and by the release of cytotoxic granules, resulting in the lysis of susceptible target cells. The importance of NK cells
becomes clear in patients with impaired NK cell function or development. These patients suffer from recurrent illness
and have particular problems in controlling viral infections despite their functional adaptive immune response.
A detailed analysis of NK cell function is therefore of great importance. Here we describe a fast and comprehensive
NK cell assay. The assay is performed in whole blood samples, eliminating the need for the isolation of PBMC or
pure NK cells, while still allowing for the stimulation of the samples with cytokines. In each sample the absolute
NK cell number is determined. The cytolytic activity is assayed by the lysis of 51Cr labeled target cells and by determining
the externalisation of CD107a in the NK cells. Furthermore, cytokine production is detected by intracellular
FACS analysis. Due to the strong reduction of required material this approach utilises less than 3,5 ml of heparinised
whole blood and is particularly applicable for frequent monitoring the immune function of adult and especially of
pediatric patients.
Standort Heidelberg
Arbeitsgruppe Apl. Prof. Dr. rer. nat. Carsten Watzl
Projektleiter Apl. Prof. Dr. rer. nat. Carsten Watzl
Mitarbeiter Dr. rer. nat. Maren Claus, Dr. rer. nat. Kristine Kohl, Dipl. Biol. Doris Urlaub, Dipl. Biochem. Stephan
Meinke, Dipl. Biochem. Stefanie Margraf, Dipl. Biol. Andre Cohnen, MSc. Stephan Gütgemann, Bsc.
Mina Sandusky, Birgitta Messmer (MTA), Sabine Wingert (BLA)
Kooperationen PD Dr. med. Johann Greil, Pädiatrie Heidelberg
Förderung BMBF (BioFuture), Deutsche Krebshilfe
Laufzeit des Projektes 2007 – 2008
Weitere Informationen
Comprehensive analysis of NK cell function in whole blood samples. Claus M, Greil J, Watzl C. J Immunol
Methods. 2008 Dec 3. [Epub ahead of print]
181

Forschungsbericht 2007 – 2008
Immunmodulation durch intravenöse Immunglobuline
Hintergrund und Projektbeschreibung
Intravenöse Immunglobuline (IVIG) werden als Therapie der ersten und zweiten Wahl bei zahlreichen immunvermittelten
Erkrankungen eingesetzt. Der genaue Wirkungsmechanismus von IVIG ist bisher ungeklärt. Multiple immunmodulatorische
Mechanismen scheinen eine Rolle zu spielen. So konnte bisher unter anderem gezeigt werden, dass IVIG
die Expression von Fc-Rezeptoren balanciert, die Differenzierung und Reifung von dendritischen Zellen moduliert und
die Komplementaktivierung inhibiert. Auch zahlreiche Chemokine und Zytokine werden in ihrer Bildung beeinflusst.
In klinischen Studien, z.B. bei der Behandlung der Multiplen Sklerose, zeigt sich ein heterogenes Bild hinsichtlich des
therapeutischen Ansprechens nach IVIG-Applikation. Diese Unterschiede sprechen dafür, dass es hilfreich wäre, vor
Therapiebeginn (anhand von Biomarkern) Supgruppen zu detektieren, die von einer Therapie mit IVIG profitieren.
Zu diesem Zweck wurden in dem laufenden Projekt zunächst Methoden entwickelt mit denen die Immunmodulation
durch IVIG gemessen werden kann. Ein besonderes Augenmerk wurde dabei auf mögliche interindividuelle Unterschiede
in der Immunmodulation durch IVIG gelegt.
Wichtigste Ergebnisse
In dem Projekt wurde ein Vollblutassay zum Nachweis der Immunmodulation durch IVIG entwickelt. Neben einer
reduzierten Expression von CD16 (Fc-gamma Rezeptor III) wurden mehrere Zytokine nach IVIG-Gabe sowohl auf
trans kriptioneller wie auch auf translationaler Ebene induziert. Für die Sekretion von IFN-gamma konnten NK-Zellen
als Quelle identifiziert werden. Weitergehende Untersuchungen zeigten, dass die zytotoxische Aktivität der NK-Zellen
durch IVIG supprimiert wird. Ursächlich für diese supprimierte zytotoxische Aktivität scheint eine Induktion der
NK-Zell-Degranulierung zu sein. So korreliert eine höhere Induktion der NK-Zell-Degranulierung mit einer verstärkten
Inhibition der zytotoxischen Aktivität. Interessanterweise zeigten sich sowohl bezüglich der Intensität der Degranulierung,
wie auch der Höhe der Sekretion von IFN-gamma deutliche interindividuelle Unterschiede. Gleiches gilt für die
Modulation anderer Zytokine und der Fc-Rezeptoren. Möglicherweise können anhand solcher interindividueller Unterschiede
zukünftig Subgruppen von Patienten bezüglich ihres Ansprechens auf eine IVIG-Gabe identifiziert werden. Zu
diesem Zweck ist eine klinische Studie initiiert worden, welche bei Patienten mit Multipler Sclerose die klinische
Wirksamkeit einer IVIG-Therapie mit dem Grad der Immunmodulation durch IVIG ex vivo korrelieren soll.
Summary
Immunomodulation by intravenous immunoglobulin (IVIG) is clinically well documented. However, the underlying mechanisms
for this activity are not conclusively understood. IVIG is proposed to modulate a wide range of molecules
(e.g. Fc receptors, complement, autoantibodies, cytokines and chemokines). New studies on the mechanisms of its
immunmodulatory activities are critically needed. Using an ex vivo whole blood assay system we demonstrate that
IVIG modulates the expression of Fc-gamma Receptor III (CD16) and multiple chemokines and cytokines. Among
others we observed an induction of IFN gamma gene expression and protein release. The NK cell population was
identified as source of the IFN-gamma release. In addition IVIG suppresses the cytolytic activity of NK cells. This effect
was paralleled by an IVIG-induced spontaneous degranulation of NK cells. These effects of IVIG on the functions
of NK cells describe a novel immunomodulatory effect of IVIG. The response to IVIG treatment is variable inter-individually
and it would be desirable to identify responders by in vitro testing. Possibly our in vitro assays could represent
informative test systems to monitor effects of in vivo IVIG treatment at an individual level.
182

Standort Heidelberg
Arbeitsgruppe Molekulare Immundiagnostik
Projektleiter Dr. med. Thomas Giese
Mitarbeiter Simone Fomuki (MTA), Henrike Weigold (MTA), Dieter Stefan (BTA)
Kooperationen Dr. med. Christian Jacobi, Neurologische Klinik
Förderung Octapharma AG/ Sonstige Mittel
Laufzeit des Projektes 01.05.2006 – 31.12.2008
Weitere Informationen
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Jacobi C., Römisch J., Meuer S., Giese T.: Gene expression profile modulated by IVIG in healthy donors and multiple
sclerosis patients. 7th Annual Meeting of the Federation of Clinical Immunological Societies (FOCIS), San
Diego, California, June 7-11, 2007. Clin Immunol 123(Supplement),S147(Abstract No. Su. 15) (2007)
Jacobi C., Römisch J., Meuer S., Giese T.: Modulation of gene expression by IVIG in healthy donors and multiple
sclerosis patients. 37th Annual Meeting of the German Society for Immunology, Heidelberg, Germany, September
5-8, 2007.
Jacobi C., Claus M., Römisch J., Wildemann B., Watzl C., Meuer S., Giese T.: NK cell modulation induced by intravenous
immunoglobulins. 8th Annual Meeting of the Federation of Clinical Immunological Societies (FOCIS),
Boston, Massachusetts, June 5-9, 2008. Clin Immunol 127(Supplement),S52 (Abstract No. F. 28) (2008)
Jacobi C., Claus M., Wildemann B., Römisch J., Watzl C., Meuer S., Giese T.: Natural killer cells are modulated in
patients with neuroimmunologic disorders in response to treatment with intravenous immunoglobulin. Joint Annual
Meeting of Immunology of the Austrian and German Societies (ÖGAI, DGfI), Vienna, Austria, September 3-6,
2008. Wien Klin Wochenschr 120/15-16 (Suppl1):23 (Abstract No. 068) (2008)
183

Forschungsbericht 2007 – 2008
Regulation der Natürlichen Killer-Zell-Aktivität durch aktivierende und
inhibierende Signale
Hintergrund und Projektbeschreibung
Natürliche Killerzellen erfüllen eine wichtige Aufgabe in der frühen Immunabwehr gegen virale Infektionen und Krebs.
Dabei wird die Aktivität dieser Zellen durch verschiedene Oberflächenrezeptoren reguliert, die entweder ein positives
oder ein negatives Signal in die NK-Zelle übertragen. Viele dieser inhibierenden Rezeptoren erkennen körpereigenes
MHC I als Ligand und stellen somit die Toleranz der NK-Zellen gegenüber gesunden, körpereigenen Zellen sicher.
NK-Zell-Zytotoxizität und Zytokinproduktion kann durch verschiedene aktivierende Oberflächenrezeptoren ausgelöst
werden. Viele der Liganden für diese aktivierenden NK-Zell-Rezeptoren sind in den letzten Jahren identifiziert worden.
Die Liganden für die aktivierenden NK-Zell-Rezeptoren NKp30, NKp44 und NKp46 sind jedoch noch unbekannt.
Unser Interesse gilt der Regulation der NK-Zell-Aktivität. Dabei haben wir uns auf verschiedene Themengebiete
fokussiert. Unser Interesse galt (1) der Charakterisierung der NKp30, NKp44 und NKp46 Liganden auf Tumorzellen,
(2) dem Zusammenspiel von positiven und negativen Signalen bei der NK-Zell-Regulation und (3) der Zytotoxischen
Aktivität von NK-Zellen gegenüber Tumorzellen.
Wichtigste Ergebnisse
Durch die Verwendung von rekombinanten Fusionsproteinen bestehend aus dem extrazellulären Teil von NKp30,
NKp44 und NKp46 konnten wir die Anwesenheit der Liganden für diese Rezeptoren auf verschiedenen Tumorzellen
nachweisen. Dabei konnten diese Liganden sowohl intrazellulär, als auch auf der Oberfläche der Tumorzellen detektiert
werden. Die Expression der Liganden war variabel und korrelierte nicht mit der Herkunft der Tumorzellen. Wir
konnten eine Korrelation zwischen der Expressionsstärke der Liganden für NKp30 und NKp44 mit der Lyse der Tumorzellen
durch NK-Zellen zeigen und somit die Funktionalität der Liganden nachweisen. Die Oberflächenexpression
der Liganden konnte durch Trypsin Behandlung reduziert werden, was nachweist, dass die bisher noch unbekannten
Liganden eine Proteinkomponente besitzen. Ferner ließ sich eine reduzierte Expression der Liganden in Zellen nachweisen,
die in der G2/M-Phase des Zellzyklus arretiert waren. Dies lässt auf eine zellzyklusabhängige Regulation der
Liganden schließen.
Um das Zusammenspiel von aktivierenden und inhibierenden Rezeptoren näher zu untersuchen, haben wir die frühen
Signalereignisse nach Stimulation des aktivierenden NKG2D-Rezeptors untersucht. Wir konnten zeigen, dass NKG2D
in den Kontaktbereich zwischen NK-Zellen und Tumorzellen (auch immunologische Synapse genannt), rekrutiert wird.
Dies ging mit einer Rekrutierung in spezielle Membranbereiche, die auch Lipid-Rafts genannt werden, einher und war
von einer Phosphorylierung des Signalmoleküls Vav-1 begleitet. Inhibierende Rezeptoren konnten die NKG2D-vermittelte
NK-Zell-Aktivierung verhindern. Unsere Daten zeigten, das durch den Einfluss von inhibierenden Rezeptoren
effektiv die Rekrutierung von NKG2D in Lipid-Rafts und in die immunologische Synapse verhindert werden konnte.
Weiterhin wurde die NKG2D-vermittelte Vav-1-Phosphorylierung durch inhibierende Rezeptoren verhindert. Unsere
Daten unterstützen ein Modell, in dem inhibierende Rezeptoren die Raft-Rekrutierung von aktivierenden Rezeptoren
blockieren, und über diese Eigenschaft effektiv die NK-Zell-Aktivierung steuern und kontrollieren können. Diese
Daten geben daher einen neuen und wichtigen Einblick in die Regulation von NK-Zellen durch aktivierende und inhibierende
Rezeptoren.
Zelluläre Zytotoxizität stellt eine wichtige Effektorfunktion der NK-Zellen dar. Wir haben daher diese Aktivität näher
untersucht. Unsere Daten haben gezeigt, dass IL-2 stimulierte humane NK-Zellen mehrere Tumorzellen in serieller
Weise lysieren konnten. Wir konnten zeigen, dass im Durchschnitt vier Tumorzellen pro NK-Zelle umgebracht werden
konnten. Diese serielle Zytotoxizität konnte auch videomikroskopisch nachgewiesen werden. Diese Aktivität der
NK- Zellen war durch einen Verlust der zytotoxischen Effektormoleküle Perforin und Granzym B begleitet, führte jedoch
nicht zum Tod der NK-Zellen. Vielmehr konnten wir zeigen, dass sich NK-Zellen nach einer solchen seriellen
Zytotoxizität wieder unter dem Einfluss des Zytokins IL-2 erholen und ihre Zytotoxizität wiedererlangen konnten. IL-2
und IL-15 konnten in ähnlicher Weise die serielle Zytotoxizität von ruhenden NK-Zellen stimulieren. Interessanterweise
konnte auch die Behandlung mit Rituximab, einem monoklonalen Antikörper der in der Tumortherapie einge-
184

Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
setzt wird, die serielle Zytotoxizität von ruhenden und IL-2 aktivierten NK-Zellen deutlich steigern. Diese Daten zeigen,
dass die serielle Zytotoxizität bei der Bekämpfung von Tumoren durch NK-Zellen wichtig ist, und lassen vermuten
dass therapeutische monoklonale Antikörper auch auf diese Aktivität angewiesen sind.
Summary
We analysed the expression of NKp30 ligand and NKp44 ligand on 30 transformed or non-transformed cell lines of
different origin. We found intracellular and surface expression of these two ligands on almost all cell lines tested.
Expression of NKp30 and NKp44 ligands was variable and did not correlate with the origin of the cell line. Expression
of NKp30 and NKp44 ligand correlated with NKp30 and NKp44-mediated NK cell lysis of tumor cells, respectively.
The surface expression of NKp30 ligand and NKp44 ligand was sensitive to trypsin treatment and was reduced in
cells arrested in G2/M phase. These data demonstrate the ubiquitous expression of the ligands for NKp30 and
NKp44 and give an important insight into the regulation of these ligands.
NKG2D is an activating receptor expressed on all human NK cells and a subset of T cells. In cytolytic conjugates
between NK cells and target cells expressing its ligand MICA, we found that NKG2D accumulated at the immunological
synapse (IS) with GM1-rich microdomains. Furthermore, NKG2D was specifically recruited to detergent resistant
membrane fractions (DRM) upon ligation. However, in the presence of a strong inhibitory stimulus, NKG2D-mediated
cytotoxicity could be intercepted, and recruitment of NKG2D to the IS and DRM fractions was blocked. Also,
downstream phosphorylation of Vav-1 triggered by NKG2D ligation was circumvented by co-engaging inhibitory
receptors. Thus, we propose that one way in which inhibitory signaling can control NKG2D-mediated activation is by
blocking its recruitment to GM1-rich membrane domains. The accumulation of activating NK cell receptors in GM1rich
microdomains may provide the necessary platform from where stimulatory signals can proceed.
In our analysis of the cytotoxic activity of NK cells we observed that IL-2 activated human NK cells can serially hit
multiple targets. Using functional assays, we demonstrated that on an average, a single IL-2 activated NK cell can kill
four target cells. Data using live video microscopy suggested that an individual NK cell can make serial contacts with
multiple targets and that majority of contacts lead to lysis of target cells. Serial killing was associated with a loss of
Perforin and Granzyme B content. A large majority of NK cells survived serial killing and IL-2 could replenish their
granular stock and restore the diminished cytotoxicity of „exhausted” NK cells. IL-2 and IL-15 were equally effective
in enhancing the killing frequency of resting NK cells. Significantly, Rituximab, a therapeutic monoclonal antibody
increased the killing frequency of both resting and IL-2 activated NK cells. Our data suggest that NK cell-based therapies
for overcoming tumours rely on their serial killing ability. Therefore, strategies augmenting the killing ability of
NK cells can boost the immune system and enhance the effectiveness of monoclonal antibody-based therapies.
Standort Heidelberg
Arbeitsgruppe Apl. Prof. Dr. rer. nat. Carsten Watzl
Projektleiter Apl. Prof. Dr. rer. nat. Carsten Watzl
Mitarbeiter Dr. rer. nat. Maren Claus, Dr. rer. nat. Kristine Kohl, Dipl.-Biol. Doris Urlaub, Dipl.-Biochem. Stephan
Meinke, Dipl.-Biochem. Stefanie Margraf, Dipl. Biol. Andre Cohnen, MSc. Stephan Gütgemann, Bsc.
Mina Sandusky, Birgitta Messmer (MTA), Sabine Wingert (BLA)
Kooperationen PD Dr. med. Frank Momburg, DKFZ Heidelberg
Prof. Dr. Daniel Davis, Imperial College, London, UK
Förderung BMBF (BioFuture), Deutsche Krebshilfe, DFG (SFB 405, TP A13)
Laufzeit des Projektes 2005 bis heute
Weitere Informationen
Endt, J., McCann, F.E., Almeida, C.R., Urlaub, D., Leung, R., Pende, D., Davis, D.M., Watzl, C. (2007) Inhibitory receptor
signals suppress ligation-induced recruitment of NKG2D to GM1-rich membrane domains at the human
NK cell immune synapse. J. Immunol., 178, 5606-5611.
Byrd, A., Hoffmann, S.C., Jarahian, M., Momburg, F., Watzl, C. (2007) Expression Analysis of the Ligands for the
Natural Killer Cell Receptors NKp30 and NKp44. PLoS ONE 2(12): e1339. doi:10.1371/journal.pone.0001339
Bhat, R., Watzl, C. (2007) Serial Killing of Tumor Cells by Human Natural Killer Cells - Enhancement by Therapeutic
Antibodies. PLoS ONE, 2(3): e326. doi:10.1371/journal.pone.0000326
185

Forschungsbericht 2007 – 2008
Molekulare Grundlage abgeschwächter Antigeneigenschaften im
AB0-Blutgruppensystem
Hintergrund und Projektbeschreibung
Neben den Hauptantigenen A1, A2, B und 0 im AB0-Blutgruppensystem können auch abgeschwächte Antigeneigenschaften
serologisch als A3, Ael, Ax oder Aweak sowie B3, Bel, Bx oder Bweak nachgewiesen werden. Die molekulare
Ursache abgeschwächter Antigene ist sehr heterogen und deutet auf eine signifikante Polymorphie des
AB0-Genortes hin.
Ziel des Projekts ist die molekulare Charakterisierung des AB0-Gens bei Individuen (Patienten oder Blutspendern) mit
abgeschwächten Antigeneigenschaften. Im Abgleich mit den bekannten Genvarianten, die in einer Web-basierten
Datenbank (dbRBC) hinterlegt sind, soll im Einzelfall die Genotyp-Phänotyp-Korrelation geprüft werden. Insgesamt
kann dadurch die Diagnostik solcher Proben verbessert werden, wobei die klinische Relevanz noch unklar ist.
Wichtigste Ergebnisse
Im Verlauf des Projekts konnte eine neue AB0-Genvariante bei einem Blutspender und seinen Familienangehörigen
identifiziert werden (siehe Abb.). Dieses so genannte Bw20-Allel ist serologisch durch nicht-nachweisbare B-Antigenexpression
und stark abgeschwächte anti B-Isoagglutinine gekennzeichnet. Bekannte Genvarianten, wie z.B. Ax01
(Mutation 646T>A), Aw06 (502C>T); Aw04 (721C>T), Ael01 (804insG), konnten bereits bei mehreren Spendern oder
Patienten nachgewiesen werden.
Phänotyp und Genotyp einer neu identifizierten AB0-Genvarianten (Bw20) bei einem Blutspender (Index) und den Familienangehörigen.
186

Molecular basis of weak antigen expression of the AB0 blood group system
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
A diminished expression of antigens of the AB0 blood group system can be observed in patients as well as healthy
blood donors. Variants of the corresponding gene may represent the molecular basis of such phenotypes. For the
AB0 gene a number of variants have been described and deposited in a web-based databank (dbRBC). In this project
we focus on the molecular characterization of the AB0 gene in individuals with diminished antigen expression.
We could already identify a number of AB0 variants which seem to occur at higher frequency (more than single
cases). The knowledge of such variants is of diagnostic importance, but the clinical relevance of the weak antigens
remains unclear.
Standort Mannheim
Arbeitsgruppe Molekulare Immunhämatologie
Projektleiter Prof. Dr. rer. nat. Peter Bugert
Mitarbeiter Gabi Rink (MTA)
Kooperationen Dr. E.A. Scharberg, Baden-Baden
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Laufzeit des Projektes 01.01.2005 – 31.12.2008
Weitere Informationen
Bugert P, Scharberg EA, Janetzko K, Rink G, Panter K, Richter E, Klüter H. A novel variant B allele of the ABO
blood group gene associated with lack of B antigen expression. Transfusion Med Immunother 35: 319-323 (2008).
dbRBC: www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/gv/rbc/xslcgi.fcgi?cmd=bgmut/systems_info&system=abo
187

Forschungsbericht 2007 – 2008
Charakterisierung der molekularen Grundlagen des
Aspirin-like-Defekts bei pädiatrischen Patienten und deren Familien
Hintergrund und Projektbeschreibung
Der Aspirin-like-Defekt (ALD) ist eine erbliche Funktionsstörung der Thrombozyten. Die Folgen sind meist milde
Blutungsneigungen, z.B. regelmäßiges Nasenbluten, Nachbluten bei Zahnextraktion oder verlängerte Regelblutung.
In der Labordiagnostik ist der ALD in erster Linie durch eine gestörte Thrombozytenaggregation nach Arachidonsäure-Induktion
zu erkennen. Aus diesem Grund wird der zugrundeliegende Defekt im Bereich des thrombozytären
Arachidonsäure-Stoffwechsels vermutet, wodurch das Erscheinungsbild des ALD der aggregationshemmenden Wirkung
von Acetylsalicylsäure (Aspirin®) ähnelt. Ziel dieses Forschungsprojekts, ist die Charakterisierung molekularer
Grundlagen des ALD bei pädiatrischen Patienten und deren Familien, die in der hämostaseologischen Ambulanz der
Universitätskinderklinik Dresden betreut werden. Da der noch weitgehend ungeklärte Pathomechanismus dieser
Thrombozytopathie bislang nur wenig systematisch untersucht wurde, stand zunächst die Charakterisierung klinischer
Merkmale und Laborphänotypen bei Patienten mit ALD im Vordergrund der Untersuchungen. Die in Dresden
gesammelten Patientenproben wurden in der Mannheimer Arbeitsgruppe Thrombozytenimmunologie und -funktion
durch eine Reihe molekularer Methoden untersucht. Da über den Pathomechanismus des ALD noch wenig bekannt
ist, waren die Untersuchungen systematisch auf DNA-, RNA- und Protein-Ebene ausgelegt. Die DNA-Sequenzierung
der kodierenden Abschnitte der Gene des Arachidonsäurestoffwechsels bei ALD-Patienten zeigte keine Mutationen.
Derzeit werden noch die Promoterbereiche der Gene analysiert. Ein Vergleich der Thrombozyten-Transkriptome von
ALD-Patienten und gesunden Familienangehörigen zeigte eine verminderte Expression des Thromboxanrezeptors,
der bei der Arachidonsäure-vermittelten Thromobzytenaktivierung eine entscheidende Rolle spielt. Die Ursache des
ALD könnte also in einer verminderten Rezeptorexpression liegen. Diese Vermutung wird derzeit durch Untersuchungen
auf Proteinebene geprüft.
Wichtigste Ergebnisse
Durch die systematische Untersuchung von 52 Individuen aus 17 Familien konnten 34 Patienten mit ALD identifiziert
werden. Die verminderte bzw. fehlende Aggregationsantwort auf Arachidonsäure wurde als wichtigster diagnostischer
Parameter des ALD etabliert (siehe Bild). Die Ergebnisse der molekularen Analysen deuten darauf hin, dass der
ALD mit einer verminderten Expression des Thromboxan-A2-Rezeptors bei Thrombozyten in Verbindung steht.
Summary
ALD is a rare platelet function disorder so far not fully characterised in detail. A disturbed intraplatelet arachidonic
acid metabolism is assumed as the underlying defect. Typical laboratory findings include absent or markedly
diminished platelet aggregation with arachidonic acid (AA). In this project we investigate the molecular basis of the
ALD in affected families. DNA sequencing of the coding regions of genes of the AA pathways did not indicate mutations.
The comparison of platelet transcriptomes of patients and controls led to the identification of diminished
expresssion of RNA coding for the thromboxane A2 receptor. This finding needs to be confirmed at the protein level.
188

Charakteristische Aggregationsprofile
eines gesunden
Probanden (A) im Vergleich
zur gestörten Thrombozyten-
Aggregation nach Arachidonsäure-
und ADP-Induktion bei
einem ALD-Patienten (B).
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Standort Mannheim
Arbeitsgruppe Thrmobozytenimmunologie
Projektleiter Prof. Dr. rer. nat. Peter Bugert
Mitarbeiter Angelika Schedel, Dipl. Ing. (FH); cand. med. Iris Klaus
Kooperationen Prof. Dr. M. Suttorp, PD Dr. R. Knöfler, Dr. N. Rolf; Universitätskinderklinik Dresden
Förderung Deutsche Forschungsgemeinschaft (BU 1795/3-1)
Laufzeit des Projektes 01.07.2006 – 30.06.2008
Weitere Informationen
Ristocetin
Arachidonsäure
ADP
Kollagen
Kollagen
Ristocetin
Rolf N, Knoefler R, Bugert P, Gehrisch S, Siegert G, Kuhlisch E, Suttorp M. Clinical and laboratory phenotypes
associated with the Aspirin-like defect: a study in 17 unrelated families. Br J Haematol 144: 416-424 (2009).
ADP
Arachidonsäure
189

Forschungsbericht 2007 – 2008
Identifizierung und Charakterisierung neuer Rezeptoren bei
Thrombozyten
Hintergrund und Projektbeschreibung
Die Charakterisierung des Thrombozyten-Transkriptoms lieferte wichtige Daten zur Identifizierung und Charakterisierung
neuer Rezeptoren bei Thrombozyten. In den letzten Jahren hat sich dabei insbesondere die Fokussierung auf
neuronale Genfunktionen entwickelt. Neben dem Nachweis des Dopamin-Transporters (DAT) wurden auch die bei
Thrombozyten exprimierten Dopamin-Rezeptoren (DR) funktionell charakterisiert. Aktuelle Arbeiten konzentrieren sich
auf die Gruppe der nikotinischen und muskarinischen Acetylcholinrezeptoren.
Wichtigste Ergebnisse
Es konnte gezeigt werden, dass Dopamin ein Agonist für Thrombozyten ist und zusammen mit ADP eine verstärkte
Adhäsion an Kollagen unter Flussbedingungen bewirkt. Durch die Verwendung spezifischer Rezeptorantagonisten
wurde nachgewiesen, dass ausschließlich D2-like-Rezeptoren am Dopaminagonismus beteiligt sind (Abb. 1). In den
jüngsten Untersuchungen konnte der alpha7 nikotinische Acetylcholinrezeptor bei Thrombozyten nachgewiesen werden
(Abb. 2).
Summary
190
Abb. 1: Durch die quantitative
Messung der Thrombozytenadhäsion
an Kollagen unter
Flussbedingungen konnte der
agonisierende Effekt von
Dopamin auf Thrombozyten
nachgewiesen werden. Der
Effekt wird ausschließlich
über D2-like-Rezeptoren vermittelt,
was durch die Verwendung
spezifischer
Antagonisten (Rac und Cloz)
gezeigt werden konnte.
On the basis of microarray hybridisation analysis with whole genome array systems we investigated the RNA profiles
of platelets in order to identify new receptors which have not been described for platelets so far. In this project we
could already identify and functionally characterise the complete dopaminergic system of platelets including the dopamine
transporter (DAT) and different receptors. Dopamine is an ADP-dependent agonist for the adhesion of platelets
to collagen. Only D2-like but not D1-like receptors were involved in this agonism (Figure 1). Current
investigations focus on the characterisation of cholinergic receptors. The alpha7 nicotinic acetylcholine receptor
could be identified at the RNA and protein level in platelets (Figure 2).

Abb. 2: Nachweis der Expression
des alpha7 nikotinischen
Acetylcholinrezeptors in
Thrombozyten mittels Real-
Time-PCR (A), Westernblot (B)
und Durchflusszytometrie (C)
.
Standort Mannheim
Arbeitsgruppe Thromobozytenimmunologie und -funktion
Projektleiter Prof. Dr. rer. nat. Peter Bugert
Mitarbeiter Angelika Schedel, Dipl. Ing. (FH)
Kooperationen PD Dr. P. Schloss; ZI Mannheim
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Laufzeit des Projektes 01.01.2005 – 31.12.2008
Weitere Informationen
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Schedel A, Schloss P, Klüter H, Bugert P. The dopamine agonism on ADP-stimulated platelets is mediated
through D2-like but not D1-like dopamine receptors. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol 378: 431-439
(2008).
191

Forschungsbericht 2007 – 2008
Molekulare Grundlage abgeschwächter Antigeneigenschaften und
seltener Antigene des RHCE-Systems
Hintergrund und Projektbeschreibung
Das Rhesus-Blutgruppensystem repräsentiert Antigene, die sich auf den RhD- und RhCE-Proteinen in der Erythro -
zytenmembran befinden. Während mehr als 100 RHD-Allele bekannt sind, die schwache oder partiale RhD-Antigene
exprimieren, ist das RHCE-Gen diesbezüglich noch wenig systematisch untersucht. Des Weiteren sind seltene Antigene
vermutlich auf dem RhCE-Protein lokalisiert, jedoch sind die molekularen Ursachen noch nicht geklärt.
Ziel dieses Projekts ist die systematische Analyse des RHCE-Gens bei Individuen, die eine Abschwächung eines
oder mehrerer RhCcEe-Merkmale aufweisen. So konnten im Verlauf von etwa zwei Jahren insgesamt 43 Proben mit
auffälliger Antigenexpression identifiziert werden. Die molekularen Analysen ergaben bei 34 dieser Proben eine veränderte
RHCE-Gensequenz, meist in Form von einzelnen Punktmutationen (siehe Tabelle).
Wichtigste Ergebnisse
192
Übersicht der identifizierten
Punktmutationen im RHCE-
Gen bei Proben mit abgeschwächterRhCE-Antigenexpression.
*Die meisten Aminosäureänderungen
finden
sich in transmembranären Bereichen
(TM), seltener intrazellulär
(IC) oder exofazial (EF).
Auf der Basis routineserologischer Untersuchungen in den Instituten Baden-Baden, Ulm und Frankfurt konnten bislang
insgesamt 43 Individuen mit auffälligen RhCE-Antigeneigenschaften identifiziert werden. Die Sequenzierung des
RHCE-Gens ergab veränderte RHCE-Allele bei 34 Proben. Insgesamt konnten 22 RHCE-Allele identifiziert werden,
wovon zehn bislang nicht beschrieben waren (siehe Bild). Die Mutationen häuften sich insbesondere in den Exonen
3 – 6.

Modell der RhCE-Proteintopologie
in der Erythrozytenmembran.
Aminosäuren (AS)
sind als Kreise dargestellt. Die
4 AS, die C und c-Antigene
unterscheiden, sind quergestreift.
Die AS, die E und
e- Antigene unterscheidet ist
durch das Kreuzsymbol
gekennzeichnet. Bereits
bekannte AS-Varianten sind
durch graue Kreise und neue
Varianten durch schwarze
Kreise gekennzeichnet. Die
Exon-Intron-Grenzen der
RHCE cDNA sind durch graue
Balken markiert.
Summary
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Variant RHCE alleles with diminished expression of C, c, E and e antigens have been described and indicate the
genetic diversity of this gene locus in several populations. In the present study we determined the molecular background
of variant RhCE antigens identified by standard serological routine testing in German blood donors and patients.
Samples from blood donors and patients were routinely analysed for RhCE phenotype using the PK7200
analyser with two sets of monoclonal anti-C, -c, -E and -e reagents. Samples with confirmed variant RhCE antigens
were analysed by nucleotide sequencing of the 10 RHCE exons. A multiplex PCR-SSP method was established for
rapid typing of the rare RHCE alleles. We identified 43 samples with serological RhCE variants. Molecular analysis
revealed variant RHCE alleles in 34 samples. Altogether 22 RHCE alleles were detected; ten have not been published
before. 20 alleles harbored distinct single nucleotide substitutions, 18 of which encoded amino acid changes and
two occurred in non-coding regions. Two samples represented RHCE-D-CE hybrid alleles involving different segments
of the RHCE exon 5. A multiplex PCR-SSP screening for 17 RHCE alleles was negative in 1,344 samples of
the DNA bank GerBS. The cumulative frequency was estimated between 1 in 488 (0.20 %) and 1 in 8,449 (0.012 %).
Single amino acid substitutions were the molecular basis for variant RhCE antigen expression in most samples.
Nucleotide substitutions in RHCE exons were excluded as possible mechanism of diminished RhCE antigen expression
in one fifth of the serologically identified samples.
Standort Mannheim, Baden-Baden, Ulm, Frankfurt
Arbeitsgruppe Molekulare Immunhämatologie
Projektleiter Prof. Dr. rer. nat. Peter Bugert
Mitarbeiter Prof. Dr. Willi Flegel, Dr. Inge von Zabern, Dr. Erwin A. Scharberg, Dr. Karin Janetzko, Dr. Chrisof Geisen,
Gabi Rink (MTA), Kathrin Panter (MTA), Andrea Ernst (MTA), Marianne Lotsch (MTA)
Kooperationen Prof. Dr. G. Daniels, Bristol, UK; Dr. H. Hustinx, Bern
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Laufzeit des Projektes 01.01.2005 – 31.12.2008
Weitere Informationen
Bugert P, Scharberg EA, Panter K, Penz S, Rink G, von Zabern I, Schrezenmeier H, Richter E, Klüter H, Flegel WA.
RHCE antigen variants among 116,100 blood donors. Transfus Med Hemother 34 (suppl 1): S5 (2007)
193

Forschungsbericht 2007 – 2008
Analyse und Genreparatur angeborener
Immun- und Hämatopoiesedefekte I
Bei der nukleotidgenauen Genreparatur mit DNA-Bruch wird ein kleines
Gen-Fragment (ssODN) nicht in das Genom eingebaut, sondern dient
als Schreibvorlage bei der Herstellung einer DNA-Kopie.
194
Hintergrund und Projektbeschreibung
Zur Entwicklung neuer Genkorrekturansätze von angeborenen
Lymphozyten- und Erythrozytendefekten
werden Genelemente aus sehr kurzen, modifizierten,
in vitro synthetisierten DNA-Strängen in Zell- und
Tiermodellen eingesetzt, die es erlauben, auf Einzelzellebene
mit Fluoreszenzanalytik Reparatureffizienzen
und Reparaturexaktheit zu testen,
Korrekturmodalitäten zu entwickeln und Nebenwirkungen
der Therapie zu beschreiben. Die Untersuchungen
werden mit und ohne künstlich induzierten
DNA-Brüchen durchgeführt.
Wichtigste Ergebnisse
An Reporter-Zelllinien ist in unseren Arbeiten an
ca. 4,5 % der Zellen eine nukleotidgenaue Reparatur
eines Multikopie-Genorts mit sehr kurzen (ca. 13 bis
70 Nukleotide-Länge) modifizierten, einzelsträngigen
Oligonukleotiden möglich. Eine detaillierte molekulare
Untersuchung zeigte auf, dass das Reparaturoligo
nukleotid, wenn es der Zelle ohne Störungen der
DNA angeboten wird, im Reparaturprozess nicht als
Matritze benutzt wird, sondern direkt in das zu verändernde
Genom am gewünschten Genort integriert
wird. Neuere Untersuchungen zeigen, dass diese
Methode fehlerbehaftet ist und die Korrektur-DNA
auch an anderen Genloci eingebaut werden kann
(unveröffentlicht).
Defekte an Einzelkopie-Genorten können in unseren
Modelllinien mit einer Frequenz von ca. 0,5 bis 1,0 %
korrigiert werden. Dies setzt allerdings voraus, dass
in der unmittelbaren Nähe des zu reparierenden DNA-
Abschnittes künstlich ein spezifischer DNA-Doppelstrangbruch
erzeugt wird. Unerwarteterweise wird in
dieser Variante der Genkorrektur das Reparaturoligonukleotid
nicht physikalisch in die DNA inseriert, sondern
als Matritze für DNA-Polymerasen eingesetzt.
Die Genkorrektur nach Anbringen eines gezielten,
spezifischen DNA-Doppelstrangbruches mit Designernukleasen
ermöglicht nicht nur die Reparatur von
Punktmutationen, sondern auch eine Reversion von
Insertionen und Deletionen.

Summary
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
To develop innovative therapeutic gene correction options for primary immuno- and haematopoietic deficiencies,
short modified synthetic oligonucleotides are used in cell and animal models. These studies allow to test gene repair
proficiency with a fluorescing single cell in vivo reporter. The technology provides the basis to elucidate the biochemical
pathways of the DNA-repair, to maximize the correction efficiency and to control for non-specific side effects.
The experiments are projected with and without the introduction of DNA-doublestrand breaks.
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Genreparatur an Modellsystemen
Projektleiter Dr. med. Klaus Schwarz
Mitarbeiter Dr. Frank Radecke, Ingrid Peter (TA), Sarah Radecke (TA), U. Stötzner (TA)
Kooperationen Prof. Dr. Cathomen (Charité, Berlin)
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Strukturelle Mittel der Universität Ulm
EU-Kommission
Laufzeit des Projektes fortlaufend
Weitere Informationen
Radecke, S., Radecke, F., Peter, I. und Schwarz, K. Incorporation of single-stranded correction oligonucleotides
into the targeted chromosomal site. Journal of Gene Medicine. 8, 217-228, 2006.
Radecke, F., Peter, I., Radecke, S., Gellhaus, K., Schwarz, K. und Cathomen, T. Targeted chromosomal gene modification
in human cells by single-stranded oligodeoxynucleotides in the presence of a DNA double-strand break.
Molecular Therapy,14, 798-808, 2006.
195

Forschungsbericht 2007 – 2008
Analyse und Genreparatur angeborener
Immun- und Hämatopoiesedefekte II
Hintergrund und Projektbeschreibung
Neben der routinemäßig durchgeführten molekularen Diagnostik der allermeisten primären Lymphopoiese- und vieler
Hämatopoiesedefekte (in einem ISO 9001-zertifizierten Labor und unter DACH-Akkreditierung) steht in Kooperation
mit dem Universitätsklinikum Ulm (Pädiatrie, Innere Medizin), der Pädiatrie und Inneren Medizin des Universitätsklinikums
in Freiburg und dem Centre of Chronic Immunodeficiency in Freiburg im Zentrum unseres Labors die molekular-pathophysiologische
Aufklärung bisher nicht charakterisierter Entwicklungs- und Funktionsstörungen der
lymphatischen und erythroiden Reihe. Ein Schwerpunkt konzentriert sich auf die DNA-Reparatur und DNA-Stabilität
bei der Lymphozytendifferenzierung, beim Immunglobulinklassenwechsel und bei der Affinitätsreifung von Immun -
globulingenen im Keimzentrum der Lymphknoten. Weiteres Interesse liegt auf der Analyse des Einflusses des Energiestoffwechsels
bei der Leukozytendifferenzierung.
Wichtigste Ergebnisse
196
Knochenmarksausstrich eines Patienten mit Congenitaler
Dyserythropoietischer Anämie Typ I (CDAI).
Es konnten mehrere Immun-/Erythropoiesedefekte neu molekular beschrieben oder es konnte ein Beitrag zur besseren
Charakterisierung (RAG-1 Defekt, ADA-Defekt, PRF-1-Defekt) bekannter Defekte geleistet werden. So wurde gemeinsam
mit der Kinderklinik in Ulm und dem Max-Planck-Institut für Immunbiologie eine neue Entität des schweren,
kombinierten Immundefektes beschrieben. Bei der so genannten Retikulären Dysgenesie (einer Aleukozytose) fällt ein
mitochondriales Enzym des Energiestoffwechsels aus. Der Mangel an Adenylatkinase 2 ist der erste Immundefekt mit
Veränderungen der Mitochondrien.
Die Biochemie von ARTEMIS, Ligase IV und XLF, so genannten DNA-Reparaturfaktoren, die bei der Entwicklung von
Immunzellen eine entscheidende Rolle spielen, konnte vervollständigt werden. Die Funktion dieser Faktoren bei dem
Abtöten von Leukämiezellen wurde gemeinsam mit C. Friesen (Rechtsmedizin Ulm) untersucht. Interessante Korrelationen,
warum Zellen behandlungsresistent für Chemotherapeutika sein können, wurden in diesen Untersuchungen
nachgewiesen.
Die molekulare Beschreibung der Mutationen einer Art der kongenitalen Erythrozytosen (CDAI) (Kooperation
Prof. Heimpel, Ulm), wurde vervollständigt. Dabei konnten zum ersten Mal Genveränderungen bei CDANI bei
asiatischen Patienten nachgewiesen werden.

Summary
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Besides the routine genetic analyses of a majority of primary immunodeficiencies and some haematopoietic defects,
the laboratory concentrates on the molecular and pathophysiological elucidation of so far unsolved developmental
and functional defects of lymphocytes and erythrocytes. One focus in this respect is the influence of DNA-repair
components on lymphocyte differentiation, immunoglobulin class-switch and affinity maturation of antibodies.
A second emphasis is put on energy metabolism during leukocyte development.
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Analyse molekularbiologischer Ursachen angeborener Immun- und Hämatopoiesedefekte
Projektleiter Dr. med. Klaus Schwarz
Mitarbeiter Dr. D. Niewolik; Dr. U. Pannicke; K. Heinrich (TA); C. Gruber (TA); I. Peter (TA); I. Janz (TA);
E.-M. Rump (TA); S. Braun (TA); T. Kersten (TA)
Kooperationen Dr. H. Cario (Universitätskinderklinik Ulm);
Prof. Dr. S. Ehl (Universitätskinderklinik Freiburg);
Prof. Dr. Lieber, USC (USA);
Prof. Dr. W. Friedrich (Universitätskinderklinik Ulm);
Dr. M. Hönig (Universitätskinderklinik Ulm);
Prof. emerit. Dr. H. Heimpel (Ulm);
PD Dr. C. Friesen (Rechtsmedizin Ulm);
Prof. Dr. T. Böhm (MPI für Immunbiologie) Freiburg
Förderung BMBF
Deutsche José Carreras Leukämie-Stiftung e.V.
Else-Kröner-Fresenius-Stiftung
Strukturelle Mittel der Universität Ulm
Wilhelm-Sander-Stiftung
Laufzeit des Projektes fortlaufend
Weitere Informationen
Lu, H., Pannicke, U., Schwarz, K. und Lieber, M.R. Length-dependent binding of human XLF to DNA and stimulation
of XRCC4:DNA Ligase IV activity. J. Biol. Chem., 282, 11155-11162, 2007.
Schütz, C., Gudowius, S., Schneider, D.T., Huck, K., Manfras, B., Pannicke, U., Megahed, M., Willemze, R.,
Göbel, U., Schulz, A., Debatin , K.M., Friedrich, W., Schwarz, K. und T. Niehues, T. A novel type of combined immunodeficiency
caused by hypomorphic RAG mutations. N. Engl. J. Med., 358, 2030-2038, 2008.
Pannicke U, Hönig M, Hess I, Friesen C, Holzmann K, Rump EM, Barth TF, Rojewski MT, Schulz A, Böhm T, Friedrich
W, Schwarz K. Reticular dysgenesis (aleukocytosis) is caused by mutations in the gene encoding mitochondrial
adenylate kinase 2: Nat Genet, epub ahead of print, 30 November 2008.
197

Forschungsbericht 2007 – 2008
Aufklärung des Polymorphismus im Rhesus-Blutgruppensystem
Hintergrund und Projektbeschreibung
Ziel dieses langfristigen Projektes ist die Aufklärung von Polymorphismen des RHD-Genorts zur Verbesserung der
D-Typisierung in unterschiedlichen Populationen. Rhesus ist das komplexeste aller bekannten Blutgruppensysteme.
Die Kenntnis der in diesem System auftretenden Allele und ihrer serologischen Phänotypen ist für die Abschätzung
eines Immunisierungsrisikos klinisch bedeutsam und Voraussetzung für eine rationale und kostengünstige Typisierungsstrategie
in der immunhämatologischen Routine. Da jede Blutgruppenbestimmung auch mit der Bestimmung
des Rhesus-Antigens D einhergeht, ist die Charakterisierung der existierenden Allele von großer praktischer Bedeutung.
Modell der Rhesus-Proteine in der Erythrozytenmembran. Beide Rhesus-Proteine weisen 417 Aminosäuren auf, die durch Kreise
symbolisiert sind. Den reifen Proteinen in der Membran fehlt die erste Aminosäure. Eingezeichnet sind in gelb die Aminosäureaustausche
zwischen dem RhD- und dem RhCE-Protein, wobei die vier für Antigen-C-relevante Aminosäurepositionen in grün und die eine für
Antigen E in schwarz markiert sind. In blau sind alle bekannten einzelnen Aminosäureaustausche für die partial-D-Allele und in rot für
die weak-D-Allele gekennzeichnet, unter denen in hellblau und orange die von der Arbeitsgruppe in Ulm identifizierten Mutationen
markiert sind.
Wichtigste Ergebnisse
In Kooperationen mit Kollegen in Linköping, Prag, Linz, Bristol und in deutschen Blutspende-Instituten wurde seit
2006 die klinische Relevanz von weiteren neuen Rhesus D-Varianten veröffentlicht. Die Phänotypen und die zugrunde
liegenden Allele wurden veröffentlicht und sind den beigefügten Literaturstellen im Einzelnen zu entnehmen.
Summary
In cooperation with colleagues in in Linköping, Prag, Linz, Bristol and in German Blood Donor Services the clinical
relevance of additional novel D variants was determined since 2006. The phenotypes and the underlying alleles were
published and are detailed in the accompanying references.
198

Standort Ulm
Arbeitsgruppe Molekulare Diagnostik erythrozytärer Antigene
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Projektleiter Prof. Dr. med. Willy A. Flegel
Mitarbeiter Dr. med. Ingeborg von Zabern
Marianne Lotsch, Anita Link, Hedwig Erne (MTA)
Kooperationen Dr. Franz F. Wagner, DRK-Blutspendedienst NSTOB, Springe
Dr. Andrea Doescher, DRK-Blutspendedienst NSTOB, Oldenburg
Dr. Klaus P. Strathmann, DRK-Blutspendedienst West-Breitscheid, Ratingen
Dr. Christof Geisen, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen, Frankfurt am Main
Primarius Dr. Christian Gabriel, Dr. Helene Polin, Österreichisches Rotes Kreuz Oberösterreich, Linz
Dr. Miodrag Palfi, Universitätsklinik Linköping, Schweden
Dr. Martin Pisacka, UHKT, Prag, Tschechische Republik
Prof. Dr. Neil D. Avent, Universität West of England, Bristol, England
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Laufzeit des Projektes 2002 – 2009
Weitere Informationen
Flegel, W. A., et al.: D variants at the RhD vestibule in the weak D type 4 and Eurasian D clusters. Transfusion
2009 im Druck
Flegel, W. A., et al.: DCS-1, DCS-2 and DFV share amino acid substitutions at the extracellular RhD protein vestibule.
Transfusion 48(2008)25-33
Flegel, W. A.: Molecular genetics of RH and its clinical application. Transfus. Clin. Biol. 13(2006)4-12
Internetseite: http://www.uni-ulm.de/~wflegel/RH/
199

Forschungsbericht 2007 – 2008
BloodGen: Blutgruppen-Bestimmung und Genotypisierung
Hintergrund und Projektbeschreibung
Ziel des BloodGen-Konsortium ist es, den Gebrauch von molekulargenetischen Methoden zur Blutgruppen-Untersuchung
zu etablieren. Der Genotyp einer großen Kohorte von Individuen aus verschiedenen Regionen der EU soll bestimmt
werden, um die Verlässlichkeit der neuen Methode und deren Überlegenheit gegenüber den üblichen
serologischen Verfahren zu belegen. Im Projekt wurde die Biochip-Technologie zum Nachweis von Einzel-Nukleotid-
Polymorphismen eingesetzt und ein Bloodchip entwickelt, der die Untersuchung einer großen Zahl von Blutgruppen-
Allelen und einen großen Durchsatz ermöglicht.
MAPH Multiplex PCR zur Blutgruppen-spezifischen Amplifikation. PCR Amplifikate von zwei Bloodchip MPX PCR-Ansätzen sind
dargestellt: a) AB0 und RHD MPX PCR (15 Fragmente) und b) MPX PCR für GYPA und GYPB (MNS); RHCE, DO, KEL, CO, JK, DI, FY
Blutgruppen-kodierende Gene (20 Fragmente). RHD positive und negative genomische DNA-Proben wurden amplifiziert mit beiden
MPX PCR-Ansätzen und die Produkte wurden in 4 % bis 20 % Polyacrylamid-Gele getrennt.
Wichtigste Ergebnisse
Die Anwendbarkeit des Bloodchip wurde in einer Reihe kleinerer klinischer Untersuchungen etabliert. Die Mitglieder
des BloodGen-Konsortiums führten eine große klinische Studie durch, in der der BloodChip an 3.000 AB0-, Rhesus
CcDEe- und K-typisierten Blutspender- und Patientenproben CE-zertifiziert wurde. Das Ziel ist der Einsatz dieser
Technologie in einer Reihe von EU-Mitgliedsstaaten, um anfangs Risiko-Patientengruppen und einen relevanten Teil
der Blutspender zu untersuchen, bei denen die Blutgruppen-Genotypisierung den größten Nutzen aufweist.
200

Summary
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
The efficacy of Bloodchip has been determined by a series of small-scale clinical trials. Members of the consortium
completet a large clinical trial where Bloodchip was applied to a panel of 3,000 AB0, Rhesus CcDEe and K-typed
individuals and was granted a CE-certification. The goal is to implement the technology in several EU countries
initially at least to target at-risk patient groups and a relevant fraction of blood donors where blood group genotyping
will have the most impact.
Bloodchip Objektträger hybridisiert mit MPX-Produkten von a) D positiven und b) D negativen Genomen. RHD positive und
negative genomische DNA-Proben wurden amplifiziert mit beiden MPX-PCR-Ansätzen, fragmentiert, gefärbt und auf einem Bloodchip
hybridisiert. Die Abbildungen zeigen die „Mikroarray“-Objektträger nach Auswertung mit einem Axon-Scanner und Computer-unterstützter
Auswertung mit dem GenePixPro6-Programm.
201

Forschungsbericht 2007 – 2008
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Molekulare Diagnostik erythrozytärer Antigene
Projektleiter Prof. Dr. med. Willy A. Flegel
Mitarbeiter Dr. med Ingeborg von Zabern (Fachärztin für Transfusionsmedizin, wissenschaftliche Mitarbeiterin)
Anita Link (MTA)
Kooperationen Neil D. Avent, Universität West of England, Bristol, England
Masja de Haas, Ellen van der Schoot, Sanquin, Amsterdam, Niederlande
Marion Scott, Geoff Daniels, Bristol Institute for Transfusion Sciences, Bristol, England
Jill Storry, Martin Olsson, Universität Lund, Schweden
Nurio Nogues, Rosa Estaban, Banc de Sang i Teixits, Barcelona, Spanien
Antonio Martinez, Progenika, Derio, Spanien
Förderung DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Laufzeit des Projektes 01.01.2006 – 31.12.2007
Weitere Informationen
202
Avent, N.D., Martinez, A., Flegel, W. A., Olsson, M. L., Scott, M. L., Nogues, N., Pisacka, M., Daniels, G. L.,
Muniz-Diaz, E., Madgett, T. E., Beiboer, S., Cheroutre, G., von Zabern, I., Hacker, A., Jimenez, E., Tejedor, D.,
Lopez, M., Storry, J. R., Camacho, E., Svobodova, I., de Haas, M. The BloodGen project: toward mass scale
comprehensive genotyping of blood donors in the European Union and beyond. Transfusion 2007
Internetseite des BloodGen-Projektes: http://www.bloodgen.com/
Internetseite eines Symposiums: http://www.uni-ulm.de/~wflegel/RH/SympDGTI2004/

Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Core Facility Hochgeschwindigkeitszellsortierung und durch fluss-
zytometrische Diagnostik
Hintergrund und Projektbeschreibung
Im Institut Ulm wurde im Dezember 2003 eine Core Facility für durchflusszytometrische Zellsortierung und Diagnostik
eingerichtet. Die apparative Ausstattung umfasst neben analytischen Durchflusszytometern ein Gerät zur Hochgeschwindigkeits-Zellsortierung
(FACSAria der Firma Becton Dickinson). Mit diesem Gerät sind die Messung von bis zu
sieben Fluoreszenzparametern und die Sortierung von Einzelpopulationen aus Zellgemischen möglich.
Hochgeschwindigkeits-Zellsortierer FACSAria mit den wichtigsten Ausstattungsmerkmalen.
Wichtigste Ergebnisse
Maximale Durchflussrate (Messung) 100.000 Zellen/s
Maximale Durchflussrate (Sortieren) 30.000 Zellen/s
Anzahl der Messparameter 28
Anzahl der Laser 2
Filterkombinationen für Laser 488 nm 488/10
530/30 – 502LP
576/26 – 556LP
610/20 – 595LP
695/40 – 655LP
780/60 – 735LP
Filterkombinationen für Laser 633 nm 660/20
780/60 - 735LP
Probentemperierung (in °C) 4, 20, 37, 42
Temperierung der sortierten Zellen stufenlos ab 2° C
Anzahl gleichzeitig sortierbarer Populationen 1 bis 4
Einzelzellsortierung ACDU
Durchmesser der zu sortierenden Zellen maximal 30 µM
Software FACSDiva 6.x
Datenformat FCS2
FCS3
DIVA Experiment
Zusätzlich verfügbare Software CellQuest 3.x
CellQuestPro 5.2.1
Weasel
FCS Express 3.x
Baujahr 2003
Durch die mehrjährige Erfahrung im Bereich der Hochgeschwindigkeits-Zellsortierung und Diagnostik ist die Core
Facility in zahlreiche Projekte und Kooperationen mit den Arbeits gruppen im Institut Ulm und weiteren Arbeitsgruppen
im Universitätsklinikum Ulm eingebunden (zu Diagnostik und Forschungsanwendungen im Institut siehe weitere
Projektbeschreibungen in diesem Band).
Weiterhin werden folgende Fragestellungen mit externen Kooperationspartnern untersucht:
Anhaltende CMV-Clearance durch adoptiven Transfer Streptamer-selektionierter CMV-spezifischer CD8+ T-Zellen
nach Transplantation.
Expression von RHAMM G250/CAIX und Auslösen einer spezifischen CD8+ T-Zellantwort beim Plattenepithelkarzinom.
Verlaufsuntersuchungen bei RHAMM-R3 Peptid-vakzinierten Patienten mit akuter myeloi scher Leukämie, myelodysplastischem
Syndrom und multiplem Myelom.
203

Forschungsbericht 2007 – 2008
204
Potentielle klinisch relevante Leukämie-assoziierte Antigen-spezifische CD8+ T-Zellantwort bei Patienten mit
chronischer lymphatischer Leukämie durch RHAMM/R3 Peptid-Vakzinie rung.
Beeinflussung RHAMM/CD168-spezifischer CD8+ Zellen und dosisabhängige Proliferations hemmung
CD4+CD25+ regulatorischer T-Zellen durch den Tyrosinkinase-Inhibitor Imatinib.
Proliferations- und Funktionsstörung von CD8+ T-Zellen durch den Tyrosinkinase-Inhibitor Nilotinib.
Dosisabhängige Proliferationsinhibition und Funktionsstörung von CD8+ und CD4+CD25+ regulatorischen
T-Zellen durch den Tyrosinkinase-Inhibitor Dasatinib.
Inhibitorischer Effekt von Cyclosporin A und Prednisolon auf zytotoxische CD8+ T-Zellen und CD4+CD25+
regulatorische T-Zellen.
Markierung von CD34+ hämatopoetischen Stammzellen und CD73/CD105 positiven mesen chymalen
Stroma zellen mit mRNA.
Komplikationen des zentralen Nervensystems bei Patienten mit Deaminase-Defizienz
Expressionsprofile und Mutationen der Adenylatkinasen 1 und 2 in unterschiedlichen Gewe ben bei Patienten mit
retikulärer Dysgenese.
Anreicherung von Ewing-Sarkom und Neuroblastom initiierenden Tumor-„Stamm“-Zellen.
Etablierung einer durchflusszytometrischen Diagnostik für Zellen aus Cerebrospinal flüssigkeit und peripherem
Blut bei Patienten mit neurologischen und psychiatrischen Erkrankungen.
Summary
In 2003 a core facility for flow cytometry based high speed cell sorting and diagnosis was established. The core facility
has different flow cytometer analysers and one high speed cell sorter, equipped with two lasers (488 nm, 633 nm)
which allows acquisition of up to seven fluorescence parameters in at the same time and single cell cloning using an
automated cell deposition unit (ACDU).
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Core Facility Flow Cytometry
Projektleiter Dr. rer. medic. Markus Rojewski
Kooperationen Universitätsklinikum Ulm / Universität Ulm:
– Klinik für Innere Medizin III, Tumor Immunology Group (TIG), (Prof. Dr. Schmitt, PD Dr. Greiner,
PD Dr. Ringhoffer)
– Klinik für Kinder und Jugendmedizin, Immunologie (Dr. Hönig)
– Klinik für Kinder und Jugendmedizin, AG Prof. Dr. Beltinger (Dr. Wahl)
– Klinik für Innere Medizin I, Arbeitsgruppe Molekulare Zellbiologie (Dr. Niess)
– Klinik für Innere Medizin I, Arbeitsgruppe Reimann (Prof. Dr. Reimann, Dr. Gomez)
– Klinik für Innere Medizin II, AG Inflammation im kardiovaskulären System (Prof. Dr. Torzewski,
Dr. Wiehe)
– Klinik für Psychiatrie und Psychotherapie II (Prof. Dr. Bechter, Dr. Maxeiner)
– Universitäts und Rehabilitationskliniken Ulm, Universitätsklinikum für Neurologie (Prof. Dr. Tumani)
Weitere Kooperationspartner:
– Key Laboratory of Development Genes and Human Diseases, Ministry of Education,
Southeast University Medical School, Nanjing, China (Prof. Dr. Chen
– Department of Clinical Immunology, Lublin Medical University, Polen (Dr. Giannopoulos)
Förderung (einschließlich
Kooperationspartner) Margarete Ammon Stiftung
Deutsche José Carreras Leukämie-Stiftung e.V.
Wilhelm Sander-Stiftung
Medizinische Fakultät, Universität Ulm
Laufzeit des Projektes seit 01.12.2003

Weitere Informationen
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
U. Pannicke, M. Hönig, I. Hess, C. Friesen, K. Holzmann, E.-M. Rump, T. F. Barth, M. Rojewski, A. Schulz, T.
Boehm, W. Friedrich, K. Schwarz (2009). Reticular Dysgenesis (Aleucocytosis) caused by mutations in mitochondrial
adenylat kinase 2. Nature Genetics 41(1), 101-105
F. Fei, Y. Yu, A. Schmitt, M. Rojewski, B. Chen, M. Götz, H. Döhner, D. Bunjes, M. Schmitt (2009). Dasatinib inhibits
the proliferation and function of CD4+CD25+ regulatory T cells. British Journal of Haematology 144(2),
195-205
H.-G. Maxeiner*, M. T. Rojewski*, A. Schmitt, H. Tumani, M. Schmitt, K. Bechter (2009). Flow cytometric analysis
of T cell subsets in paired samples of cerebrospinal fluid and peripheral blood from patients with neurological and
psychiatric disorders. Brain, behaviour and Immunity 23, 134-142 *These authors contributed equally to the work.
F. Fei, Y. Yu, A. Schmitt, M. T. Rojewski, B. Chen, J. Greiner, M. Goetz, P. Guillaume, H. Doehner, D. Bunjes, M.
Schmitt (2008). Dasatinib inhibits the proliferation and function of CD8+ T cells in a dose-dependent manner. Experimental
Hematology 36; 1297-1308
J. Chen, A. Schmitt, B. Chen, M. Rojewski, V. Rüßeler, F. Fei, Y. Yu, J. Yao, X. Yu, M. Ringhoffer, S. von Harsdorf,
J. Greiner, M. Götz, P. Guillaume, H. Döhner, D. Bunjes, M. Schmitt (2008). Nilotinib hampers the proliferation and
function of CD8+ T lymphocytes through inhibition of T cell receptor signaling. Journal of Cellular and Molecular
Medicine 12(2),13
M. Schmitt, A. Schmitt, M. T. Rojewski, J. Chen. K. Giannopoulos, F. Fei, Y. Yu, M. Götz, M. Heyduk, G. Ritter, D.
E. Speiser, S. Gnjatic, P. Guillaume, M. Ringhoffer, R. F. Schlenk, P. Liebisch, D. Bunjes, H. Shiku, H. Döhner, J.
Greiner (2008). RHAMM-R3 peptide vaccination in patients with acute myeloid leukemia, myelodysplastic syndrome
and multiple myeloma elicits immunological and clinical responses. Blood 111(3), 1357-1365
J. Chen, A. Schmitt, K. Giannopoulos, B. Chen, M. T. Rojewski, H. Döhner, D. Bunjes, M. Schmitt (2007). Imatinib
impairs the proliferation and function of CD4+CD25+ reagulatory T cells in a dose-dependent manner. International
Journal of Oncology 31(5), 1133-1139
M. Hönig, M. H. Albert, A. Schulz, M. Sparber-Sauer, C. Schütz, B. Belohradsky, T. Güngör, M. T. Rojewski, H.
Bode, U. Pannicke, D. Lippold, K. Schwarz, K.-M. Debatin, M. S. Hershfield, W. Friedrich (2007). Patients with
adenosine deaminase deficiency surviving after hematopoietic stem cell transplantation are at high risk of CNS
complications. Blood 109(8), 3595-3602
J. M. Wiehe, P. Ponsaerts, M. T. Rojewski, J. M. Homann, J. Greiner, D. Kronawitter, H. Schrezenmeier, V. Hombach,
M. Wiesneth, O. Zimmermann, J. Torzewski (2007). mRNA-mediated gene delivery into human progenitor
cells promotes highly efficient protein expression. Journal of Cellular and Molecular Medicine 11(3), 521-530
J. Chen; A. Schmitt, B. Chen; M. Rojewski; M. Ringhoffer, S. von Harsdorf; J. Greiner, P. Guillaume, H. Döhner, D.
Bunjes, M. Schmitt (2007). Imatinib impairs CD8+ T lymphocytes specifically directed against the leukemia-associated
antigen RHAMM/CD168 in vitro. Cancer Immunol Immunother 56(6), 849-861
205

Forschungsbericht 2007 – 2008
Diagnostik der PNH
Hintergrund und Projektbeschreibung
Die paroxysmale nächtliche Hämoglobinurie (PNH) ist eine seltene, lebensbedrohliche Erkrankung der hämatopoietischen
Stammzelle. Aufgrund der großen Variabilität von Symptomatik und klinischem Verlauf ist die PNH trotz ihrer
Seltenheit im Rahmen der Abklärung hämolytischer Erkrankungen oder bei Thrombosen unklarer Ursache eine wichtige
Differentialdiagnose für den Kliniker. In den letzten Jahren gab es erhebliche Fortschritte bei der Aufklärung der
Pathophysiologie dieser Erkrankung. Diese Erkenntnisse waren die Basis für die heutigen diagnostische Verfahren
und die Entwicklung einer molekular zielgerichteten Therapie. Mit der neuen Möglichkeit einer spezifischen antikörperbasierten
Therapie der PNH gewinnt die frühe Diagnose einer PNH zunehmend an Bedeutung. Aus diesem Grund
befasste sich die Arbeitsgruppe intensiv mit der Optimierung des durchflusszytometrischen Nachweises GPI-defizienter
Populationen zum Nachweis einer PNH.
healthy control
SSC
Wichtigste Ergebnisse
206
10 0
10 0
R1 = Erythrozyten + Retikulozyten
10 1
10 1
10 2
10
FSC-Heig h t
2
FSC-Heig h t
PNH-patient
SSC
10 0
10 0
10 1
10 1
FS C
10 3
10 3
erythrocyte/reticulocyte-gate
R1 = Erythrozyten + Retikulozyten
10 2
10
FSC-Heig h t
2
FSC-Heig h t
FS C
10 3
10 3
erythrocyte/reticulocyte-gate
10 4
10 4
10 4
10 4
GPI-marker
GPI-marker
10 0
10 0
R3 = Erythrozyten
10 1
R3 = Erythrozyten
10 1
R2 = Retik u lo zy ten
10 2
Retico u nt
thiazolorange
R2 = Retik u lo zy ten
10 2
Retico u nt
10 3
10 3
10 4
erythrocyte-g ate + reticulocyte-g ate
thiazolorange
10 4
erythrocyte-g ate + reticulocyte-g ate
Durchflusszytometrische
Messung der GPI-Defizienz
auf Erythrozyten und Retikulozyten
Für die Beurteilung der Methode (Messung der GPI-Defizienz mit den Markern CD58, CD59 CD66b/CD24, CD16,
CD14, CD 48, CD48/CD19, CD48/CD3 und FLAER auf Retikulozyten, Erythrozyten, Granulozyten, Monozyten und
Lymphozyten) wurden 1050 durchflusszytometrische Befunde ausgewertet. Zusätzlich wurde bei 152 Patienten eine
Follow up-Analyse durchgeführt, um Veränderungen der Expressionsstärke und des Klonmusters beurteilen zu können.
Die mediane Untersuchungszahl für diese Gruppe lag bei 3 pro Patient und die mediane Untersuchungsdauer
bei 1039 Tagen. In 22 % der Fälle zeigte sich eine signifikante Änderung der Klongröße und in 8 % der Fälle
entwickelte sich ein neuer PNH-Klon. Insgesamt bestätigt die Auswertung die gewählten Marker als sehr sensitiv. Es
konnte gezeigt werden, dass die Methode unabhängig von hämolytischen Krisen oder EK-Transfusionen angewandt
werden kann. Die Methode erlaubt damit eine valide Klonquantifizierung im Verlauf. Dadurch wird eine Beurteilung
des Therapieansprechens möglich. Insbesondere die Untersuchung der GPI-Defizienz auf den Monozyten zeigte sich
als äußerst senitiver Parameter für den Nachweis kleiner PNH-Klone. Die durchflusszytometrische Untersuchung der
GPI-Defizienz sollte in allen Situationen, die verdächtig für das Vorliegen einer PNH sind oder bei Knochenmarkversagenssyndromen
durchgeführt werden. Regelmäßige Folgeuntersuchungen sind beim Nachweis einer PNH oder bei
Knochenmarkversagenssyndromen sinnvoll.
10 0
10 0
10 0
10 0
M1
M1
M1
M1
10 1
10 1
10 1
10 1
10 2
CD5 9 PE
10 2
CD5 9 PE
10 2
CD5 9 PE
10 2
CD5 9 PE
10 3
erythrocyte-GPI-marker
10 3
reticulocyte-GPI-marker
10 3
erythrocyte-GPI-marker
10 3
reticulocyte-GPI-marker
10 4
10 4
10 4
10 4

Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Ein Teilprojekt beschäftigt sich in Kooperation mit der Abteilung Neurologie des RKU Ulm mit dem Screening nach
GPI-defizienten Populationen bei Schlaganfallpatienten.
Weitere Teilprojekte befassen sich mit der Etablierung der durchflusszytometrischen Messung der hämolytischen
Aktivität sowie der GPI-Defizienz auf den Thrombozyten.
Summary
The new therapy option Eculizumab leads to a highly significant reduction of intravascular haemolysis and thromboembolic
events. With the advent of a targeted therapy early diagnosis of PNH gets even more importance for prevention
of vascular events and improved quality of life.
Results: 1050 flow cytometric results of patients (pts) who were suspected of having or had PNH were studied. The
criterion for inclusion in follow up analysis – availability of at least two GPI-AP assessments – was met by 152 pts.
During follow up in 22 % of cases a substantial change of clone size and in 8 % of cases a newly emerging clone
with significant GPI-deficiency occurred. The median number of analyses was 3 per pt and the median follow up
1039 days. Conclusion: 1) Flow cytometric analysis of GPI-anchored proteins should be performed in all situations
suspicious of PNH and in bone marrow failure syndromes. 2) Measurement of at least two different GPI-anchored
proteins on granulocytes and reticulocytes provides a simple and rapid method to detect even small GPI-deficient
populations. 3) Monocytes so far often disregarded proved to be a very sensitive parameter for detection of small
GPI-deficient clones. 4) This method is not affected by recent haemolytic crises or RBC transfusions. It allows clone
quantization and can therefore be used to monitor the course during follow up to detect evolution of PNH clones and
to assess effect of therapy. 5) Both newly emerging PNH cell populations in patients with bone marrow failure
syndromes as well as substantial changes in clone size warrant regular follow up studies since both situations can
prompt therapeutic consequences.
Additionaly the group is screening in cooperation with the department of neurology stroke patients for GPI-deficient
populations. Other projects have the task to establish flow cytometric measurement of haemolytic activity and GPIdeficiency
on thrombocytes.
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie der PNH und hämatopoietischer Insuffizienz
Projektleiter Prof. Dr. H. Schrezenmeier, Dr. B. Höchsmann
Mitarbeiter Dr. med. B. Höchsmann, Dr. Rojewski
Kooperationen PD Dr. med. R. Huber, Neurologie, RKU Ulm
Förderung Alexion Pharmaceuticals (Kooperationsprojekt mit der Neurologie)
Laufzeit des Projektes 2009
Weitere Informationen
Höchsmann B, Köper S, Becker T, Baur G, Leichtle R, Rojewski M, Schrezenmeier H: Flow cytometric analysis for
paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH): A simple and rapid method for diagnosis and serial monitoring;
Transfusion Medicine and Hemotherapy, 34 (1), 20 (2007)
Schrezenmeier H., Höchsmann B., Körper S., Schubert J.: Aktuelles zur Diagnostik und Therapie der paroxysmalen
nächtlichen Hämoglobinurie. Hämotherapie 8: 17-26 (2006)
Höchsmann B, Köper S, Becker T, Baur G, Leichtle R, Rojewski M, Schrezenmeier H: A simple and rapid flow cytometric
analysis for diagnosis and serial monitoring of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria; Onkologie, 31 (4),
210 (2008)
Nebe T, Schubert, J., Gutensohn, K., and Schrezenmeier H. Flow cytometric analysis of GPI-deficient cells for the
diagnosis of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH). J.Lab.Med. 27257-265 (2003)
http://www.blutspende.de/transfusionsmedizin/formulare/pdf/pnh_diagnostik.pdf
207

Forschungsbericht 2007 – 2008
Stammzelltransplantation bei aplastischer Anämie und paroxysmaler
nächtlicher Hämoglobinurie
Hintergrund und Projektbeschreibung
In diesem Projekt wurden folgende zwischenzeitlich publizierten Untersuchungen durchgeführt:
– Bedeutung der Stammzellquelle (periphere Blutstammzellen versus Knochenmark) für die Ergebnisse bei allogener
Transplantation zur Behandlung der aplastischen Anämie.
– Ergebnisse der allogenen Stammzelltransplantation bei aplastischer Anämie: Entwicklung im Verlauf und Vergleich
mit anderen Therapiemodalitäten.
– Rolle von G-CSF in der Therapie der aplastischen Anämie, insbesondere Risiko sekundärer, klonaler Erkrankungen
bei G-CSF-behandelten Patienten.
In aktuellen Untersuchungen werden bei Patienten mit PNH die Ergebnisse der allogenen Stammzelltransplantation
mit denen anderer Therapieverfahren (chronische Transfusion, Eculizumab, Antikoagulation) verglichen.
In Untersuchungen aus den 80er und 90er Jahren hatte sich die Zahl von Bluttransfusionen vor allogener Transplantation
bei AA als prognostisch ungünstiger Parameter gezeigt. Da sich in der Qualität der Blutprodukte und der
Transfusionsstrategie seither wesentliche Veränderungen ergeben haben, haben wir diese Frage in Kooperation mit
der EBMT-Arbeitsgruppe unter besonderem Fokus auf die Qualität der Blutprodukte erneut aufgegriffen.
Wichtigste Ergebnisse
208
Inzidenz chronischer Transplantat-gegen-Wirt
Reaktion
(cGvHD) nach allogener HLAidenterGeschwisterspendertransplantation
(1995 – 2003)
bei Patienten mit erworbener
aplastischer Anämie stratifiziert
nach Alter und Stammzelllquelle
(aus: Schrezen -
meier et al., BLOOD 110:
1397 (2007). (PB: Periphere
Blutstammzellen;
BM: Knochenmark)
1. Stammzellquelle und Transplantation bei aplastischer Anämie: Diese gemeinsam mit der EBMT Aplastic Anemia
Working Party und dem Centre for International Blood and Marrow Transplant Research (CIBMTR) durchgeführte
Untersuchung zeigte, dass bei jungen Patienten (≤ 20 Jahre) mit peripheren Blutstammzellen eine höhere Rate
chronischer GvHD und erhöhte Mortalität besteht (5-Jahre-Überlebenswahrscheinlichkeit 73 % bzw. 85 % nach
Blutstammzell- bzw. Knochenmarktransplantation).
2. Entwicklung der Ergebnisse nach allogener Transplantation: Die Längsschnittuntersuchung zeigte, dass sich die
Ergebnisse nach allogener Transplantation sowohl von verwandten und insbesondere auch von nicht verwandten
Stammzellspendern deutlich verbessert hatten. Wesentliche prognostische Faktoren waren junges Alter, Transplantation
nach 1996, Transplantation von einem HLA-identen Geschwisterspender und ein kurzes Intervall zwischen
Diagnose und Transplantation.
3. Stammzelltransplantation bei PNH: Die 5-Jahres-Überlebenswahrscheinlichkeit bei HLA-identer Geschwistertransplantation
beträgt in der aktuellen Auswertung 70 %. Infektionen und GvHD waren die Haupttodesursachen.
In einer nicht transplantierten Kontrollgruppe betrug die 10-Jahres-Überlebenswahrscheinlichkeit 67,8 %. Auswertungen
zu prognostischen Parametern für die beiden Verfahren werden zur Zeit durchgeführt, um eine Entscheidungshilfe
für die Auswahl der geeigneten Therapie zu schaffen.
Insgesamt sind diese Ergebnisse für optimierte Indikationsstellung, Auswahl von Spender, Stammzellquelle und
Konditionierungsregime relevant.

Summary
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Major results of the recent projects in this field:
1. This joint study of the EBMT aplastic anemia working party and the CIBMTR demonstrated worse outcome and
more chronic GvHD with peripheral blood progenitor cells than bone marrow in HLA-matched sibling donor transplants
for young patients (≤ 20 years) with severe aplastic anaemia.
2. This study demonstrated improved outcome with time after both matched sibling donor and alternative donor
stem cell transplantation. In multivariate analysis favourable predictors were younger age, transplant beyond
1996, matched sibling donor transplant, short time between diagnosis and transplant and no irradiation in the
conditioning regimen.
3. In a current analysis of PNH transplants registered by the EBMT the 5-year probability of survival is 70 % after
HLA-matched sibling transplantation.
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie der PNH und hämatopoietischer Insuffizienz
Projektleiter Prof. Dr. H. Schrezenmeier
Mitarbeiter Dr. med. B. Höchsmann, Rosi Oneto (Data manager)
Kooperationen Prof. Dr. J. Passweg (Genf) und weitere Mitglieder der EBMT Working Party Aplastic Anemia
Prof. Dr. G. Socie, Dr. R. de Latour (Paris), Prof. J. Marsh (London), Dr. Mary Eapen (Milwaukee) und
weitere Mitarbeiter in der Aplastic Anemia Working Group der CIBMTR
Förderung EBMT
Laufzeit des Projektes seit 2003; aktuelle Studie zur Stammzelltransplantation bei PNH fortlaufend
Weitere Informationen
Locasciulli A., Oneto R., Bacigalupo A., Socie G., Korthof E., Bekassy A., Schrezenmeier H., Passweg J., Führer
M.; Servere aplastic anemia working party of the European Blood and Marrow Transplant Group: Outcome of patients
with acquired aplastic anemia given first line bone marrow transplantation or immunosuppressive treatment
in the last decade: a report from the European Group for Blood and Marrow Transplantation (EBMT). Haematologica
92: 11-18 (2007). . [IF 5,516]
McCann SR, Passweg JR, Bacigalupo A, Locasciulli A, Locatelli F, Ryan J, Schrezenmeier H, Lawler M (2007) The
influence of cyclosporin alone, or cyclosporin and methotrexate, on the incidence of mixed haematopoietic chimaerism
following allogeneic sibling bone marrow transplant for severe aplastic anaemia. Bone Marrow Transpl
39: 109-114. [IF 3,000]
Schrezenmeier H, Passweg JR, Marsh JCW, Bacigalupo A, Bredeson CN, Bullorsky E, Camitta BM, Champlin RE,
Gale RP, Führer M, Klein JP, Locasciulli A, Oneto R, Schattenberg AVMB, Socié G, Eapen M (2007) Worse outcome
and more chronic GVHD with peripheral blood progenitor cells than bone marrow in HLA-matched sibling
donor transplants for young patients with severe acquired aplastic anemia: Blood 110: 1397-1400. [IF 10,370]
Socié G, Mary JY, Schrezenmeier H, Marsh J, Bacigalupo A, Locasciulli A, Tichelli A, Passweg J (2007) Granulocyte-stimulating
factor and severe aplastic anemia: a survey by the European Group for Blood and Marrow Transplantation
(EBMT). Blood 109: 2794-2796. [IF 10,896]
McCann SR, Passweg JR, Bacigalupo A, Locasciulli A, Locatelli F, Ryan J, Schrezenmeier H, Lawler M (2007) The
influence of cyclosporin alone, or cyclosporin and methotrexate, on the incidence of mixed haematopoietic chimaerism
following allogeneic sibling bone marrow transplant for severe aplastic anaemia. Bone Marrow Transpl
39: 109-114. [IF 3,000]
Viollier R, Socié G, Tichelli A, Bacigalupo A, Korthof E, Marsh J, Cornish J, Ljungmann P, Oneto R, Bekassy A,
Führer M, Maury S, Schrezenmeier H, Lint MT van, Wojcik D, Locasciulli A, Passeg JR for the Working Party
Aplastic Anemia (WPSAA) of the European Group for Blood and Marrow Transplantation (EBMT) (2008) Recent
improvement in outcome of unrelated donor transplantation for aplastic anemia. Bone Marrow Transpl 41: 45-50.
[IF 3,000]
de Latour RP, Schrezenmeier H, Mary JY, and Socie G. Stem cell transplantation for paroxysmal nocurnal hemoglobinuria:
an ongoing EBMT Aplastic Anemia Working Party / SFH Study. Blood, Nov 2008; 112: 3442.
209

Forschungsbericht 2007 – 2008
Therapie der PNH
Hintergrund und Projektbeschreibung
Die paroxysmale nächtliche Hämoglobinurie (PNH) ist eine Erkrankung mit einem erworbenen oligoklonalen Stammzelldefekt
der Blutbildung. Sie manifestiert sich durch eine korpuskuläre hämolytische Anämie, eine thrombophile
Diathese und hämopoietische Insuffizienz. Die Prognose der Erkrankung war mit Überlebenswahrscheinlichkeiten
zwischen 50 % und 60 % 15 Jahre nach Diagnosestellung bislang sehr ungünstig.
Die Therapieoptionen bestanden bisher vor allem in Transfusionstherapie, Antikoagulation und allogener Stammzelltransplantation.
Seit kurzem steht mit dem C-5 Antikörper Eculizumab eine neue spezifische Therapieoption zur Verfügung.
Ziel dieses Projektes ist es, die verschiedenen Therapieoptionen für die PNH in Bezug auf Effizienz und
Sicherheit zu evaluieren.
210
PNH-pts
control group (n=29)
before eculizumab (n=15)
total without eculizumab (n=44)
during eculizumab therapy (n=13)
direct antiglobulin
test (DAT) negative
26
13
39
1
C3d positive
1
0
1
12
other DAT positive
findings
2
2
4
2
Patient unter Eculizumab-
Therapie mit C3c und C3d-
Beladung der Erythrozyten,
Ergebnisse direkter Antiglobulintest
von PNH-Patienten
ohne (n=28, Kontrollen) sowie
vor (n=15) und während
(n=13) Eculizumab-Therapie

Wichtigste Ergebnisse
Molekulare Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie
Die Arbeitsgruppe beteiligte sich an drei internationalen Multizenter-Studien zur Therapie der PNH: der TRIUMPH-,
SHEPHERD- und EXTENSION-Studie. Alle drei Studien sind zwischenzeitlich abgeschlossen. Diese Studien konnten
zeigen, dass der monoklonale Antikörper Eculizumab, der gezielt den Komplementfaktor C5 hemmt, zu einer signifikanten
Reduktion der Hämolyse mit einer Stabilisierung des Hämoglobins, einer Reduktion des Transfusionsbedarfs
und einer signifikanten Verbesserung der Lebensqualität führt. Es konnte gezeigt werden, dass unter Eculizumab-
Therapie das Risiko für thrombembolische Ereignisse reduziert ist. Außerdem konnte die Sicherheit und Effizienz von
Eculizumab in der Langzeittherapie nachgewiesen werden. Die Daten dieser Studien führten zwischenzeitlich zur
Zulassung des Antikörpers Eculizumab (Soliris) in den USA und Europa.
Zusätzlich ist die Arbeitsguppe auf nationaler Ebene Koordinator für das Internationale PNH-Register. Das
PNH-Register ist eine internationale Beobachtungstudie, die Daten zum natürlichen Verlauf der PNH, sowie zur
Sicherheit und Effizienz verschiedener Therapieoptionen sammelt (mindestens weitere fünf Jahre geplant).
Der aktuelle Schwerpunkt der Arbeit liegt auf der weiteren Optimierung der Therapiestrategien bei der PNH.
Neben der Auswertung der Daten zu Sicherheit und Effizienz der Stammzelltransplantation bei PNH-Patienten, die
gemeinsam mit der EBMT Aplastic Anemia Working Party durchgeführt wird, widmen wir uns verstärkt der neuen
C5-Antikörpertherapie mit Eculizumab.
In diesem Rahmen wurde der Mechanismus einer residuellen Hämolyse trotz kompletter terminaler Komplement -
inhibition, der bei einem Teil der Patienten auffällt, untersucht. Die Ergebnisse zeigen einen positiven Antiglobulintest
(bedingt durch eine C3d–Beladung der PNH-Erythrozyten) als regelhaften Befund (12 von 13 Patienten). Ein Patient
zeigte zusätzlich eine C3c–Beladung. Nur einer der 13 unter Eculizumab-Therapie untersuchten Patienten entwickelte
keinen postiven Coombs-Test. Dieser Patient erhielt die Therapie jedoch wegen thromembolischer Komplikationen
ohne eine transfusionsbedürftige hämolytische Anämie aufzuweisen. Vier PNH Patienten hatten
anti-erythrozytäre Allo-Antikörper (anti-D, -C, -E, -Lua, and -Kpa) und zwei von ihnen wiesen zusätzliche Wärmeautoantikörper
auf. Zwei Patienten, bei denen die Eculizumab-Therapie beendet wurde, zeigten zwei bis drei Monate
nach Therapieabschluss einen negativen Antiglobulintest. Folglich scheint der positive direkte Antiglobulintest unter
Eculizumab-Therapie eine reversible Eigenschaft zu sein. Die Therapie mit Eculizumab sollte daher zukünftig, insbesondere
bei C3c- und/oder C3d-Beladung, als neue Differntialdiagnose eines positiven Coombs-Testes in Erwägung
gezogen werden.
Summary
The working group participated in three international multi-centre trials for treatment of PNH: TRIUMPH, SHEPHERD
and EXTENSION-study: All three studies are closed now. These studies demonstrated that the monoclonal antibody
Eculizumab which inhibits complement factor C5 leads to a significant reduction of haemolysis, stabilization of
haemoglobin and reduce transfusion need as well as significant improvement of quality of life scores and reduction
of thromboembolic events. Long time safety and efficacy of Eculizumab was evaluated. The highly significant data
leads to approval of eculizumab (Soliris) in USA and Europe.
The working group is nationwide responsible for the PNH-registry an international observational study about the natural
course of PNH and safety and efficiency of various therapy options.
Furthermore, we examined a potential mechanism to explain residual haemolysis in some patients despite complete
blockade of the terminal complement cascade. A positive direct antiglobulin test (due to C3d loading of PNH RBC)
seems to be a consistent finding during eculizumab therapy. Eculizumab does not block the early stages of complement
activation and therefore C3 cleavage products may occur and bind to CD55/CD59-deficient RBC. The inhibition
of terminal membrane attack complex formation by eculizumab allows the survival of cells which otherwise undergo
a rapid intravascular haemolysis due to C5b-9 formation. The only patient with a negative antiglobulin test during
eculizumab therapy was treated for PNH-related thromboembolic events without having transfusion dependent
211

Forschungsbericht 2007 – 2008
haemolytic anaemia. 4 PNH pts (control group and before initiation of eculizumab therapy) had anti-erythrocytic alloantibodies
(anti-D, -C, -E, -Lua, and -Kpa) and two of them had additional warm auto-antibodies. Two pts. showed
two to three months after eculizumab treatment a negative antiglobulin test. Therefore DAT-positivity during eculizumab
therapy seems to be a reversible attribute. Therefore eculizumab-therapy should be taken into account as a new
differential diagnosis of a positive direct antiglobulin test.
Standort Ulm
Arbeitsgruppe Pathophysiologie, Diagnostik und Therapie der PNH und hämatopoietischer Insuffizienz
Projektleiter Prof. Dr. H. Schrezenmeier
Mitarbeiter Dr. med. B. Höchsmann, Prof. Dr. W. Flegel, Dr. M. Rojewski
Kooperationen Prof. P. Hillmen (Leeds), Prof. Flegel (Ulm), EBMT
Förderung Alexion Pharmaceuticals; International PNH Registry
Laufzeit des Projektes mindestens bis 2014
Weitere Informationen
212
Hillmen P., Young N.S., Schubert J., Brodsky R.A., Socié G., Muus P., Röth A., Szer J., Elebute M.O., Nakamura
R., Browne P., Risitano A.M., Hill A., Schrezenmeier H., Fu C.-L., Maciejewski J., Rollins S.A., Mojcik C.F., Rother
R.P., Luzzatto L.: The complement inhibitor eculizumab in paroxysmal nocturnal hemoglobinuria. N. Engl. J. Med.
355: 1233-1243 (2006)
Höchsmann B, Rojewski M, Flegel WA, and Schrezenmeier H. Monitoring of direct antiglobulin test, ferritin and
flow cytometric results in PNH-patients during eculizumab-therapy: extravascular hemolysis unmasked by the efficient
eculizumab-mediated inhibition of intravascular hemolysis. Blood, 112: 3440 (2008)
de Latour RP, Schrezenmeier H, Mary JY, and Socie G. Stem cell transplantation for paroxysmal nocurnal hemoglobinuria:
an ongoing EBMT Aplastic Anemia Working Party / SFH Study. Blood, 112: 3442 (2008)
Brodsky RA, Young NS, Antonioli E, Risitano AM, Schrezenmeier H, Schubert J, Gaya A, Coyle L, de CC, Fu CL,
Maciejewski JP, Bessler M, Kroon HA, Rother RP, and Hillmen P. Multicenter phase 3 study of the complement inhibitor
eculizumab for the treatment patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria. Blood 111(4),1840-
1847(2008).
Hillmen P, Muus P, Duhrsen U, Risitano AM, Schubert J, Luzzatto L, Schrezenmeier H, Szer J, Brodsky RA, Hill A,
Socie G, Bessler M, Rollins SA, Bell L, Rother RP, and Young NS. Effect of the complement inhibitor eculizumab
on thromboembolism in patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria. Blood 110(12),4123-4128 (2007).
Schrezenmeier H, Höchsmann B. Eculizumab opens a new era of treatment for paroxysmal nocturnal hemolglobinuria.
Exp. Reviews Hematol., 2(1), 7-16 (2009).
www.pnhregistry.org

Finanzierung der Forschung 2007 – 2008
Finanzierung der Forschung 2007 – 2008
Die Forschung des DRK-Blutspendedienstes Baden-Württemberg - Hessen wird finanziert durch Eigenmittel des Unternehmens,
durch die Universitäten Frankfurt, Heidelberg, Mannheim und Ulm sowie durch verschiedene Drittmittelgeber,
die nachfolgend aufgeführt sind:
Asahi Medical corp. (Japan)
Bayer Healthcare
BioRad (Frankreich)
Bundesministerium für Bildung und Forschung (BMBF)
Caridian BCT, Eurpoe NV
CSL-Behring
Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG)
Deutsche José Carreras Leukämie-Stiftung e.V.
Deutsche Krebshilfe e.V.
DiaMed (Schweiz)
Dr.- Mildred-Scheel-Stiftung der Deutschen Krebshilfe e.V.
Else-Kröner-Fresenius-Stiftung
Europäische Kommission
Europäische Union (EU)
Exzellenzcluster Cardio-Pulmonary Systems der DFG (ECCPS)
Fresenius Hemocare
Gesellschaft für Schwerionenforschung (GSI)
Gesellschaft für Thrombose- und Hämostaseforschung (GTH)
Landesstiftung Baden-Württemberg
MacoPharma
Marie-Curie-International Reintegration Grant der Europäischen Union
Novartis Pharma GmbH
Siemens Healthcare
Stiftung Hämotherapie-Forschung
Universität Heidelberg, Stiftungsmittel „Nachlass Herbert Dauss“
Universitätsklinikum der Johann Wolfgang Goethe Universität Frankfurt
Wilhelm-Sander-Stiftung
213

Forschungsbericht 2007 – 2008
Publikationen 2007 – 2008
1. Amirzargar AA, Naroueynejad M, Khosravi F, Dianat S, Rezaei
N, Mytilineos J, Nikbin B (2008): Cytokine single nucleotide
polymorphisms in Iranian populations.
Eur Cytokine Netw 19: 104-112. [IF 2,064]
2. Antoni S, Walz N, Landersz M, Humbert M, Seidl C, Dittmar
MT, Dietrich U: Genetic and biological characterization of
HIV-1 viruses derived from long-term non-progressors
(LTNP).
AIDS Res Hum Retorvir 2007:23811): 1377-1386. [IF 2,022]
3. AuBuchon JP, de Wildt-Eggen J, Dumont LJ for the Biomedical
Excellence for Safer Transfusion Collaborative and the
Transfusion Medicine Resource Committee of the College of
American Pathologists: (2008) Reducing the variation in performance
of antibody titrations.
Vox Sang, 95: 57-65. [IF 2,588]
4. Avent ND, Martinez A, Flegel WA, Olsson ML, Scott ML, Nogués
N, Pisaka M, Daniels G, Van der Schoot E, Muniz-Diaz
E, Madgett TE, Storry JR, Beiboer SH, Maaskant-van Wijk
PA, Zabern I von, Jiménez E, Tejedor D, López M, Camacho
E, Cheroutre G, Hacker A, Jinoch P, Svobodova I, de Haas
M (2007): The BloodGen project: toward mass-scale comprehensive
genotyping of blood donors in the European
Union and beyond.
Transfusion 47: 40S-46S. [IF 3,374]
5. Assmus B, Fischer-Rasokat U, Honold J, Seeger FH,
Fichtlscherer S, Tonn T, Seifried E, Schaechinger V, Dimmeler
S, Zeiher AM (2007):Transcoronary transplantation of
functionally competent BMCs is associated with a decrease
in natriuretic peptide serum levels and improved survival of
patients with chronic postinfarction heart failure: results of
the TOPCARE-CHD Registry.
Circ Res ;27:100(8):1234-41. [IF 9,408]
6. Bartel M, Hansch GM, Giese T, Penzel R, Ceyhan G, Ketterer
K, von Knebel-Doberitz M, Friess HM, and Giese NA
(2008): Abnormal crosstalk between pancreatic acini and
macrophages during the clearance of apoptotic cells in
chronic pancreatitis.
J Pathol 215:195-203. [IF 6,213]
7. Bekeredjian-Ding I, Inamura S, Giese T, Moll H, Endres S,
Sing A, Zahringer U, and G. Hartmann G (2007): Staphylococcus
aureus protein A triggers T cell-independent B cell
proliferation by sensitizing B cells for TLR2 ligands.
J Immunol 178:2803-2812. [IF 6,387]
8. Bhat R, Watzl C (2007): Serial Killing of Tumor Cells by
Human Natural Killer Cells - Enhancement by Therapeutic
Antibodies.
PLoS ONE, 2(3): e326. doi:
10.1371/journal.pone.0000326
9. Bieback K, Schallmoser K, Klüter H, Strunk D: Clinical Protocols
for the Isolation and Expansion of Mesenchymal
Stromal Cells.
Transf Med Hemother: 35(4): 286-295 (2008). [IF 0,452]
10. Binder H, Flegel WA, Emran J, Müller A, Cupisti S, Beckmann
MW, Eckstein R, Dittrich R, Ringwald J (2008): Blood
group A: an overseen risk factor for early-onset ovarian hyperstimulation
syndrome?
Reprod Biomed Online 17: 185-189. [IF 2,840]
11. Binder H, Flegel WA, Emran J, Müller A, Dittrich R, Beckmann
MW, Zingsem J, Eckstein R, Ringwald J (2008): Association
of blood group A with early-onset ovarian
hyerstimulation syndrome.
Transfus Clin Biol 15: 395-401. [IF 1,138]
12. Bistrian R, Dorn A, Möbest D, Rüster B, Ludwig R, Scheele
J, Seifried E, Martin H, Henschler R: Shear Stress-Mediated
Adhesion of Acute Myeloid Leukemia (AML) and KG-1 Cells
214
to Endothelial Cells Involves Functional P-selectin.
Stem Cells Dev. 2008 Dec 23. Epub. [IF 3,224]
13. Bönig H, Chang KH, Geisen C, Seifried E, Ware C (2008):
Blood types of current embryonic stem cell lines are not
suitable for culturing „universal donor” RBCs.
Transfusion 48:1039-1040. [IF 3.374]
14. Bönig H, Chudziak D, Priestley G, Papayannopoulou T
(2008): Insights into the biology of mobilized hematopoietic
stem/progenitor cells (HSPC) through innovative treatment
schedules of the CXCR4 antagonist AMD3100.
Exp Hematol. Epub. [IF 3,147]
15. Bönig H, Priestley G, Wohlfahrt ME, Kiem HP, Papayannopoulou
T (2008): Blockade of alpha6-integrin reveals diversity
in homing patterns between human, non-human primate
and murine cells.
Stem Cells Dev (e-published October 8, 2008). [IF 3,224]
16. Bönig H, Priestley GV, Oehler V, Papayannopoulou T (2007):
Hematopoietic Progenitor Cells (HPC) from Mobilized Peripheral
Blood Display Enhanced Migration and Marrow Homing
Compared to Steady-State Bone Marrow HPC:
Exp Hematol 35:287-295. [IF 3,147]
17. Bönig H, Watts K, Chang KH, Kiem HP, Papayannopoulou T
(2008): Concurrent blockade of 4-integrin and CXCR4 in
hematopoietic stem/progenitor cell mobilization.
Stem Cells. Epub. [IF 7,531]
18. Bönig H, Wundes A, Chang HK, Lucas S, Papayannopoulou
T (2008): Increased numbers of circulating hematopoietic
stem/progenitor cells (HSPC) are chronically maintained in
patients treated with the CD49d blocking antibody Natalizumab.
Blood 111:3439-3441. [IF 10,896]
19. Bönig H, Wundes A, Papayannopoulou T (2008): More about
multiple sclerosis, natalizumab and CD34+ hematopoietic
progenitors.
Blood 48:1039-40. [IF 10,896]
20. Braunstein J, Autschbach F, Giese T, Lasitschka F, Heidtmann
A, Sido B, Funke B, Reiser C, Schroder AJ, Nebl G,
Samstag Y, and Meuer SC (2008): Up-regulation of the
phosphoinositide 3-kinase pathway in human lamina propria
T lymphocytes.
Clin Exp Immunol 151:496-504. [IF 2,805]
21. Brixner V, Richter R, Bader P, Seifried E, and Seidl C (2008):
A new HLA-B*08 allele, HLA-B*0828, found in two voluntary
stem cell donors.
Tissue Antigens 71, 482-483. [IF 2,245]
22. Brodsky RA, Young NS, Antonioli E, Rotoli B, Schrezenmeier
H, Schubert J, Urbano-Ispizua A, et al (2008): Multicenter
phase III study of the complement inhibitor eculizumab for
the treatment of patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria.
Blood 111: 1840-1847. [IF 10,896]
23. Bug G, Konstantinos A, Tonn T, Bialleck H, Seifried E, Hoelzer
D, Ottmann O: Impact of leukapheresis on early death
rate in adult acute myeloid leukemia presenting with hyperleukocytosis.
Transfusion 2007;10:1843-50. [IF 3,160]
24. Bug G, Schwarz K, Schoch C, Kampfmann M, Henschler R,
Hoelzer D, Ottmann OG, Ruthardt M: Effect of histone deacetylase
inhibitor valproic acid on progenitor cells of acute
myeloid leukemia.
Haematologica. 2007 Apr; 2(4):542-5. [IF 5,516]
25. Bugert P, Pabinger I, Stamer K, Vormittag R, Skeate RC,
Wahi MM, Panzer S (2007): The risk for thromboembolic

disease in lupus anticoagulant patients due to pathways involving
P-Selectin and CD154.
Thromb Haemost 97: 573-580. [IF 3,501]
26. Bugert P, Scharberg EA, Janetzko K, Rink G, Panter K, Richter
E, Klüter H (2008): A novel variant B allele of the ABO
blood group gene associated with lack of B antigen expression.
Transfusion Med Immunother 35: 319-323. [IF 0,452]
27. Byrd A, Hoffmann SC, Jarahian M, Momburg F, Watzl C
(2007): Expression Analysis of the Ligands for the Natural
Killer Cell Receptors NKp30 and NKp44.
PLoS ONE 2(12): e1339. doi:10.1371/journal.pone.0001339
28. Candotti D, Grabarczyk P, Ghiazza P, Roig R, Casmitjana M,
Iudicone P, Schmidt M, Bird A, Crookes R, Broijer E, Miceli
M, Amiri A, Li C, Allain JP: Characterization of occult hepatitis
B virus from blood donors carrying genotype A2 or genotype
D strains.
J Hepatol 2008, 49(4):537-547. [IF 6,642]
29. Cario H, Schwarz K, Herter JM, Komrska V, McMullin MF,
Minkov M, Niemeyer C, Pospisilova D, Reinhard H, Debatin
KM, Pahl HL (2008): Clinical and molecular characterisation
of a prospectively collected cohort of children and adolescents
with polycythemia vera.
Br J Haematol 142: 622-626. [IF 4.490]
30. Carmona G, Göttig S, Orlandi A, Scheele J, Bäuerle T, Jugold
M, Kiessling F, Henschler R, Zeiher AM, Dimmeler S,
Chavakis E: Role of the small GTPase Rap1 for integrin activity
regulation in endothelial cells and angiogenesis.
Blood. 2009 Jan 8;113(2):488-97.
Epub 2008 Sep 19. [IF 10,896]
31. Cerwenka A, Falk CS, Watzl C (2007): Natural Killer Cells -
from basic research to cancer therapy.
Eur. J. Immunol., 37, 1161-1164. [IF 4,7]
32. Ceyhan GO, Bergmann F, Kadihasanoglu M, Erkan M, Park
W, Hinz U, Giese T, Muller MW, Buchler MW, Giese NA, and
Friess H (2007): The neurotrophic factor artemin influences
the extent of neural damage and growth in chronic pancreatitis.
Gut 56:534-544. [IF 7,692]
33. Chavakis E, Carmona G, Urbich C, Göttig S, Henschler R,
Penninger JM, Zeiher AM, Chavakis T, Dimmeler S: Phosphatidylinositol-3-kinase-gamma
is integral to homing
functions of progenitor cells.
Circ Res. 2008 Apr 25; 102(8):942-9. [IF 9,721]
34. Chen J, Schmitt A, Chen B, Rojewski M, Ringhoffer M,
Harsdorf S von, Greiner J, Guillaume P, Döhner H, Bunjes D,
Schmitt M (2007): Imatinib impairs CD8+ T lymphocytes
specifically directed against the leukemia-associated antigen
RHAMM/D168 in vitro.
Cancer Immunol Immunother 56: 849-861. [IF 3,728]
35. Chen J, Schmitt A, Chen B, Rojewski M, Ruesseler V, Fei F,
Yu Y, Vao J, Yu X, Ringhoffer M, Harsdorf S von, Greiner J,
Goetz M, Guillaume P, Doehner H, Bunjes D, Schmitt M
(2008): Nilotinib hampers the proliferation and function of
CD8+ T lymphocytes through inhibition of T cell receptor
signaling.
J Cell Mol Med 12: 2107-2118. [IF 6,807]
36. Chen J, Schmitt A, Giannopoulos K, Chen B, Rojewski M,
Döhner H, Bunjes D, Schmitt M (2007): Imatinib impairs the
proliferation and function of CD4+CD25+ regulatory T cells
in a dose-dependent manner.
Int J Oncol 31: 1133-1139. [IF 2,295]
37. Chudziak D, Sireis W, Pfeiffer HU, Henschler R, Seifried E,
Bönig H (2008): Accumulation of soluble inflammatory mediators
between blood donation and prestorage leukocyte
depletion.
Vox Sang. Epub ahead of print. [IF 2.588]
Publikationen 2007 – 2008
38. Claus M, Meinke S, Bhat R, Watzl C (2008): Regulation of
NK cell activity by 2B4, NTB-A and CRACC.
Front Biosci., 13, 956-965. [IF 3,0]
39. Daegelmann C, Herberth G, Roder S, Herbarth O, Giese T,
Kramer U, Behrendt H, Borte M, Heinrich J, Emmrich F, and
Lehmann I (2008): Association between suppressors of cytokine
signalling, T-helper type 1/T-helper type 2 balance
and allergic sensitization in children.
Clin Exp Allergy 38:438-448. [IF 3,553]
40. Daniels G, Flegel WA, Fletcher A et al (2007): International
Society of Blood Transfusion Committee on Terminology for
Red Cell Surface Antigens: Cape Town Report.
Vox Sang 92: 250-253. [IF 2,588]
41. Danzer M, Polin H, Schroder S, Mytilineos J, Gabriel C
(2007): HLA-Cw*0740, a new allele mistyped by generic sequencing
and identified by allelic separation.
Tissue Antigens 69: 100-102. [IF 2,245]
42. Dausend J, Musyanovych A, Dass M, Walther P, Schrezenmeier
H, Landfester K, Mailänder V (2008): Uptake mechanism
of oppositely charged fluorescent nanoparticles in
HeLa cells.
Macromol Biosci 8: 1135-1143. [IF 2,831]
43. Delev D, Pavlova A, Heinz S, Blaise MC, Chandra T, Poetsch
B, Seifried E, Oldenburg J (2008): Modelling and expression
studies of two novel mutations causing factor V deficiency.
Thromb Haemost. 100(5):766-72. [IF 5,947]
44. Denomme GA, Flegel WA (2008): Applying molecular immunohematology
discoveries to standards in blood banks, now
is the time.
Transfusion 48: 2461-2475. [IF 3,374]
45. Doss F, Menard J, Hauschild M, Kreutzer HJ, Mittlmeier T,
Müller-Steinhardt M, Müller B: (2007) Elevated IL-6 levels in
the synovial fluid of osteoarthritis patients stem from plasma
cells.
Scand J Rheumatol 36 : 136-139. [IF 2,640]
46. Eichler H, Nguyen XD, Roelen D, Celluzzi CM, McKenna D,
Pamphilon D, Blair A, Read EJ, Takahashi TA, Szczepiorkowski
ZM: Biomedical Excellence for Safer Transfusion
Collaborative. Multicenter study on in vitro characterization
of dendritic cells.
Cytotherapy 2008; 10:21-29. [IF 3,553]
47. Endt J, Eissmann P, Hoffmann SC, Meinke S, Giese T, and
Watzl C (2007): Modulation of 2B4 (CD244) activity and regulated
SAP expression in human NK cells.
Eur J Immunol 37:193-198. [IF 4,876]
48. Endt J, McCann FE, Almeida CR, Urlaub D, Leung R, Pende
D, Davis DM, Watzl C (2007): Inhibitory receptor signals
suppress ligation-induced recruitment of NKG2D to GM1rich
membrane domains at the human NK cell immune synapse.
J. Immunol., 178, 5606-5611. [IF 6,1]
49. Erbs S, Linke A, Schaechinger V, Assmus B, Thile H, Diederich
KW, Hoffmann K, Dimmeler S, Tonn T, Hambrecht R,
Zeiher A, Schuler G: Restoration of microvascular function
in the infarct-related artery by intracoronary transplantation
of bone marrow progenitor cells in patients with acute myocardial
infarction: the „doppler substudy“ of the REPAIR-
AMI trial.
Circulation. Epub ehead of print. [IF 11,632]
50. Erkan M, Kleeff J, Gorbachevski A, Reiser C, Mitkus T,
Esposito I, Giese T, Buchler MW, Giese NA, and Friess H
(2007): Periostin creates a tumor-supportive microenvironment
in the pancreas by sustaining fibrogenic stellate cell
activity.
Gastroenterology 132:1447-1464. [IF 12,386]
215

Forschungsbericht 2007 – 2008
51. Esposito I, Kayed H, Keleg S, Giese T, Sage EH, Schirmacher
P, Friess H, and Kleeff J (2007): Tumor-suppressor
function of SPARC-like protein 1/Hevin in pancreatic cancer.
Neoplasia 9:8-17. [IF 3,850]
52. Fatar M, Stroick M, Griebe M, Marwedel I, Kern S, Bieback
K, Giesel FL, Zechmann C, Kreisel S, Vollmar F, Alonso A,
Back W, Meairs S, Hennerici MG: Lipoaspirate-derived adult
mesenchymal stem cells improve functional outcome during
intracerebral hemorrhage by proliferation of endogenous
progenitor cells stem cells in intracerebral hemorrhages.
Neurosci Lett 443(3):174-8 (2008). [IF 2,085]
53. Fatar M, Stroick M, Steffens M, Senn E, Reuter B, Bukow S,
Griebe M, Alonso A, Lichtner P, Bugert P, Meitinger T, Wienker
TF, Hennerici MG: Single-Nucleotide Polymorphisms of
MMP-2 Gene in Stroke Subtypes.
Cerebrovasc Dis 26: 113-119 (2008). [IF 2,534]
54. Fei F, Yu Y, Schmitt A, Rojewski MT, Chen B, Greiner J, Götz
M, Guillaume P, Döhner H, Bunjes D, Schmitt M: (2008) Dasatinib
exerts an immunosuppressive effect on CD8(+) T
cells specific for viral and leukaemia antigens.
Exp Hematol 36: 1297-1308. [IF 3,147]
55. Fink T, Sedlaczek H, Nguyen D, Blau W, Jackisch C: Lebensbedrohliche
intrakranielle Blutung in der 28. Schwangerschaftswoche
als Folge einer
Autoimmunthrombozytopenie – Ein Fallbericht.
Geburtsh Frauenheilk 67: 1–5 (2007). [IF 0,502]
56. Flegel W, Zabern I von, Doescher A, Wagner FF, Vytisková J,
Pisacka M (2008): DCS-1, DCS-2, and DFV share amino
acid substitutions at the extracellular RhD protein vestibule.
Transfusion 48: 25-33. [IF 3,374]
57. Flegel WA (2007): Blood group genotyping in Germany.
Transfusion 47: 47S-53S. [IF 3,278]
58. Flegel WA (2007): Donor selection: Germany.
Transfusion Today 72: 20-21.
59. Flegel WA (2007): Genetik des Rhesus-Blutgruppensystems.
Deutsches Ärzteblatt 104 (Heft 10): A651-A657.
60. Flegel WA (2007): Will MICA glitter for recipients of kidney
transplants?
New Engl J Med 357: 1337-1339. [IF 52,589]
61. Flegel WA (2008): A rewarding fresh look at routine blood
group data (Editorial).
Blood Transfus 6: 182-183.
62. Flegel WA, Denomme GA, Yazer MH (2007): On the complexity
of D antigen typing: a handy decision tree in the age of
molecular blood group diagnostics.
J Obstet Gynaecol Can 29: 746-752.
63. Frank B, Bermejo JL, Hemminki K, Sutter C, Wappenschmidt
B, Meindl A, Kiechle M, Bugert P, Schmutzler RK,
Bartram CR, Burwinkel B: Copy number variant in the candidate
tumor suppressor gene MTUS1 and familial breast
cancer risk.
Carcinogenesis 28: 1442-1445 (2007). [IF 5,406]
64. Frank B, Hemminki K, Meindl A, Wappenschmidt B, Sutter
C, Kiechle M, Bugert P, Schmutzler RK, Bartram CR, Burwinkel
B: PRIP1 (BACH1) variants and familial breast cancer
risk: a case-control study.
BMC Cancer 7: 83 (2007). [IF 2,709]
65. Frank B, Rigas SH, Bermejo JL, Wiestler M, Wagner K,
Hemminki K, Reed MW, Sutter C, Wappenschmidt B, Balasubramanian
SP, Meindl A, Kiechle M, Bugert P, Schmutzler
RK, Bartram CR, Justenhoven C, Ko YD, Bruning T, Brauch
H, Hamann U, Pharoah PP, Dunning AM, Pooley KA, Easton
DF, Cox A, Burwinkel B: The CASP8 -652 6N del promoter
polymorphism and breast cancer risk: a multicenter study.
Breast Cancer Res Treat 111: 139-144 (2008). [IF 4,453]
216
66. Frank B, Wiestler M, Kropp S, Hemminki K, Spurdle AB,
Sutter C, Wappenschmidt B, Chen X, Beesley J, Hopper JL;
Australian Breast Cancer Family Study Investigators, Meindl
A, Kiechle M, Slanger T, Bugert P, Schmutzler RK, Bartram
CR, Flesch-Janys D, Mutschelknauss E, Ashton K, Salazar
R, Webb E, Hamann U, Brauch H, Justenhoven C, Ko YD,
Brüning T, Silva Idos S, Johnson N, Pharoah PP, Dunning
AM, Pooley KA, Chang-Claude J, Easton DF, Peto J, Houlston
R; Gene Environment Interaction and Breast Cancer in
Germany Group, Kathleen Cuningham Foundation Consortium
for Research into Familial Breast Cancer Investigators,
Australian Ovarian Cancer Study Management Group, Chenevix-Trench
G, Fletcher O, Burwinkel B: Association of a
common AKAP9 variant with breast cancer risk: a collaborative
analysis.
J Natl Cancer Inst 100: 437-442 (2008). [IF 15,678]
67. Friesen C, Glatting G, Koop B, Schwarz K, Morgenstern A,
Apostlidis C, Debatin KM, Reske SN (2007): Breaking chemoresistance
and radioresistance with [213Bi]anti-CD45 antibodies
in leukemia cells.
Cancer Res 67: 1950-1958. [IF 7,672]
68. Friesen C, Uhl M, Pannicke U, Schwarz K, Miltner E, Debatin
K-M (2008): DNA-ligase IV and DNA-protein kinase play
a critical role in deficient caspases activation in apoptosisresistant
cancer cells by using doxorubicin.
Mol Biol Cell 19: 3283-3289. [IF 6,028]
69. Gille J, Heidenreich R, Pinter A, Schmitz J, Boehme B, Hicklin
DJ, Henschler R, Breier G: Simultaneous blockade of
VEGFR-1 and VEGFR-2 activation is necessary to efficiently
inhibit experimental melanoma growth and metastasis formation.
Int J Cancer. 2007 May 1;120(9):1899-908. [IF 4.56]
70. Glaschick S, Röcker C, Deutschle K, Wiedenmann J, Oswald
F, Mailänder V, Nienhaus GU (2008): Axial resolution
enhancement by 4PI confocal fluorescence microscopy with
two-photon excitation.
J Biol Phys, online paper DOI 10.1007/s10867-008-9084-1.
[IF 0,695]
71. Gleissner CA, Zastrow A, Klingenberg R, Kluger MS, Konstandin
M, Celik S, Haemmerling S, Shankar V, Giese T,
Katus HA, and Dengler TJ (2007): IL-10 inhibits endothelium-dependent
T cell costimulation by up-regulation of
ILT3/4 in human vascular endothelial cells.
Eur J Immunol 37:177-192. [IF 4,876]
72. Goessler UR, Bugert P, Bieback K, Stern-Straeter J, Bran G,
Hörmann K, Riedel F: Integrin expression in stem cells from
bone marrow and adipose tissue during chondrogenic differentiation.
Int J Mol Med 21: 271-279 (2008). [IF 1,847]
73. Gu J, Lu H, Tsai AG, Schwarz K, Lieber MR (2007): Singlestranded
DNA ligation and XLF stimulated incompatible
DNA end ligation by the XRCC4-DNA ligase IV complex: influence
of terminal DNA sequence.
Nucleic Acids Res 35: 5755-5762. [IF 6,954]
74. Guo KT, Schäfer R, Paul A, Ziemer G, Wendel HP (2007):
Aptamer-based strategies for stem cell research.
Mini-Reviews in Medicinal Chemistry 7(7): 701-705.
[IF 3,060]
75. Haas J, Schopp L, Storch-Hagenlocher B, Fritzsching B, Jacobi
C, Milkova L, Fritz B, Schwarz A, Suri-Payer E, Hensel
M, Wildemann B (2008): Specific recruitment of regulatory T
cells into the CSF in lymphomatous and carcinomatous meningitis.
Blood 111(2):761-6. [IF 10,896]
76. Heimpel H, Kohne E, Schrod L, Schwarz K, Wickramasinghe
S (2007): A new type of transfusion-dependent congenital
dyserythropoietic anemia.
haematologica - The Hematology Journal 92: 1427-1428.
[IF 5,516]

77. Henschler R, Deak E, Seifried E: Homing of Mesenchymal
Stem Cells.
Transfus Med Hemother. 2008;35:306–312.
78. Hermann FG, Martinius H, Egelhofer M, Giroglou T, Tonn T,
Roth SD, Zahn R, Schult-Dietrich P, Alexandrov A, Dietrich
U, Baum C, von Laer D: Protein scaffold and expression
level determine antiviral activity of membrane-anchored antiviral
peptides.
Hum Gene Ther. 2008 Dec 29. Epub ahead of print.
[IF 4,079]
79. Hershkovitz O, Jarahian M, Bar-Ilan A, Zilka A, Jivov S, Tekoah
Y, Glicklis R, Hoffmann S, Mandelboim O, Watzl C,
Momburg F, and Porgador A (2008): Aberrant glycosylation
of recombinant NKp30 hampers the binding to heparan sulfate:
a lesson for the use of recombinant immuno-receptors
as an immunological tool.
J. Glycobiol., 18, 28-41. [IF 3,9]
80. Hillmen P, Muus P, Dührsen U, Risitano AM, Schubert J,
Luzzatto L, Schrezenmeier H, Szer J, Brodsky RA, Hill A,
Socié G, Bessler M, Rollins SA, Bell L, Rother RP, Young NS
(2007): Effect of the complement inhibitor eculizumab on
thromboembolism in patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria.
Blood 110: 4123-4128. [IF 10,896]
81. Hirv K, Bloch M, Fischer M, Schrezenmeier H, Mytilineos J
(2007): HLA-DRB1 allele and DRB1-DQB1 haplotype frequency
as prediction criterion for the duration of an unrelated
blood stem cell donor search. Visuals of the 8th
European Clinical Histocompatibility Workshop, pp 34-35.
82. Hoffmann MM, Bugert P, Seelhorst U, Wellnitz B, Winkelmann
BR, Boehm BO, März W: The –50G>T polymorphism
of the CYP2J2 gene in coronary heart disease: the Ludwigshafen
Risk and Cardiovascular Health Study.
Clin Chem 53: 539-540 (2007). [IF 4,803]
83. Hoffmann SC, Schellack C, Textor S, Konold S, Schmitz D,
Cerwenka A, Pflanz S, Watzl C (2007): Identification of
CLEC12B, an inhibitory receptor on myeloid cells.
J Biol Chem. 282, 22370-22375. [IF 5,6]
84. Hönig M, Albert MH, Schulz A, Sparber-Sauer M, Schütz C,
Belohradsky B, Güngör T, Rojewski MT, Bode H, Pannicke
U, Lippold D, Schwarz K, Debatin K-M, Hershfield MS,
Friedrich W (2007): Patients with adenosine deaminase deficiency
surviving after hematopoietic stem cell transplantation
are at high risk of CNS complications.
Blood 109: 3595-3602. [IF 10,896]
85. Hourfar MK, Jork C, Schottstedt V, Weber-Schehl M, Brixner
V, Busch MP, Geusendam G, Gubbe K, Mahnhardt C, Mayr-
Wohlfart U, Pichl L, Roth WK, Schmidt M, Seifried E, Wright
DJ for the German Red Cross NAT Study Group (2008): Experience
of German Red Cross blood donor services with
nucleic acid testing: results of screening more than 30 million
blood donations for human immunodeficiency virus 1,
hepatitis C virus, and hepatitis B virus.
Transfusion 48: 1558-1566. [IF 3,374]
86. Hourfar MK, Koller M, Roth WK, Kehrli R, Seifried E,
Schmidt M: Balance module allows consistent monitoring
and documentation of the pooling process for nucleic acid
amplification technology testing.
Vox Sang 2007;93(1):37-41. [IF 2,588]
87. Hourfar MK, Themann A, Eickmann M, Puthavathana, Laue
T, Seifried E and Schmidt M: Blood screening for influenza.
Emerging infectious diseases 2007;13(7): 1081-83. [IF 5,094]
88. Hourfar MK, Walch LA, Geusendam G, Dengler T, Janetzko
K, Gubbe K, Frank K, Karl A, Löhr M, Sireis W, Seifried E,
Schmidt M: Sensitivity and specificity of anti-HBc screening
assays – which assay is best for blood donor screening?
Int J Lab Hematol 2008, 30.
Publikationen 2007 – 2008
89. Hustinx H, Poole J, Bugert P, Gowland P, Still F, Fontana S,
Scharberg EA, Tilley L, Daniels G, Niederhauser C (2008):
Molecular basis of the Rh antigen RH48 (JAL).
Vox Sang. Epub. [IF 1,888]
90. Ivaskevicius V, Seitz R, Kohler HP, Schroeder V, Muszbek L,
Ariens RA, Seifried E, Oldenburg J; Study Group (2007) International
registry on factor XIII deficiency: a basis formed
mostly on European data.
Thromb Haemost. 97(6):914-21. [IF 5,947]
91. Ivaskevicius V, Windyga J, Baran B, Bykowska K, Daugela
L, Watzka M, Seifried E, Oldenburg J (2008): The first case
of combined coagulation factor V and coagulation factor VIII
deficiency in Poland due to a novel p.Tyr135Asn missense
mutation in the MCFD2 gene.
Blood Coagul Fibrinolysis. 19(6):531-534. [IF 1,373]
92. Ivaskevicius V, Windyga J, Baran B, Schroeder V, Junen J,
Bykowska K, Seifried E, Kohler HP, Oldenburg J. (2007):
Phenotype-genotype correlation in eight Polish patients with
inherited Factor XIII deficiency: identification of three novel
mutations.
Haemophilia. 13(5):649-57. [IF 1,947]
93. Jacobi C, Hähnel S, Martinez-Torres F, Rieger S, Jüttler E,
Heiland S, Jarius S, Meyding-Lamadè U, Storch-Hagenlocher
B, Wildemann B (2008): Prospective combined brain
and spinal cord MRI in clinically isolated syndromes and
possible early multiple sclerosis: impact on dissemination in
space and time.
Eur J Neurol 15(12):1359-64, [IF 2,580]
94. Jacobi C, Lange P, Reiber H (2007): Quantitation of intrathecal
antibodies in cerebrospinal fluid of subacute sclerosing
panencephalitis, herpes simplex encephalitis and multiple
sclerosis: discrimination between microorganism–driven and
polyspecific immune response.
J Neuroimmunol 187(1-2):139-146. [IF 2,920]
95. Jacobi C, Müller HD, Korporal M, Back T, Wildemann B
(2008): Mononeuropathy multiplex due to treatment with interferon-
and ribavirin in a patient with hepatitis C.
Eur J Neurol 15(6):e55-6. [IF 2,580]
96. Jacobi C, Wildemann B (2008): CME: Rheumatologische Erkrankungen.
Differenzierte Diagnostik bei Beteiligung des
Nervensystems.
Der Neurologe & Psychiater 9 (11):27-34,
97. Jaganathan BG, Ruester B, Dressel L, Stein S, Grez M, Seifried
E, Henschler R: Rho inhibition induces migration of
mesenchymal stromal cells.
Stem Cells. 2007 Aug;25(8):1966-74.
Epub 2007 May 17 [IF 7.53]
98. Jagielski N, Sharma S, Hombach V, Mailänder V, Rasche V,
Landfester K (2007): Nanocapsules synthesized by miniemulsion
technique for application as new contrast agent
materials.
Macromol Chem Phys 208: 2229-2231. [IF 2,021]
99. Jarahian M, Watzl C, Jasmin I, Altevogt P, Momburg F
(2007): Blockade of natural killer cell-mediated lysis by
NCAM140 expressed on tumor cells.
Int. J. Cancer., 120, 2625-2634. [IF 4,6]
100. Kälsch T, Elmas E, Nguyen XD, Kralev S, Leweling H, Klüter
H, Dempfle CE, Borggrefe M: Effects of alimentary lipemia
and inflammation on platelet CD40-ligand.
Thromb Res. 2007;120:703-8. [IF 2,038]
101. Kälsch T, Elmas E, Nguyen XD, Leweling H, Klüter H, Borggrefe
M, Dempfle CE: Alimentary lipemia enhances procoagulatory
effects of inflammation in patients with a history of
acute myocardial infarction complicated by ventricular fibrillation.
Int J Cardiol. 2008;123:131-7. [IF 2,878]
217

Forschungsbericht 2007 – 2008
102. Kälsch T, Elmas E, Nguyen XD, Suvajac N, Klüter H, Borggrefe
M, Dempfle CE: Endotoxin-induced effects on platelets
and monocytes in an in vivo model of inflammation.
Basic Res Cardiol 102: 460-466 (2007). [IF 4,333]
103. Kapp M, Stevanovi S, Fick K, Tan SM, Loeffler J, Opitz A,
Tonn T, Stuhler G, Einsele H, Grigoleit GU: CD8(+) T-cell responses
to tumor-associated antigens correlate with superior
relapse-free survival after allo-SCT.
Bone Marrow Transplant. 2009 Jan 12.
Epub ahead of print. [IF 3,0]
104. Karamatic Crew V, Mallinson G, Green C, Poole J, Uchikawa
M, Tani Y, Geisen C, Oldenburg J, Daniels G (2007): Different
inactivating mutations in the LU genes of three individuals
with the Lutheran-null phenotype.
Transfusion 47(3):492-8. [IF 3.374
105. Karo O, Wahl A, Nicol SB, Brachert J, Lambrecht B, Spengler
HP, Nauwelaers F, Schmidt M, Schneider CK, Müller TH
and Montag T: Bacteria detection by flow cytometry.
Clin Chem Lab Med 2008;46(7):947–953. [IF 1,741]
106. Kayed H, Bekasi S, Keleg S, Michalski CW, Giese T, Friess
H, and Kleeff J (2007): BGLAP is expressed in pancreatic
cancer cells and increases their growth and invasion.
Mol Cancer 6:83. [IF 3,693]
107. Kayed H, Jiang X, Keleg S, Jesnowski R, Giese T, Berger
MR, Esposito I, Lohr M, Friess H, and Kleeff J. (2007): Regulation
and functional role of the Runt-related transcription
factor-2 in pancreatic cancer. Br J Cancer 97:1106-1115. [IF
4,115]
108. Kayed H, Kleeff J, Keleg S, Felix K, Giese T, Berger MR,
Buchler MW, and Friess H (2007): Effects of bone sialoprotein
on pancreatic cancer cell growth, invasion and metastasis.
Cancer Lett 245:171-183. [IF 3,049]
109. Keleg S, Kayed H, Jiang X, Penzel R, Giese T, Buchler MW,
Friess H, and Kleeff J (2007): Adrenomedullin is induced by
hypoxia and enhances pancreatic cancer cell invasion.
Int J Cancer 121:21-32. [IF 4,700]
110. Kläffling C, Großmann R, Geisen C, Lindhoff-Last E, Seifried
E und Müller MM: Hämorrhagische Diathesen – Teil 2: „Gerinnung
praktisch“ an den Beispielen disseminierte intravasale
Gerinnung (DIC) und erworbene
Hemmkörper-Hämophilie.
Hämotherapie 2007;10:36-49.
111. Klaffschenkel RA, Biesemeier A, Waidmann M, Northoff H,
Steurer W, Königsrainer A, Lembert N (2007): A closed system
for islet isolation and purification using the COBE2991
cell processor may reduce the need of clean room facilities.
Cell Transplantation, 16(6):587-94. [IF 3,871]
112. Klarmann D, Martinez Saguer I, Funk MB, Knoefler R, von
Hentig N, Heller C, Kreuz W: Immune tolerance induction
with mycophenolate-mofetil in two children with haemophilia
B and inhibitor.
Haemophilia. 2008; 14(1):44-9. [IF 1,947]
113. Kocaoemer A, Kern S, Klüter H, Bieback K: Human AB
serum and thrombin-activated platelet-rich plasma are suitable
alternatives to fetal calf serum for the expansion of mesenchymal
stem cells from adipose tissue.
Stem Cells 25(5): 1270-8 (2007). [IF 7,531]
114. Kolb A, Kleeff J, Arnold N, Giese NA, Giese T, Korc M, and
Friess H (2007): Expression and differential signaling of heregulins
in pancreatic cancer cells.
Int J Cancer 120:514-523. [IF 4,700]
115. Konstandin MH, Sommerer C, Doesch A, Zeier M, Meuer
SC, Katus HA, Dengler TJ, and Giese T (2007): Pharmacodynamic
cyclosporine A-monitoring: relation of gene ex-
218
pression in lymphocytes to cyclosporine blood levels in cardiac
allograft recipients.
Transpl Int 20:1036-1043. [IF 1,797]
116. Körper S, Hütter G, Blau O, Schrezenmeier H, Knauf W,
Thiel E, Blau W (2008): Successful treatment of partial graft
failure after matched unrelated donor stem cell transplantation
by a combination of ancestim (stem cell factor) and granulocyte
colony stimulating factor in a patient with heavily
pre-treated chronic lymphatic leukaemia.
Leuk Lymphoma 49: 2015-2017. [IF 1,512]
117. Krishnan U, Goodall AH, Bugert P: Letter by Krishnan et al
regarding article, „Platelet expression profiling and clinical
validation of myeloid-related protein-14 as a novel determinant
of cardiovascular events“.
Circulation 115: e186 (2007). [IF 12,755]
118. Kunzli, BM, Berberat PO, Giese T, Csizmadia E, Kaczmarek
E, Baker C, Halaceli I, Buchler MW, Friess H, and Robson
SC (2007): Upregulation of CD39/NTPDases and P2 receptors
in human pancreatic disease.
Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 292:G223-230.
[IF 3,472]
119. Kusumawidjaja G, Kayed H, Giese N, Bauer A, Erkan M,
Giese T, Hoheise JD,Friess H, and Kleeff J (2007): Basic
transcription factor 3 (BTF3) regulates transcription of
tumor-associated genes in pancreatic cancer cells.
Cancer Biol Ther 6:367-376. [IF 2,981]
120. Lieber MR, Lu H, Gu J, Schwarz K (2008): Flexibility in the
order of action and in the enzymology of the nuclease, polymerase,
and ligase of vertebrate non-homologous DNA end
joining: relevance to cancer, aging, and the immune system.
Cell Res 18: 125-133. [IF 4,217]
121. Löb S, Ebner S, Wagner S, Weinreich J, Schäfer R, Königsrainer
A (2007): Are IDO producing human dendritic cells a
good tool for suppression of allogeneic T-cell responses?
Transplantation 83(4):468-73. [IF 3,641]
122. Löb S, Königsrainer A, Schäfer R, Rammensee HG, Opelz
G, Terness P (2008): Levo- but not dextro-1-methyl tryptophan
abrogates the IDO activity of human dendritic cells.
Blood, 111(4):2152-4. [IF 10,896]
123. Locasciulli A, Oneto R, Bacigalupo A, Socié G, Korthof E,
Bekassy A, Schrezenmeier H, Passweg J, Führer M on the
Behalf of the Severe Aplastic Anemia Working Party of the
European Blood and Marrow Transplant Group (SAA-WP,
BMT) (2007): Outcome of patients with acquired aplastic
anemia given first line bone marrow transplantation or immunosuppressive
treatment in the last decade: a report
from the European Group for Blood and Marrow Transplantation.
Haematologica - The Hematology Journal 91: 11-18.
[IF 5,516]
124. Loos M, Giese NA, Kleeff J, Giese T, Gaida MM, Bergmann
F, Laschinger M, and H. Friess H (2008): Clinical significance
and regulation of the costimulatory molecule B7-H1 in pancreatic
cancer.
Cancer Lett 268:98-109. [IF 3,049]
125. Lorenz M, Kohnle MV, Dass M, Walther P, Höcherl A, Ziener
U, Landfester K, Mailänder V (2008): Synthesis of fluorescent
polyisoprene nanoparticles and their uptake into various
cells.
Macomol. Biosci. 8: 711-727. [IF 2,831]
126. Lotfi R, Lotze MT (2008): Eosinophils induce DC maturation,
regulating immunity.
J Leukoc Biol 83: 456-460. [IF 4,128]
127. Lu H, Pannicke U, Schwarz K, Lieber MR (2007): Length-dependent
binding of human XLF to DNA and stimulation of
XRCC4:DNA Ligase IV activity.
J Biol Chem 282: 11155-11162. [IF 5,581]

128. Lu H, Schwarz K, Lieber MR (2007): Extent to which hairpin
opening by the Artemis: DNA-PKcs complex can contribute
to junctional diversity in V(D)J recombination.
Nucleic Acids Res 35: 6917-6923. [IF 6,954]
129. Lu H, Shimazaki N, Raval P, Gu J, Watanabe G, Schwarz K,
Swanson PC, Lieber MR (2008): A biochemically defined
system for coding joint formation V(D)J recombination.
Mol Cell 31: 485-497. [IF 13,156]
130. Luxembourg B, Mani H, Toennes SW, Strubel G, Klaeffling
C, Daemgen-von Brevern G, Geisen C, Lindhoff-Last E
(2007): Factitious anticoagulant-resistance as a cause of recurrent
arterial bypass graft occlusions.
Thromb Haemost. 97(6):1046-8. [IF 5,947]
131. Maercker C, Rogge T, Mathis H, Ridinger H, Bieback K: Development
of live cell chips to monitor cell differentiation
processes.
Eng Life Sci 8: 33-39 (2008). [IF 0,969]
132. Mailänder V, Lorenz M, Musyanovych A, Holzapfel V, Fuchs
K, Wiesneth M, Walter P, Landfester K, Schrezenmeier H
(2008): Carboxylated superparamagnetic iron oxide particles
labelled cells intercellularly without transfection agents.
Mol Imaging Biol 10: 138-146. [IF 2,951]
133. Matthes G, Moog R, Radtke H, Wiesneth M, Zingsem J
(2007): Durchführung präparativer Hämapheresen zur Gewinnung
von Blutbestandteilkonzentraten - Empfehlungen
zur präparativen Hämapherese der Deutschen Gesellschaft
für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie (DGTI).
Transfus Med Hemother 34: 367-374. [IF 0,451]
134. Mayr-Wohlfart U, Ravalli G, Günther KP, Kessler S (2008):
Staining undecalcified bone sections a modified technique
for an improved visualization of synthetic bone substitutes.
Acta Chir. Orthop. Traumatol. Cech 75: 443-445.
135. McCann SR, Passweg JR, Bacigalupo A, Locasciulli A, Locatelli
F, Ryan J, Schrezenmeier H, Lawler M (2007): The influence
of cyclosporin alone, or cyclosporin and
methotrexate, on the incidence of mixed haematopoietic
chimaerism following allogeneic sibling bone marrow transplant
for severe aplastic anaemia.
Bone Marrow Transpl 39: 109-114. [IF 3,000]
136. Mehrle S, Schmidt J, Büchler MW, Watzl C, Märten A
(2008): Enhancement of anti-tumor activity in vitro and in
vivo by CD150 and SAP.
Mol. Immunol., 45, 796-804. [IF 3,7]
137. Meyer M, Laux G, Scherer S, Tran TH, Opelz G, Mytilineos J
(2007): No association of factor V Leiden, prothrombin G
20210A, and MTHFR C677T gene polymorphisms with kidney
allograft survival: a multicenter study.
Transplantation 83: 1055-1058. [IF 3,641]
138. Michalski CW, Autschbach F, Selvaggi F, Shi X, Di Mola FF,
Roggo A, Muller MW, Di Sebastiano P, Buchler MW, Giese
T, and Friess H (2007): Increase in substance P precursor
mRNA in noninflamed small-bowel sections in patients with
Crohn's disease.
Am J Surg 193:476-481. [IF 1,924]
139. Michalski CW, Erkan M, Sauliunaite D, Giese T, Stratmann
R, Sartori C, Giese NA, Friess H, and Kleeff J (2008): Ex vivo
chemosensitivity testing and gene expression profiling predict
response towards adjuvant gemcitabine treatment in
pancreatic cancer.
Br J Cancer 99:760-767. [IF 4,115]
140. Michalski CW, Gorbachevski A, Erkan M, Reiser C, Deucker
S, Bergmann F, Giese T, Weigand M, Giese NA, Friess H,
and Kleeff J (2007): Mononuclear cells modulate the activity
of pancreatic stellate cells which in turn promote fibrosis
and inflammation in chronic pancreatitis.
J Transl Med 5:63. [IF 2,935]
Publikationen 2007 – 2008
141. Michalski CW, Laukert T, Sauliunaite D, Pacher P, Bergmann
F, Agarwal N, Su Y, Giese T, Giese NA, Batkai S, Friess H,
and Kuner R (2007): Cannabinoids ameliorate pain and reduce
disease pathology in cerulein-induced acute pancreatitis.
Gastroenterology 132:1968-1978. [IF 12,386]
142. Michalski CW, Maier M, Erkan M, Sauliunaite D, Bergmann
F, Pacher P, Batkai S, Giese NA, Giese T, Friess H, and
Kleeff J (2008): Cannabinoids reduce markers of inflammation
and fibrosis in pancreatic stellate cells.
PLoS ONE 3:e1701.
143. Michalski CW, Selvaggi F, Bartel M, Mitkus T, Gorbachevski
A, Giese T, Sebastiano PD, Giese NA, and Friess H (2008):
Altered anti-inflammatory response of mononuclear cells to
neuropeptide PACAP is associated with deregulation of NF-
{kappa}B in chronic pancreatitis.
Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 294:G50-57.
[IF 3,472]
144. Mormann M, Thederan M, Nackchbandi I, Giese T, Wagner
C, and Hansch GM (2008): Lipopolysaccharides (LPS) induce
the differentiation of human monocytes to osteoclasts
in a tumour necrosis factor (TNF) alpha-dependent manner:
a link between infection and pathological bone resorption.
Mol Immunol 45:3330-3337. [IF 4,307]
145. Moshous D, Feyen O, Lankisch P, Schwarz K, Schaper J,
Schneider M, Dilloo D, Laws H-J, Schwahn BC, Niehues T
(2007): Primary necrotizing lymphocytic central nervous system
vasculitis due to perforin deficiency in a four-year-old
girl.
Arth Rheum 56: 995-999. [IF 7,751]
146. Mueller MM, Henschler R, Seifried E: Clinical impact of leucocyte
depletion – what is the evidence?
ISBT Science Series 2008;3:85-90.
147. Muller MC, Erben P, Saglio G, Gottardi E, Nyvold CG,
Schenk T, Ernst T, Lauber S, Kruth J, Hehlmann R, Hochhaus
A : Harmonization of BCR-ABL mRNA quantification
using a uniform multifunctional control plasmid in 37 international
laboratories.
Leukemia 22: 96-102 (2008). [IF 6,924]
148. Müller MM, Henschler R, Wiesneth M, Richter E, Holzberger
G, Müller-Steinhardt, M, Pfeiffer HU, Müller-Kuller T, Klüter
H, Schrezenmeier H, Seifried E (2008): Blutprodukte aus
Vollblutspenden.
Hämotherapie 11 (Regionalbeilage Baden-Württemberg -
Hessen): 2-7.
149. Müller MM, Kläffling C, Lindhoff-Las E, Großmann R, Seifried
E, Geisen C: Hämorrhagische Diathesen – Eine Übersicht.
hämotherapie 2007;9:13-31.
150. Muller MW, Giese NA, Swiercz JM, Ceyhan GO, Esposito I,
Hinz U, Buchler P, Giese T, Buchler MW, Offermanns S, and
Friess. H (2007): Association of axon guidance factor semaphorin
3A with poor outcome in pancreatic cancer.
Int J Cancer 121:2421-2433. [IF 4,700]
151. Müller-Steinhardt M, Ebel B, Härtel C: The impact of interleukin-6
promoter -597/-572/-174genotype on interleukin-6
production after lipopolysaccharide stimulation.
Clin Exp Immunol. 147 : 339-345 (2007). [IF 2,599]
152. Musyanovych A, Schmitz-Wienke J, Mailänder V, Walther P,
Landfester K (2008): Preparation of biodegradable polymer
nanoparticles by miniemulsion technique and their cell interactions.
Macromol Biosci 8: 127-139. [IF 7,677]
153. Nesselmann C, Ma N, Bieback K, Wagner W, Ho A, Konttinen
YT, Zhang H, Hinescu ME, Steinhoff G: Mesenchymal
stem cells and cardiac repair.
J Cell Mol Med. 12: 1795-810 (2008). [IF 6,807]
219

Forschungsbericht 2007 – 2008
154. Nguyen XD, Müller-Berghaus J, Kälsch T, Schadendorf D,
Borggrefe M, Klüter H: Differentiation of monocyte-derived
dendritic cells under the influence of platelets.
Cytotherapy 2008;10:720-9. [IF 3,553]
155. Nydegger UE, Riedler GF, Flegel WA (2007): Histoblood
groups other than HLA in organ transplantation.
Transplant Proc 39: 64-68. [IF 1,027]
156. Oldenburg J, Bevans CG, Fregin A, Geisen C, Müller-Reible
C, Watzka M (2007): Current pharmacogenetic developments
in oral anticoagulation therapy: the influence of variant
VKORC1 and CYP2C9 alleles.
Thromb Haemost. 98(3):570-8. [IF 5,947]
157. Pǎunescu V, Deak E, Herman D, Siska IR, Tǎnasie G, Bunu
C, Anghel S, Tatu CA, Oprea TI, Henschler R, Rüster B, Bistrian
R, Seifried E: In vitro differentiation of human mesenchymal
stem cells to epithelial lineage.
J Cell Mol Med. 2007 May-Jun;11(3):502-8. [IF 6,807]
158. Pfleiderer C, Blümel J, Schmidt M, Roth WK, Hourfar MK,
Eckert J, Chudy M, Menichetti E, Lechner S, Nübling CM:
West Nil Virus and blood product safety in Germany.
J Med Virol 2008, 80 (3):557-563. [IF 2,831]
159. Picanco-Castro V, Heinz S, Bott D, Behrmann M, Covas D,
Seifried E, Tonn T: Rekombinant expression of coagulation
factor VIII in hepatic and non-hepatic cell lines stably transduced
with third generation lentiviral vectors comprising the
minimal factor VIII promoter.
Cytotherapy.2007;9(8):785-94.[ IF 3,553]
160. Pietersz RN, Engelfriet CP, Reesink HW, Wood EM, Winzar
S, Keller AJ, Wilson JT, Henn G, Mayr WR, Ramirez-Arcos S,
Goldman M, Georgsen J, Morel P, Herve P, Andeu G, Assal
A, Seifried E, Schmidt M, Foley M, Doherty C, Coakley P,
Salami A, Cadden E, Murphy WG, Satake M, de Korte D,
Bosnes V, Kjeldsen-Kragh J, McDonald C, Brecher ME,
Yorntovian R, Aubuchon JP: Detection of bacterial contamination
of platelet concentrates.
Vox Sang 2007;93(3):260-77. [IF 2,588]
161. Pramanik K, Trüpschuch S, Greiner A, Ruthardt M, Henschler
R, Müller AM: The aorta-gonad-mesonephros-derived
stroma cell line DAS104-4 induces differentiation of leukemic
cells.
Leuk Res. 2008 May;32(5):781-9. [IF 2.56]
162. Puzik A, Schultz C, Iblher P, Müller-Steinhardt M, Härtel C:
Effects of ciclosporin A, tacrolimus and sirolimus on cytokine
production in neonatal immune cells.
Acta Paediatr 96 : 1483-1489 (2007). [IF 1,297]
163. Raftery MJ, Hitzler M, Winau F, Giese T, Plachter B, Kaufmann
SH, and Schonrich G (2008): Inhibition of CD1 antigen
presentation by human cytomegalovirus.
J Virol 82:4308-4319. [IF 5,178]
164. Raftery MJ, Winau F, Giese T, Kaufmann SH, Schaible UE,
and Schonrich G (2008): Viral danger signals control CD1d
de novo synthesis and NKT cell activation.
Eur J Immunol 38:668-679. [IF 4,876]
165. Ramos-Lopez E, Fernandez-Balsells M, Kahles H, Seidl C,
Ferrer J, Badenhopp K: HLA-DQ haplotypes in Spanish and
German Families with Graves’ diesease: Contribution to
DQA1*0501-DQB1*0301 mediated genetic susceptibility
from fathers.
Thyroid 2007: 17(11): 1131-5. [IF 2,692]
166. Reesink HW, Engelfriet CP, Schennach H, Gassner C, Wendel
S, Fontao-Wendel R, Brito MA de, Sistonen P, Matilainen
J, Peyrard T, Pham BN, Rouger P, Le Pennec PY, Flegel WA,
Zabern I von, et al (2008): International Forum: Donors with
a rare pheno(geno) type.
Vox Sang 95: 236-253. [IF 2,588]
220
167. Riechelmann H, Wiesneth M, Schauwecker P, Reinhardt P,
Gronau S, Schmitt A, Schroen C, Atz J, Schmitt M (2007):
Adoptive therapy of head and neck squamous cell carcinoma
with antibody coated immune cells: a pilot clinical
trial.
Cancer Immunol Immunther 56: 1397-1406. [IF 3,728]
168. Ringhoffer M, Harsdorf S von, Schmitt M, Wiesneth M, Zenz
T, Stilgenbauer S, Greiner J, Döhner K, Marx M, Döhner H,
Bunjes D (2007): Reduced-intensity conditioning followed by
T-cell depleted allogeneic stem cell transplantation for patients
with chronic myeloid leukaemia and minimal residual
disease at the time of transplant: high risk of molecular relapse.
Brit J Haematol 136: 127-130. [IF 4,490]
169. Rives S, Pahl HL, Florensa L, Bellosillo B, Neusuess A,
Estella J, Debatin K-M, Kohne E, Schwarz K, Cario H (2007):
Molecular genetic analyses in familial and sporadic congenital
erythrocytosis.
Haematologica - The Hematology Journal 92: 674-677.
[IF 5,516]
170. Rodionova E, Conzelmann M, Maraskovsky E, Hess M,
Kirsch M, Giese T, Ho AD, Zoller M, Dreger P, and Luft T
(2007): GSK-3 mediates differentiation and activation of proinflammatory
dendritic cells.
Blood 109:1584-1592. [IF 10,131]
171. Rojewski MT, Weber BM, Schrezenmeier H (2008): Phenotypic
characterization of MSC from various tissues.
Transf Med Hemother 35: 168-184. [IF 0,451]
172. Ru YX, Zhu XV, Yan WW, Gao JT, Schwarz K, Heimpel H
(2008): Congenital dyserythropoietic anemia in a Chinese family
with a mutation of the CDAN1-gene.
Ann Hematol 87: 751-754. [IF 2,342]
173. Rupp S, Bauer J, Tonn T, Schächinger V, Dimmeler S, Zeiher
AM, Schranz D: Intracoronary administration of autologous
bone marrow-derived progenitor cells in a critically ill twoyr-old
child with dilated cardiomyopathy.
Pediatr Transplant. 2008 Nov 26. Epub ahead of print.
[IF 1,505]
174. Sadick H, Hage J, Goessler U, Bran G, Riedel F, Bugert P,
Hörmann K: Does the genotype of HHT patients with mutations
of the ENG and ACVRL1 gene correlate to different expression
levels of the angiogenic factor VEGF?
Int J Mol Med 22: 575-580 (2008). [IF 1,847]
175. Sárdy M, Csikós M, Geisen C, Preisz K, Kornseé Z, Tomsits
E, Töx U, Hunzelmann N, Wieslander J, Kárpáti S, Paulsson
M, Smyth N: (2007) Tissue transglutaminase ELISA positivity
in autoimmune disease independent of gluten-sensitive
disease.
Clin Chim Acta 376(1-2):126-35.
176. Schäfer R, Ayturan M, Bantleon R, Kehlbach R,Siegel G,
Pintaske J,Conrad S, Wolburg H, Northoff H, Wiskirchen J,
Weissert R (2008) The Use of Clinically Approved Small Particles
of Iron Oxide (SPIO) for Labelling of Mesenchymal
Stem Cells Aggravates Clinical Symptoms in Experimental
Autoimmune Encephalomyelitis and Influences their in vivo
Distribution.
Cell Transplantation, 17:923-941. [IF 3,871]
177. Schäfer R, Dominici M, Müller I, Dazzi F, Bieback K, Godthardt
K, Le Blanc K, Meisel R, Pochampally R, Richter R,
Skutella T, Steinhoff G, Mitterberger M, Wendel H, Wiskirchen
J, Handgretinger R, Northoff H: Progress in characterization,
preparation and clinical applications of
non-hematopoietic stem cells, 29-30 September 2006, Tubingen,
Germany.
Cytotherapy 9:397-405 (2007). [IF 3,553]

178. Schäfer R, Kehlbach R, Wiskirchen J, Bantleon R, Pintaske
J, Brehm BR, Gerber A, Wolburg H, Claussen CD, Northoff
H (2007): Transferrin Receptor Upregulation: In Vitro Labeling
of Rat Mesenchymal Stem Cells with Superparamagnetic
Iron Oxide.
Radiology 244(2):514-23. [IF 5,561]
179. Schäfer R, Northoff H (2008): Cardioprotection and Cardiac
Regeneration by Mesenchymal Stem Cells.
Panminerva Medica, 50(1):31-9. [IF 1,429]
180. Schäfer R, Northoff H (2008): Characteristics of MSC - New
Stars in Regenerative Medicine or unrecognized Old Fellows
in Autologous Regeneration?
Transfusion Medicine and Hemotherapy, 35(1):154-158
181. Schäfer R, Wiskirchen J, Guo K, Neumann B, Kehlbach R,
Pintaske J, Voth V, Walker T, Scheule AM, Greiner TO, Hermanutz-Klein
U, Claussen CD, Northoff H, Ziemer G, Wendel
HP (2007): Aptamer-based isolation and subsequent
imaging of mesenchymal stem cells in ischemic myocard by
magnetic resonance imaging.
Rofo.,179(10):1009-15. [IF 1,882]
182. Schedel A, Schloss P, Klüter H, Bugert P: The dopamine
agonism on ADP-stimulated platelets is mediated through
D2-like but not D1-like dopamine receptors.
Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol 378:
431-439 (2008). [IF 2,161]
183. Schmidt C, Giese T, Hermann E, Zeuzem S, Meuer SC,
and Stallmach A (2007): Predictive value of mucosal TNFalpha
transcripts in steroid-refractory Crohn's disease patients
receiving intensive immunosuppressive therapy.
Inflamm Bowel Dis 13:65-70. [IF 3,012]
184. Schmidt C, Giese T, Goebel R, Schilling M, Marth T, Ruether
A, Schreiber S, Zeuzem S, Meuer SC, and Stallmach A
(2007): Interleukin-18 is increased only in a minority of patients
with active Crohn's disease.
Int J Colorectal Dis 22:1013-1020. [IF 1,749]
185. Schmidt C, Hauser W, Giese T, and Stallmach A (2007): Irritable
pouch syndrome is associated with depressiveness
and can be differentiated from pouchitis by quantification of
mucosal levels of proinflammatory gene transcripts.
Inflamm Bowel Dis 13:1502-1508. [IF 3,012]
186. Schmidt H, Gelhaus C, Nebendahl M, Lettau M, Watzl C,
Kabelitz D, Leippe M, and Janssen O (2008): 2D-DIGE analyses
of enriched secretory lysosomes reveal heterogeneous
profiles of functionally relevant proteins in leukemic and
activated human NK cells.
Proteomics, 8, 2911-2925. [IF 5,5]
187. Schmidt M, Karakassopoulos A, Burkhart J, Deitenbeck R,
Asmus J, Muller TH, Weinauer F, Seifried E, Walther-Wenke
G: Comparison of three bacterial detection methods under
routine conditions.
Vox Sang 2007;92(1):15-21. [IF 2,588]
188. Schmidt M, Themann A, Drexler C, Bayer M, Lanzer G, Menichetti
E, Lechner S, Wessin D, Prokoph B, Allain JP, Seifried
E, Hourfar K: Blood donor screening for parvovirus B19
in Germany and Austria.
Transfusion 2007;47(10):1775-82. [IF 3,374]
189. Schmitt A, Li L, Giannopoulos K, Greiner J, Reinhardt P,
Wiesneth M, Schmitt M (2008): Quantitative expression of
Toll-like receptor-2, -4, and -9 in dendritic cells generated
from blasts of patients with acute myeloid leukelmia.
Transfusion 48: 861-870. [IF 3,374]
190. Schmitt A, Reinhardt P, Hus I, Tabarkiewicz J, Rolinski J,
Barth T, Giannopoulos K, Dmoszynska A, Wiesneth M,
Schmitt M (2007): Large-scale generation of autologous
dendritic cells for immunotherapy in patients with acute
myeloid leukemia.
Transfusion 47: 1588-1594. [IF 3,374]
Publikationen 2007 – 2008
191. Schmitt M, Schmitt A, Rojewski MT, Chen J, Giannopoulos
K, Fei F, Yu Y, Götz M, Heyduk M, Ritter G, Speiser DE,
Gnjatic S, Guillaume P, Ringhoffer M, Schlenk RF, Liebisch
P, Bunjes D, Shiku H, Döhner H, Greiner J (2008): RHAMM-
R3 peptide vaccination in patients with acute myeloid leukemia,
myelodysplastic syndrome and multiple myeloma
elicits immunological and clinical responses.
Blood 111: 1357-1365. [IF 10,896]
192. Schmitt S, Mailänder V, Egerer G, Leo A, Becker S, Reinhardt
P, Wiesneth M, Schrezenmeier H, Ho AD, Goldschmidt
H, Moehler TM (2008): Successful autologous peripheral
blood stem cell transplantation in a Jehovah's Witness with
multiple myeloma. Case report, review of literature and recommendations
for high-dose chemotherapy without support
of allogeneic blood products.
Int J Hematol 87: 289-297. [IF 1,491]
193. Schrezenmeier H, Passweg JR, Marsh JCW, Bacigalupo A,
Bredeson CN, Bullorsky E, Camitta BM, Champlin RE, Gale
RP, Führer M, Klein JP, Locasciulli A, Oneto R, Schattenberg
AVMB, Socié G, Eapen M (2007): Worse outcome and more
chronic GVHD with peripheral blood progenitor cells than
bone marrow in HLA-matched sibling donor transplants for
young patients with severe acquired aplastic anemia:
Blood 110: 1397-1400. [IF 10,370]
194. Schrezenmeier H, Thiel E (2007) Erworbene Aplastische
Anämie. In: Seeber S, Schütte J (Hrsg) Therapiekonzepte
Onkologie. Heidelberg: Springer-Medizin-Verlag, 5. Auflage,
S. 210-226.
195. Schrezenmeier H, Walther-Wenke G, Müller TH, Weinauer F,
Younis A, Holland-Letz T, Geis G, Asmus J, Bauerfeind U,
Burkhart J, Deitenbeck R, Förstemann E, Gebauer W,
Höchsmann B, Karakassopoulos A, Liebscher U-M, Sänger
W, Schmidt M, Schunter F, Sireis W, Seifried E (2007):
Bacterial contamination of platelet concentrates: Results of
a prospective multicenter study comparing pooled whole
blood-derived platelets and apheresis platelets.
Transfusion 47: 644-652. [IF 3,374]
196. Schuetz C, Huck K, Gudowius S, Megahed M, Feyen O,
Hubner B, Schneider DT, Manfras B, Pannicke U, Willemze
R, Knüchel R, Göbel U, Schulz A, Borkhardt A, Friedrich W,
Schwarz K, Niehues T (2008): An immunodeficiency disease
with RAG mutations and granulomas.
N Engl J Med 358: 2030-2038. [IF 52,589]
197. Schüttrumpf J, Milanov P, Roth S, Seifried E, Tonn T: Nonviral
gene transfer results in therapeutic factor IX levels in
haemophilia B mice.
Haemost. 2008;1:S92-95
198. Seeger FH, Tonn T, Krzossok N, Zeiher AM, Dimmeler S:
Cell isolation procedures matter: a comparison of different
isolation protocols of bone marrow mononuclear cells used
for cell therapy in patients with acute myocardial infarction.
Eur Heart J 2007; 28(6):766-72. [IF 7,341]
199. Seidl C, Brixner V, Müller-Kuller T, Sireis W, Costello P, Cermakova
Z, Delaney F, McMillan Douglas A, Nightingale M,
van Galen JP , O’Connell M, Siegel W, Sobaga L, de Wit J,
Seifried E: Levels of quality management of blood transfusion
services in Europe.
Vox Sanguinis – Science Series, Vol 3 (1), 2008: p54-62.
[IF 2,588]
200. Seidl C, Brixner V, Sobaga L, O’Connell M, van Krimpen P,
McMillan Douglas A, Gorham M, Letowska M, de Wit J,
Seifried E on behalf of the Project’s participant: The EU-Q-
BLOOD-SOP Manual: European standard operating procedure
methodology reflecting European best practice within
the area addressing the quality and safety of blood.
Transfusion Today 2007: 27: 31-35.
221

Forschungsbericht 2007 – 2008
201. Seidl C, O’Connell M, Delaney F, McMillan Douglas A, Gorham
M, van Krimpen P, Letowska M, Sobaga L, de Wit J, Erhard
Seifried E: European best practice in blood transfusion:
Improvement of quality related processes in blood establishments.
Vox Sanguinis, Volume 2 (1), 2007; 143-9. [IF 2,588]
202. Seidl C, Seifried E. Blutsicherheit auf sehr hohem Niveau:
Qualitätsstandards und Akkreditierung von transfusionsmedizinischen
Einrichtungen auf nationaler und europäischer
Ebene. II. Russisch-deutsche Konferenz des Koch-Metschnikow-Forums.
Review, Koch-Metschnikow-Journal, 01/2008, p61-63.
203. Seifried E and Mueller MM: Development of transfusion medicine
in Europe – A challenge for physicians, scientists and
politicians.
Blood Rev 2007; 21:S30-S33. [IF 5,922]
204. Seifried E, Schmidt M, Mueller MM: Safety in Modern Hemotherapy
– Testing Procedures, Costs and Residual Risks
– An Update 2008.
Transfusion & Hematology Today 2008;14:178-180.
205. Sido B, Lasitschka F, Giese T, Gassler N, Funke B, Schroder-Braunstein
J, Brunnemer U, Meuer SC, and Autschbach
F (2008): A prominent role for mucosal
cystine/cysteine metabolism in intestinal immunoregulation.
Gastroenterology 134:179-191. [IF 12,386]
206. Sievert KD, Feil G, Renninger M, Selent C, Maurer S, Conrad
S, Hennenlotter J, Nagele U, Schäfer R, Möhle R, Skutella
T, Northoff H, Seibold J, Stenzl A (2007): [Tissue
engineering and stem cell research in urology for a reconstructive
or regenerative treatment approach.]
Urologe A, 46(9):1224-30 [IF 0,414]
207. Socié G, Mary JY, Schrezenmeier H, Marsh J, Bacigalupo A,
Locasciulli A, Tichelli A, Passweg J (2007): Granulocyte-stimulating
factor and severe aplastic anemia: a survey by the
European Group for Blood and Marrow Transplantation
(EBMT).
Blood 109: 2794-2796. [IF 10,896]
208. Sommerer C, Giese T, Schmidt J, Meuer S, and Zeier M
(2008): Ciclosporin A tapering monitored by NFAT-regulated
gene expression: a new concept of individual immunosuppression.
Transplantation 85:15-21. [IF 3,879]
209. Sommerer C, Hartschuh W, Enk A, Meuer S, Zeier M, and
Giese T (2008): Pharmacodynamic immune monitoring of
NFAT-regulated genes predicts skin cancer in elderly longterm
renal transplant recipients.
Clin Transplant 22:549-554. [IF 1,887]
210. Sommerer C, Morath C, Giese T, Meuer S, and Zeier M
(2008): Activity of nuclear factor of activated T cells is independent
of the number of peripheral lymphocytes in
FTY720-treated patients.
Transplant Proc 40:1416-1418. [IF 0,799]
211. Speckmann C, Pannicke U, Wiech E, Schwarz K, Fisch P,
Friedrich W, Niehues T, Gilmour K, Buiting K, Schlesier M,
Eibel H, Rohr J, Superti-Furga A, Groß-Wieltsch U, Ehl S
(2008): Clinical and immunologic consequences of a somatic
reversion in a patient with X-linked severe combined immunodeficiency.
Blood 112: 4090-4097. [IF 10,896]
212. Sun Y, Song M, Jäger E, Schwer C, Stevanovic S, Flindt S,
Karbach J, Nguyen XD, Schadendorf D, Cichutek K: Human
CD4+ T Lymphocytes Recognize a Vascular Endothelial
Growth Factor Receptor-2-Derived Epitope in Association
with HLA-DR.
Clin Cancer Res. 2008;14:4306-15. [IF 6,25]
222
213. Tchatchou S, Wirtenberger M, Hemminki K, Sutter C, Meindl
A, Wappenschmidt B, Kiechle M, Bugert P, Schmutzler RK,
Bartram CR, Burwinkel B: Aurora kinases A and B and familial
breast cancer risk.
Cancer Lett 247: 266-272 (2007). [IF 3,398]
214. Textor S, Dürst M, Jansen L, Accardi R, Tommasino M,
Trunk MJ, Porgador A, Watzl C, Gissmann L, Cerwenka H
(2008): Activating NK cell receptor ligands are differentially
expressed during progression to cervical cancer.
Int. J. Cancer., 123, 2343-2353. [IF 4,6]
215. Tonn T and Barz D: MSC a multipotent stromal cell in search
of clinical application.
Transfusion Medicine and Hemotherapy. 2008: 35;269-272.
216. Tonn T, Barz D: Recovery and Clinical Use of Mesenchymal
Stem Cells according to Good Manufacturing Practice.
Transfusion Medicine & Hemotherapy; Karger Verlag; Heft 4,
2008
217. Tramsen L, Koehl U, Tonn T, Latgé JP, Schuster FR, Borkhardt
A, Uharek L, Quaritsch R, Beck O, Seifried E, Klingebiel
T, Lehrnbecher T. Clinical-scale generation of human
anti-Aspergillus T cells for adoptive immunotherapy.
Bone Marrow Transplant. 2009 Jan;43(1):13-9.
Epub 2008 Sep [IF 3,0]
218. Treede I, Braun A, Sparla R, Kuhnel M, Giese T, Turner JR,
Anes E, Kulaksiz H, Fullekrug J, Stremmel W, Griffiths G,
and Ehehalt R (2007): Anti-inflammatory effects of phosphatidylcholine.
J Biol Chem 282:27155-27164. [IF 5,854]
219. Vaclavicek A, Bermejo JL, Wappenschmidt B, Meindl A,
Sutter C, Schmutzler RK, Kiechle M, Bugert P, Burwinkel B,
Bartram CR, Hemminki K, Forsti A: Genetic variation in the
major mitotic checkpoint genes does not affect familial breast
cancer risk.
Breast Cancer Res Treat 106: 205-213 (2007). [IF 4,453]
220. Van der Schoot CE, de Haas M, Engelfriet CP, Reesink HW,
Panzer S, Jungbauer C, Schwartz DM, Mayr WR, Castilho L,
St Louis M, Long A, Denomme G, Semple E, Fernandes B,
Flegel WA, Wagner F. et al (2008) Genotyping for red blood
cell polymorphisms.
Vox Sang, epub ahead of print, 4 December [IF 2,588]
221. Veltkamp C, Ruhwald R, Veltkamp R, Giese T, and Stremmel
W (2007): Regulatory CD4+ CD25+ T cells prevent thymic
dysfunction in experimental chronic colitis.
Scand J Immunol 66:636-644. [IF 2,023]
222. Villartay JP, Schwarz K, Villa A (2007): V(D)J recombination
defects. In: Ochs H, Smith CIE, Puck J (eds), Primary Immunodeficiency
Diseases, a Molecular and Genetic Approach.
Oxford: Oxford University Press, 2nd edition, pp 155-166.
223. Viollier R, Socié G, Tichelli A, Bacigalupo A, Korthof E,
Marsh J, Cornish J, Ljungmann P, Oneto R, Bekassy A, Führer
M, Maury S, Schrezenmeier H, Lint MT van, Wojcik D,
Locasciulli A, Passeg JR for the Working Party Aplastic Anemia
(WPSAA) of the European Group for Blood and Marrow
Transplantation (EBMT) (2008): Recent improvement in outcome
of unrelated donor transplantation for aplastic anemia.
Bone Marrow Transpl 41: 45-50. [IF 3,000]
224. Vossmerbaeumer U, Kuehl S, Bieback K, Klüter H, Jonas
JB: Cultivation and differentiation characteristics of human
limbal progenitor cells.
Tissue Cell 40:83-8 (2008). [IF 1,237]
225. Vossmerbaeumer U, Kühl S, Kern S, Klüter H, Jonas JB,
Bieback K: Induction of retinal pigment epithelium properties
in ciliary margin progenitor cells.
Clin Experiment Ophthalmol 36: 358-366 (2008). [IF 1,253]
226. Watzl C (2008): Natural Killer Cells, Probiotics and Cancer.
Int. J. Probiotics and Prebiotics, 3, 141-146.

227. Weiss CK, Lorenz MR, Landfester K, Mailänder V (2007):
Cellular uptake behavior of unfunctionalized and functionalized
PBCA particles prepared in a miniemulsion.
Macromol Biosci 7: 883-896. [IF 2,831]
228. Weiss, CK, Kohnle, MV, Landfester K, Hauk T, Fischer D,
Schmitz-Wienke, J, Mailänder V (2008): The first step into
the brain: Uptake of NIO-PDCA nanoparticles by endothelial
cells in vitro and in vivo, and direct evidence for the bloodbrain
barrier permeation.
Chem Med Chem 3: 1395-1403. [IF 2,825]
229. Welsch T, Endlich K, Giese T, Buchler MW, and Schmidt J
(2007): Eps8 is increased in pancreatic cancer and required
for dynamic actin-based cell protrusions and intercellular
cytoskeletal organization.
Cancer Lett 255:205-218. [IF 3,049]
230. Wente MN, Gaida MM, Mayer C, Michalski CW, Haag N,
Giese T, Felix K, Bergmann F, Giese NA, and Friess H
(2008): Expression and potential function of the CXC chemokine
CXCL16 in pancreatic ductal adenocarcinoma.
Int J Oncol 33:297-308. [IF 2,681]
231. Wente MN, Mayer C, Gaida MM, Michalski CW, Giese T,
Bergmann F, Giese NA, Buchler MW, and Friess H (2008):
CXCL14 expression and potential function in pancreatic
cancer.
Cancer Lett 259:209-217. [IF 3,04]
232. Wiehe JM, Ponsaerts P, Rojewski MT, Homann JM, Greiner
J, Kronawitter D, Schrezenmeier H, Hombach V, Wiesneth
M, Zimmermann O, Torzewski J (2007): mRNA-mediated
gene delivery into human progenitor cells promotes highly
efficient protein expression.
J Cell Mol Med 11: 521-530. [IF 6,807]
233. Wiesneth M, Müller C, Schrezenmeier H (2007): Spendersicherheit
bei der Mobilisation und Entnahme von peripheren
Blutstammzellen.
hämotherapie 10: 22-35.
234. Yang R, Frank B, Hemminki K, Bartram CR, Wappenschmidt
B, Sutter C, Kiechle M, Bugert P, Schmutzler RK, Arnold N,
Weber BH, Niederacher D, Meindl A, Burwinkel B: SNPs in
Ultraconserved Elements and Familial Breast Cancer Risk.
Carcinogenesis 29: 351-355 (2008). [IF 5,406]
235. Yao J, Bechter C, Wiesneth M, Härter G, Götz M, Germeroth
L, Guillaume P, Hasan F, von Harsdorf S, Mertens T (2008):
Multimer staining of cytomegalovirus phosphoprotein 65specific
T cells for diagnosis and therapeutic purposes: a
comparative study.
Clin Infect Dis 46: e96-105. [6,750]
236. Zabern I von, Flegel WA (2007): IVS38del4 deletion in the
RHD gene does not cause a DEL phenotype: relevance of
RHD alleles including DFR-3.
Transfusion 47: 1552-1555. [IF 3,374]
237. Zell S, Geis N, Rutz R, Schultz S, Giese T, and Kirschfink M
(2007): Down-regulation of CD55 and CD46 expression by
anti-sense phosphorothioate oligonucleotides (S-ODNs)
sensitizes tumour cells to complement attack.
Clin Exp Immunol 150:576-584. [IF 2,805]
238. Zheng X, Seshire A, Rüster B, Bug G, Beissert T, Puccetti E,
Hoelzer D, Henschler R, Ruthardt M: Arsenic but not alltrans
retinoic acid overcomes the aberrant stem cell capacity
of PML/RARalpha-positive leukemic stem cells.
Haematologica. 2007 Mar;92(3):323-31. [IF 5.516]
239. Zieker D, Schäfer R, Glatzle J, Nieselt K, Coerper S, Kluba
T, Northoff H, Königsrainer A, Hunt TK, Beckert S (2008):
Lactate modulates gene expression in human mesenchymal
stem cells.
Langenbecks Arch Surg, 393(3):297-301 [IF 1,533]
BUCHBEITRÄGE
Publikationen 2007 – 2008
240. Seifried E, Müller MM: Risiken der Eigen- und Fremdblut-
Transfusion. In: Verbotene Methode – Erhöhung des Sauerstofftransfers.
Doping-Kleinkonferenz 2007. Schriftenreihe
des Bundesinstituts für Sportwissenschaft 2008-03. Herausgeber:
Bundesinstitut für Sportwissenschaft, pp. 145-
157; Leipziger Verlagsanstalt, Leipzig, 2008. (ISBN:
978-3-937489-02-5)
241. Seifried E, Seidl C (ed.): European standard operating procedure
(SOP) methodology refelcting European best
practice within the area adressing the qualtiy and safety of
blood. Manual, Edition 1.0, published by the EU-Blood-SOP
project cofunded by the European Commission, Public health
and risk assessment directorate, 2007.
242. Seidl C, Seifried E: Immungenetik: Klinische und diagnostische
Aspekte des Humanen-Leukozyten-Antigen (HLA)-Systems.
In: Lothar Thomas (Ed.) Labor und Diagnose.
Indikation und Bewertung von Laborbefunden für die medizinische
Diagnostik. 7. Auflage. 1193-1213. (Jubiläumsausgabe
30 Jahre), 2007. (ISBN Nummer 978-3-9805215-6-7)
243. Seidl C, O’Connell M, Sobaga L, Delaney F, McMillan Douglas
A, Gorham M, van Krimpen P, Letowska M, de Wit J,
Seifried E on behalf of the Project’s participants: European
guidelines for quality systems of blood establishments following
the directives of the European Commission: The EU-
Blood SOP Manual. Proceedings of the ESTM – Optimal use
of blood and blood components (Eds. Cardenas JM, Politis
C, McClelland DBL, Koistinen J, Rossi U), 47-59, 2007.
244. Heimpel H, Schrezenmeier H (2007): Krankheiten der Erythrozyten.
In: Gerok W, Huber C, Meinertz T, Zeidler H
(Hrsg), Die Innere Medizin. Stuttgart und New York: Schattauer,
11. Auflage, Kap 2.5, S 54-70.
223

Forschungsbericht 2007 – 2008
Wissenschaftliche Vorträge, publizierte Abstracts 2007-2008
1. Agildere A, Pistor A, Haungs G, Richter E: Validation of a
new soft filter for leukoreduction.
Transfusion 2007; 47 (Suppl): 95 A (P)
2. Agildere A, Richter E: Development of a new soft filter for
RBC leukoreduction.
Transfus Med Hemother 2007; 34 (Suppl 1): 37 – 38 (P)
3. Agildere A, Richter E: Improvement of Hb-content by a new
filter for RBC leukoreduction.
Vox Sang 2007; 93 (Suppl 1): 96 (P)
4. Agildere A: QK-Daten des EK-soft-housing Filters von Fresenius.
Tagung der DRK-Herstellungsleiter, Ingoldstadt,
15./16.11.2007 (V)
5. Althaus K, Rummler S, Oelzner P, Scharberg EA, Barz D:
Transfusion of cross-matched positive red blood cell units in
a patient with the high incidence red cell antigen AnWJ
Transfus Med Hemother 2007; 34 (Suppl 1): 52 – 53 (P)
6. Askar M, Mytilineos J Howard A, Fung M, Constantino D,
Taves C, Wagenknecht D, Jensen M, Embrey Ch, Vayntrub
T, Siegel R, Ayala D, Lind C: High resolution HLA typing
strategies and reporting practices of ASHI and EFI accredited
laboratories. 34th ASHI Annual Meeting, Toronto, 27.-
31.10.2008.
Human Immunology 2008, 64-W, p 133
7. Askar M, Mytilineos J, Howard A, Fung M, Constantino D,
Taves C, Wagenknecht D, Jensen M, Embrey C, Vayntrub T,
Siegel R, Ayala D, Lind C: High resolution HLA typing strategies
and reporting practices of ASHI and EFI accredited laboratories.
15th International Histocompatibility and
Immunogenetics Workshop and Conference, Rio de Janeiro,
13-20 September 2008.
Tissue Antigens 73: 249-250 (2008) [O-48].
8. Assmus B, Fischer-Rasokat U, Honold J, Seeger FH,
Fichtlscherer S, Tonn T, Schächinger V, Dimmeler S, Zeiher
AM, (2007): Transcoronary transplantation of functionally
competent bone marrow cells is associated with decreased
natriuretic peptide levels and improved survival in post-infarction
heart failure patients.
Eur Heart J 28(1):251
9. Assmus B, Schächinger V, Erbs S, Elsässer A, Döbert N,
Tonn T, Aicher A, Dimmeler S, Zeiher AM (2007): Aktivierung
von Knochenmark und Progenitorzellen bei Patienten mit
akutem Myokardinfarkt. 73. Jahrestagung der Deutschen
Gesellschaft für Kardiologie, Herz- und Kreislaufforschung.
10. Assmus B, Schächinger V, Erbs S, Elsässer A, Haberbosch
W, Hambrecht R, Hölschermann H, Yu J, Corti R, Mathey
DG, Hamm CW, Süselbeck T, Tonn T, Dimmeler S, Zeiher
AM, REPAIR-AMI Investigators (2007): Intracoronary Administration
Of Bone Marrow-derived Progenitor Cells Abrogates
Progressive Left Ventricular Enlargement After AMI:
Insights from the REPAIR-AMI TriaL Circ 116 (Suppl II), 756.
11. Assmus B, Schächinger V, Erbs S, Elsässer A, Haberbosch
W, Hambrecht R, Hölschermann H, Yu J, Corti R, Mathey
DG, Hamm CW, Süselbeck T, Tonn T, Dimmeler S, Zeiher
AM (2007): Selektive Kontraktilitätsverbesserung der am
stärksten betroffenen Infarktareale nach intrakoronarer Infusion
von Knochenmark-Progenitorzellen nach akutem Myokardinfarkt:
Quantitative LV-Angiographie der
REPAIR-AMI-Studie. 73. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft
für Kardiologie, Herz- und Kreislaufforschung.
12. Assmus B, Schächinger V, Erbs S, Elsässer A, Tonn T, Dimmeler
S, Zeiher AM (2007): The Quality Of Cell Isolation Determines
Left Ventricular Contractile Recovery After
Intracoronary Administration Of Bone Marrow-derived Progenitor
Cells In Patients With AMI - Insights from the RE-
PAIR-AMI TriaL Circ 116 (Suppl II), 129.
224
13. Bacigalupo A, Socié G, Locatelli F, Schrezenmeier H, Korthof
E, Békassy A, Tichelli A, Passweg J: Unrelated donor
transplants for severe aplastic anemia: A report from the
EBMT SAA Working Party. 49th Annual Meeting of the American
Society of Hematology (ASH), Atlanta, 8-11 December
2007.
Blood 110 (11): 897A-989A (2007) (Abstract 3054 and
Poster Session 273-III)
14. Badenhoop K, Kahles H, Kordonouri O, Ramos Lopez E,
Walter M, Rosinger S, Ziegler A, Seidl C, Böhm BO: MHCenvironment
interactions leading to type 1 diabetes: feasibility
of an analysis of HLA DR-DQ alleles in relation to
manifestation periods and dates of birth. submitted for MHC
Workshop 27/28 August, Washington, 2007.
15. Bader P, Jarisch A, Soerensen J, Koehl U, Esser R, Krenn T,
M Körte, Beier R, Tonn T, Kreyenberg H, Kuci S, Klingebiel T:
Excellent Engraftment and rapid immune recovery in haploidentical
stem cell transplantation using CD3/CD19 depleted
peripheral stem cell grafts after reduced intensity conditioning.
34rd Annual Meeting of the EBMT Group in Florence,
30.03.-2.04.2008; Oral Session (Miltenyi Biotec Satellitensymposium)
16. Baila S, Furlan Freguia C, Favaro P, Schuettrumpf J, Mingozzi
F, Andrade-Gordon P, Arruda V: Protease-Activated
Receptor 2 (PAR-2): A Novel Target to Prevent FIX Inhibitor
Formation, ISTH Geneva, 2007 (P)
17. Bechter, K, Maxeiner, H-G, Rojewski M, Schmitt, A, Tumani,
H und Schmitt, M: Typing of T-cells by flow cytometry in peripheral
blood and CSF in patients with affective and schizophrenic
spectrum disorders. XXVI CINP congress of the
Collegium Internationale Neuro-Psychopharmacologicum,
Munich, Germany, July 13-17 (2008) (P)
18. Becker P, Appelbaum FR, Chien S, Zhao X, Bonig H, Mukasa
R, Papayannopoulou T: Oral small molecule inhibotor
of VLA-4 overcomes adhesion mediated chemotherapy resistance
in acute myeloid leukaemia cella in vitro, without
impairment of normal blood cell recovery when combined
with chemotherapy in vivo, ASH: Blood 112:858 (V)
19. Bessler M, Schrezenmeier H, Maciejewski JP, Hill A, Rollins
SA, Young NS, Luzzatto L: Significant disease burden in paroxysmal
nocturnal hemoglobinuria patients with lower levels
of hemolysis, mild anemia and minimal transfusion:
Clinical improvement with eculizumab therapy. 49th Annual
Meeting of the American Society of Hema tology (ASH), Atlanta,
8-11 December 2007.
Blood 110 (11): 257a-258a (Abstract No. 840) (2007)
20. Bieback K, Hecker A, Lannert H, Kocaömer A, Schallmoser
K, Strunk D, Klüter H: Human Alternatives to Fetal Calf
Serum for Bone Marrow-Derived Mesenchymal Stromal Cell
Expansion.
Transfusion Medicine and Hemotherapy 34(S1) (2007) (V)
OS5.9
21. Bieback K, Vinci M, Elvers-Hornung S, Czabanka M, Blaske
T, Klüter H, Vajkoczy P. Studying the Multistep Process of
Endothelial Progenitor Cell Homing to the Tumour Vasculature.
4th ITERA – Life-Sciences Forum Workshop. Maastricht
12-15.10. 2008
22. Bieback K, Vinci M, Elvers-Hornung S, Czabanka M, Klüter
H, Vajkoczy P: In vitro and in vivo anlysis of the tumor targeting
capacities of CD34+ derived cord blood endothelial
progenitor cells.
Transfus Med Hemother 35(S1) (2008) (V) O8.3

23. Bieback K: Alternative Sources of Mesenchymal Stem Cells
for Potential Clinical Use. 23.10.2007. Regenerative Medicine
Institute (REMEDI), National Centre for Biomedical Engineering
Science (NCBES), National University of Ireland,
Galway
24. Bieback K: Alternative sources of MSC for therapeutic application.
Symposium. Induction of Immunologic Tolerance
by Mesenchymal Stem Cells. 12.-13.09. 2007, Düsseldorf
25. Bieback K: Comparing Mesenchymal Stem Cells From Umbilical
Cord Blood, Adipose Tissue and Bone Marrow:
10.05.2007. Miltenyi Biotech, Bergisch Gladbach
26. Bieback K: Comparing Mesenchymal Stem Cells From Umbilical
Cord Blood, Adipose Tissue and Bone Marrow. AABB
Spring Conference 2007 Cellular Therapy 23-25.03.2007,
San Diego, USA
27. Bieback K: Differential Effects of human Alternatives to FBS
on MSC from different Tissues. Kongressbeitrag 2nd Congress
on Biology, Characterisation, Preparation and Clinical
Application of Non-hemopoietic Stem Cells, Tübingen
4./5.04.2008
28. Bieback K: Human alternatives to bovine serum for the isolation
and expansion of mesenchymal stem cells. 3rd ITERA
Workshop. 25. –26.10. 2007. Maastricht
29. Bieback K: Mesenchymale Stammzellen. TransfusionsmeD
Seminar für Ärzte in der Weiterbildung (BDT/DGTI),
24.02.2007, Bielefeld
30. Bieback K: MSCs from Cord BlooD 33rd Annual Meeting of
the EBMT 25-28.03.2007, Lyon
31. Bieback K: Sources of Mesenchymal Stem Cells for Clinical
Use. Advanced Therapies Conference. 08. 11. 2007, Mailand
32. Bieback K: Sources of MSC for Clinical Use. Workshop on
Mesenchymal Stem Cells (MSCs) for Regenerative Medicine
and Immune Regulation. 24.-25.05.1007, Verona, Italien
33. Bieback K: Stammzellen aus Fettgewebe? Kongressbeitrag
IGLD Wien 13./14.03. 2008
34. Bieback K: Standardisierung der Herstellung mesenchymaler
Stammzellen. Jahrestagung DGKL 22.09.2008
35. Bomke B, Schüttrumpf J, Bialleck H, Jarisch A, Klingebiel T,
Seifried E, Tonn T: Effective Treatment of a Patient with
Sickle Cell Disease and Recurring Cerebral Vaoocclusive
Episodes by Periodical Red Cell Exchange. DGTI Friedrichshafen,
2007 (P)
36. Bönig H, Papayannopoulou T (2007): Insights into the biology
of mobilized cells through innovative treatment schedules
of the CXCR4 antagonist AMD3100, ASH:
Blood 110:2229 (P)
37. Bönig H, Papayannopoulou T (2007): Maximizing mobilization
of hematopoietic stem and progenitor cells (HSPC) by
AMD3100 and characterization of phenotype, function and
cell cycling of AMD3100 mobilized HSPC, ISEH.
Exp Hematol 35S2:49 (P)
38. Bönig H, Papayannopoulou T (2008): Potent stem cell mobilization
by AMD3100 infusion, and functional analysis of
AMD3100 mobilized cells, ISBT.
Vox Sang. 95s1:27 (V)
39. Bönig H, Priestley G, Wohlfahrt M, Kiem H, Papayannopoulou
T (2008): Blockade of alpha6 integrin reveals diversity in
homing patterns between human and murine cells.
ISEH: Exp Hematol 36s1:S79 (P)
40. Bönig H, Wundes A, Chang KH, Lucas S, Papayannopoulou
T (2007): Hematopoietic stem/progenitor cells (HSPC) mobilization
parameters in patients chronically treated with the
Wissenschaftliche Vorträge, publizierte Abstracts 2007 – 2008
CD49d blocking antibody Natalizumab, ASH.
Blood 110:177 (V)
41. Brixner V, Richter R, Seifried E, Seidl C: A new HLA-B*08
allele, HLA-B*0828 found in two voluntary stem cell donors.
Tissue Antigens, Vol 69 (5), P-049, p422-423, 2007
42. Brixner V, Richter R, Zoeller S, Seifried E, Seidl C: Sequence
analysis of the new HLA-B*0828 reveals Exon 3 - alpha2 domain
based amino acid variations that modify peptide binding
pockets DE and F.
Transfus Med Hemother, 34(S1), P7.07, 2007.
43. Bugert P, Rink G, Janetzko K, Klüter H: Genotypisierung der
ABO Blutgruppe als ergänzende Untersuchung bei der Abstammungsbegutachtung.
Jahrestagung der DGAB und der
deutschsprachigen Arbeitsgruppe der ISFG, Köln,
13.-14.06.08.
44. Bugert P, Rolf N, Knöfler R, Suttorp M, Klüter H, Schedel A:
Correlation of platelet RNA profiles and platelet aggregation
response to arachidonic acid in patients with aspirin-like defect.
Hämostaseologie 28: A35 (2008) (V)
45. Bugert P, Scharberg E, Panter K, Penz S, Rink G, von Zabern
I, Schrezenmeier H, Richter E, Klüter H, Flegel WA:
RHCE antigen variants among 116,100 blood donors. 40th
Annual Meeting of the German Society for Trans fusion Medicine
and Immunohematology (DGTI), Friedrichshafen, 18-
21 September 2007.
Transfus. MeD Hemother. 34 (S1): 5 (Abstract No. V3.4)
(2007) (V)
46. Bugert P, Schedel A, Rolf N, Knöfler R, Suttorp M, Klüter H:
Correlation of platelet RNA profiles and platelet aggregation
response to arachidonic acid in patients with aspirin-like defect.
Transfus Med Hemother 35 (S1): S82-83 (2008) (P)
47. Bugert P, Schedel A, Schloss P, Klüter H: Expression of neuronal
receptors and transporters for neurotransmitters in
human platelets.
Hämostaseologie 27: A56 (2007) (V)
48. Bugert P, Schedel A, Schloss P, Klüter H: The dopaminergic
system of human platelets.
Platelets 18: S82 (2007) (V)
49. Bugert P, Seyboth S, Panter K, Rink G, Janetzko K, Richter
E, Klüter H, Scharberg EA: Four novel alleles associated
with subgroups of the ABO blood group.
Transfus Med Hemother 2008; 35 (Suppl 1): 27 (V)
50. Bugert P: Comparative Analysis of the Platelet Transcriptome
in Patients with Aspirin-like Defect. 1st Japanese-Polish-German
Meeting on Thrombosis, Dresden, 12.-14. Juli
2007.
51. Bugert P: Die Bedeutung der ABO-Genotypisierung bei der
Abstammungsbegutachtung. Wissenschaftliches Symposium
der Abstammungsgutachter, Arbeitskreis Süd, München,
01. Dezember 2007.
52. Cario, H, Sola, SR, Florensa, L, Neusuess, A, Pahl, HL,
Schwarz, K und Kohne, E. Molekulargenetische Unter suchungen
bei Patienten mit familiärer und sporadischer kongenitaler
primärer Erythrozytose. 103. Jahrestagung der
Deutschen Gesellschaft für Kinder- und Jugendmedizin
(DGKJ). Nürnberg, 13.-16. September 2007 (P).
53. Ciuculescu F, Giesen M, Deak E, Seifried E, Hartmann TN,
Henschler R: Lymphocyte-Activating Chemokines Are Potent
Inducers of Sudden Arrest and Firm Adhesion in Mesenchymal
Stromal Cells (MSCs) Under Shear Flow.
Blood (ASH Annual Meeting Abstracts), Nov 2008; 112:
2425. (P)
225

Forschungsbericht 2007 – 2008
54. Deak E, Rüster B, Göttig S, Puccetti E, Ruthardt M, Seifried
E, Scheele J, Henschler R: The Small GTPase Rap1A Is
Central for Migration and Adhesion of Mesenchymal Stromal
Cells (MSCs).
Blood (ASH Annual Meeting Abstracts), Nov 2008; 112:
2426 (P)
55. Deak E, Rüster B, Möbest D, Puccetti E, Ruthardt M, Seifried
E, Scheele J, Henschler R: The Small GTPase Rap1A Is
Central for Migration and Adhesion of Mesenchymal Stromal
Cells (MSCs).
Transfus Med Hemother 2008;35(suppl 1):19 (V)
56. Deak E, Rüster B, Möbest D, Puccetti, E, Ruthardt M, Seifried
E, Scheele J, Henschler R: The small GTPase Rap1A is
Central for Migration and Adhesion of Mesenchymal Stromal
Cells (MSCs).
Onkologie 2008;31(suppl 4):114 (V)
57. Elmas E, Bugert P, Popp T, Lang S, Weiss C, Wolpert C,
Brueckmann M, Borggrefe M, Kaelsch T The P-selectin polymorphism
val168met: a novel risk marker for the occurence
of primary ventricular fibrillation during acute
myocardial infarction.
J Amer Col Cardiol 51 (S10): A1 (2008) (P)
58. Fabian GA, Halebic R, Infanti L, Stötzer F, Bleyer G, Bollinne
V, Ehrbar M, Fangrad E, Uyttenhove A Double Red Cell Collection
using the ALYX Component Collection System new
Software.
Transfus Med Hemother 35 (P1A): S45 (2008) (V)
59. Fei F, Yu Y, Schmitt A, Chen J, Chen B, Rojewski M, Ringhoffer
M, Harsdorf S von, Greiner J, Götz M, Guillaume P,
Döhner H, Bunjes D, Schmitt M: Tyrosine kinase inhibitors
dasatinib, nilotinib and imatinib have an impact on both
CD8+ T lymphocytes and CD4+CD25+FoxP3+regulatory T
cells by downregulation of the NF-B pathway. 49th Annual
Meeting of the American Society of Hematology (ASH), Atlanta,
8-11 December 2007.
Blood 110 (11): 699a (Abstract No. 2368) (2007) (P)
60. Fei F, Yu YZ, Schmitt A, Chen J, Chen B, Rojewski MT, Greiner
J, Götz M, Guillaume P, Döhner H, Bunjes D, Schmitt M:
Dasatinib, nilotinib and imatinib exert immunosuppression
on leukaemia and viral antigen specific CD8+ T-lymphocytes
and CD4+CD25+FoxP3+ regulatory T-cells through downregulation
of the NF-B pathway. 34th Annual Meeting of the
European Group for Blood and Marrow Transplantation
(EBMT), Florence, 30 March – 2 April 2008.
Bone Marrow Transplantation 41 (S1): S224-S225 (2008) (P)
61. Felka T, Schäfer R, de Zwart P, Aicher WK: Expansion and
differentiation of bmMSC under FCS - free conditions 3rd
int. Congress on Regenerative Biology and Medicine (Bio
Star), October 2008, Stuttgart, Germany (Poster Award) (P)
62. Felka T, Schäfer R, Schewe B, Aicher WK: Chondrogenic
differentiation of FCS-free expanded, human bone marrow
derived MSC under hypoxic conditions 2nd International
Congress on Stem Cell and Tissue formation 2008 Dresden,
Germany (P)
63. Findhammer S, Geisen C, Müller MM, Müller-Kuller T, Sireis
W, Seifried E: Die Transfusion von Blutpräparaten – Ein Leitfaden
für die Kitteltasche. DRK-Blutspendedienst Baden-
Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH, Frankfurt am
Main, 2008, Version 3 und: DRK-Blutspendedienst Ost gemeinnützige
GmbH; Dresden, 2008; Version 1 und: DRK-
Blutspendedienst Nord gemeinnützige GmbH; Lütjensee,
2008; Version 1
64. Findhammer S, Müller-Kuller T, Koerner K, Karl A, Wiesneth
M; Seifried E, Sireis W: Results of an Error-Risk-Management
Reporting System (ERMS) at the Red Cross Blood
Donor Service Baden-Württemberg - Hessen in 2007, An-
226
nual Meeting of the German Society for Transfusion Medicine
and Immunohematology (DGTI), Düsseldorf, 16.-19.
September
65. Flegel WA, Binder H, Emran J, Müller A, Cupisti S, Beckmann
MW, Eckstein R, Dittrich R, Ringwald J: Blood group
A: An overseen risk factor for early-onset ovarian hyperstimulation
syndrome? Annual Congress of the Ger man Society
for Transfusion Medicine and Immunohaematology
(DGTI), Düsseldorf, 16-19 September 2008. Trans fus.
Med Hemother. 35 (S1): 8 (Abstract No. O 3.6) (2008) (V)
66. Flegel WA, Von Zabern I, Kroll H, Just B: Rare blood utilization
during a 2.5 years observation period in Ger many.
XXXth International Congress of the International Society of
Blood Transfusion (ISBT), Macao, 7-12 June 2008.
Vox Sang. 95 (S1): 114 (2008) (Abstract No. P-114) (2008) (P)
67. Flegel WA, Wagner FF: Genotyping of red blood cell, granulocyte
and platelet antigens: Current applications in the German-speaking
countries. Annual Congress of the German
Society for Transfusion Medicine and Immuno haematology
(DGTI), Düsseldorf, 16-19 September 2008. Transfus.
Med Hemother. 35 (S1): 26 (2008) [S 3.2]
68. Flegel WA, Zabern I von, Doescher A, Wagner FF, Vytiskova
J, Pisacka M: DCS-1, DCS-2 and DFV share amino acid
substitution at the RhD protein vestibule. AABB Annual
Meeting, Anaheim, CA, 20-23 October 2007.
Transfusion 47 (3S): 11A (Abstract No. S22-030E) (2007) (V).
69. Flegel WA, Zabern I von: QA (quality assurance) of D negative
red cell units. Reading (England): BGS Meeting,
13.04.2007 (V)
70. Flegel WA: Alleles of the RH blood group systems in various
populations: Mexico City: Universidad Panamericana,
12.10.2007 (V)
71. Flegel WA: Antenatal determination of fetal RhD status (Ko-
Vorsitz einer Sitzung). 40. Jahreskongress der Deutschen
Gesellschaft für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie
(DGTI), Friedrichshafen, 19.09.2007 (V)
72. Flegel WA: Bestimmung des molekularen Weak-D-Typs: Differentialindikation
für die Anti-D-Immunprophylaxe. 40. Jahreskongress
der Deutschen Gesellschaft für
Transfusionsmedizin und Immunhämatologie (DGTI), Friedrichshafen,
19.09.2007 (V)
73. Flegel WA: Cellular Antigens and Immunohematology II
(Chair of session). Düsseldorf: 41. Jahreskongress der Deutschen
Gesellschaft für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie,
17.09.2008 (V)
74. Flegel WA: Complexities of Rh system: serological and molecular
aspects. Sao Paulo (Brasilien): II. Meeting in Immunohematology,
Instituto de Ensino e Pesquisa, Hospital Sirio
Libanes, 21.09.2007 (V)
75. Flegel WA: DNA analysis vs. serology. 60th AABB Annual
Meeting, Anaheim, CA, 23.10.2007 (V)
76. Flegel WA: Donors and patients with weak D and DEL phenotypes.
Impact on blood bank practices. Pomona, CA:
American Red Cross Blood Services, Southern California
Region, 18.10.2007 (V)
77. Flegel WA: Educational Workshop 3: Rare BlooD Düsseldorf:
41. Jahreskongress der Deutschen Gesellschaft für Transfusionsmedizin
und Immunhämatologie, 16.09.2008 (V)
78. Flegel WA: Erythrozytenantigene. Bielefeld: Transfusionsmedizinisches
Seminar für Ärzte in der Weiterbildung zur Transfusionsmedizin
der DGTI und des BDT, 19.02.2007 (V)
79. Flegel WA: Erythrozytenantigene: Klinische Bedeutung. Bieliefeld:
Transfusionsmedizinisches Seminar für Ärzte in der
Weiterbildung zur Transfusionsmedizin der DGTI und des
BDT, 19.05.2008 (V)

80. Flegel WA: Genotyping of red blood cell, granulocyte and
platelet antigens: current applications in the German-speaking
countries. Düsseldorf: 41. Jahreskongress der Deutschen
Gesellschaft für Transfusionsmedizin und
Immunhämatologie (DGTI), 17.09.2008 (V).
81. Flegel WA: Interactive question and answer session. Sao
Paulo (Brasilien): II. Meeting in Immunohematology, Instituto
de Ensino e Pesquisa, Hospital Sirio Libanes, 21.09.2007
82. Flegel WA: Management of donors and patients with weak
D and DEL phenotypes: impact on blood bank practices.
Sao Paulo (Brasilien): II. Meeting in Immunohematology, Instituto
de Ensino e Pesquisa, Hospital Sirio Libanes,
21.09.2007 (V)
83. Flegel WA: Mass scale genotyping technology for blood
groups. Shenzhen (China): Germany-Austria-China Academic
Exchange Conference on Blood Group, 06.06.2008 (V)
84. Flegel WA: Microarray technology: availability and practical
applications. Sao Paulo (Brasilien): II. Meeting in Immunohematology,
Instituto de Ensino e Pesquisa, Hospital Sirio Libanes,
21.09.2007 (V).
85. Flegel WA: Molecular analysis of Rh(D) negative donors:
cost efficiency. Madrid: XVII. Regional Congress Europe of
the International Society of Blood Transfusion (ISBT),
25.06.2007 (V).
86. Flegel WA: Molecular genotyping in blood transfusion. Toronto:
University of Toronto – citywide transfusion rounds
(webcasted), 07.05.2007 (V).
87. Flegel WA: Molecular screening for weak D and DEL donors.
Nanjing (China): Nanjing Red Cross Blood Center,
16.06.2008 (V)
88. Flegel WA: Molecular screening for weak D and DEL donors.
Shenzhen (China): Germany-Austria-China Academic Exchange
Conference on Blood Group, 06.06.2008 (V)
89. Flegel WA: Molecular screening for weak D and DEL donors.
Wuhan (China): Tongji University Hospital, 13.06.2008 (V)
90. Flegel WA: Molekulares Blutgruppenscreening. Schlieren
(Schweiz): Stiftung Zürcher Blutspendedienst SRK, Dienstleistungszentrum
Zürich-Schlieren, 04.11.2008 (V)
91. Flegel WA: Rh system – what to do about weak D inpatients
and donors. Calgary: Canadian society of Transfusion Medicine
Conference, 03.05.2007 (V)
92. Furlan Freguia C, Schuettrumpf J, Baila S, Liu J, Bunte R,
Camire RM, Arruda VR: Novel Models of Thrombophilia Result
in Spontaneous Peripheral Thrombosis and Pregnancy-
Related complications, ISTH Geneva, 2007 (V)
93. Furlan Freguia C, Schuettrumpf J, Zou J, Schlachterman A,
Downey HD, Baila S, Zhou S, Arruda VR: In vivo Effects of
Murine and Human APC, ISTH Geneva, 2007 (V)
94. Fürst D, Pabst K, Kress R, Reinhardt P, Mayr-Wohlfart U,
Koerner K, Wiesneth M, Schrezenmeier H, Mytilineos J:
Comprehensive antibody screening in apheresis donors with
suspected risk for induction of TRALI. 16 Jahrestagung der
DGI, Essen, 25.-27.09.2008
95. Fürst D, Pabst K, Reinhardt P, Mayr-Wohlfart U, Kress R,
Koerner K, Wiesneth M, Schrezenmeier H, Mytilineos J:
Comprehensive antibody-screening in apheresis donors
with suspected risk for induction of TRALI. Annual Congress
of the German Society for Transfusion Medicine and Immunohaematology
(DGTI), Düsseldorf, 16-19 September 2008.
Transfus. MeD Hemother. 35 (S1): 74-75 (Abstract No. P
6/8.03) (2008) (P)
Wissenschaftliche Vorträge, publizierte Abstracts 2007 – 2008
96. Fürst D, Schrezenmeier H, Mytilineos J: Comprehensive antibody
screening in apheresis donors with suspected risk for
induction of TRALI. 34th ASHI Annual Meeting, Toronto, 27.-
31.10.2008.
Human Immunology 2008, 197-P, page 104
97. Fürst D: HLA- an HNA-antibody screening in apheresis-donors
with suspected risk for induction of TRALI. Rottach-
Egern: European Clinical Histocompatibility Workshop,
27.06.2008 (V)
98. Fürst D: HLA- und HNA-Antikörperbestimmung mit Luminex
– Vorstellung der Ulmer Daten. St. Wendel: HLA-Fortbildungsveranstaltung
der Stefan-Morsch-Stiftung, 29.05.2008
(V)
99. Fürst, D; Pabst, K; Reinhardt, P.; Mayr-Wohlfahrt, U; Kress,
R; Körner, K; Wiesneth M; Schrezenmeier, H; Mytilineos, J:
HLA and HNA antibody screening in apheresis donors with
suspected risk for induction of TRALI. European Clinical
Histocompatability Workshop, Rottach-Egern,
26.-28.06.2008
100. Geisen C, Luxembourg B, Sittinger K, Toennes SW, Watzka
M, Lindhoff-Last E, Seifried E, Oldenburg J (2007): Pharmacogenetics
of oral anticoagulation – VKORC1-haplotypes
determine the inter-individual variability. 21th Congress of
the International Society on Thrombosis and Haemostasis
(ISTH), Genf, 06.-12. Juli 2007.
Thromb Haemost 2007, 5 Supplement 2: P-T-648(P)
101. Geisen C, Luxembourg B, Sittinger K, Toennes SW, Watzka
M, Lindhoff-Last, Seifried E, Oldenburg J (2008): Association
of phenprocoumon dose with genes involved in its action
and metabolism. 52. Jahrestagung der Gesellschaft für
Thrombose- und Hämostaseforschung e. V., Wiesbaden,
20.-23. Februar 2008. (P)
102. Geisen C, Luxembourg B, Sittinger K, Toennes SW, Watzka
M, Lindhoff-Last E, Seifried E, Oldenburg J (2008): Coumarin
pharmacogenetics: VKORC1-haplotypes mainly determine
the inter-individual variability. 20. Congreso del Grupo
Cooperativo Latinoamericano de Hemostasia y Trombosis,
8. Congreso del Grupo Cooperative Argentino de Hemostasia
y Trombosis, Buenos Aires, Argentina, 23.-26. April
2008.
Acta Bioquim Clin Latinoam 2008; Suppl. 1, 75 (V)
103. Geisen C, Luxembourg B, Sittinger K, Toennes SW, Watzka
M, Lindhoff-Last E, Seifried E, Oldenburg J (2008): Association
of phenprocoumon dose with genes involved in its action
and metabolism. Joint Annual Congress of the German
Society for Transfusion Medicine and Immunohaematology
(DGTI), Düsseldorf, 16.-19. September 2008.
Transfus Med Hemother 2008;35(suppl 1):1-96; 35 (V)
104. Geisen C, Luxembourg B, Sittinger K, Tönnes SW, Watzka
M, Lindhoff-Last E, Seifried E, Oldenburg J (2007):
VKORC1-haplotypes determine the inter-Individual variability
in phenprocoumon treatment. 40th Annual Meeting of
the German Society for Transfusion Medicine and Immunohematology
(DGTI), Friedrichshafen, 18-21. September
2007.
Transfus med Hemother 2007; 34(suppl 1); 47 (P)
105. Geisen C, Luxembourg B, Sittinger K, Tönnes SW, Watzka
M, Seifried E, Lindhoff-Last E, Oldenburg J (2007): Pharmacogenetics
of phenprocoumon treatment – VKORC1-haplotypes
determine the inter-individual variability. 14.
Dreiländertagung der Deutschen, Österreichischen und
Schweizerischen Gesellschaft für Angiologie (DGA), München,
9.-12. September 2007 (V)
227

Forschungsbericht 2007 – 2008
106. Geisen C, Schwind P, Seifried E (2007): Rapid multi-parameter
blood grouping without centrifugation – performance
evaluation with donor, patient and neonatal samples. 40th
Annual Meeting of the German Society for Transfusion Medicine
and Immunohematology (DGTI), Friedrichshafen, 18-
21. September 2007.
Transfus med Hemother 2007; 34(suppl 1); 55 (P)
107. Geisen C, Sittinger K, Spohn G, Dimichele DM, Haubelt H,
Heistinger M, Kadar JG, Kemkes-Matthes B, Klamroth R,
Lages P, Lindhoff-Last E, Luxembourg B, Mansouri Taleghani
B, Pollmann H, Spannagl M, Zimmermann R, Seifried
E, Oldenburg J (2007): Seven novel missense mutations in
the Vitamin K epoxide reductase complex subunit 1
(VKORC1) cause hereditary Coumarin resistance. 21th Congress
of the International Society on Thrombosis and Haemostasis
(ISTH), Genf, 06.-12. Juli 2007.
Thromb Haemost 2007, 5 Supplement 2: P-M-506 (P)
108. Geisen C, Watzka M, Sittinger K, Spohn G, Dimichele DM,
Haubelt H, Heistinger M, Kadar JG, Kemkes-Matthes B,
Klamroth R, Lages P, Lindhoff-Last E, Luxembourg B, Mansouri
Taleghani B, Pollmann H, Spannagl M, Zimmermann R,
Seifried E, Oldenburg J (2008): Hereditary Coumarin resistance
caused by eight novel missense mutations in the vitamin
K epoxide reductase complex subunit 1 (VKORC1). 20.
Congreso del Grupo Cooperativo Latinoamericano de Hemostasia
y Trombosis, 8. Congreso del Grupo Cooperative
Argentino de Hemostasia y Trombosis, Buenos Aires, Argentina,
23.-26. April 2008.
Acta Bioquim Clin Latinoam 2008; SupL 1, 102 (P)
109. Geisen C, Watzka M, Sittinger K, Spohn G, Haubelt H, heistinger
M, Kadar J, Kemkes-Matthes B, Klamroth R, Lages P,
Luxembourg B, Mansouri Taleghani B, Pollmann H, Spannagl
M, Seifried E, Oldenburg J (2008): Eight new VKORC1mutations
cause coumarin resistance. 52. Jahrestagung der
Gesellschaft für Thrombose- und Hämostaseforschung e. V.,
Wiesbaden, 20.-23. Februar 2008.
Hämostaseologie 1-2/2008, A9 (V)
110. Geisen C, Watzka M, Sittinger K, Spohn G, Kadar JG, Mansouri
Taleghani B, Spannagl M, Seifried E, Oldenburg J
(2007): Eight novel missense mutations in the vitamin K epoxide
reductase complex subunit 1 (VKORC1) cause hereditary
Coumarin resistance. 40th Annual Meeting of the
German Society for Transfusion Medicine and Immunohematology
(DGTI), Friedrichshafen, 18-21. September 2007.
Transfus Med Hemother 2007; 34(suppl 1); 19 (V)
111. Giannopoulos K, Kowal M, Dmoszynska A, Rolinski J, Mazurek
K, Greiner J, Rojewski M, Stilgenbauer S, Döhner H,
Schmitt M: Peptide vaccination induces dynamic changes in
CD4+ and CD8+ T cell subsets: Report on the first peptide
vaccination trial in patients with chronic lymphocytic leukaemia
(CLL). 50th Annual Meeting of the American Society of
Hematology (ASH), San Francisco, 6-9 December 2008.
Blood 112: 1083-1084 (Abstract No. 3159) (2008) (P)
112. Giese T, Sommerer C, Zeier M and Meuer S: Pharmacodynamic
controlled tapering of Cyclosporine A – a new step
towards individualized immunosuppressive therapy in transplanted
patients. FOCIS Meeting San Diego 07.-11. Juni
2007 (P)
113. Giese T, Sommerer C, Zeier M and Meuer S: Pharmacodynamic
Cyclosporin-A monitoring shows a close relationship
between individual degree of immunosuppression and incidence
of malignant diseases. 8th International Conference
on New Trends in Immunosuppression and Immunotherapy,
Berlin, 14.-17. Februar 2008 (P)
114. Giese T, Sommerer C, Zeier M and Meuer S: Pharmacodynamic
Cyclosporin-A monitoring shows a close relationship
between individual degree of immunosuppression and incidence
of malignant diseases. FOCIS Meeting Boston 05.-
09. Juni 2008 (P)
228
115. Giese T: Different mechanisms of immunosuppression caused
by Cyclosporine A (CsA) and FK506.Joint Annual Meeting
of Immunology of the ÖGAI & DGfI, Wien 03.-06.
September 2008 (V)
116. Giese T: Immunosuppression and cancer: Approaches towards
individualized immune intervention. 2nd Mediterranen
Clinical Immunology Meeting, Antalya, 04.-07. October 2008
(V)
117. Giese T: Molekulardiagnostik in der Transplantationsnachsorge:
Von der individuellen Risikoanalyse zur individualisierten
Therapie. Roche LC480 Anwendertreffen; Fulda, 25.
Oktober 2007 (V)
118. Giese T: Pharmacodynamic controlled tapering of Cyclosporine
A – a new step towards individualized immuno-suppressive
therapy in transplanted patients. 37. Jahrestagung
der DGFI Heidelberg; 05.-08. September 2007 (V)
119. Goettig S, Pinter, A, Deak, E, Stroebele, C, Seifried, E, Cancelas,
J, Williams DA, Gille J, Henschler R: Rac GTPases
Modulate Migration of Hematopoietic Progenitor Cells in an
SDF-1 Dependent Manner in a Tumor ModeL Blood (ASH
Annual Meeting Abstracts), Nov 2007; 110: 222. (V)
120. Goettler S, Fritze O, Voth V, Schleicher M, Schäfer R, Ziemer
G, Stock UA: Characterization of Endothelial Progenitor
Cells (EPC) in Healthy Volunteers 3rd int. Congress on Regenerative
Biology and Medicine (Bio Star), October 2008,
Stuttgart, Germany (P)
121. Gößler U, Bugert P, Bieback K, Stern-Sträter J, Bran G, Hörmann
K, Riedel F: Vergleich der Integrin-Expression während
chondrogener Differenzierung Mesenchymaler
Stammzellen aus Knochenmark, Fettgewebe und Nabelschnurblut
für Knorpel-Tissue Engineering. GMS Curr Posters
Otorhinolaryngol Head Neck Surg 3: Doc 69 (2007) (P)
122. Gößler U, Bugert P, Bieback K, Stern-Sträter J, Bran G, Hörmann
K, Riedel F: In vitro-Analyse der Integrin-Expression
Mesenchymaler Stammzellen für das Knorpel-Tissue Engineering.
91. Jahrestagung der Vereinigung Südwestdeutscher
Hals-Nasen-Ohrenärzte 28. - 29.09.2007 (V)
123. Göttert E; Heine SE.; Christmann A; Martin T; Schwarz K;
Graf N und Oehl-Jaschkowitz B: X-linked Bruton agammaglobulinaemia
in a girl with atypical Turner-Syndrome. 19.
Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Humangenetik
(GFH) Hannover, 8. -10. April 2008 (P).
124. Göttig S, Gille J, Williams DA, Cancelas J, Seifried E,
Henschler R: Modulation of Rac GTPases Bi-Directionally
Regulates Tumor Growth via the Migration Response to SDF
in Progenitor Cells.
Transfus Med Hemother 2008;35(suppl 1):8 (V)
125. Greiner J, Schmitt A, Giannopoulos K, Chen J, Götz M, Rojewski
M, Ritter G, Gnjatic S, Guillaume P., Ring hoffer M,
Bommer M, Schlenk RE, Liebisch P, Bunjes D, Shiku H,
Döhner H, Schmitt M: Immunological and clinical responses
in patients with acute myeloid leukemia (AML), myelodysplastic
syndrome (MDS), multiple mye loma (MM) and chronic
lymphocytic leukemia (CLL) after RHAMM-R3 peptide
vaccination. 49th Annual Meeting of the American Society of
Hematology (ASH), Atlanta, 8-11 December 2007.
Blood 110 (11): 535a (Abstract No. 1806) (2007) (P)
126. Greiner J, Schmitt A, Giannopoulos K, Chen J, Liebisch P,
Ringhoffer M, Guillaume P, Ritter G, Bommer M, Rojewski
M, Gnjatic S, Döhner H, Schmitt M: RHAMM/CD168-R3
peptide vaccination of patients with acute myeloid leukemia,
myelodysplastic syndrome, multiple myleoma and
chronic lymphatic leukemia elicits immunologi cal and clinical
responses. 12th Congress of the European Hematology
Association, Vienna, 7-10 June 2007.
haematologica 92 (S1): 154 (2007) (V)

127. Greiner J, Schmitt A, Giannopoulos K, Funk I, Heyduk M,
Rojewski M, Chen J, Goetz M, Bommer M, Ritter G, Guillaume
P, Dmoszynska A, Döhner H, Schmitt M: High-dose
RHAMM-R3 peptide peptide vaccination for patients with
vaccination for patients with acute myeloid leukaemia
(AML), myelodysplastic syndrome (MDS), multi ple myeloma
(MM) and chronic lymphocytic leukaemia (CLL). 50th Annual
Meeting of the American Society of Hematology (ASH), San
Francisco, 6-9 December 2008.
Blood 112: 1001 (Abstract No. 2911) (2008) (P)
128. Greiner J, Schmitt A, Rojewski M, Chen J, Götz M, Heyduk
M, Giannopoulos K, Ritter G, Gnjatic S, Guillaume P, Ringhoffer
M, Schlenk R, Liebisch P, Bunjes D, Shiku H, Döhner
H, Schmitt M: Immunological and clinical responses in patients
with haematological malignancies after RHAMM-R3
peptide vaccination. Gemeinsame Jah restagung der Deutschen,
Österreichischen und Schweizerischen Gesellschaften
für Hämatologie und Onkologie (DGHO), Basel, 5. -9.
Oktober 2007.
Onkologie 30 (S3): 55 (2007) (V)
129. Greiner J, Torzewski J, Ponsaerts P, Rojewski M, Kronawitter
D, Schrezenmeier H, Hombach V, Döhner H, Schmitt M,
Wiesneth M, Zimmermann O, Wiehe JM: Highly efficient
mRNA- and cDNA-based transient gene delivery into human
progenitor cells. 33rd Annual Meeting of the European
Group for Blood and Marrow Transplanta tion (EBMT), Lyon,
25-28 March 2007.
Bone Marrow Transplantation 39 (S1): S216 (2007) (P)
130. Greiner J, Torzewski J, Ponsearts P, Rojewski M, Kronwitter
D, Schrezenmeier H, Hombach V, Döhner H, Schmitt M,
Wiesneth M, Zimmermann O, Wiehe JM: Genetic labeling of
human CD34-positive hematopoietic pro genitor cells and
mesen chymal stem cells by highly efficient mRNA-based
gene transfer. 12th Congress of the Euro pean Hematology
Association, Vienna, 7-10 June 2007.
haematologica 92 (S1): 68-69 (2007) (V)
131. Greiner J, Wiesneth M, Schmitt M, Ponsaerts P, Rojewski M,
Schrezenmeier H, Hombach V, Döhner H, Torzewski J,
Wiehe J: mRNA transfection with nucleofection is an efficient
tool to transiently manipulate leukaemic cells, normal
CD34 positive haematopoietic progenitor cells and mesenchymal
stem cells. Gemeinsame Jahres tagung der Deutschen,
Österreichischen und Schweizerischen
Gesellschaften für Hämatologie und Onkologie (DGHO),
Basel, 5. -9. Oktober 2007.
Onkologie 30 (S3): 208 (2007) (P)
132. Gupta V, Carreras J, Bajorunaite R, Gale RP, Sabloff M, Aljurf
M, Schrezenmeier H, Socié G, Passweg J, Ringdén O,
Pasquini R, Marsh J, Eapen M: Hematopoietic recovery and
overall survival after HLA-matched sibling transplants for
older patients with severe aplastic anemia (SAA). 50th Annual
Meeting of the American Society of Hematology (ASH),
San Francisco, 6-9 December 2008.
Blood 112: 756 (Abstract No. 2169) (P)
133. Ha AT, Hecker A, Kocaömer A, Bugert P, Sticht C, Klüter H,
Bieback K: Differential Gene and Protein Expression of Mesenchymal
Stem Cells Induced by Human AB-Serum and
Thrombin-activated Platelet Releasate versus Fetal Calf
Serum. O4.5.
Transfus Med Hemother 35(S1) (2008) (V)
134. Haas SL, Böcker U, Bugert P, Singer MV, Backhaus JP: Application
of Fourier transform near-infrared spectroscopy of
serum samples in patients with inflammatory bowel disease
– a pilot study.
Gastroenterol 134 (S4): A201 (2008) (P)
135. Haben M, Nieberle I, Hirv K, Rojewski M, Schmid C, Wiezmüller
S, Kunze S, Ehlert J, Mytilineos J, Knabe H, Klein H-
G, Wölpl A: Eine AML-Patientin mit einem unklaren DNA und
Wissenschaftliche Vorträge, publizierte Abstracts 2007 – 2008
einem eindeutigen serologischen HLA-Ergebnis: Ein ungewöhnlicher
FalL 15. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft
für Immungenetik (DGI), München, 18. - 20. Oktober
2007
136. Harsdorf S von, Schmid C, Schmitt M, Ringhoffer M,
Schlenk RF, Wochnik A, Wiesneth M, Kolb HJ, Döhner H,
Bunjes D: Inferior survival in patients with refractory acute
myeloid leukaemia and extramedullary disease or high leukaemia
burden after sequential treatment with chemotherapy
and reduced-intensity conditioning for allogeneic stem
cell transplantation. 34th Annual Meeting of the European
Group for Blood and Marrow Transplantation (EBMT), Florence,
30 March – 2 April 2008.
Bone Marrow Transplantation 41 (S1): S105-S106 (2008) (P)
137. Harsdorf S von, Schmitt M, Ringhoffer M, Schlenk R, Döhner
H, Wiesneth M, Bun jes D: Efficacy and tolerability of the
novel mTOR antagonist Everolimus (RAD001) in treatment of
patients with advanced chronic GcHD after allogeneic stem
cell trans plantation. 33rd Annual Meeting of the European
Group for Blood and Marrow Trans plan tation (EBMT), Lyon,
25-28 March 2007.
Bone Marrow Transplantation 39 (S1): S106 (2007) (P547)
138. Hecker A, Lannert H, Kocaömer A, Klüter H, Bieback K: Differential
effects of human alternative Supplements replacing
FCS on Mesen-chymal Stromal Cells from Different Human
Tissues.
P12.05 Transfus Med Hemother 35(S1) (2008) (P)
139. Heinz S, Picanco V, Abriss D, Seifried E, Tonn T: Third generation
lentiviral vectors containing the minimal FVIII promoter
sequence are suitable for stable expression of
coagulation factor VIII in primary hepatocytes and hepatic
cell lines (oral presentation) 52. Jahrestagung der Deutschen
Gesellschaft für Thrombose- und Hämostaseforschung
(GTH), Wiesbaden, 20.-23. Februar 2008
140. Heinz S, Picanco V, Abriss D, Tonn T, Seifried E: The minimal
FVIII promoter sequence is suitable for stable expression in
primary hepatocytes and hepatic cell lines using third generation
lentiviral vectors. International Congress of the International
Society of Blood Transfusion (ISBT), Macao, 7. - 12.
June 2008
141. Heinz S, Picanco V, Bott D, Abriss D, Seifried E, Tonn T: Recombinant
expression of coagulation factor VIII in primary
hepatocytes and hepatic cell lines stably transduced with
3rd generation lentiviral vectors comprising the minimal FVIII
promoter. 40. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für
Transfusionsmedizin und Immunhämatologie (DGTI) e.V.,
Friedrichshafen am Bodensee, 18.-21. September 2007
142. Heinz S, Simpson J, Tonn T, Seifried E: Analysing coagulation
factor VIII (FVIII) trafficking pathways and biodistribution
using FVIII-GFP fusion proteins. 30th International Congress
of the International Society of Blood Transfusion (ISBT),
Macao, 7.-12. June 2008
143. Heinz S, Went D, Bott D, Seifried E, Tonn T: Inclusion of an
untranslated region improves factor VIII expression several
fold in hematopoetic cells and cell lines used for recombinant
expression. 51. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft
für Thrombose- und Hämostaseforschung (GTH),
Dresden, 21.-24. Februar 2007
144. Heinz S, Went D, Tonn T, Seifried E: Improvement of recombinant
FVIII expression in monocytic and megakaryocytic lineage
hematopoietic cells through introduction of FXIIIA
regulatory elements. International Congress of the International
Society of Blood Transfusion (ISBT), Macao, 7. - 12.
June 2008
229

Forschungsbericht 2007 – 2008
145. Henschler D, Wiesneth M, Pfeiffer HU, Müller M, Lin L, Corash
L, Seifried EJ: Generation of Double Dose Platelet Concentrates
from Pooled Buffy-Coats for Pathogen
Inactivation with Intercept.
Vox Sang 2008;95;SuppL 1:315 (V)
146. Henschler R, Bistrian R, Forssmann W-G, Forssmann U
Spodsberg N, Seifried E, Richter R: Platelets and Granulocytes
Process Circulating SDF-1alpha to Isoforms which
Modulate CXCR4 and CXCR7 Receptors.
Transfus Med Hemother 2008;35(suppl 1):9 (V)
147. Henschler R, Pfeiffer HU, Wiesneth M, Müller M, Andresen
S, Vermeij H, Krämer A, Irsch J, Lin L, Corash L, Seifried E:
Development of a double-dose platelet concentrate from 7
buffy coats using the INTERCEPT procedure for pathogen
inactivation. Annual Congress of the German Society for
Transfusion Medicine and Immunohaema tology (DGTI), Düsseldorf,
16-19 September 2008.
Transfus. Med Hemother. 35 (S1):58 (Abstract No. P 2.07)
(2008) (P)
148. Henschler R: „High Throughput Centers – Safety and Economics
– The Frankfurt Experience”. Pathogen Inactivation
Conference, Barcelona, 10.04.2008 (V)
149. Henschler R: „Implementation of Intercept Pathogen Inactivation
of Plasma and Platelets in a High Volume Center“.12th
„Euro SAT Seminars for Advances in Transfusion”
der Französischen Gesellschaft für Transfusionsmedizin
(SNTS), Paris, F, 04.10.2007 (V)
150. Henschler R: „Mesenchymal Stem Cells (MSC) Exhibit Coordinated
Rolling and Adhesion on Endothelial Cells“. Symposium:
„Induction Of Immunologic Tolerance By
Mesenchymal Stem Cells”, Düsseldorf, 12.09.2007 (V)
151. Henschler R: „Mesenchymal Stromal Cells Display Coordinated
Rolling and Adhesion Behaviour on Endothelial Cells”.
European Life Science Organisation, Dresden, 01.09.2007
(V)
152. Henschler R: „Rac GTPases Modulate Migration of Hematopoietic
Progenitor Cells in an SDF-1a Dependent Manner in
a Tumor Model”. 49th Annual Meeting of the American Society
of Hematology, Atlanta, USA, 09.12.2007 (V)
153. Henschler R: „Considerations of Pathogen Inactivation Implementation
in a High Volume Blood Bank Environment”.
40. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Transfusionsmedizin,
Friedrichshafen, 22.09.2007 (V)
154. Henschler R: „Implementation in a High Volume Center: in
vitro Characteristics of INTERCEPT Plasma”. Tagung der Internationalen
Gesellschaft für Transfusionsmedizin (ISBT,
European Branch), Madrid, E, 26.06.2007 (V)
155. Henschler R: „Mesenchymal Stem Cells Interact in a Coordinated
Fashion with the Vessel Wall under Conditions of
Shear Stress”. 2nd International Congress on Stem Cells
and Tissue Formation, Dresden, 06.07.2008 (V)
156. Henschler R: „Rac 2 GTPase Expression Modulates Adhesion
Behaviour, Homing and Tumor Growth in a Mouse
Model“. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Hämatologie
und Onkologie (DGHO) in Basel: Basel, CH,
05.10.2007 (V)
157. Henschler, R: „Homing of Mesenchymal Stromal Cells“.
Symposium on Non-Hematopoietic Stem Cells, Tübingen,
05.04.2008 (V)
158. Hillmen P, Muus P, Dührsen U, Risitano A, Schubert J,
Young NS, Schrezenmeier H, Szer J, Brodsky RA, Hill A,
Socié G, Bessler M, Rollins SA, Rother RP, Bell L, Luzzatto
L: The terminal complement inhibitor eculi zumab reduces
thrombosis in patients with paroxysmal nocturnal hemoglo-
230
binuria. 12th Congress of the European Hematology Association,
Vienna, 7-10 June 2007.
haematologica 92 (S1): 138 (2007) (V)
159. Hinrichs J, Lulai S, Neumann N, Figueiredo C, Hirv K,
Blasczyk R, Horn P, Eiz-Vesper B,: Discrimination of NULL
an low expression of HLA by cytokine induced secretion
method using soluble HLA*30142.16. Jahrestagung der
DGI, Essen, 25.-27.09.2008, 16. Jahrestagung der DGI,
Abstractbuch, Seite 46, P8
160. Hintze C, Rüster B, Ströbele C, Göttig S, Seifried E,
Henschler R: Adhesion and Homing Function of Erythrocytic
Progenitor Cells as Prerequisite for Their Use as Erythrocytic
Substitution Therapy.
Transfus Med Hemother 2008;35(suppl 1):19:31 (V)
161. Hirv K, Begovic M, Hees S, Flach C, Schrezenmeier H, Mytilineos
J: Die Häufigkeit der HLA-Expressions varianten bei
Spendern des Knochenmark-Stammzell-Spender zentrums
Ulm. 15. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Immungenetik
(DGI), München, 18. - 20. Oktober 2007
162. Hirv K, Begovic M, Hees S, Flach C, Schrezenmeier H, Mytilineos
J: Estimated frequency of HLA-A and HLA-B low expression
and null alleles in 10690 donors of the Bone
Marrow Donor Registry Ulm. European Immunogenetics and
Histocompatibility Conference, Toulouse, 2 – 5 April, 2008.
Tissue Antigens 71 (2008), 265-398 (279-0-37)
163. Hirv K, Begovic M, Hees S, Flach C, Schrezenmeier H, Mytilineos
J: Estimated frequency of HLA-A and HLA-B low expression
and null alleles in 10690 donors of the Bone
Marrow Donor Center, Ulm. 15th International Histocompatibility
and Immunogenetics Workshop and Conference, Rio
de Janeiro, 13-20 September 2008.
Tissue Antigens 73: 310 (2008) [P-144].
164. Hirv K, Bloch K, Fischer M, Schrezenmeier H, Mytilineos J:
Estimation of duration and success of unrelated stem cell
donor searches, based on HLA-DRB1 allele and DRB1-
DQB1 haplotype frequencies. 33rd Annual Meeting of the
European Group for Blood and Marrow Transplantation
(EBMT), Lyon, 25-28 March 2007.
Bone Marrow Transplantation 39 (S1): S135 (2007) (P626)
165. Hirv K: Beurteilung der KIR-Kompatibilität. Ulm: Klinik für
Kinder- und Jugendmedizin, 14.02.2008 (V)
166. Hirv K: Sequenzierung - ein praktischer Erfahrungsaustausch.
DGI-Tagung 2007, München, 18.-20.10.2007 (V)
167. Höchsmann B, Körper S, Becker T, Baur G, Leichtle R, Rojewski
M, Schrezenmeier H: Flow cytometric analy sis for paroxysmal
nocturnal hemoglobinuria (PNH): A simple and
rapid method for diagnosis and serial moni toring, 40th Annual
Meeting of the German Society for Transfusion Medicine
and Immunohematology (DGTI), Friedrichshafen, 18-21
September 2007.
Transfus. MeD Hemother. 34 (S1): 20 (2007) (V)
168. Höchsmann B, Körper S, Becker T, Baur G, Leichtle R,
Rojewski M, Schrezenmeier H: Flow cytometric analysis: A
simple and rapid method for diagnosis and serial monitoring.
13th Congress of the European Hematology Association
(EHA), Copenhagen, 12-15 June 2008.
haematologica 93 (S1): 564 (2008) [1497].
169. Höchsmann B, Körper S, Becker T, Baur G, Leichtle R, Rojewski
M, Schrezenmeier H: A simple and rapid flow cytometric
analysis for diagnosis and serial monitoring of
paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH). Jahres tagung
der Deutschen Gesellschaft für Hämatologie und Onkologie
(DGHO), Wien, 10.-14. Oktober 2008.
Onkologie 31 (S4): 210 (2008) [P608].

170. Höchsmann B, Rojewski M, Flegel WA, Schrezenmeier H:
Direct antiglobulin test, ferritin and GPI-negative cell populations
in patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria
(PNH) during eculizumab therapy: Extravascular
hemolysis unmasked by efficient eculizumab-mediated inhibition
of intravascular hemolysis. 50th Annual Meeting of
the American Society of Hematology (ASH), San Francisco,
6-9 December 2008.
Blood 112: 1180 (Abstract No. 3440) (2008) (P)
171. Höchsmann B, Runzheimer S, Beckmann N, Platow S,
Wiesneth M, Schrezenmeier H: Supportive care of out patients
using red blood cell and platelets transfusions: Safety
of long time transfusions in times of leukocyte deple tion.
13th Congress of the European Hematology Association
(EHA), Copenhagen, 12-15 June 2008.
haematologica 93 (S1): 476 (Abstract No. 1224) (2008)
172. Höchsmann B, Runzheimer S, Platow S, Wiesneth M, Mayr-
Wohlfart U, Flegel WA, Schrezenmeier H: Allo immunization
and CMV-transmission in outpatient long term transfusion
therapy with leukocyte depleted red blood cell (RBC) units.
Annual Congress of the German Society for Transfusion Medicine
and Immunohaematology (DGTI), Düsseldorf, 16-19
September 2008. Transfus.
Med Hemother. 35 (S1): 28-29 (Abstract No. O11.4)
(2008) (V)
173. Hoffmann F, Münch G, Notheis G, Wintergerst U, Schwarz
K, Führer M, Belohradsky BH und Albert M: First-days-of –
life bone marrow transplantation in a newborn with X-SCID
complicated by necrotizing enterocolitis. 13. Meeting of the
European Society for Immunodeficiencies (ESID). ´s-Hertogenbosch,
16.-19. Oktober 2008 (P).
174. Hoffmann J, Paul A, Schäfer R, Ziemer G, Wendel HP: Tissue
Engineering 13 (4): 917-918, 2007 (V)
175. Hönig M, Schulz A, Fisch P, Kersten T, Pannicke U, Rojewski
M, Debatin K-M, Friedrich W und Schwarz K: Somatische
Reversionen in lymphozytären Subpopulationen nach
HSCT bei einer Patientin mit JAK3 Defizienz –Evidenz für
unabhängige alpha/beta und gamma/delta T-Zell-Vorläufer.
44. Arbeitstagung für pädiatrische Forschung Göttingen, 21.
-22. Februar 2008 (V).
176. Hönig M, Schulz A, Fisch P., Kersten T, Pannicke U, Rojewski
M, Debatin K-M, Friedrich W und Schwarz K: Spontane
somatische Reversionen lymphozytärer
Subpopulationen bei einer Patientin mit SCID bei JAK3-Defizienz
– Hinweise auf unabhängige Vorläuferzellen für -
und - T-Zellen. 104. Jahrestagung der Deut schen Gesellschaft
für Kinder- und Jugendmedizin e.V. (DGKJ). München,
11.-14. September, 2008 (V).
177. Hönig M, Schulz A, Schütz C, Fisch P, Kersten T, Pannicke
U, Rojewski M, Friedrich W und Schwarz; K: Somatic reversion
of lymphocyte subpopulations after HSCT in a patient
with JAK3 deficiency -Evidence for independent - and - T
lineage stem cells. 24. Jahrestagung der Arbeitsgemeinschaft
Pädiatrische Immunologie (API). Ittingen, 18.-20. Mai
2007 (V).
178. Hönig M, Schulz A, Schütz C, Friedrich W, Fisch P, Kersten
T, Pannicke U, Rojewski M und Schwarz K: Somatic reversion
of lymphocyte subpopulations after HSCT in a patient
with JAK3 deficiency -Evidence for independent - and - T
lineage stem cells. 37. Jahrestreffen der Deutschen Gesellschaft
für Immunologie (DGfI). Heidelberg, 5.-8. September
2007 (V u. P).
179. Hönig MH, Flegel W, Schulz A, Schütz C, Schwarz K, Freihorst
J, Baumann U, Seltsam A, Debatin KM und Friedrich
W: Successful hematopoietic stem cell transplantation in a
patient with chronic granulomatous disease and McLeod
phenotype sensitized to Kx and K antigens. 13. Meeting of
the European Society for Immuno deficiencies (ESID). ´s-Hertogenbosch,
16.-19. Oktober 2008 (P).
Wissenschaftliche Vorträge, publizierte Abstracts 2007 – 2008
180. Hönig MH, Schulz A, Schütz C, Gatz S, Speth F, Benninghoff
U, Pannicke U, Schwarz K und Friedrich W: Long term
outcome after HSCT in patients with PNP-deficiency. 13.
Meeting of the European Society for Immu nodeficiencies
(ESID). ´s-Hertogenbosch, 16.-19. Oktober 2008 (P).
181. Houfar MK, Geusendam G, Dengler T, Frank K, Karl A, Löhr
M, Schmidt M, Seifried E, Sireis W: Evaluation of the AB-
BOTT PRISM HIV combined antibody/antigen-assay.
Transfus Med Hemother 2007; 34 (Suppl 1): 59 – 60 (P)
182. Houfar MK, Geusendam G, Vosberg A, Dengler T, Frank K,
Karl A, Löhr M, Sireis W, Seifried E, Schmidt M: Evaluation
of the ABBOTT PRISM HIV combined antibody/antigenassay.
Vox Sang 2007; (Suppl 1): 115 – 116 (P)
183. Hourfar MK, Mayr-Wohlfart U, Schmidt M, Schrezenmeier H
and Seifried E: Infectivity of B19 positive blood products.
DGTI 2008, Düsseldorf
184. Hourfar MK, Mayr-Wohlfart U, Schmidt M, Schrezenmeier H,
Seifried E: Infectivity of B19 positive blood prod ucts. Annual
Congress of the German Society for Transfusion Medicine
and Immunohaematology (DGTI), Düssel dorf, 16-19 September
2008.
Transfus. Med Hemother. 35 (S1): 16 (Abstract No. O 7.4)
(2008) (V)
185. Hourfar MK, Schmidt M, Drosten C, Seifried E and Panning
M: SCREENING OF BLOOD DONORS FOR CHIKUNGU-
NYA-VIRUS – DEVELOPMENT AND EVALUATION OF MINI-
POOL-NAT AND ANTIBODY TESTS ISBT 2008.
Macao, Vox Sanguinis 2008, 95 (Suppl 1)
186. Hustinx H, Poole J, Bugert P, Gowland P, Still F, Fontana S,
Scharberg EA, Tilley L, Daniels G, Niederhauser C: The
JAL(RH48) antigen in Black and Caucasian individuals: a serological
and molecular study. BBTS (2008) (V)
187. Hustinx H, Poole J, Bugert P, Gowland P, Still F, Fontana S,
Scharberg EA, Tilley L, Daniels G, Niederhauser C: The
JAL(RH48) antigen in black and caucasian individuals: a serological
and melecular study.
Transfusion Medicine 2008; 18 (Suppl 2): 21 (V)
188. Jacobi C, Claus M, Römisch J, Wildemann B, Watzl C,
Meuer S, Giese T: NK cell modulation induced by intravenous
immunoglobulins.FOCIS Meeting Boston 05.-09. Juni
2008 (P)
189. Jacobi C, Römisch J, Meuer S, Giese T: Gene expression
profile modulated by IVIG in healthy donors and multiple
sclerosis patients. FOCIS Meeting San Diego 07.-11. Juni
2007 (P)
190. Jacobi C: Modulation of gene expression by IVIG in healthy
donors and multiple sclerosis patients37. Jahrestagung der
DGFI Heidelberg; 05.-08. September 2007 (V)
191. Jacobi C: Natural killer cells are modulated in patients with
neuroimmunologic disorders in response to treatment with
intravenous immunoglobulin. Joint Annual Meeting of Immunology
of the ÖGAI & DGfI, Wien 03.-06. September 2008
192. Jambor C, Weber CF, Beesel Kv, Josipovic N, Müller MM,
Michael Spannagl, Bernhard Zwissler: Comparison of clinical
response to platelet transfusion and bedside impedance
aggregometry.
J Cardiothorac Vasc Anesth 2008;22;3S:S1-S2 (Oral-03) (V)
193. Jambor C, Weber CF, Beesel, Kv Josipovic N, Müller MM,
Zwissler B: In vitro platelet function of platelet concentrates
transfused to high risk cardiac surgery patients as determined
by bedside impedance aggregometry.
J Cardiothorac Vasc Anesth 2008;22;3S:S1 (Oral-02) (V)
231

Forschungsbericht 2007 – 2008
194. Janetzko K, Hinz K, Marschner S, Klüter H, Bugert P: Monitoring
of the Mirasol pathogen reduction procedure for platelet
concentrates by PCR and Bioanalyzer.
Transfus Med Hemother 34 (suppl 1): S60 (2007) (V)
195. Janetzko K: In vitro characteristics of photochemically treated
platelet concentrates collected by the Amicus cell separator.
Kongress der Deutschen Gesellschaft für
Transfusionsmedizin und Immunologie, Friedrichshafen,
September 2007.
196. Jochheim-Richter A, Schüttrumpf J, Seifried E, Richter R:
Expression of PAR1, Thrombin, Plasmin, and Protein C in
the Developing Murine Fetal Liver. DGTI Düsseldorf, 2008
(P)
197. Kahles H, Kordonouri O, Ramos Lopez E, Walter M, Rosinger
S, Boehm BO, Badenhoop K, Seidl C, Ziegler A: Mating
in parents of type 1 diabetes families as a function of the
HLA DR-DQ haplotype. submitted for MHC Workshop 27/28
August, Washington, 2007
198. Karagianni M, Klüter H, Bieback K: Adipogenic Differentiation
of mesenchymal Stromal Cells derived from human
bone marrow, adipose tissue and cord blooD O9.1.
Transfus Med Hemother 35(S1) (2008) (V)
199. Kauke T, Dick A, Marschall C, Heller C, Klarmann D, Luxembourg
B, Spannagl M, Geisen C (2008): PROS1 mutations
and protein S acitivty in 114 protein S deficient patients. 52.
Jahrestagung der Gesellschaft für Thrombose- und Hämostaseforschung
e. V., Wiesbaden, 20.-23. Februar 2008.
Hämostaseologie 1-2/2008, A11 (V)
200. Kehlbach R, Schäfer R, Bantleon R, et aL: Changes in the
TransferrinReceptor Expression of rat Mesenchymal Stem
Cells after Labeling with Superparamagnetic Iron Oxide
ECR 2007, Vienna, Austria (P)
201. Kehlbach R, Schäfer R, Bantleon R, et aL: Effect of labeling
with (U)SPIO on the migration and colony formation of adult
human mesenchymal stem cells. ECR 2007, Vienna, Austria
(P)
202. Kehlbach R, Siegel G, Bantleon R, Kluba T, Wolburg H, Dietz
K, Claussen CD, Wiskirchen J, Schäfer: Influence of SPIO-
Labeling on the Functionality of Human Adult Mesenchymal
Stem Cells; 3rd int. Congress on Regenerative Biology and
Medicine (Bio Star), October 2008, Stuttgart, Germany (P)
203. Knels R, Müller-Kuller T, Geusendam G, Sireis W: Comparison
of Haemolysis Rates in Red Blood Cells, Annual Meeting
of the German Society for Transfusion Medicine and
Immunohematology (DGTI), Düsseldorf,
16-19. September 2008
204. Knels R, Müller-Kuller T, Liebscher UM, Kraas S, Lizardo B,
Richter E, Sireis W: Influence of different production steps
on the quality of blood products. 10th European Haemovigilance
Seminar, Frankfurt/M 28.02. - 01.02.08 (P)
205. Knels R, Müller-Kuller T, Liebscher U-M, Kraas S, Lizardo B;
Richter E; Sireis W: Comparison of Different Filter Types for
Leukocyre Depletion, Annual Meeting of the German Society
for Transfusion Medicine and Immunohematology (DGTI),
Düsseldorf, 16-19. September 2008
206. Knels R, Müller-Kuller T, Lizardo B, Kraas S, Liebscher UM,
Richter E, Sireis W: Comparison of different filter types for
leucocyte depletion.
Transfus Med Hemother 2008; 35 (Suppl 1): 61 (P)
207. Lizardo B, Müller-Kuller T, Liebscher UM, Kraas S, Richter E,
Sireis W, Knels R: Influence of the leucodepletion type on
the residual leucocytes in red cells.
Vox Sang 2008; 95 (Suppl 1): 248 (P)
208. Löb S, Schäfer R, Rammensee HG, et aL: Impact of IL-3 derived
human dendritic cells expressing IDO an allogeneic
and antigen-specific T-cell responses. Research Colloquium
232
of the Medical Faculty of the University of Tübingen 2007,
Germany (P)
209. Löb S, Schäfer R, Rammensee HG, Königsrainer A: Impact
of IL-12 levels on the stimulatory capacity of human dendritic
cells expressing IDO, Research Colloquium of the Medical
Faculty of the University of Tübingen 2008 , Germany
(Poster Award) (P)
210. Loreth R, Geisen C, Blauth G, Albert FW (2008). Enhanced
adjustment of oral anticoagulation in hereditary Coumarin
sensitivity by vitamin K substitution: A case report. 52. Jahrestagung
der Gesellschaft für Thrombose- und Hämostaseforschung
e. V., Wiesbaden, 20.-23. Februar 2008. (P)
211. Lotfi R, DeMarco R, Steitz J, Schrezenmeier H, Lotze M: Eosinophils
enhance DC maturation, regulating immu nity. Gemeinsame
Jahrestagung der Deutschen, Österreichischen
und Schweizerischen Gesellschaften für Häma tologie und
Onkologie (DGHO), Basel, 5. -9. Oktober 2007. Onkologie
30 (S3): 103 (2007) (P)
212. Lotfi R, DeMarco RA, Beer Stolz D, Lotze MT: Human eosinophils
respond to dam age associated molecular pat tern
molecules [DAMPs] released from tumor cells. Impact of eosinophils
in immunopathogenesis of cancer. 40th Annual
Meeting of the German Society for Transfusion Medicine
and Immunohematology (DGTI), Friedrichshafen, 18-21
September 2007.
Transfus. Med Hemother. 34 (S1): 49 (2007) (P)
213. Lotfi R, Herzog G, Rojewski M, Schrezenmeier H: Eosinophils
enhance anti-tumor-immunity by sensing and responding
to necrotic tumor cells. Annual Congress of the
German Society for Transfusion Medicine and Immuno haematology
(DGTI), Düsseldorf, 16-19 September 2008.
Transfus. Med Hemother. 35 (S1): 94 (2008) (P)
214. Maercker C, Breitkreutz D, Bieback K, Angstmann M: Monitoring
of mesenchymal stem cell differentiation by electric
cell-substrate impedance sensing.
Europ J Cell Biol 87(S58) 16 (2008) (P)
215. Mailänder V, Häckel C, Baur G, Rojewski M, Wiesneth M,
Schrezenmeier H: Platelet lysate: variation of processing
methods and effectiveness in expansion of mesenchymal
stem cells. 40th Annual Meeting of the German Society for
Transfusion Medicine and Immunohematology (DGTI), Friedrichshafen,
18-21 September 2007.
Trans fus. Med Hemother. 34 (S1): 65 (2007) (P)
216. Mailänder V, Hennel E., Flören M, Rojewski M, Wiesneth M,
Reichel H, Schrezenmeier H: MSC from AA patients exert a
normal immunosuppression in vitro. 33rd Annual Meeting of
the European Group for Blood and Marrow Transplantation
(EBMT), Lyon, 25-28 March 2007.
Bone Marrow Transplantation 39 (S1): S188 (2007) (P)
217. Mailänder V, Schmitz-Wienke J, Weiss C, Kohnle M-V, Musyanovych
A, Wiesneth M, Landfester K, Schrezenmeier H:
Nanoparticles for labeling and drug delivery in stem cell research
and regenerative therapy. Annual Con gress of the
German Society for Transfusion Medicine and Immunohaematology
(DGTI), Düsseldorf, 16-19 Septem ber 2008.
Transfus. Med Hemother. 35 (S1): 9-10 (2008) (V)
218. Mailänder V, Schmitz-Wienke J, Weiss CK, Kohnle MV, Musyanovych
A, Landfester K, Schrezenmeier H: Harnessing of
nanoparticles for cell applications: new materials and determining
routes of endocytosis for labeling and drug delivery
in regenerative therapy. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft
für Hämatologie und Onkologie (DGHO), Wien,
10.-14. Oktober 2008.
Onkologie 31 (S4): 130-131 (2008) (P)
219. Mannherz O, Siebert B, Scharberg EA: Comparative studies
in antibody screening of blood donations with three different
pooled red blood cell reagents.
Transfus Med Hemother 2008; 35 (Suppl 1): 44 (P)

220. Marx M, Reinhardt P, Schauwecker P, Schrezenmeier H,
Wiesneth M: Predictive factors for peripheral blood stem
cell mobilization with granulocyte colony-stimulating factor.
Annual Congress of the German Society for Trans fusion Medicine
and Immunohaematology (DGTI), Düsseldorf, 16-19
September 2008. Transfus.
Med Hemother. 35 (S1): 51 (2008) (P)
221. Maxeiner HG, Bechter K, Rojewski M, Schmitt A, Otto M,
Schmitt M: Simultaneous analysis of T-cell subsets in the
cerebrospinal fluid and peripheral blood of patients by flow
cytometry. 9th Psychoimmunology Expert Meeting: Neuropsychoimmunology
of Psychoses, Reisensburg/Günzburg,
8-11 March 2007. in vivo 21: 942 (2007) (P)
222. Maxeiner HG, Bechter K, Rojewski M, Schmitt A, Otto M,
Schmitt M: Simultaneous analysis of T-cell subsets in the
cerebrospinal fluid and peripheral blood of patients by flow
cytometry. Gemeinsame Jahrestagung der Deut schen,
Österreichischen und Schweizerischen Gesellschaften für
Hämatologie und Onkologie (DGHO), Basel, 5.-9. Oktober
2007.
Onkologie 30 (S3): 169-170 (2007) (P640)
223. Maxeiner H-G, Rojewski M, Schmitt A, Tumani H, Bechter K
und Schmitt M :T cell characterization in CSF and peripheral
blood in patients with affective and schiziphrenic disorders.
DGPPN Kongress 2008 der Deutschen Gesellschaft für Psychiatrie,
Psychotherapie und Nervenheilkunde, Berlin, Germany,
November 26-29.
Der Nerven arzt 79 (S4): 402 (2008) (V).
224. Meuer S : „Control of adaptive immunity in the human intestinal
mucosa“. Berlin, Januar 2008 (V)
225. Meuer S: „A prominent role for mucosal cystin/cystein metabolism
in intestinal immunoregulation”Wien, September
2008 (V)
226. Meuer S: „Immunosuppression and cancer development:
approaches to quantitatively tailored immunotherapy. Fukuoka,
November 2008 (V)
227. Meuer S: „Immunosuppression and cancer”.Prag, Juli 2008
und Zürich, Mai 2008 (V)
228. Meuer S: „Individualisierung der immunsuppressiven Therapie”.Berlin,
Juli 2008 (V)
229. Meuer S: „Individualized immunotherapy”.Stockholm, August
2008 (V)
230. Meuer S: „Krebsrisiko Immunsuppression”: Ansätze zur individualisierten
Immunintervention. Leipzig, Juni 2008 (V)
231. Meuer S: „Natural mechanisms of anti-inflammation”Hannover,
Februar 2007 (V)
232. Meuer S: „Research in the human immune system creates
new therapeutic options for individualized immune intervention”.Wien,
September 2008 (V)
233. Meuer S: „Cancer risk and immunosuppression“. Hannover,
Oktober 2007 (V)
234. Meuer S: „The inflammatory link: an attractive target in cancer
treatment“. Bangkok, Oktober 2008 (V)
235. Meuer S: „Tumorinzidenz bei immunsupprimierten Patienten“.
Hannover, November 2007 (V)
236. Miesbach W, Dück O, Llugaliu B, Asmelash G, Schüttrumpf
J, Alesci S, Großmann R: Evaluation prospektiver Kriterien
zur Einschätzung der klinischen Verträglichkeit und Wirksamkeit
von DDAVP (Minirin®), Hämophilie-Symposion
Hamburg, 2007 (P)
237. Miesbach W, Dück O, Llugaliu B, Asmelash G, Schüttrumpf
J, Alesci S, Großmann R: Evalutation of prospective criteria
for the clinical assessment of efficacy and safety of DDAVP
(Minirin®). GTH Wiesbaden, 2008 (P)
Wissenschaftliche Vorträge, publizierte Abstracts 2007 – 2008
238. Miesbach W, Dück O, Schüttrumpf J, Alesci S, Großmann R:
Evaluation of Prospective Criteria fort he Clinical Assessement
of Efficacy and Safety of DDAVP (Minirin parenteral).
DGTI Düsseldorf, 2008 (P)
239. Milanov P, Tonn T, Seifried E, Schüttrumpf J: Non-Viral Gene
Transfer Results in Physiological Factor IX Levels in Mice.
DGTI Friedrichshafen, 2007 (V)
240. Milanov P, Tonn T, Seifried E, Schüttrumpf J: Non-Viral Gene
Transfer Results Therapeutic Factor IX Levels in Hemophilia
B Mice. Hämophilie-Symposion Hamburg, 2007 (P)
241. Müller MM and Henschler R: „Implementation of pathogen
inactivation using amotosalen & UVA in a high volume center:
In vitro characteristics of INTERCEPT plasma.” Eingeladener
Vortrag beim 22. polnischen Hämatologen- und
transfusionsmedizinischen Kongress „XXII ZJAZD Polskiego
Towarzystwa Hematologów I Transfuzjologów“; Warschau,
Freitag, 07. September 2007
242. Müller MM, Parisi-Wisniewska S, Wiesneth M, Graeßler J,
Hoechsmann B, Seifried E, Schrezenmeier H, Henschler R:
Hemovigilance Goes Active – Local Initiative to Improve Adverse
Event Reporting in Transfusion Medicine.
Transfus Med Hemother 2008;35(suppl 1):76 (P)
243. Müller MM, Parisi-Wisniewska S, Wiesneth M, Gräßler J,
Höchsmann B, Seifried E, Schrezenmeier H, Henschler R:
Hemovigilance goes active – Local initiative to improve adverse
event reporting in transfusion medi cine. Annual Congress
of the German Society for Transfusion Medicine and
Immunohaematology (DGTI), Düssel dorf, 16-19 September
2008. Transfus.
Med Hemother. 35 (S1): 76 (Abstract No. P 6/8.10) (2008) (P)
244. Müller MM, Parisi-Wisniewska S, Wiesneth M, Gräßler J,
Hoechsmann B, Seifried E, Schrezenmeier H, Henschler R:
Hemovigilance Goes Active – Local Initiative to Improve Adverse
Event Reporting in Transfusion Medicine.
Transfus Med Hemother 2008;35(suppl 1):19:76 (P)
245. Müller MM, Poetzsch B, Oldenburg J, Pfeiffer H-U, Corash
L, Seifried E, Henschler R: Amotosalen plus UVA Irradiation
for Pathogen Reduction in Fresh Frozen Plasma: Does this
Procedure Endanger Plasma Quality?
Transfus Med Hemother 2007;34(suppL 1);62 (P)
246. Müller MM, Schmidt M, Seifried E: „Haemovigilance and Residual
Risk of Platelet Component Transfusion in Germany.“
Eingeladener Vortrag beim Lunchsymposium der Firma
Cerus anläßlich des 10th European Haemoviglance Symposiums
(EHS) des European Haemovigilance Network (EHN)
in Frankfurt am Main, 28 Februar bis 01. März 2008
247. Müller MM, Seifried E: Towards an European Specialist in
Transfusion Medicine.
Transfus Med Hemother 2008;35(suppl 1):92 (P)
248. Müller MM: „Implementation of pathogen inactivation (PI)
using amotosalen & UVA in a high volume blood center:
Haemostatic characteristics of PI plasma.” Eingeladener
Vortrag beim polnischen Hemosystems-Cerus-Seminar
(Chairs: Dr. Holland (USA); Dr. Radziwon (Poland)); Warschau,
04. + 05. Februar 2008
249. Müller MM: „Nebenwirkungen der G-CSF-Mobilisierung gesunder
Stammzell-Fremdspender & KIR/HLA-C-Mismatch –
Bedeutung für die Stammzell-Transplantation & G-CSF-
Dosis zur Mobilisierung: Neue Überlegungen, neue Dosierungen.“
Eingeladener Vortrag am Universitätsklinikum
Göttingen, Mittwoch, 03. September 2008
233

Forschungsbericht 2007 – 2008
250. Müller MM: „Organisation of Blood Donor Services in Germany
– Can Efficiency still be based on Classical Ethical Values?”
Eingeladener Vortrag im Rahmen des „Executive
Meetings“ der leitenden Mitarbeiter des Französischen Blutspendewesens
EFS (Etablissement Français du Sang) auf
Einladung des Präsidenten in Lyon am Montag, 20. Oktober
2008
251. Müller MM: „Sicherheit von Blutpräparaten.“ Eingeladener
Vortrag im Rahmen des Ersten Frankfurter Gerinnungsabends
zum Thema „Blutungen – Was tun?“ des Hämophiliezentrums
am Klinikum der Johann Wolfgang
Goethe-Universität Frankfurt am Main am Mittwoch, 26.
September 2007
252. Müller MM: „Tripel-Thrombapheresen: Contra.“ Eingeladener
Vortrag im Rahmen der 41. Jahrestagung der Deutschen
Gesellschaft für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie
e.V. (DGTI) – Operatorseminar 2008 in Düsseldorf am
Dienstag, 16. September 2008
253. Müller-Kuller T, Findhammer S, Frenda S, Hennicker I, Seifried
E, Sireis W: Adoption of a peer audit system in the
DRK blood donor service Baden-Württemberg - Hessen,
Annual Meeting of the German Society for Transfusion Medicine
and Immunohematology (DGTI), Düsseldorf, 16-19.
September 2008 (P)
254. Müller-Kuller T, Findhammer S, Seifried E, Sireis W: Sterility
Testing of Blood Components, Annual Meeting of the German
Society for Transfusion Medicine and Immunohematology
(DGTI), Düsseldorf, 16-19. September 2008 (P)
255. Muus P, Luzzatto L, Rotoli B, Young NS, Schubert J, Urbano-Ispizua
A, Coyle L, DeCastro C, Fu CL, Maciejewski
JP, Kroon HA, Rother RP, Hillmen P, Schrezenmeier H:
Safety and efficacy of the terminal com plement inhibitor
eculizumab in patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria:
SHEPHERD phase III clinical study results. Leukemia
and Lymphoma Meeting, Dubrovnik, 15-19 September
2007
256. Mytilineos J, Begovic M, Schrezenmeier H, Hirv K: HLA-A
and -B low expression and NULL alleles in 10690 unrelated
bone marrow donors. Toronto: 34th ASHI Annual Meeting,
27-31 October 2008. Human Immunology 69: 88 (2008) (V)
(162-P)
257. Mytilineos J, Fürst D, Pabst K, Schrezenmeier H: Comparison
between ELISA crossmatch and CDC crossmatch. Toronto:
34th ASHI Annual Meeting, 27-31 October 2008.
Human Immunology 69: 12 (2008) (V) (9-P)
258. Mytilineos J, Meyer M, Laux G, Scherer S, Tran TH, Opelz
G: Impact of Factor V Leiden, prothrombin G20210A and
MTHFR C677T gene polymorphisms on kidney graft survivaL
40th Annual Meeting of the German Society for Transfusion
Medicine and Immunohematology (DGTI),
Friedrichshafen, 18-21 September 2007.
Transfus. Med Hemother. 34 (S1): 18 (2007) (V7.7)
259. Mytilineos J, Pabst K, Flach C, Schrezenmeier H: ELISA vs.
CDC crossmatch: a comparative study of the two methods.
Toulouse: 22nd European Immunogenetics and Histocompatibility
Conference, 2-5 April 2008.
Tissue Antigens 71: 379 (P-252)
260. Mytilineos J, Pabst K, Schrezenmeier H: Comparison between
ELISA crossmatch assay. Syndney: XXII. International
Congress of The Transplantation Society, 10-14 August
2008.
Transplantation 86: 745 (P)
261. Mytilineos J, Pabst K: EFI-Guidelines and first experiences
with AB cross. Prag: Biotest HLA-Antibody-Diagnostic &
Crossmatch Workshop, 13.02.2008 (V)
234
262. Mytilineos J: „High Throughput“ HLA class II and II typing
by sequencing. Frankfurt: Scientific Seminar of R.O.S.E.
Europe, 04.09.2008 (V)
263. Mytilineos J: 1. EFI-Standards und Eurotransplant-Anforderungen
an die HLA-AK-Diagnostik, 2. Evaluierung AbCross
HLA-ELISA. BIOTEST HLA-Workshop, Dresden, 10.-
13.06.2007 (V)
264. Mytilineos J: A practical guide how to perform a worldwide
search for an unrelated bone marrow donor. Session: Workshop
7 - Clinical Pathology, Riyadh, 19.-21.11.2007 (V)
265. Mytilineos J: Auflösung von Ambiguitäten: Relevanz und
Notwendigkeit. St. Wendel: HLA-Fortbildungsveranstaltung
der Stefan-Morsch-Stifung, 29.06.2008 (V)
266. Mytilineos J: Berücksichtigung von nicht HLA-Parametern
bei der Auswahl nicht verwandter Stammzell-/ Knochenmarkspender.
ARGE-KMSB-Workshop. Kassel, 05.06.2007
(V)
267. Mytilineos J: Bone marrow transplantation and HLA. Istanbul:
Transplantation Immunology and EFI Region 8 Balkan
External Proficiency Testing Meeting, 06.12.2008 (V)
268. Mytilineos J: Cytokine gene polymorphisms in organ transplantation.
Faro: VII. Congresso Luso-Brasilieiro de Transplantacao,
02.10.2008 (V)
269. Mytilineos J: Das KSS Ulm. Ulm: ZKRD-Tagung, 03.06.2008
(V)
270. Mytilineos J: Häufigkeit von NULL-Allelen: Eine systematische
Analyse der Typisierungen im Knochenmark- und
Stammzellspender-Zentrum Ulm. Wien: Seminar der Österreichischen
Knochenmarkspender-Zentrale, 03.07.2008 (V)
271. Mytilineos J: High resolution HLA typing and reporting
practices of ASHI & EFI accredited laboratories. Toronto:
34th ASHI Annual Meeting, Session Case Studies in Stem
Cell Transplantation, 30.10.2008 (V)
272. Mytilineos J: HLA - Antikörper-Screening und Kreuzproben
aus der Sicht eines EFI-Inspectors. BmT-Antikörper-Analyse-Workshop
(virtuelles PRA), Berlin, 19.-20.04.2007 (V)
273. Mytilineos J: HLA class I and II typing by sequencing.
Chongqing (China): HLA Seminar of the Chinese National
Blood System, 08.11.2008 (V)
274. Mytilineos J: HLA-DRB1 Allel and DRB1-DQB1 Haplotype,
Frequency as Prediction Criterion for the Duration of an Unrelated
Blood Stem Cell Donor Search. 8th European Clinical
Histocompatability Workshop, Fiuggi (Rom),
06.-09.06.2007 (V)
275. Mytilineos J: HLA-typing using buccal swabs and the alternative
sources. Florenz: EBMT-Meeting, Nuclear Accident
Session, 01.04.2008 (V)
276. Mytilineos J: Immungenetik und HLA: Bedeutung für die
Transplantation. Walter-Brendel-Kolleg für Transplantationsmedizin,
Wildbad-Kreuth, 02.-07.03.2007 (V)
277. Mytilineos J: Immungenetik und HLA: Bedeutung für die
Transplantation. Wildbad-Kreuth: Walter-Brendel-Kolleg für
Transplantationsmedizin, 29.02.2008 (V)
278. Mytilineos J: Impact of HLA-Matching on Solid and Stem
Cell Transplantation. Session 1 - Clinical Pathology (Immunpathology),
Riyadh, 19.-21.11.2007 (V)
279. Mytilineos J: Methoden zur HLA-Typisierung. Ulm. VIII.
Workshop „Blutstammzelltransplantation“ des Berufsverbands
Deutscher Transfusionsmediziner, 18.04.2008 (V)
280. Mytilineos J: Methods of HLA typing. ICAS-Kurs 2007, Ulm,
16.-20.04.2007 (V)

281. Mytilineos J: The search process for a compatible unrelated
bone marrow donor in national and international registries.
2nd East West Immunogenetics Conference, Prag, 01.-
03.03.2007 (V)
282. Mytilineos J: TRALI - Prevention diagnostics. Antibody
screening with ELISA and Luminex in healthy blood donors.
Leiden. Eurotransplant Meeting, Tissue Typers' Meeting,
09.10.2008 (V)
283. Mytilineos J: Transplantationsimmunologische DiagnostiK
21. Treffen der hauptamtlichen Laborleiter der Krankenhäuser
in Nordrhein-Westfalen, Bochum, 19.-20.10.2007 (V)
284. Neben K, Mytilineos J, Heiss C, Ho AD, Benner A, Opelz G,
Goldschmidt H: Polymorphisms of the transform ing growth
factor beta 1 (TGFB1) gene define a subgroup of patients
with late onset of disease and poor outcome in multiple
myeloma. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Hämatologie
und Onkologie (DGHO), Wien, 10.-14. Oktober
2008.
Onkologie 31 (S4): 184-185 (2008) [P532].
285. Nguyen X D, Leible M, Schober M, Klüter H, Panzer S: Evaluation
of the novel method SASPA vs. MAIPA for detection
of platelet antibodies.
Transfus Med Hemother 35 (S1): O12.6 (2008) (V)
286. Nguyen XD, Kerowgan M, Flesch B, Stötzer F, Klüter H:
Rapid screening for detection of granulocyte antibodies with
a novel assay. Vox Sanguinis 2008, Volume 95 SuppL 1.
XXXth Congress of the ISBT, Macao, June 7-12, 2008 (V)
287. Nguyen XD, La Roseé P, Nebe Th, Buchheidt D, Klüter H:
Therapeutic apheresis in mantle cell lymphoma in leukaemic
phase: a case report. XVIIIth Regional Congress of ISBT,
Asia, November 10-13, 2007, Hanoi, Vietnam.
Vox Sanguinis 2007 Volume 93 SuppL 2 (P)
288. Nguyen XD, Müller-Berghaus J, Kälsch Th, Klüter H:
Functional investigation of monocyte-derived dendritic cells
under influence of platelets. XVIIIth Regional Congress of
ISBT, Asia, November 10-13, 2007, Hanoi, Vietnam.
Vox Sanguinis 2007 Volume 93 SuppL 2 (P)
289. Nguyen XD, Stötzer F, Müller-Steinhardt M, Flesch B, Sachs
U, Klüter H: Rapid screening for detection of granulocyte
antibodies with a novel assay.
Transfus Med Hemother 35 (Suppl 1): (2008) (V)
290. Nguyen XD, Stötzer F, Sachs U, Flesch B, Klüter H A Novel
Method for Simultaneous Analysis of Specific Granulocyte
Antibodies: SASGA.
Transfus Med Hemother 35 (Suppl 1): (2008) (V)
291. Nguyen XD, Stötzer F, Sachs U, Flesch B, Klüter H A Novel
Method fo Simultaneous Analysis of Specific Granulocyte
Antibodies: SASGA (25.-27.09.2008,16. Jahrestagung der
DGI 2008) (V)
292. Nguyen XD: Anwendung von SASPA (simultaneous analysis
of specific platelet antibody) in der klinischen Diagnostik.
Workshop „moving cytometry“24.11.2007 Jena.
293. Nguyen XD: Functional investigation of monocyte-derived
dendritic cells under influence of platelets. XVIIIth Regional
Congress of ISBT, Asia, November 10-13, 2007, Hanoi, Vietnam.
294. Nguyen XD: Therapeutic apheresis in mantle cell lymphoma
in leukaemic phase: a case report. XVIIIth Regional Congress
of ISBT, Asia, November 10-13, 2007, Hanoi, Vietnam.
295. Oancea, C, Rüster, B, Mandegary-Bamakan, A, Henschler R
and Ruthardt, M: The t(6;9) associated DEK/CAN fusion protein:
Its effects on primitive hematopoiectic stem cells and
its leukemogenic potential.
Onkologie 2008;31(suppl 4):51 (V)
Wissenschaftliche Vorträge, publizierte Abstracts 2007 – 2008
296. Osen W, Song M, Soltek S, Leuchs B, Steitz J, Nguyen XD,
Schadendorf D, Paschen A: Identification of novel CD4+ T
cell epitopes from human Tyrosinase-related proteins 1 and
2 (TRP-1/-2) upon vaccination of HLA-class II transgenic
mice with recombinant Adenovirus followed by combinatorial
peptide library screening. 6th International CIMT Meeting
2008, Mainz, Germany (V)
297. Ottinger HD, Müller C, Beelen DW, Ehninger G, Zander A,
Schrezenmeier H: Allogeneic blood stem cell trans plantations
performed for malignant lymphomas in Germany – A report
from the German Registry for Stem Cell Transplantation
(DRST) covering the period from 1998 – 2006. Jahrestagung
der Deutschen Gesellschaft für Hämatologie und Onkologie
(DGHO), Wien, 10.-14. Oktober 2008.
Onkologie 31 (S4): 10 (2008) (P)
298. Ottinger HD, Müller C, Schrezenmeier H, Ehninger G, Zander
A, Beelen DW: on behalb of the German Registry for
Stem Cell Transplantation (DRST): Allogeneic blood stem
cell transplantations performed for malignant lympho mas in
Germany: Report from the German Registry for Stem Cell
Transplantation (DRST) covering the period from 1998 to
2006. 34th Annual Meeting of the European Group for Blood
and Marrow Transplantation (EBMT), Florence, 30 March – 2
April 2008.
Bone Marrow Transplantation 41 (S1): S245-S246 (2008) (P)
299. Pabst K, Czachurski D, Mytilineos J: Vergleich AbCross
ELISA Klasse I + II (Biotest) vs. LCT X-Match. 15. Jahres tagung
der Deutschen Gesellschaft für Immungenetik (DGI),
18. – 20. September 2007
300. Peffault de Latour R, Schrezenmeier H, Mary JY, Bacigalupo
A, De Souza CA, Willemze R, Tichelli A, Passweg J, Socié G
on behalf of the Aplastic Anemia Working Party of the European
Blood and Marow Transplant Group and the French
Society of Hematology: Stem cell transplantation for paroxysmal
nocturnal hemoglobinuria: an ongoing Aplastic Anemia
Working Party EBMT SFH Study. 50th Annual Meeting
of the American Society for Hema tology (ASH), San Francisco,
6-9 December 2008.
Blood 112: 1181 (Abstract No. 3443) (2008) (P)
301. Prager M, Scharberg EA, Wagner FF, Burkhart J, Seltsam A:
ABO Genotyping for diagnosis of unusual ABO blood
groups: A comparative study in German Blood Donor Centers.
Transfus Med Hemother 2007; 34 (Suppl 1): 6 (V)
302. Prager M, Scharberg EA, Wagner FF, Burkhart J, Seltsam A:
ABO Genotyping for diagnosis of unusual ABO blood
groups: A comparative study in German Blood Donor Centers.
Transfusion 2007; 47 (Suppl): 144 – 145 A (P)
303. Quante AS, Goecke TO, Schwarz K und Juergens H: Effect
of molecular diagnostic procedures on therapy decision making
in a family with Wiskott-Aldrich syndrome: a case report
18. Jahrestagung Deutsche Gesellschaft für
Humangenetik. Bonn, 7.-10. März 2007 (P).
304. Radecke F, Peter I, Radecke S, Gellhaus K, Cathomen T und
Schwarz K: Targeted chromosomal gene modi fication in
human cells by single-stranded oligonucleotides in the presence
of a DNA double-strand break 14. Jahrestagung der
Deutschen Gesellschaft für Gentherapie (DG-GT) Heidelberg,
18.-20. Juli 2007 (P).
305. Radecke F, Radecke S und Schwarz K: Progress in ODNmediated
genome tinkering. 2. Annual ZNIP Consor tium
Meeting (EU-Project). Berlin, 4. Juli, 2008 (V).
235

Forschungsbericht 2007 – 2008
306. Reinhardt P, Flor K, Koerner K, Schrezenmeier H, Wiesneth
M: Plasma-reduced platelet apheresis double-products in
PAS III additive solution. Annual Congress of the German
Society for Transfusion Medicine and Immunohaematology
(DGTI), Düsseldorf, 16-19 September 2008.
Transfus. Med Hemother. 35 (S1): 50-51 (2008)
[Abstract No. P 1B.07) (2008) (P)
307. Reinhardt P, Schauwecker P, Schwarz K, Krug E, Maccari B,
Schrezenmeier H, Wiesneth M: High recovery of haematopoietic
stem cells using a closed apheresis system for erythrocyte
depletion and volume reduction of
AB0-incompatible bone mar row transplants. 33rd Annual
Meeting of the European Group for Blood and Marrow
Transplantation (EBMT), Lyon, 25-28 March 2007.
Bone Marrow Transplantation 39 (S1): S129 (2007) (P)
308. Reinhardt P, Schauwecker P, Schwarz K, v. Harsdorf S, Döhner
K, Bunjes D, Schrezenmeier H, Wiesneth M: Colony
assay of stem cells uncovers Jak2-mutation in a family
donor. 40th Annual Meeting of the German Society for
Transfusion Medicine and Immunohematology (DGTI), Friedrichshafen,
18-21 September 2007.
Trans fus. Med Hemother. 34 (S1): 12+14 (2007) (V5.8)
309. Richter E: Development and validation of the platelet additive
solution SSP+. VII. MacoPharma Symposium - Proactive
an Reactive Measures in Transfusion Medicine,
Gdansk, 29.11.07 (V)
310. Richter E: Weiterentwicklung und Validierung der EK-Filtration
mittels neuen Filtersystems der Fa. MacoPharma. Tagung
der DRK-Herstellungsleiter, Potsdam, 10./11.05.2007
(V)
311. Ringhoffer S, Bunjes D, Wiesneth M, Wenzel P, Döhner H,
Ringhoffer M: Differen tial sjTREC and DBJb-TREC determination
reveals distinct types of immune reconsti tution after
allogeneic stem cell transplantation. 33rd Annual Meeting of
the European Group for Blood and Marrow Transplantation
(EBMT), Lyon, 25-28 March 2007.
Bone Mar row Transplantation 39 (S1): S28 (2007) (O290)
312. Risitano A, Marando L, Selleri C, Serio B, Seneca E, Camer
A, Catalano L, Scalia G, Del Vecchio L, Iori A, Maury S, Bacigalupo
A, Socié G, Tichelli A, Marsh J, Schrezenmeier H,
Passweg J, Rotoli B on behalf of the WPSAA: Subcutaneous
alemtuzumab is safe and effective for treatment of global
or single-lineage immune-mediated marrow failure: a
pilot study from the Working Party Aplastic Anaemia
(WPSAA). 34th Annual Meeting of the European Group for
Blood and Marrow Transplantation (EBMT), Florence, 30
March – 2 April 2008.
Bone Mar row Transplantation 41 (S1): S19 (2008) (V)
313. Risitano AM, Seneca E, Marando L, Serio B, Selleri C, Scalia
G, Del Vecchio L, Iori A, Kulagin A, Maury S, Halter J, Gupta
V, Bacigalupo A, Socié G, Tichelli A, Marsh J, Schrezenmeier
H, Passweg R, Rotoli B:Subcutaneous alemtuzumab
is a safe and effective treatment for global or single-lineage
immune-mediated mar row failures: a survey from the EBMT-
WPSAA). 50th Annual Meeting of the American Society of
Hematology (ASH), San Francisco, 6-9 December 2008.
Blood 112: 381-382 (Abstract No. 1041 (P)
314. Rohr, J, Speckmann, C, Müller, I, Nikolopoulos, E, Fisch, P,
Handgretinger, R, Pannicke, U, Schwarz, K und Ehl, S Chronic
inflammatory bowel disease is a new phenotype of Artemis
deficiency. 25. Jahrestagung der Arbeits gemeinschaft
Pädiatrische Immunologie (API). Berlin, 1.-4.Mai, 2008 (V).
315. Rohr, J, Speckmann, C, Schwarz, K, Haller, W, Jorch, N, Nikolopoulos,
E, Fisch, P, Superti-Furga, A, Schindler, D und
Ehl; S A combination of microcephaly, developmental delay,
skeletal dysplasias and mild suscep tibility to infections in a
236
patient with a mutation in DNA-Ligase IV. 24. Jahrestagung
der Arbeitsgemeinschaft Pädiatrische Immunologie (API). Ittingen,
18.-20. Mai 2007 (V).
316. Rohr, JC, Schwarz, K, Nikolopoulos, E, Stern, M, Speckmann,
C, Pannicke, U, Müller, I, Handgretinger, R, Fisch, P
und Ehl, S . Chronic inflammatory bowel disease is a new
phenotype of Artemis deficiency. 13. Meeting of the European
Society for Immunodeficiencies (ESID). ´s-Hertogenbosch,
16.-19. Oktober 2008 (V).
317. Röth A, Körper S, Höchsmann B, Siegmund-Schulz H, Murawski
N, Schrezenmeier H, Schubert J, Ganser A, Hillmen
P, Dührsen U: Treatment with the terminal complement inhibitor
eculizumab improves anaemia in patients with paroxysmal
nocturnal haemoglobinuria: phase III
THRIUMPH-study results. Gemeinsame Jahrestagung der
Deutschen, Österreichischen und Schweizerischen Gesellschaften
für Hämatologie und Onkologie (DGHO), Basel,
5.-9. Oktober 2007.
Onkologie 30 (S3): 92 (2007) (P)
318. Roth S, Schuettrumpf J, Bott D, Seifried E, Tonn T Chemical
Chaperones as a New Concept to Improve Factor VIII Secretion.
DGTI Düsseldorf, 2008 (P)
319. Rundtischgespräch zur Transfusionsmedizin in Deutschland;
Moderation Prof. Dr. Burger, Präsident des Robert Koch Instituts,
Airport Conference Center Flughafen Frankfurt; „Interdisziplinäre
Herstellung zellulärer Arzneimittel im
universitären Umfeld“. am 6. Juli 2007
320. Runzheimer S, Platow S, Wiesneth M, Mayr-Wohlfart U, Flegel
WA, Schrezenmeier H, Höchsmann B: Safety of outpatient
long term red blood cell (RBC) transfusions with
leukocyte depleted RBC units. Jahrestagung der Deutschen
Gesellschaft für Hämatologie und Onkologie (DGHO), Wien,
10.-14. Oktober 2008.
Onkologie 31 (S4): 193 (Abstract No. V558) (2008) (V)
321. Schächinger V, Erbs S, Elsässer A, Haberbosch W, Hambrecht
R, Hölschermann H, Yu J, Corti R, Mathey DG,
Hamm CW, Süselbeck T, Assmus B, Tonn T, Dimmeler S,
Zeiher AM, REPAIR-AMI Investigators (2007). Sustained 2
Year Clinical Benefit From Intracoronary Infusion of Bone
Marrow-derived Progenitor Cells in Patients After Acute
Myocardial Infarction.
Circ 116 (Suppl II), 777.
322. Schächinger V, Erbs S, Elsässer A, Haberbosch W, Hambrecht
R, Hölschermann H, Yu J, Corti R, Mathey DG,
Hamm CW, Süselbeck T, Assmus B, Tonn T, Dimmeler S,
Zeiher AM, REPAIR-AMI Investigators (2007). Amelioration
of Early Ventricular Remodeling by Intracoronary Progenitor
Cell Infusion in Patients with AMI is Associated with Improved
Late Clinical Outcome.
Circ 116 (Suppl II), 762
323. Schächinger V, Erbs S, Elsässer A, Haberbosch W, Hambrecht
R, Hölschermann H, Yu J, Corti R, Mathey DG,
Hamm CW, Süselbeck T, Assmus B, Tonn T, Dimmeler S,
Zeiher AM (2007): Einfluss der intrakoronaren Infusion von
Knochenmark-Progenitorzellen auf das ventrikuläre Remodeling
4 Monate nach akutem Myokardinfarkt: Einblicke aus
der REPAIR-AMI-Studie. 73. Jahrestagung der Deutschen
Gesellschaft für Kardiologie, Herz- und Kreislaufforschung.
324. Schächinger V, Erbs S, Elsässer A, Haberbosch W, Hambrecht
R, Hölschermann H, Yu J, Corti R, Mathey DG,
Hamm CW, Süselbeck T, Assmus B, Tonn T, Dimmeler S,
Zeiher AM (2007): Reduzierte kardiovaskuläre Ereignisrate
nach intrakoronarer Infusion von Knochenmark-Progenitorzellen
im akuten Myokardinfarkt: Klinisches Follow-up der
REPAIR-AMI-Studie. 73. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft
für Kardiologie, Herz- und Kreislaufforschung.

325. Schäfer R, Ayturan M, Bantleon R, et aL: The Use of Clinically
Approved Small Particles of Iron Oxide (SPIO) for Labeling
of clonal rat Mesenchymal Stem Cells Aggravates
Clinical Symptoms in Experimental Autoimmune Encephalomyelits
(EAE) WCRM 2007 Leipzig, Germany (P)
326. Schäfer R, Kehlbach R, Bantleon R: Labeling of MSC with
clinically approved iron particles leads to clinical effects and
influences stem cell biology.
Cytotherapy 2008 (10) suppL 1 (P)
327. Schäfer R, Kehlbach R, Wiskirchen J, et aL: Labeling of
adult Mesenchymal Stem Cells with clinically approved iron
particles: Clinical effects and impacts on stem cell biology.
Transfus Med Hemother. Suppl 1 (34) p.66, 2007 (P)
328. Schäfer R, Lourhmati A, Kabisch D et aL: Neural differentiation
of MSC and neuroprotection under hypoxia and glutamate-induced
injury: the role of erythropoietin.
Cytotherapy 2008 (10) suppL 1 (P)
329. Schäfer R, Siegel G, Köster A: The induction of cardiomyogenic
differentiation of MSC depends on the intrinsic expression
of cardiomyogenic genes.
Cytotherapy 2008 (10) suppL 1 (P)
330. Schäfer R, Wiskirchen J, Kehlbach R et aL: Aptamer-based
isolation and subsequent imaging of Mesenchymal Stem
Cells in ischemic myocard by magnetic resonance tomography.
Transfus Med Hemother. Suppl 1 (34) p.69, 2007
(Poster Award) (P)
331. Scharberg EA, Seyboth S, Panter K, Ernst A, Hagel J, Richter
E, Rink G, Janetzko K, Bugert P: Do donors with non-deletional
blood group O alleles boost anti-A and anti-B titers
in blood group O recipients?
Transfusion 2008; 48 (Suppl): 259-60 (V)
332. Scharberg EA: AKS, Differenzierung, DCT und Elution. Biotest-Fortbildungsveranstaltung
Immunhämatologie, Freiburg,
11.07.07 (V)
333. Scharberg EA: Der positive Coombstest. Biotest-Fortbildungsveranstaltung
Immunhämatologie, Stuttgart,
23.04.2008 (V)
334. Scharberg EA: Immunhämatologie heute und vor 20 Jahren.
Symposium anlässlich des 20jährigen Jubiläums LaborDialog
Mittlerer Neckar, Stuttgart, 15.20.2007 (V)
335. Scharberg EA: Untersuchungen seltener Rh D/CE-Phänotypen
mit dem OLYMPUS PK7200/PK7300. OLYMPUS-Anwendertreffen,
Hamburg, 28.11.2008 (V)
336. Schauwecker P, Reinhardt P, Maccari B, Fischer C, Brink A,
Schrezenmeier H, Wiesneth M: Discrepancies in bone marrow
transplant cell counts using different hematology analyzers.
40th Annual Meeting of the German Society for
Transfusion Medicine and Immunohematology (DGTI), Friedrichshafen,
18-21 September 2007.
Trans fus. Med Hemother. 34 (S1): 62-63 (2007) (P)
337. Schedel A: Sensitive in vitro Messung der Thrombozyten
Aktivierung im Flusskammersystem. ILGD-Symposion 2007,
Zelldiagnostik und Zelltherapie, Günzburg, 15. März 2007.
338. Schedel A, Schloss P, Klüter H, Bugert P: Expression of
functional nicotinic acetylcholine receptors in human platelets.
Transfus Med Hemother 34 (suppl 1): S42 (2007) (P)
339. Schedel A, Schloss P, Klüter H, Bugert P: Expression of
functional acetylcholine receptors in human platelets.
Hämostaseologie 28: A41 (2008) (P)
340. Schmetterer KG, Seidel MG, Körmöczi U, Schwarz K, Matthes-Martin
S, Steinberger P und Pickl WF: Pheno typic and
molecular analysis of an HLA class II defiscient patient reveals
a homozygous nonsense mutation in the CIITA gene at
amino acid position 381. Joint Annual Meeting of Immuno-
Wissenschaftliche Vorträge, publizierte Abstracts 2007 – 2008
logy of the Austrian and German Socie ties (ÖGAI and DGfI)
Wien, 3. - 6. September, 2008 (V).
341. Schmidt M, Falckenberg S, Hourfar MK and Seifried E: Two
Hexaplex NAT Assays for Bacterial detection in platelets
ISBT 2008, Macao.
Vox Sanguinis 2008, 95 (Suppl 1)
342. Schmidt M, Houfar MK, Geusendam G, Siebert B, Dengler
T, Gubbe K, Frank K, Karl A, Löhr M, Seifried E, Sireis W:
One year experience after implementation of anti-HBc-testing
into blood donor screening in Germany.
Transfus Med Hemother 2007; 34 (Suppl 1): 23 (V)
343. Schmidt M, Houfar MK, Schellenberg E, Geusendam G, Siebert
B, Vosberg A, Dengler T, Gubbe K, Frank K, Karl A,
Löhr M, Sireis W, Seifried E: One year experience after implementation
of anti-HBc-testing into blood donor screening
in Germany.
Vox Sang 2007; 93 (Suppl 1): 136 (P)
344. Schmidt M, Hourfar MK, Sireis W, Findhammer S, Mayr-
Wohlfart U, Schrezenmeier H, Mytilineos J, Gubbe K, Karl A,
Seifried E: From in house mini-pool NAT to CE acredited IVD
– Improvement in blood safety. 40th Annual Meeting of the
German Society for Transfusion Medicine and Immunohematology
(DGTI), Friedrichshafen, 18-21 September 2007.
Transfus. Med Hemother. 34 (S1): 4 (2007) (Abstract No.
V2.9) (V)
345. Schmidt M, Hourfar MK, Sireis W, Findhammer S, Schellenberg
E, Mayr-Wohlfart U, Schrezenmeier H, Mytilineos J,
Gubbe K Karl A, Seifried E: From in house mini-pool NAT to
CE accredited IVD improvement in blood safety. XVIIth Regional
Con gress of the ISBT Europe, Madrid, 23-27 June
2007.
Vox Sang. 39 (S1): 26-27 (Abstract No. 3A-S10-4) (2007)
346. Schmidt M, Korn K, Nübling M, Chudy M, Geusendam G,
Hennig H, Sireis W, Rabenau HF, Doerr HW, Berger A, Hourfar
MK, Gubbe K, Karl A, Gürtler L and Seifried E: First
Transmission of HIV-1 by a allular blood product after mandatory
NAT blood screening in germany ISBT 2008, Macao.
Vox Sanguinis 2008, 95 (Suppl 1)
347. Schmidt M, Mayr-Wohlfart U, Hourfar MK, Schrezenmeier H,
Seifried E: Infectivity of B19 positive blood products. ISBT
2008
348. Schmidt M: Anti-HBc Daten nach Einführung des Screenings
23. Sitzung der Transfusionskommission im DRK Blutspendedienst
Baden-Würrtemberg – Hessen, Januar, 2008
349. Schmidt M: Automatisierung der PCR für 5 transfusionsmedizinisch
relevante Viren Bundeswehr Koblenz 06.02.2008
350. Schmidt M: Bericht vom ISBT Kongress 2008, Zusammenfassung
der Arbeitsgruppe TTI Frankfurt Juli 2008
351. Schmidt M: Blood donor screening by NAT at the German
Red Cross Institute Frankfurt – experience with the cobas
TaqScreen MPX test on the cobas s201 platform and infectivity
of B19 positive blood products AABB 2008, Montreal
352. Schmidt M: CE-Zertifizierung der In-House-NAT 23. Sitzung
der Transfusionskommission im DRK Blutspendedienst
Baden-Würrtemberg – Hessen, Januar, 2008
353. Schmidt M: DRK Studie zur bakteriellen Kontamination in
Thrombozytenkonzentraten 23. Sitzung der Transfusionskommission
im DRK Blutspendedienst Baden-Würrtemberg
– Hessen, Januar, 2008
354. Schmidt M: Transmission of viral infections 3. Deutsche
Tschechische Transfusionskonferenz, Prag, April 2008
355. Schmidt M: Virussicherheit bei Transfusion transmitted infections
23. Sitzung der Transfusionskommission im DRK
Blutspendedienst Baden-Würrtemberg – Hessen, Januar,
2008
237

Forschungsbericht 2007 – 2008
356. Schmitt A, Barth TF, Beyer E, Borchert F, Rojewski M, Chen
J, Greiner J, Moeller P, Riechelmann H, Schmitt M: RHAMM
and CAIX/G250 as novel immunotargets in head and neck
squamous cell carcinomas. Annual Con gress of the German
Society for Transfusion Medicine and Immunohaematology
(DGTI), Düsseldorf, 16-19 Septem ber 2008.
Transfus. Med Hemother. 35 (S1): 32 (2008) (V)
357. Schmitt A, Barth TF, Beyer E, Borchert F, Rojewski M, Gronau
S, Riechelmann H, Schmitt M: The tumour anti gens
RHAMM and CAIX/G250 are expressed in head and neck
squamous cell carcinomas and elicit specific CD8+ T-cell responses.
Gemeinsame Jahrestagung der Deutschen, Österreichischen
und Schweizerischen Gesellschaften für
Hämatologie und Onkologie (DGHO), Basel, 5. -9. Oktober
2007. Onkologie 30 (S3): 164 (2007) (P)
358. Schmitt A, Einsele H, Grigoleit G, Busch D, Germeroth L,
Tonn T, Wiesneth M, Rojewski M, Marx M, Oden dahl M,
Bechter C, Fei F, Yu Y., Chen B, von Harsdorf S, Döhner H,
Schrezenmeier H, Bunjes D, Schmitt M: Adoptive CMVpp65
specific Cd8+ T cell transfer to post-transplant patients with
the Streptamer technology. Jahres tagung der Deutschen
Gesellschaft für Hämatologie und Onkologie (DGHO), Wien,
10.-14. Oktober 2008.
Onkologie 31 (S4): 27-28 (2008) (V)
359. Schmitt A, Rojewski M, Maxeiner H, Chen J, Bechter C,
Götz M, Bechter K, Schmitt M: Comparison of tetra-/penta-
/streptamer technology for the characterization of CMV antigen-specific
CD8+ T-cells by flow cytometry. 9th
Psychoimmunology Expert Meeting: Neuropsychoimmunology
of Psychoses, Reisensburg/Günzburg, 8-11 March
2007.
in vivo 21: 949 (2007) (Abstract. No. 39)
360. Schmitt A, Tonn T, Busch D, Grigoleit G, Einsele H, Odendahl
M, Germeroth L, Ringhoffer M, Ringhoffer S, Wiesneth
M, Michel D, Mertens T, Rojewski M, Marx M, Harsdorf S,
Döhner H, Seifried E, Bunjes D, Schmitt M: Adoptive transfer
and consequential selective reconstitution of streptamerselected
cytomegalovirus-specific CD8+ cells leads to
enduring virus clearance in patients after allogeneic stem
cell transplantation. 50th Annual Meeting of the American
Society of Hematology (ASH), San Francisco, 6-9 December
2008.
Blood 112: 431-432 (Abstract No. 1181) (2008) (P)
361. Schmitt A, Tonn T, Einsele H, Grigoleit GU, Busch DH, Germeroth
L, Wiesneth M, Schrezenmeier H, Döhner H, Bunjes
D, Schmitt M: Clinical adoptive CMVpp65 specific CD8+ T
cell transfer to post-transplant patients. Annual Congress of
the German Society for Transfusion Medicine and Immunohaematology
(DGTI), Düsseldorf, 16-19 September 2008.
Transfus. Med Hemother. 35 (S1): 22 (2008)
362. Schmitt A, Yao J, Einsele H, Grigoleit G, Busch D, Odenthal
M, Germeroth L, Tonn T, Wiesneth M, Rojewski MT, Marx M,
Bechter C, Harsdorf S von, Döhner H, Bunjes D, Schmitt M:
Assessment of CMVpp65 specific CD8+ T-cell frequencies
and adoptive T-cell transfer to post transplant patients by
streptamer technology. 34th An nual Meeting of the European
Group for Blood and Marrow Transplantation (EBMT),
Florence, 30 March – 2 April 2008.
Bone Marrow Transplantation 41 (S1): S276 (2008) (P)
363. Schmitt A, Yao J, Einsele H, Grigoleit U, Busch D, Odendahl
M, Germeroth L, Tonn T, Wiesneth M, Rojewski M, Bechter
C, Harsdorf S von, Döhner H, Bunjes D, Schmitt M: Streptamer
technology for the assessment of CMVpp65 specific
CD8+ T cell frequencies and for the adoptive T cell transfer
to post-transplant patients. 49th An nual Meeting of the
American Society of Hematology (ASH), Atlanta, 8-11 December
2007.
Blood 110 (11): 584a (Abstract No. 1964) (2007) (P)
238
364. Schmitt M, Schmitt A, Chen J, Rojewski M, Giannopoulos K,
Ritter G, Ringhoffer M, Liebisch P, Bunjes D, Döhner H,
Greiner J: RHANN/CD168-R3 peptide vaccina tion of patients
with haematological malignancies elicits immunological
and clinical re sponses. 33rd Annual Meeting of the
European Group for Blood and Marrow Trans plantation
(EBMT), Lyon, 25-28 March 2007.
Bone Marrow Transplantation 39 (S1): S55 (2007) (V)
365. Schmitt M, Schmitt A, Giannopoulos K, Chen J, Li L, Liebisch
P, Ringhoffer M, Guillaume P, Ritter, G, Rojewski M,
Gnjatic S, Döhner H, and Greiner J: RHAMM/CD168-R3
peptide vaccination of patients with acute myeloid leukemia
(AML), myelodysplastic syndrome (MDS), multiple myeloma
(MM) and chronic lymphatic leukemia (CLL) elicits immunological
and clinical responses. 5th Annual Meeting of the
Association for Immunotherapy of Cancer (CIMT) and 3rd
International Conference „Strategies for Immune Therapy
(SFIT)“, Würzburg, Germany, April 12-14 (2007) (V)
366. Schmitz-Wienke J, Weiss CK, Kohnle M-V, Landfester K,
Hauk T, Fischer D, Mailänder V: Nanoparticles: endo cytotic
mechanisms and crossing of the blood brain barrier. CLI-
NAM, Basel, 19.-21.05.2008 (P)
367. Schneider K, Luxembourg B, Geisen C, Sittinger K, Seifried
E, Lindhoff-Last E (2007): Impact of the Vitamin K epoxide
reductase complex subunit 1 (VKORC1) polymorphism c.-
1639G>A upon phenprocoumon therapy. 21th Congress of
the International Society on Thrombosis and Haemostasis
(ISTH), Genf, 06.-12. Juli 2007.
Thromb Haemost 2007, 5 Supplement 2: P-W-485 (P)
368. Schneider K, Luxembourg B, Geisen C, Sittinger K, Seifried
E, Lindhoff-Last E (2008). Influence of the vitamin K epoxide
reductase complex subunit 1 (VKORC1) polymorphism c.-
1639G>A upon the initiation and the maintenance phase of
phenprocoumon therapy. 52. Jahrestagung der Gesellschaft
für Thrombose- und Hämostaseforschung e. V., Wiesbaden,
20.-23. Februar 2008. (P)
369. Schrezenmeier H, Führer M, Ottinger H, Kolb H-J, Eder M,
Kolbe K, Handgretinger R, Müller C, Ehninger G, Beelen D:
Allogeneic stem cell transplantation for acquired aplastic
anemia: Results of a retrospective analysis of transplants reported
to the German Registry of Stem Cell Transplantation.
Annual Congress of the German Society for Transfusion Medicine
and Immunohaematology (DGTI), Düsseldorf, 16-19
September 2008. Transfus.
Med Hemother. 35 (S1): 27-28 (2008) (V)
370. Schrezenmeier H, Luzzatto L, Rotoli B, Young NS, Schubert
J, Urbano-Ispizua A, Coyle L, DeCastro C, Fu CL, Maciejewski
JP, Kroon HA, Rother RP, Hillmen P: Safety and efficacy
of the terminal complement inhibitor eculizumab in
patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria: SHE-
PHERD phase III clinical study results. 12th Congress of the
European Hematology Association, Vienna, 7-10 June 2007.
haema tologica 92 (S1): 137 (2007) (V)
371. Schrezenmeier H, Mailänder V, Landfester K, Rojewski M,
Bieback K, Schäfer R, Rüster B, Henschler R: Mesenchymal
stromal cells: how to validate – the case of epithelia repair.
Second international workshop: MSCs for Regenerative Medicine
and Immune Regulation 2008 Tours, France (V)
372. Schrezenmeier H, Morsch S, Robin-Winn M, Lenartz E, Winterhager
J, Grosse-Wilde H, Knabe H, Fischer J: Stiftung
Knochenmarkspende Deutschland (SKD): Evolution of registered
donors and stem cell donations. National Marrow
Donor Pro gram Council Meeting (2007)
373. Schrezenmeier H, Passweg J, Marsh J, Bacigalupo A, Bredeson
C, Führer M, Klein JP, Locasciulli A, Oneto R, Socié
G, Eapen M: Worse outcome and more chronic GVHD with
peripheral blood progenitor cells than bone marrow in HLAmatched
sibling donor transplants for young patients with

severe acquired aplastic anemia: A report from the EBMT
and the CIBMTR 40th Annual Meeting of the German Society
for Transfusion Medicine and Immunohematology
(DGTI), Friedrichshafen, 18-21 September 2007.
Transfus. Med Hemother. 34 (S1): 10-11 (2007) (V5.1)
374. Schrezenmeier H, Röth A, Ganser A, Young NS, Rotoli B,
Luzzatto L, Siegmund-Schulz H, Murawski N, Höchsmann
B, Körper S, Dührsen U, Rother RP, Hillmen P, Schubert J:
Safety and efficacy of the terminal complement inhibitor
eculizumab in patients with paroxysmal nocturnal haemoglobinuria:
SHEPHERD Phase III Clinical Study Results. Gemeinsame
Jahrestagung der Deutschen, Österreichischen
und Schweizerischen Gesell schaften für Hämatologie und
Onkologie (DGHO), Basel, 5. -9. Oktober 2007.
Onkologie 30 (S3): 3 (2007) (V)
375. Schrezenmeier H, Schubert J, Röth A, Ganser A, Siegemund-Schulz
H, Murawski N, Höchsmann B, Körper S,
Dührsen U, Kroon H-A, Hillmen P: Safety and efficacy of the
terminal complement inhibitor eculizumab in patients with
paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH): SHEPHERD
phase III clinical study results. 40th Annual Meet ing of the
German Society for Transfusion Medicine and Immunohematology
(DGTI), Friedrichshafen, 18-21 September 2007.
Transfus. Med Hemother. 34 (S1): 20 (2007) (V)
376. Schrezenmeier H, Wiesneth M, Reinhardt P, Sireis W, Klüter
H, Seifried E: Adverse events of whole blood and plateletpheresis
donations. Annual Congress of the German Society
for Transfusion Medicine and Immunohaema tology
(DGTI), Düsseldorf, 16-19 September 2008.
Transfus. Med Hemother. 35 (S1): 34 (Abstract No. O 14.6)
(2008) (V)
377. Schrezenmeier H: Aktuelle Aspekte in Diagnostik und Therapie
der PNH: Molekular-zielgerichtete Therapie mit Eculi zumab:
Ulm: Abteilungsseminar der Klinik für Innere Medizin III
des Universitätsklinikums, 26.01.2007 (V)
378. Schrezenmeier H: Aktuelle Therapie der PNH. Erlangen:
Wissenschaftliches Seminar der Medizinischen Klinik V des
Universitätsklinikums, 26.11.2008 (V)
379. Schrezenmeier H: Allogeneic stem cell transplantation for
acquired aplastic anemia: Results of a retrospective analysis
of transplants reported to the German Registry of Stem Cell
Transplantation. Düsseldorf: Jahreskongress der Deutschen
Gesellschaft für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie
(DGTI), 16.-09.09.2008 (V)
380. Schrezenmeier H: Apherese- vs. Poolthrombozyten. Düsseldorf:
ESFH Postgraduate Course Hemovigilance beim
DGTI-Jahreskongress, 16.-19.09.2008 (V)
381. Schrezenmeier H: Aplastische Anämie. Basel: Genzyme-Satellitensymposium
„Orphan Diseases - Current Opinion in
Therapy“ auf dem DGHO-Jahreskongress, 05.-09.10.2007
(V)
382. Schrezenmeier H: Aplastische Syndrome und MDS Hamburg:
Klinik für Onkologie/Hämatologie, Universitätsklini kum
Eppendorf, 14.02.2007 (V)
383. Schrezenmeier H: ATG-Therapie bei aplastischer Anämie
und myelodysplastischen Syndromen: Gibt es alters abhängige
Therapieempfehlungen? Stuttgart: Genzyme-Symposium
„Myelodysplastische Syndrome/Aplastische Anämie“
im Robert-Bosch-Krankenhaus, 28.02.2007 (V)
384. Schrezenmeier H: Bakterielle Kontamination von Blutprodukten.
Mainz: Frühjahrstagung der Arbeitsgemeinschaft Infektionen
in der Hämatologie und Onkologie der DGHO,
23.03.2007 (V)
385. Schrezenmeier H: Bakterielle Kontamination von Blutprodukten.
Stuttgart: Qualitätszirkel Transfusionsmedizin,
19.07.2007 (V)
Wissenschaftliche Vorträge, publizierte Abstracts 2007 – 2008
386. Schrezenmeier H: Bedeutung der Transfusionsmedizin in
der modernen Medizin. Ulm: Veranstaltung des Instituts Ulm
des DRK-Blutspendedienstes Baden-Württemberg - Hessen
anlässlich des Weltblutspendertages, 14.06.2008 (V)
387. Schrezenmeier H: Behandlung der chronischen Anämie bei
Tumorpatienten: Wann Erythropoetin, Erythrozyten konzentrate
oder Eisen? Regensburg: Fortbildungsveranstaltung im
Krankenhaus Barmherzige Brüder, 19.11.2008 (V)
388. Schrezenmeier H: Blood products (platelets, granulocytes,
erythrocytes). Oberschleissheim: ICAS Advanced Train ing
Course on European Approach to the Medical Management
of Mass Radiation Exposure, 28.-30.11.2007 (V)
389. Schrezenmeier H: Current Management of PNH. 8th International
Symposium on Graft-versus-Host and Graft-ver sus-
Leukemia Reactions 2008. Bad Aibling, 23.-26. January
2008 (V)
390. Schrezenmeier H: Diagnostik und Therapie Steroid-refraktärer
AIHA Seminar des Instituts Frankfurt des DRK-Blut -
spendedienstes Baden-Württemberg - Hessen,
12.12.2007 (V)
391. Schrezenmeier H: Die Anämie - Moderne Diagnostik und
Therapie. Ravensburg: 7. Ravensburger Symposium für Hämatologie
und Onkologie, Krankenhaus, St. Elisabeth,
22.10.2008 (V)
392. Schrezenmeier H: Differentialindikation gepoolter vs. Einzelspender-Thrombozytenkonzentrate.
Erlangen: Wissenschaftliches
Seminar der Medizinischen Klinik V des
Universitätsklinikums, 26.11.2008 (V)
393. Schrezenmeier H: Differenzialdiagnose der PNH. Basel: Alexion-Satellitensymposium
„Paroxysmal nocturnal haemoglobinuria:
Current aspects and future perspectives“ auf
dem DGHO-Jahreskongress, 05.-09.10.2007 (V)
394. Schrezenmeier H: Entwicklung der Stammzelltransplantationsaktivitäten
in Deutschland Kassel: Workshop der ARGE-
KMSB, 05.06.2007 (V)
395. Schrezenmeier H: Ex-vivo-Expansion von mesenchymalen
Stammzellen zur klinischen Anwendung: Evaluation von Expansionsbedingungen
und regulatorische Aspekte. Günzburg/Ulm:
11. Jahrestagung der IGLD „Zelltherapie und
Zelldiagnostik“, 15.-16.03.2007 (V)
396. Schrezenmeier H: Herstellung und Eigenschaften von Plättchenlysat
und FFP als Supplemente für die klinische Anwendung.
Tübingen: Studiengruppe „MSC- FFP-PL GvHD,
02.02.2007 (V)
397. Schrezenmeier H: Indications for platelet transfusion. Prag:
Third German-Czech Transfusion Days, 10.-11.04.2008 (V)
398. Schrezenmeier H: Introduction to pathophysiology, clinical
presentation, and diagnosis of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria
(PNH). Wien: Jahreskongress der Deutschen Gesellschaft
für Hämatologie (DGHO), 11.-15.10.2008 (V)
399. Schrezenmeier H: Knochenmarktransplantation in Deutschland
seit 1990 - Entwicklung und Perspektive. Günzburg/Ulm:
11. Jahrestagung der IGLD „Zelltherapie und
Zelldiagnostik“, 15.-16.03.2007 (V)
400. Schrezenmeier H: Labeling techniques of stem cells. Tübingen:
2nd Congress on Biology, Characterization, Prepa ration
and Clinical Applications of Non Hematopoietic Stem
Cells, 04.-05.04.2008 (V)
401. Schrezenmeier H: Mesenchymal stem cells: Isolation, expansion
and potential use. Ulm: 4th International Advanced
ICAS Training Course on „Blood Stem Cell Transplantation:
State of the Arts, Methods, Perspectives, 16.-19.04.2007 (V)
239

Forschungsbericht 2007 – 2008
402. Schrezenmeier H: Moderate aplastic anemia - Incidence,
prognosis and therapy. Wien: Genzyme Symposium „Overlaping
Syndromes: Aplastic Anemia, Myelodysplastic Syndromes
and PNH“, 24.02.2007 (V)
403. Schrezenmeier H: MSC for healing of chronic wounds. Asselheim:
Forschungsseminar des DRK-Blutspende dienstes
Baden-Württemberg - Hessen, 28.-19.11.2008 (V)
404. Schrezenmeier H: MSC: How to validate? The case of use in
epithelia. Tours: 2nd International Workshop „Mesen chymal
Stem Cells (MSCs) for Regenerative Medicine and Immune
Regulation, 12.-13.05.2008 (V)
405. Schrezenmeier H: Myelodysplastisches Syndrom. Ulm: Onkologischer
Arbeitskreis, 07.04.2008 (V)
406. Schrezenmeier H: Optimizing patient outcomes in PNH. Satellitensymposium
„The Management of PNH: Recent Advances
in Diagnosis and Treatment, and New Hope for
Patients“ der Firma Alexion. Atlanta: 49th Annual Meeting
der American Society for Hematology (ASH),
08.-10.12.2007 (V)
407. Schrezenmeier H: Overview on PNH (prevalence, flow cytometry,
clone size, screening for patients, screening patients
with AA and MDS). Wien: Jahreskongress der European
Haematology Association (EHA), 07.-09.06.2007 (V)
408. Schrezenmeier H: Pathophysiologie, Klinik und Therapie
schwerer aplastischer Anämien. Ulm: ZKRD-Jahres tagung,
10.-11.05.2007 (V)
409. Schrezenmeier H: Risk of apheresis (platelets) versus blood
donation: Frankfurt: 10th European Haemovigilance Seminar
(EHS), 28.02.-01.03.2008 (V)
410. Schrezenmeier H: Therapie der steroidrefraktären autoimmunhämolytischen
Anämie. Friedrichshafen: DGTI-Kongress,
18.-21.09.2007 (V)
411. Schrezenmeier H: Therapie mit Thrombozytenkonzentraten:
Vergleich Apherese- und Pool-Präparate, Herstellung, Qualitätskriterien.
Berlin: Arbeitskreis Hämotherapie, DRK-Blutspendedienst
Ost, 31.01.2007 (V)
412. Schrezenmeier H: Therapie von Patienten mit chronischem
Transfusionsbedarf. Friedrichshafen: DGTI-Kongess, 18.-
21.09.2007 (V)
413. Schrezenmeier H: Vorstellung der aktuellen Transfusionsleitlinien
chronischer Anämien. Stuttgart: Interdisziplinäre Fortbildungsveranstaltung
der Praxis für Transfusionsmedizin
„Chronische Anämien, Behandlung und Folgen“,
16.07.2008 (V)
414. Schubert J, Murawski N, Siegmund-Schulz H, Körper S,
Höchsmann B, Röth A, Dührsen U, Ganser A, Schrezenmeier
H: Therapy with termincal complement inhibitor eculizumab
markedly reduces thrombosis in patients with
paroxysmal nocturnal haemoglobinuria. Gemeinsame Jahrestagung
der Deutschen, Österreichischen und Schweizerischen
Gesellschaften für Hämatologie und Onkologie
(DGHO), Basel, 5. -9. Oktober 2007.
Onkologie 30 (S3): 4 (2007) (V)
415. Schuettrumpf J, Baila S, Khazi F, Liu J, Bunte R, Arruda VR:
AAV Vectors Do Not Increase the Risk of Tumor Formation in
p53 Deficient Models. ASGT Seattle, 2007 (V)
416. Schuster V, Hügle B, Schille R, Sack U, Schwarz K und
Schulz A: 6 Wochen alter männlicher Säugling mit MRSA-
Staphylodermie: Wieviel Diagnostik ist erforderlich? 11. Interdisziplinären
Kinderimmunologischen Arbeitstreffen
Höfgen-Kaditzsch, 26. Oktober 2007(V).
417. Schuster V, Schulz, A, Gatz, S, Benninghof, U, Hügle, B,
Schille, R, Sack, U, Hönig, M, Schwarz, K und Schütz, C: 6
Wochen alter gut gediehender männlicher Säugling (2. Zwilling,
eheM FG) mit hartnäckiger Erythro dermie (MRSA-Sta-
240
phylodermie): Wieviel weitere Diagnostik ist erforderlich? 25.
Jahrestagung der Arbeitsgemein schaft Pädiatrische Immunologie
(API). Berlin, 1.-4.Mai, 2008 (V).
418. Schüttrumpf J, Milanov P, Seifried E, Tonn T: Modification of
the Factor IX Gla-Domain as a Strategy to Improve Hemophilia
B Therapy. DGTI Düsseldorf, 2008 (P)
419. Schüttrumpf J, Abriss D, Milanov P, Seifried E, Tonn T: Diminishing
Immunogenicity of Non-Viral Gene Transfer for FVIII
by the Use of Minicircle Vectors. DGTI Düsseldorf, 2008 (V)
420. Schüttrumpf J, Milanov P, Roth S, Seifried E, Tonn T: Sustained
Therapeutic Factor IX Expression Following Non-Viral
Gene Transfer in a Hemophilia B Mouse Model DGTI Düsseldorf,
2008 (V)
421. Schüttrumpf J, Milanov P, Tonn T, Seifried E: Complete correction
of Factor IX levels following non-viral gene transfer
in hemophilia B mice. ISBT Macao
422. Schüttrumpf J, Milanov P, Tonn T, Seifried E: Complete correction
of Factor IX levels following non-viral gene transfer
in a hemophilia B mouse model GTH Wiesbaden, 2008 (V)
423. Schüttrumpf J, Zou J, Furlan Freguia C, Baila S, Liu J, Arruda
VR: Protease-activated receptros 1 and 4 modulate
viral transduction by adeno-associated and adenoviral
vectors. Hämostaseologie 28: A28, 2007. (V)
424. Schüttrumpf J: Factor IX Variants for the Treatment of Hemophilia
A, Bayer Schering Pharma Hematology Conference,
Berlin, 2008 (V)
425. Schütz C, Schulz A, Pannicke U, Hönig M, Blanche S, Moshous
D, de Villartay JP, Cavazzano-Calvo M, Debre M,
Hirsch I, Schwarz K, Fischer A und Friedrich W: Are complications
after hematopoietic stem cell transplantation (HSCT)
more frequent in SCID patients with Artemis versus RAG
mutations? The European Group for Blood and Marrow
Transplantation (EBMT) Working Party „Inborn Errors“ Meeting.
Arta, 11. -13. Oktober 2007 (V).
426. Schwarz K und Hönig M: Spontaneous and enforced reversions
of genomic DNA Abteilungsseminar Immunologie,
Universität Ulm. Ulm, 30. Januar und 27. Februar 2007 (V).
427. Schwarz K und Lolascon A: CDA II: Molecular Genetics. Second
workshop on the Congenital Dyserythropoietic Anemias.
Menaggio, 9.-11. November 2008 (V).
428. Schwarz K, Aschenbrenner F, Rüster B, Komor M, Kampfmann
M, Hofmann WK, Ruthardt M, Henschler R, Bug G
Novel role of Ras-GTPase Activating Protein SH3 Domain-
Binding Protein G3BP in cytoskeletal remodelling, migration
and short-term homing of hematopoietic progenitor cells.
Onkologie 2008;31(suppl 4):111
429. Schwarz K, Radecke F, Peter I, Radecke S, Gellhaus K, Cathomen
T: Targeted chromosomal gene modifica tion in
human cells by single-stranded oligodeoxynucleo tides in
the presence of a DNA double-stand break. 40th Annual
Meeting of the German Society for Transfusion Medicine
and Immunohematology (DGTI), Friedrichshafen, 18-21
September 2007. Transfus.
Med Hemother. 34 (S1): 27 (2007) (V11.6)
430. Schwarz K: Angeborene Immundefekte: Diagnostik und
Therapie. Seminar Kinderklinik Innsbruck, Innsbruck,
19. März, 2008 (V).
431. Schwarz K: Beispiele aus der Transfusionsmedizin. Tag der
Gesundheitsforschung. Ulm, 25. Februar 2008 (V).
432. Schwarz K: Ex vivo enforced gene reversion. 1. ZNIP Consortium
Meeting (EU-Projekt) Oslo, 30. März 2007 (V).
433. Schwarz K: Methoden zur Genkorrektur. VIII. BDT-Workshop
Blutstammzelltransplantation. Ulm, 17.-18. April 2008 (V).

434. Schwarz K: Pathophysiology and diagnosis of congenital
immunodeficiencies. 4. Advanced ICAS Training Course on
„Blood stem cell transplantation: State of the arts, methods,
perspectives. Ulm, 16.-19. April, 2007 (V).
435. Schwarz K: Spontaneous and ex vivo enforced gene reversion.
Abteilungsseminar Molekulare und Zelluläre Immunologie,
Universität Göttingen. Göttingen, 25. April 2007 (V).
436. Schwarz K: Wie funktioniert Gentherapie? Gegenwart und
Zukunft. 40 Jahre Universität Ulm, Jubiläumsfeier. Ulm, 7.
Juli 2007 (V).
437. Schwarz, K: Enforced reversions of genomic DNA. Abteilungsseminar
Humangenetik, Universität Ulm. Ulm, 26. April
2007(V).
438. Seidl C, Brixner V, O’Connell M, Delaney F, McMillan Douglas
A, Gorham M, van Krimpen P, Letowska M, Sobaga L,
de Wit J, Seifried E on behalf of the Project’s participants:
Blood transfusion in Europe: The EU-Q-Blood SOP manual
for implementing quality management systems following the
European blood directives.
Transfus Med Hemother, 34(S1), V2.7, 2007.
439. Seidl C, Sireis W, Brixner V, Siegel W, Costello P, Cermakova
Z, Delaney F, McMillan Douglas A, Gorham M, de Wit J, Seifried
E: European Blood Inspection System (EUBIS): A concept
for developing and implementing commonly accepted
criteria and standards to ensure equivalent recognition of inspection
of blood establishments among Member States.
Transfus Med Hemother, 34(S1), P10.03 (2007)
440. Seidl C: Basics of Blood Bank Certification and Accreditation.
Proceedings, 2nd Russian-German Conference of the
Koch-Metchnikov Forum Thomks, Meeting Proceeding,
pp194-195, 2007
441. Seifried E and Müller MM: „Development of Transfusion Medicine
in Europe – A Challenge for Physicians, Scientists
and Politicians.” Eingeladener Vortrag (Educational) im Rahmen
des Kongresses der International Society of Hematology
(ISH) – European-African Division (EAD), Budapest,
Ungarn, Freitag, 31. August 2007
442. Seifried E: Safety of Cell Therapeutics, Vortrag beim XXXth
International Congress of the International Society of Blood
Transfusion, Macao, 07. bis 12.06.2008
443. Seifried E und Tonn T: Good Manufacturing Practice Facilities
in der Universitätsmedizin. Erfahrungen mit einem GMP
Zentrum. Wissenschaftsrat (WR), GMP Anhörung des Ausschusses
Medizin, Köln, 18.09.2007
444. Seifried E, Bönig H, Henschler R, Tonn T: Stem and progenitor
cells in haemopoietic tissues: Potentiality and contribution
to blood and tissue regeneration, ISBT.
Vox Sanguinis (late-breaking abstract, unpublished) (V)
445. Seifried E, Henschler D, Mueller MM: Clinical Impact of Leukocyte
Depletion – What is Evidence-Based?
Vox Sang 2008:95;SuppL 1:1 (V)
446. Seifried E, Müller MM, Schmidt M: „Bacterial Contamination
of Platelet Concentrates.“ Eingeladener Vortrag in der „Educational
Session II – Transfusion Practice” des XVIIIth Regional
Congress Asia of the International Society of Blood
Transfusion (ISBT), Hanoi, Vietnam, 10. November 2007
447. Seifried E, Müller MM: Risiken der Eigen- und Fremdblut-
Transfusion. Eingeladener Vortrag im Rahmen der Doping-
Kleinkonferenz auf Einladung des Bundesministers des
Inneren in Dresden am Donnerstag, 29. März 2007
448. Seifried E: „Blut ist ein ganz besond'rer Saft!“ – Blutspende
und Bluttransfusion in Deutschland, Vortrag im St. Josef-
Krankenhaus, Königstein, 30.10.2008
Wissenschaftliche Vorträge, publizierte Abstracts 2007 – 2008
449. Seifried E: Anti-HBc Screening bei Blutspendern: Studie der
DRK Forschungsgemeinschaft; Aktueller Stand 01/2007,
Vortrag während der Sitzung der DRK Forschungsgemeinschaft,
Frankfurt 18.01.2007
450. Seifried E: Blutprodukte 2007/2008: Versorgungslage und
neue Aspekte zur Sicherheit, Vortrag beim Arbeitskreis Hämotherapie,
Frankfurt 16.01.2008
451. Seifried E: Cellular Immunotherapy: From Bench to clinical
Studies, Vortrag beim XVIIIth Regional Congress of the
ISBT, Hanoi, 10. bis 13.11.2007
452. Seifried E: Erfahrungen mit einem GMP-Zentrum. Vortrag
während Anhörung: Ausschuss Medizin des Wissenschaftsrates
zum Thema „Good Manufacturing Practice facilities in
der Universitätsmedizin“, Köln, 18.09.2007
453. Seifried E: Moderne Hämotherapie: Sicherheit von Blutprodukten
und zukünftige Entwicklungen in der Transfusionsmedizin/Modern
Hemotherapy: Safety of Blood Products
and Future Developments in Transfusion Medicine, Vortrag
beim Pirogov Tag, Moskau, 19.12.2008
454. Seifried E: NAT & Pathogen Reduction in Germany: Costs
and Benefits, Vortrag bei den 3rd German-Czech Transfusion
Days, Prag, 10. bis 11.04.2008
455. Seifried E: Present and Future Aspects of Transfusion Medicine,
Vortrag beim Pirogov Tag, Moskau 18.12.2008
456. Seifried E: Relevanz zellulärer Blutkomponenten beim akuten
Blutungsmanagement, Vortrag zum XXI. Biotest Hemophilia-Forum,
Seefeld, 22. bis 25.03.2007
457. Seifried E: Sicherheit von Blutprodukten – Eine medizinische
und ökonomische Herausforderung, Vortrag beim Rotary,
Frankfurt, 21.05.2008
458. Seifried E: Wandel und Perspektiven der Transfusionsmedizin
– Ein Ausblick, Vortrag anläßlich des 25-jährigen Bestehens
des DRK-Blutspendedienstes Berlin, 01.10.2008
459. Sido B, Autschbach F, Braunstein J, Lasitschka F, Giese T,
Meuer S: Differential Levels of Intercellular Glutathion (GSH)
Dictate the Shift from Adaptive to Innate T Cell Function in
the Human Intestinal Mucosa. FOCIS Meeting San Diego
07.-11. Juni 2007 (P)
460. Sireis W, Seidl C, Seifried E: Donor management - an important
instrument to safeguard blood supply. 40th Annual
Meeting of the German Society for Transfusion Medicine
and Immunohematology (DGTI), Friedrichshafen, 18-21.
September 2007
Transfus Med Hemother, 34(S1),P14.16, 2007
461. Sireis W, Stähle M, Müller-Kuller T, Brixner V, Findhammer S,
Seidl C, Seifried E: Blood transfusion safety and cost effectiveness:The
limits and advantages of quality management
systems. 40th Annual Meeting of the German Society
for Transfusion Medicine and Immunohematology (DGTI),
Friedrichshafen, 18-21. September 2007
Transfus Med Hemother, 34(S1), P14.15, 2007
462. Sittinger K, Geisen C, Watzka M, Ivaskevicius V, Heller C,
Kappert G, Kadar JG, Zieger B, Laws HJ, Seifried E, Oldenburg
J (2007): Combined Factor V and Factor VIII defidiency:
mutation analysis and ethnical background of five
patients. 21th Congress of the International Society on
Thrombosis and Haemostasis (ISTH), Genf, 06.-12. Juli
2007.
Thromb Haemost 2007, 5 Supplement 2: P-T-031 (P)
241

Forschungsbericht 2007 – 2008
463. Sittinger K, Geisen C, Watzka M, Ivaskevicius V, Klarmann
D, Heller C, Kappert G, Eisert R, Klamroth R, Laws HJ,
Kadar JG, Zieger B, Seifried E, Oldenburg J (2008): Novel
and recurrent mutations in combined FV and VIII deficiency
due to a screening strategy based on the descent of eight
patients. 20. Congreso del Grupo Cooperativo Latinoamericano
de Hemostasia y Trombosis, 8. Congreso del Grupo
Cooperative Argentino de Hemostasia y Trombosis, Buenos
Aires, Argentina, 23.-26. April 2008.
Acta Bioquim Clin Latinoam 2008; Suppl 1, 103 (P)
464. Sittinger K, Klarmann D, Eisert R, Zieger B, Kappert G,
Klamroth R, Kadar JG, Laws HJ, Seifried E, Oldenburg J,
Geisen C (2008): Combined analysis in combined FV and
VIII deficiency: novel and recurrent mutations and the ethnical
background of 8 patients. Joint Annual Congress of the
German Society for Transfusion Medicine and Immunohaematology
(DGTI), Düsseldorf, 16.-19. September 2008;
Transfus Med Hemother 2008;35(suppl 1):1-96; 82 (P)
465. Sittinger K, Miesbach W, Ivaskevicius V, Heller C, Weiss D,
Harbrecht U, Kappert G, Bidlingmaier C, Seifried E, Oldenburg
J, Geisen C (2008): The link between genetic diagnosis,
coagulation tests and clinical phenotype in 34 patients
with dysfibrinogenemia. Joint Annual Congress of the German
Society for Transfusion Medicine and Immunohaematology
(DGTI), Düsseldorf, 16.-19. September 2008.
Transfus Med Hemother 2008;35 (suppl 1):1-96; 38 (V)
466. Sittinger K, Watzka M, Ivaskevicius V, Heller C, Kappert G,
Laws H-J, Kadar JG, Zieger B, Geisen C, Seifried E, Oldenburg
J (2007): Mutation screening strategy based on patients’
ethnic background in combined Factor V and Factor
VIII deficiency. 40th Annual Meeting of the German Society
for Transfusion Medicine and Immunohematology (DGTI),
Friedrichshafen, 18-21. September 2007.
Transfus med Hemother 2007; 34 (suppl 1); 18 (V)
467. Speckmann C, Pannicke U, Nikolopoulos E, Schwarz K,
Fisch P, Friedrich W, Niehues T, Gilmour E, Buiting K, Schlesier
M, Eibel H, Rohr J, Superti-Furga A, Groß-Wieltsch U
und Ehl S: Somatic reversion in a patient with X-linked
SCID: a limited cure? 13. Meeting of the European Society
for Immunodeficiencies (ESID). ´s-Hertogenbosch, 16.-19.
Oktober 2008 (P).
468. Speckmann C, Schwarz K, Niehues T, Schlesier M, Fisch P,
Nikolopoulus E, Eibl H, Rohr J, Groß-Wieltsch U und Ehl S:
Potential and limitations of somatic reversion in X-linked
SCID 24. Jahrestagung der Arbeitsgemeinschaft Pädiatrische
Immunologie (API). Ittingen, 18.-20. Mai 2007 (V).
469. Stach K, Nguyen XD, Elmas E, Klüter H, Borggrefe M,
Brückmann M, Kälsch T: Protektive Effekte von 1,25-Dihydroxyvitamin
D3 auf endotheliale und thrombozytäre Aktivitäts-und
Progressionsmarker der Atherosklerose.
Clin Res Cardiol 2008, Suppl 1;97,P810 (P)
470. Stenzel A, Bringmann G, Strathmann K, Just B, Grolle A,
Flegel WA, Finger C, Muwazi E, Halfmann B, Kort mann H-R:
A case of a severely injured patient with blood group Oh
(Bombay). Annual Congress of the German Society for
Transfusion Medicine and Immunohaematology (DGTI), Düsseldorf,
16-19 September 2008.
Transfus. Med Hemother. 35 (S1): 47 (Abstract No. P 1A.10)
(2008) (P)
471. Ströbele C, Rüster B, Bugert P, Seifried E, Henschler R: Normoblasts
of different maturation stages express shear-resistant
binding to the endothelial substrate, vascular cell
adhesion molecule (VCAM)-1.
Transfus Med Hemother 34 (suppl 1): S11 (2007) (V)
472. Tonn T, Grigoleit GU, Busch D, Odendahl M, Anderl F, Germeroth
L, Seifried E, Einsele H: Adoptive immunotherapy
with Streptamer-selected HCMV specific T-cells after allogeneic
stem cell transplantation. DGTI Friedrichsh., 2007
242
473. Tonn T: Adoptive Cellular Immunotherapy of recurrent CMViremia
using streptamer-isolated CMV specific donor T-lymphocytes.
Annual Meeting of the Brazilian Society of
Hematology, Sao Paulo, 07-09.11.2007
474. Tonn T: Bone marrow progenitor cells for the treatment of
cardiovascular disease – lessons learned from the Repair-
AMI triaL American Association of Blood Banks (AABB); Cell
Therapy Spring Meeting San Diego, USA, 24.03.2007
475. Tonn T: Entwicklung und Kommerzialisierung zellulärer Produkte:
Neue Wege für neuartige Arzneimittel; Arbeitskreis
Biotechnologie der Deutschen Chemischen Industrie (DE-
CHEMA), Vortragstitel: „Interdisziplinäre Herstellung von Gewebe
und Zellen im universitären Umfeld“. Frankfurt am
Main,den 10.04.2007
476. Tonn T: Trafficking of stem cell products. European situation.
Jahrestagung der „Interntional Society for Cellular Therapy
(ISCT) June 2007 Sydney, Australia
477. Tramsen L, Köhl U, Tonn T, Latgé JP, Schuster FR, Borkhardt
A, Uharek L, Quaritsch R, Beck O, Seifried E, Klingebiel
T, Lehrnbecher T: Clinical-scale generation of human
anti-Aspergillus T-cells.
Klein Pädiatr 2008:220:209
478. Vega-Ostertag M, Milani LP, Argentieri D, Sittinger K: Frecuencia
del haplotipo 2 del gen de la VKORC1 en la poblacion
argentina. 20. Congreso del Grupo Cooperativo Latinoamericano
de Hemostasia y Trombosis, 8. Congreso del Grupo
Cooperative Argentino de Hemostasia y Trombosis, Buenos
Aires, Argentina, 23.-26. April 2008.
Acta Bioquim Clin Latinoam 2008; Suppl 1, 174 (P)
479. Verbeek M, Bornhaeuser M, Finke J, Beelen D, Kolb H,
Schwerdtfeger R, Kienast J, Zander A, Kraut L, Schoenland
S, Mayer R, Sayer H, Hahn J, Bunjes D, Christopeit M, Eder
M, Repp R, Arnold R, Ottinger H, Schrezenmeier H, Schmid
C on behalf of the German Transplant Cooperative Group
and German Registry for Stem Cell Transplantation: Second
transplant in the management of AML relapse after first allogeneic
stem cell transplantation: Results from a retrospective
analysis by the German transplant cooperative
group and the German registry for stem cell transplantation
(DRST). 34th Annual Meeting of the European Group for
Blood and Marrow Transplantation (EBMT), Florence, 30
March – 2 April 2008.
Bone Marrow Transplant 41 (S1): S103 (2008) (P)
480. Vigh A, Putzbach J, Mytilineos J: NOD2/CARD15 Polymorphismen
bei Patienten mit AML, ALL und CML.15. Jahrestagung
der Deutschen Gesellschaft für Immungenetik (DGI),
18. – 20. September 2007
481. Vigh A, Putzbach J, Schrezenmeier H, Mytilineos J: Impact
of donor and patient NOD2/CARD15 polymorphisms in the
outcome of unrelated stem cell transplantation. Toulouse:
22nd European Immonogenetics and Histocompatibility
Conference, 2-5 April 2008.
Tissue Antigens 71: 265 (2008) (315-P-078)
482. Vigh A, Putzbach J, Schrezenmeier H, Mytilineos J:
NOD2/CARD15 SNP genotyping by Luminex and impact on
the outcome of unrelated stem cell transplantation. Toronto:
34th ASHI Annual Meeting, 27-31 October 2008 (V) (P)
483. Vigh A, Putzbach J, Schrezenmeier H, Mytilineos J:
NOD2/CARD15 SNP genotyping by Luminex and impact on
the outcome of unrelated stem cell transplantation. Annual
Congress of the German Society for Transfusion Medi cine
and Immunohaematology (DGTI), Düsseldorf, 16-19 September
2008.
Transfus. Med Hemother. 35 (S1): 88-89 (2008) [P 14.01].
484. Vigh A, Putzbach J, Schrezenmeier H, Mytilineos J:
NOD2/CARD15 SNP Genotyping by Luminex and Impact on
the Outcome of Unrelated Stem Cell Transplantation. 34th
ASHI Annual Meeting, Toronto, 27.-31.10.2008.

485. Vigh A, Putzbach J, Schrezenmeier H, Mytilineos J: Relevance
of NOD2/CARD15 polymorphisms in the out come of
unrelated stem cell transplantation. Jahrestagung der Deutschen
Gesellschaft für Hämatologie und Onkolo gie (DGHO),
Wien, 10.-14. Oktober 2008.
Onkologie 31 (S4): 41-42 (2008) [P100].
486. Vigh A: Zytokingenpolymorphismen und ihr Einfluss auf die
Transplantation nicht verwandter Knochenmarkspender. Asselheim:
DRK-Forschungsseminar, 28.11.2008 (V)
487. Vinci M, Czabanka M, Elvers-Hornung S, Blaske T, Bieback
K, Klueter H and Vajkoczy P: In vivo analysis of tumor targeting
capacities of progenitor cell subpopulations. Joint Meeting
Annual Meeting of the Society for Microcirculation and
Vascular Biology and 6th International Symposium on the
Biology of Endothelial Cells. 6-10.10.2007 Heidelberg (V)
488. Von Zabern I, Burkhart J, Just B, Kroll H, Wojtzyk I, Flegel
W: The clinical need and supply of rare blood in Ger many: A
survey since 2005. Annual Congress of the German Society
for Transfusion Medicine and Immunohaema tology (DGTI),
Düsseldorf, 16-19 September 2008. Transfus.
Med Hemother. 35 (S1): 29 (Abstract No. O 12.1) (2008) (V)
489. Von Zabern I, Doescher A, Vytiskova J, Pisacka M, Wagner
FF, Flegel WA: RhD variants with amino acid sub stitutions at
the Rh vestibule: DCS-1, DCS-2 and DFV. 40th Annual Meeting
of the German Society for Transfusion Medicine and Immuno
hematology (DGTI), Friedrichshafen, 18-21 September
2007.
Transfus. Med Hemo ther. 34 (S1): 5-6 (Abstract No. V3.5)
(2007) (V)
490. Waidmann M: Das Tübinger Inseltransplantationsprojekt (V).
Vorgetragen am 07.08.2008 beim Gießener Inselworkshop
491. Warstat K, Felka T, Schäfer R, et aL: Effects of GMP-compatible
media and attachment to extra-cellular matrix compounds
onto the metabolism of human mesenchymal
stromal cells (MSC), DGBF 2007, Münster, Germany (P)
492. Wiesneth M: Blood Stem Cell Transplantation: Practical
Exercises. Ulm: ICAS-Course, 17./18.04.2007 (V)
493. Wiesneth M: Gesetz über Qualität und Sicherheit von
menschlichen Geweben und Zellen (Gewebegesetz-Entwurf)
- Kommentar. Günzburg: 11. IGLD Symposium „Zelldiagnostik
und Zelltherapie, 16.03.2007 (V)
494. Wiesneth M: Herstellung und Qualitätskontrolle von Blutpräparaten.
Ulm: Fortbildung für Voruntersuchende Ärzte bei
Blutspendeaktionen des DRK-BSD Baden-Württemberg -
Hessen, 21.07.2007 (V)
495. Wiesneth M: Herstellung von Blutbestandteilpräparaten
„Welche Blutprodukte werden aus einer Blutspende gewonnen?“.
Ulm: Fortbildung für Entnahmeteams, Institut Ulm
des DRK-BSD Baden-Württemberg - Hessen, 17.11.2008
(V)
496. Wiesneth M: Perspektiven der Blut- und Stammzellpräparation.
Essen: 13. Landsberg Kolloquium, 16.05.2008 (V)
497. Wiesneth M: Präparation und Transplantation hämatopoetischer
Stammzellen. Ulm: VIII. BDT (Bund Deutscher Transfusionsmediziner)
– Workshop „Blutstammzell transplantation“,
17./18.04.2008 (V)
498. Wiesneth M: Rechtliche Vorgaben zur Spendersicherheit bei
der Gewinnung von peripheren Blutstammzellen. Ulm:
ZKRD (Zentrales Knochenmarkspender-Register Deutschland)
– Jahrestagung, 11.05.2007 (V)
499. Wiesneth M: Spendersicherheit bei der Gewinnung von hämatopoetischen
Stammzellen und Akkreditierungs verfahren.
Kassel: ARGE-KMSB (Arbeitsgemeinschaft der Knochenmarkspender-Dateien
Deutscher Blutspendedienste e.V.) -
Jahrestagung, 05.06.2007 (V)
Wissenschaftliche Vorträge, publizierte Abstracts 2007 – 2008
500. Wiesneth M: Transfusionsassoziierte Akute Lungeninsuffizienz.
Ulm: Fortbildung für Voruntersuchende Ärzte bei Blutspendeaktionen
des DRK-BSD Baden-Württemberg -
Hessen, 31.05.2008 (V)
501. Wiesneth M: Transplantation hämatopoetischer Stammzellen
- Immuntherapie. Bielefeld: Transfusionsmedizinisches
Seminar für Ärzte in der Weiterbildung für Transfusionsmediziner
der DGTI und des BDT, 24.02.2007 (V)
502. Wiesneth M: Transplantation hämatopoetischer Stammzellen
- Immuntherapie. Bielefeld: Transfusionsmedizinisches
Seminar für Ärzte in der Weiterbildung für Transfusionsmediziner
der DGTI und des BDT, 23.05.2008 (V)
503. Wiesneth M: Von der Blutspende zur Zelltherapie. Ulm: „40
Jahre Universität Ulm“, 07.07.2007 (V)
504. Wiesneth M: Welche Blutprodukte werden aus einer Blutspende
gewonnen? Ulm: Weltblutspendetag, 14.06.2008 (V)
505. Wiesneth M: Zelluläre Immuntherapie und Blutstammzelltransplantation.
Baden-Baden: Klinische Transfusions medizin
(Fortbildungsveranstaltung zur Qualifikation als
Transfusionsverantwortliche/r und Tranfusionsbeauftragte/r),
21.06.2008 (V)
506. Wiskirchen J, Schäfer R, Kramberg S et aL: Labeling of
human Cells with commercially available iron-containig MR
contrast agents in combination with liposomal and non-liposomal
transfection agents - in vitro investigations and potential
for in vivo applications. Research Colloquium of the
Medical Faculty of the University of Tübingen 2007, Germany
(P)
507. Wundes A, Chang KH, Lucas S, Papayannopoulou T, Bönig
H (2008): Elevated Hematopoietic Stem/Progenitor Cell
Counts Circulating in Patients with Multiple Sclerosis Treated
with Natalizumab, AAN: Neurology 70s1:374
P (featured abstract in „highlights of MS“)
508. Zabern I von: IVS5-38del4-Deletion im RhD-Gen: STR-Polymorphismus
ohne Bezug zur Antigen-D-Expression. Dessau:
DGTI-Sektionssitzung, 22.11.2007 (V)
509. Zabern I von: Klinischer Bedarf an Erythrozytenpräparaten
mit seltenen Blutgruppen in Deutschland seit 2005. Düsseldorf:
Jahreskongress der Deutschen Gesellschaft für Transfusionsmedizin
und Immunhämatologie (DGTI), 18.09.2008
(V)
510. Zabern I von: Neue Wege zur Gewinnung und Freigabe von
tiefgefrorenen Präparaten mit seltenen Blutgruppen. Düsseldorf:
Jahreskongress der Deutschen Gesellschaft für Transfusionsmedizin
und Immunhämatologie (DGTI),
Arbeitsgruppe Seltene Blutgruppen, 16.09.2008 (V)
511. Zabern I von: RhD-Varianten mit Aminosäuresubstitutionen
im Rhesus-Vestibulum: DCS-1, DCS-2 und DFV. Friedrichshafen:
Jahreskongress der Deutschen Gesellschaft für
Transfusionsmedizin und Immunhämatologie (DGTI),
19.09.2007 (V)
512. Zabern I von: RhD-Varianten mit Aminosäuresubstitutionen
im Rhesus-Vestibulum: DCS-1, DCS-2 und DFV. Sasbachwalden:
Forschungsseminar der DRK-Blutspendedienste
Baden-Württemberg - Hessen, 03.11.2007 (V)
513. Zabern I von: Transfusionszwischenfälle: Diagnostik und Interpretation.
Gera: Transfusionsmedizinisches Seminar beim
DRK-NSTOB/LÄK Thüringen, 14.11.2007 (V)
243

Forschungsbericht 2007 – 2008
Wissenschaftspreise / Posterpreise 2007 – 2008
Posterpreis 2007 (Best Clinical Presentation) für Herrn Dr. Kaimo Hirv für sein Poster „Estimation of duration and
success of unrelated stem cell donor searches, based on HLA-DRB1 allele and DRB1-DQB1 haplotype frequencies“
beim 33rd Annual Meeting of the European Group for Blood and Marrow Transplantation (EBMT), Lyon, 25.-28. März
2007. Bone Marrow Transplantation 39 (S1): S135 (2007) (P626).
Posterpreis 2007 der Deutschen Gesellschaft für Transfusionsmedizin und Immunhämotologie (DGTI) an Herrn Dr.
med. R. Schäfer für das Poster „Aptamer-based isolation and subsequent imaging of Mesenchymal Stem Cells in
ischemic myocard by magnetic resonance tomography“
Jahreskongress der DGTI, Friedrichshafen 16.-19. September 2007.
Posterpreis 2008 der Deutschen Gesellschaft für Transfusionsmedizin und Immunhämotologie (DGTI) an Frau Stefanie
Roth für das Poster „The Role of PDI and the L-Tyüe Lectin LMAN2L in the Secretion of Full-Length and B-Domain-Deleted
Factor FVIII“ Roth S, Seifried E, Tonn T. 41. Jahreskongress der DGTI, 16.-19. September 2008,
Düsseldorf.
Rudolf Marx Stipendium 2008 der Gesellschaft für Thrombose- und Hämostaseforschung für das Projekt „Faktor IX
Varianten mit veränderter Enzymaktivität zur Behandlung der Hämophilie“ verliehen an Herrn Dr. Jörg Schüttrumpf
Early Career Development Award 2008 des Bayer Healthcare Hemophilia Award Programms für das Projekt „Factor
IX Variants for the Treatment of Hemophilia A“ vergeben an Herrn Dr. Jörg Schüttrumpf.
Stipendium der Stiftung Hämotherapie-Forschung (2008 bis 2010) für die Förderung der Entwicklung neuer Behandlungsstrategien
für die Hämophillie vergeben an Herrn Dr. Jörg Schüttrumpf.
Prof. Heimburger Award der Firma CSL-Behring für das Projekt „Tolerance Induction by Non Viral Gene Transfer for
Hemophilia A and Cellular Immunomodulation with Mesenchymal Stem Cells“ vergeben an Herrn Dr. Jörg Schüttrumpf.
Fritz Schiff Preis 2008 der Deutschen Gesellschaft für Transfusionsmedizin und Immunhämotologie (DGTI) für die
Arbeit „Factor IX Variants Improve Gene Therapy Efficacy for Hemophilia B“ verliehen an Herrn Dr. Jörg Schüttrumpf.
Promotionspreis 2008 der Ulmer Universitätsgesellschaft für Herrn Dr. med. Timo Axel Lüttringhaus für hervorragende
Promotionsleistungen für seine Dissertation zur Erlangung des Doktorgrades der Medizin der Medizinischen
Fakultät der Universität Ulm: RHD-Genotypisierung bei D-negativen Ostasiaten.
Posterpreis 2008 der Deutschen Gesellschaft für Kinder- und Jugendmedizin für Hönig, M., Schulz, A., Fisch, P.,
Kersten, T., Pannicke, U., Rojewski, M., Debatin, K.-M., Friedrich, W. und Schwarz, K. „Spontane somatische Reversionen
lymphozytärer Subpopulationen bei einer Patientin mit SCID bei JAK3-Defizienz – Hinweise auf unabhängige
Vorläuferzellen für ��- und ��-T-Zellen“. 104. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Kinder- und Jugendmedizin
e.V. (DGKJ). München, 11.-14. September, 2008.
Promotionsstipendium 2008 im Förderprogramm „Experimentelle Medizin“ der Medizinischen Fakultät der Universität
Ulm für Frau Gloria Herzog (AG Dr. med. Ramin Lotfi) für Untersuchungen der Interaktion dendritischer Zellen und
eosinophiler Granulozyten.
244

Ausgerichtete wissenschaftliche Kongresse
und Symposien 2007 – 2008
Ausgerichtete wissenschaftliche Kongresse und Symposien 2007 – 2008
VIII. Workshop „Blutstammzelltransplantation“ des Berufsverbands Deutscher Transfusionsmediziner, Ulm,
17. und 18. April 2008 (Organisation: Dr. Markus Wiesneth, Prof. Dr. Hubert Schrezenmeier)
4th Advanced ICAS Training Course on "Blood Stem Cell Transplantation: State of the Arts, Methods and
Perspectives, Ulm, 16. - 19. April 2007 (Leitung: Prof. Dr. Hubert Schrezenmeier)
10th European Haemovigilance Seminar, 28.02. – 01.03.2008, Frankfurt (Prof. Dr. med. Dr. h. c. E. Seifried)
Organisation des 6. START-MSC Workshops 07. – 08. März 2008 (Leitung Dr. rer. nat. Karen Bieback)
Third German-Czech Transfusion Days, 10.04 – 11.04.2008. Prag
Baden-Badener Tag der Impf- und Reisemedizin, Baden-Baden am 08.11.2008 (Leitung: Dr. A. Agildere)
Baden-Badener Tag der Impf- und Reisemedizin, Baden-Baden am 15.09.2007 (Leitung: Dr. A. Agildere)
2nd Congress on Characterization, Preparation and Clinical Applications of non Hematopoietic Stem Cells, Tübingen,
04. – 05. April 2008
(Leitung: Prof. Dr. med. H. Northoff; Organisation, Sekretär und Mitglied des Wissenschaftlichen Komitees:
Dr. med. R. Schäfer)
DRK-Forschungsseminar 2007, Sasbachwalden, 02. – 03.11.2007
(Organisation: Prof. Dr. med. H. Northoff, Dr. med. R. Schäfer, T. Vetter)
DRK-Forschungsseminar 2008, , Asselheim, 28. – 29.11.2008
(Organisation: , Prof. Dr. Stefan Meuer, Dr. med. A. Leo)
37. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Immunologie; Heidelberg, Neue Universität 5. – 8. September 2007
Kongress Präsident: Prof. Dr. med. S. Meuer
Kongress Koordinator: Dr. med. T. Giese
Mini-Symposium der europäischen FOCIS-Center of Excellence; Heidelberg, 22.-23. Mai 2008
(Prof. Dr. med. S. Meuer)
EFIS-EJI Natural Killer Cell Symposiums 2008, Bad Herrenalb, 21. – 23.5.2008. Organisiert von Prof. Dr. C. Watzl
3rd EU-Q-Blood-SOP Project Meeting in Frankfurt am Main, 18. – 19. April 2007 (Prof. Dr. med. C. Seidl)
EuBIS Concept Meeting, Frankfurt am Main, 26. Oktober 2007 (Prof. Dr. med. C. Seidl)
1st EuBIS Project Meeting, Frankfurt am Main, 21. – 23. November 2007 (Prof. Dr. med. C. Seidl)
1st MDT-Meeting innerhalb des EuBIS Projects in Frankfurt am Main, 18. März 2008 (Prof. Dr. med. C. Seidl)
EuBIS Working Group 3 Meeting in Kooperation mit dem National Center of Haematology and Transfusiology, Sofia,
17. – 18. April 2008 (Prof. Dr. med. C. Seidl)
EuBIS Working Group 4 Meeting in Kooperation mit dem Irish Blood Transfusion Service
(National Blood Centre), Dublin, 24.-25. April 2008 (Prof. Dr. med. C. Seidl)
EuBIS Joint Working Group 1 and 2 Meeting in Kooperation mit dem National Blood Transfusion Service,
Malta, 25. – 28. Mai 2008 (Prof. Dr. med. C. Seidl)
2nd MDT-Meeting innerhalb des EuBIS Projects in Frankfurt am Main, 28. – 30. Oktober 2008 (Prof. Dr. med. C. Seidl)
3rd MDT-Meeting innerhalb des EuBIS Projects am Paul-Ehrlich-Institut (PEI) in Langen,
8. – 10. Dezember 2008 (Prof. Dr. med. C. Seidl)
245

Forschungsbericht 2007 – 2008
Lehrveranstaltungen 2007-2008
Frankfurt
Aktuelle Entwicklung der Virussicherheit in der Hämotherapie im
WS 2006/2007
Seminar; Di, 16:00 – 17:00
Seidl Ch., Seifried E.
Differentialdiagnostisches Fall-Seminar Immunhämatologie im WS
2006/2007
Seminar; jede 2. Woche Do, 18:00 – 19:30
Seidl Ch., Henschler R., Tonn T.
Doktorandenseminar: Grundlagen der Immungenetik: Molekulare
Struktur und klinische Bedeutung des HLA-Systems im WS
2006/2007
Seminar; 2-stdg.
Seidl Ch.
Grundlagen der Stammzellbiologie
Seminar; Fr, 14:00 – 15:00
Henschler R., Seifried E.
Grundlagen der Transfusionsmedizin und Immunhämatologie -
alle klin. Semester im WS 2006/2007
Vorlesung; jede 2. Woche Do, 10:15 – 11:45
Seifried E., Henschler R., Seidl Ch., Tonn T., Weichert W.
Immunhämatologisches Praktikum – alle klin. Sem. im WS
2006/2007
Praktikum; eine Woche Blockveranstaltung
Seifried E., Seidl Ch., Henschler R., Oremek G.
Klinische Immunologie (Querschnittsbereich 4) Teil 1: Klinische
Immunologie im WS 2006/2007
Seminar; Mo, 11:00 – 13:00
Radeke H.H., Seifried E. und Mitarbeiter
Klinische Transplantationsimmunologie - Immungenetik und Zelltherapie
im WS 2006/2007
Seminar; 4-stdg, 14.00 – 18.00
Seidl Ch., Tonn T.
Pathophysiologie und Therapie von Krankheitsbildern der Blutgerinnung
im WS 2006/2007
Vorlesung; jede 2. Woche Do, 18:00 – 19:30
Seifried E. und Mitarbeiter
Transfusionsmedizin u. Hämotherapie / Immunhämatologie im WS
2006/2007
Praktikum; vier Donnerstage im Semester, 15.00 – 17.00
Seifried E., Seidl Ch., Henschler R., Tonn T.
Aktuelle Entwicklung der Virussicherheit in der Hämotherapie im
SS 2007
Seminar; Di, 16:00 – 17:00
Seidl Ch., Seifried E.
Differentialdiagnostisches Fall-Seminar Immunhämatologie im SS
2007
Seminar; jede 2. Woche Do, 18:00 – 19:30
Seidl Ch., Henschler R., Tonn T. und Mitarbeiter
Doktorandenseminar: Grundlagen der Immungenetik: Molekulare
Struktur und klinische Bedeutung des HLA-Systems im SS 2007
Seminar; 2-stdg
Seidl Ch.
Grundlagen der Stammzellbiologie
Seminar; Fr, 14:00 – 15:00
Seifried E. Henschler R.
246
Grundlagen der Transfusionsmedizin und Immunhämatologie -
alle klin. Semester im SS 2007
Vorlesung; jede 2. Woche Do, 10:15 – 11:45
Seifried E., Henschler R., Seidl Ch., Tonn T., Weichert W. und Mitarbeiter
Immunhämatologisches Praktikum – alle klin. Sem. im SS 2007
Praktikum; eine Woche Blockveranstaltung
Seifried E., Seidl Ch., Henschler R., Oremek G., Tonn T.
Klinische Transplantationsimmunologie - Immungenetik und Zelltherapie
im SS 2007
Seminar; 4-stdg, 14.00 – 18.00
Seidl Ch., Tonn T.
Pathophysiologie und Therapie von Krankheitsbildern der Blutgerinnung
im SS 2007
Vorlesung; jede 2. Woche Do, 18:00 – 19:30
Seifried E. und Mitarbeiter
Transfusionsmedizin u. Immunhämatologie [Profilfach 4] im SS
2007
Praktikum und Seminar; zwei Semesterwochenstunden;
Mi, 17:30 – 19:00
Seifried E., Seidl Ch., Henschler R., Tonn T., Geisen C., Müller M.
Aktuelle Entwicklung der Virussicherheit in der Hämotherapie im
WS 2007/2008
Seminar; Di, 16:00 – 17:00
Seidl Ch., Seifried E.
Differentialdiagnostisches Fall-Seminar Immunhämatologie im WS
2007/2008
Seminar; jede 2. Woche Do, 18:00 – 19:30
Seidl Ch., Henschler R., Tonn T. und Mitarbeiter
Doktorandenseminar: Grundlagen der Immungenetik: Molekulare
Struktur und klinische Bedeutung des HLA-Systems im WS
2007/2008
Seminar; 2-stdg.
Seidl Ch.
Grundlagen der Stammzellbiologie im WS 2007/2008
Seminar; Fr, 14:00 – 15:00
Seifried E. Henschler R.
Grundlagen der Transfusionsmedizin und Immunhämatologie -
alle klin. Semester im WS 2007/2008
Vorlesung; jede 2. Woche Do, 10:15 – 11:45
Seifried E., Henschler R., Seidl Ch., Tonn T., Weichert W. und Mitarbeiter
Immunhämatologisches Praktikum – alle klin. Sem. im WS
2007/2008
Praktikum; eine Woche Blockveranstaltung
Seifried E., Seidl Ch., Henschler R., Schmidt M., Tonn T.,
Oremek G.
Klinische Immunologie (Querschnittsbereich 4) Teil 1: Klinische
Immunologie im WS 2007/2008
Seminar; Mo, 11:00 – 13:00
Radeke H.H., Seifried E. und Mitarbeiter
Klinische Transplantationsimmunologie - Immungenetik und Zelltherapie
im WS 2007/2008
Seminar; 4-stdg, 14:00 – 18:00
Seidl Ch., Tonn T.

Pathophysiologie und Therapie von Krankheitsbildern der Blutgerinnung
im WS 2007/2008
Vorlesung; jede 2. Woche Do, 18:00 – 19:30
Seifried E., Großmann R.E.
Transfusionsmedizin u. Immunhämatologie [Profilfach 4] im WS
2007/2008
Praktikum und Seminar; zwei Semesterwochenstunden;
Mi, 17:30 – 19:00
Seifried E., Seidl Ch., Henschler R., Tonn T., Großmann R.E.,
Schmidt M.
Aktuelle Entwicklung der Virussicherheit in der Hämotherapie im
SS2008
Seminar; Di, 16:00 – 17:00
Seidl Ch., Seifried E.
Differentialdiagnostisches Fall-Seminar Immunhämatologie im
SS2008
Seminar; jede 2. Woche Do, 18:00 – 19:30
Seidl Ch., Henschler R., Tonn T. und Mitarbeiter
Doktorandenseminar: Grundlagen der Immungenetik: Molekulare
Struktur und klinische Bedeutung des HLA-Systems im SS2008
Seminar; 2-stdg.
Seidl Ch.
Entwicklung und Anwendung von Realtime PCR Methoden in der
Medizin [Profilfach 4] SS2008
Seminar; eine Woche i.d. Semesterferien Blockveranstaltung,
07.07. – 11.07., ganztägig
Schmidt M. und Mitarbeiter
Grundlagen der Stammzellbiologie SS2008
Seminar; Fr, 14:00 – 15:00
Seifried E., Henschler R.
Grundlagen der Transfusionsmedizin und Immunhämatologie -
alle klin. Semester im SS2008
Vorlesung; jede 2. Woche Do, 10:15 – 11:45,
Seifried E., Henschler R., Seidl Ch., Tonn T., Weichert W. und Mitarbeiter
Immunhämatologisches Praktikum - alle klin. Sem. im SS2008
Praktikum; eine Woche Blockveranstaltung
Seifried E., Seidl Ch., Henschler R., Schmidt M., Tonn T., Oremek,
G. und Mitarbeiter
Klinische Transplantationsimmunologie – Immungenetik und Zelltherapie
im SS2008
Seminar; 4-stdg., Di, 14:00 – 18:00
Seidl Ch., Tonn T.
Pathophysiologie und Therapie von Krankheitsbildern der Blutgerinnung
Vorlesung; jede 2. Woche Do, 18:00 – 19:30
Seifried E. und Mitarbeiter
Sicheres Blut – neue Entwicklungen in der Transfusionsmedizin
[Profilfach 4] im SS2008
Seminar; Dienstag alle zwei Wochen
Schmidt M. und Mitarbeiter
Transfusionsmedizin u. Immunhämatologie [Profilfach 4] im
SS2008
Praktikum und Seminar; 2 Semesterwochenstunden; Mi, 17:30 –
19:00
Seifried E., Seidl Ch., Henschler R., Tonn T., Großmann R.E.,
Schmidt M., Geisen C., Müller M., Bönig H.
Lehrveranstaltungen 2007 – 2008
Heidelberg
Modul Immunologie im Propäddeutischen Block 5 * eine Woche
Modul klinische Infektiologie / Immunologie im Block III 8 * zwei
Wochen
Allgemeine und klinische Immunologie für Mediziner und Naturwissenschaftler,
1st.
Immunchemie für Mediziner und Naturwissenschaftler, 1st.
Einführung in die zelluläre Immunologie für Mediziner und Naturwissenschaftler,
1st.
Immunologische Mediatoren: Entzündungsreaktion und Infektabwehr,
für Mediziner und Naturwissenschaftler, 1st.
Klinische Immunologie und Rheumatologie, 2st.
Ringvorlesung: Zelluläre Immunologie, 2st.
Das Histokompatibilitäts-System des Menschen, 1st.
Einführung in die Immunhämatologie und Transfusionsmedizin
Seminar für Fortschritte auf dem Gebiet der Immunologie, für Mediziner
und Naturwissenschaftler, 2st.
Problemorientiertes Lernen (POL); Immunologie für Mediziner: Klinisch-immunologische
Fälle (Gruppenarbeit)
Ausgewählte Kapitel der Immunologie, 4st.
Monoklonale Antikörper in Diagnostik und Therapie, 2st.
Leukozytenmigration- und adhäsion, 1st.
Immundiagnostisches Seminar: Die Diagnostik von Infektionen,
Autoimmun- und anderer Erkrankungen mit immunologischen
Techniken, 2st.
Immunologisches Praktikum für Mediziner und Naturwissenschaftler
Immundiagnostisches Praktikum
Die immunologische Untersuchung der Stammesgeschichte des
Menschen und anderer Primaten, 1st.
Mannheim
Studiengang: MaReCuM, Modul II Blut
08.01. – 23.02.2007
07.01. – 22.02.2008
Klüter H., Biebac, K., Bugert P., Müller-Steinhardt M.,
Janetzko K., Nguyen X.-D.
Studiengang: MaReCuM, Modul I naturwissenschaftlich Propädeutik/Zelle
I
29.10. – 14.12.2007
27.10. – 12.12.2008
Klüter H., Bieback K., Bugert P.
Studiengang: MaReCuM, Modul VI Molekulargenetik
10.12.2007 – 08.02.2008
08.12.2008 – 06.02.2009
Bieback, K., Bugert, P.
Blockkurs 'Transfusionsmedizin', 24. – 28.09.2007,
Bibliothek/Labor Institut Mannheim
Blockkurs 'Transfusionsmedizin', 10. – 14.03.2008,
Bibliothek/Labor Institut Mannheim
Blockkurs 'Transfusionsmedizin', 22. – 26.09.2008,
Bibliothek/Labor Institut Mannheim
Klüter H., Bieback K., Bugert P., Janetzko K.,
Müller-Steinhardt M., Nguyen X. D., Stichling F. , Stötzer F.
247

Forschungsbericht 2007 – 2008
Querschnittsbereich 4: „Infektiologie/Immunologie“ 22.10. –
10.12.2007
Querschnittsbereich 4: „Infektiologie/Immunologie“ 22.09. –
02.10.2008
Klüter H., Bugert P., Neumaier M., Bohus M., Hof H., Yard B.,
Schadendorf D., Riedel F., Müller-Steinhardt M.
PJ-Seminare, 01.09.2007 – 28.02.2008
PJ-Seminare, 01.04. – 28.08.2008
Klüter H., Janetzko K., Müller-Steinhardt M.
Tübingen
Infektionen durch Blutprodukte
i-KliCs: Immunämatologie, Infektion
OTA-Unterricht: Transfusionsrisiken, Dokumentation, Regelwerke,
Rückverfolgung
Infektionen durch Blutprodukte i-KliC: Infektion
PJ-Studenten: Thrombopenie, Hämolyse
Infektionen durch Blutprodukte i-KliC: Infektion
PJ-Studenten: Gabe von Blutprodukten, Risiken bei homologer
Bluttransfusion,autologe Bluttransfusion
OTA-Unterricht: Blut
Apparative und molekularbiologische Methoden in der Sportmedizin
(TüKlic)
Forschungsseminar Transfusionsmedizin
Doktoranden- und Diplomandenkolloquium Sportmedizin
Grundbegriffe der Blutphysiologie (OTA)
Reaktionsmuster des Organismus – Entzündung (OTA)
Reaktionsmuster des Organismus – Krankhafte Veränderungen
and Zelle und Gewebe (OTA)
Zentrales und peripheres Nervensystem (Logopädieschule)
Skills Lab Transfusionsmedizin i.R. Blockpraktikum Innere Medizin
Eckpfeiler der Transfusionsmedizin (Theodor-Billroth-Summer
School)
Ulm
Wahlfach Transfusionsmedizin im WS 2006/07
08.01. – 12.02.2007: 7 x 120 Min.
Wahlfach Transfusionsmedizin im SS 2007 mit folgenden Inhalten:
- Blutspende.
- Herstellung von Blutkomponenten aus Vollblutspenden.
- Blutgruppen.
- Praktikum Blutgruppenserologie.
- Indikation für Blutkomponenten.
- Nicht infektiöse unerwünschte Wirkungen von Bluttransfusionen.
23.04. – 16.07.2007: 14 x 120 Min.
Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier
Zelluläre Therapien, Indikationen. POL-Gruppe Mikrobiologie/Virologie/Immunologie/Transfusionsmedizin
25.04. – 16.05.2007: 4 x 120 Min.
Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier
248
Vorlesung „Blood“ im Rahmen der Vorlesungsreihe „Advanced
Materials, Topic „Biomaterials“
09.05.2007: 45 Min.
Vorlesung „Blutprodukte als Medikamente“ im Rahmen des Wahlfachs
„Spezielle Aspekte der klinische Pharmakologie“
31.05.2007: 120 Min.
Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier
Herstellung, Eigenschaften, Indikationen (I) von Blutprodukten
Vorlesung im Rahmen des Kurses Hygiene/Mikrobiologie/Virologie
mit Immunologie und Transfusionsmedizin
18.06.2007: 60 Min.
Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier
Immundefekte
POL-Gruppe Mikrobiologie/Virologie/Immunologie/Transfusionsmedizin
20.06. – 11.07.2007: 4 x 120 Min.
PD Dr. med. J. Mytilineos
Indikationen, Tranfusionsreaktionen
POL-Gruppe Mikrobiologie/Virologie/Immunologie/Transfusionsmedizin
20.06. – 11.07.2007: 4 x 120 Min.
Prof. Dr. med. W.A. Flegel
Moderne Aspekte der Gentherapie: Generepair
Seminar im Bachelorstudiengang Molekulare Medizin (6. Fachsemester)
21.06.2007: 120 Min.
Dr. med. K. Schwarz
Herstellung, Eigenschaften, Indikationen (I) von Blutprodukten
Vorlesung im Rahmen des Kurses Hygiene/Mikrobiologie/Virologie
mit Immunologie und Transfusionsmedizin
28.06.2007: 60 Min.
Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier
Transplantationsimmunologie: HLA
Vorlesung im Rahmen des Kurses Hygiene/Mikrobiologie/Virologie
mit Immunologie und Transfusionsmedizin
29.06.2007: 60 Min.
PD Dr. med. J. Mytilineos
Grundlagen von Blutgruppenantigenen. Durchführung einer Transfusion
Vorlesung im Rahmen des Kurses Hygiene/Mikrobiologie/Virologie
mit Immunologie und Transfusionsmedizin
04.07.2007: 60 Min.
Prof. Dr. med. W.A. Flegel
Indikationen für Blutprodukte (II); Leitlinien, Dokumentation
Vorlesung im Rahmen des Kurses Hygiene/Mikrobiologie/Virologie
mit Immunologie und Transfusionsmedizin
11.07.2007: 60 Min.
Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier
Praktikum Transfusionsmedizin im Rahmen des Kurses Hygiene/Mikrobiologie/Virologie
mit Immunologie und Transfusionsmedizin
12.07.2007:
Prof. Dr. med. W.A. Flegel
Unerwünschte Wirkungen von Transfusionen
Vorlesung im Rahmen des Kurses Hygiene/Mikrobioloige/Virologie
im Immunologie und Transfusionsmedizin
18.07.2007: 60 Min.
Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier

Wahlfach Transfusionsmedizin im WS 2007/08 mit folgenden Inhalten:
- Blutspende: Physiologie, Kriterien Spenderauwahl, Hämapherese.
- Herstellung von Blutkomponenten aus Vollblutspenden.
- Blutgruppen.
- Praktikum Blutgruppenserologie.
- Indikationen für Blutkomponenten.
- Nicht infektiöse unerwünschte Nebenwirkungen von Bluttransfusionen.
- Stammzellen: Hämatopoetische Stammzellen.
- Stammzellen: Regenerative Therapie.
- Infektiöse unerwünschte Nebenwirkungen von Bluttransfusionen.
22.10.2007 – 11.02.2008: 28 Std.
Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier
Blutprodukte: Anwendung und unerwünschte Wirkungen
POL-Gruppe Mikrobiologie/Virologie/Immunologie/Transfusionsmedizin
07.11. – 28.11.2007: 4 x 120 Min.
Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier
Blutprodukte: Indikationen, Transfusionsreaktionen
POL-Gruppe Mikrobiologie/Virologie/Immunologie/Transfusionsmedizin
07.11. – 28.11.2007: 4 x 120 Min.
Prof. Dr. med. W.A. Flegel
Einführung in die klinische Medizin/Berufsfelderkundung
16.11.2007: 90 Min.
Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier
Vorlesung „Blutprodukte als Medikamente“ im Rahmen des Wahlfachs
„Spezielle Aspekte der klinischen Pharmakologie“
22.11.2007: 120 Min.
Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier
Einführung in die klinische Medizin/Berufsfelderkundung
18.01.2008: 90 Min.
Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier
Gesundheitsforschung: Beispiele aus der Transfusionsmedizin
Vorlesung am Tag der Gesundheitsforschung
25.02.2008: 60 Min.
Dr. med. K. Schwarz und Dr. hum. biol. U. Pannicke
Wahlfach Transfusionsmedizin mit folgenden Inhalten:
- Blutspende, Teil 1: Physiologie, Kriterien Spenderauswahl
- Blutspende, Teil 2: Hämapherese.
- Blutgruppen Teil 1 und 2.
- Blutgruppenserologie: Praktikum.
- Indikation für Blutkomponenten, Teil 1, 2 und 3.
- Nicht infektiöse unerwünschte Nebenwirkungen von Bluttransfusionen.
- Stammzellen, Teil 1: Hämatopoetische Stammzellen.
- Stammzellen, Teil 2: Regenerative Therapie.
- Infektiöse unerwünschte Nebenwirkungen von Bluttransfusionen.
21.04. – 14.07.2008: 14 x 120 Min.
Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier
Primäre Immundefekte
Seminar Querschnittsveranstaltung Q4 Immunologie und Infektiologie
SS 2008
22.04.2008: 120 Min.
Dr. med. K. Schwarz, PD Dr. med. A. Schulz und Prof. Dr. med. W.
Friedrich
Einführung in die klinische Medizin/Berufsfelderkundung
25.04.2008: 90 Min.
Dr. med. Ramin Lotfi
Lehrveranstaltungen 2007 – 2008
Primäre Immundefekte
Seminar Querschnittsveranstaltung Q4 Immunologie und Infektiologie
SS 2008
29.04.2008: 120 Min.
Dr. med. K. Schwarz, PD Dr. med. A. Schulz und
Prof. Dr. med. W. Friedrich
Primäre Immundefekte
Seminar Querschnittsveranstaltung Q4 Immunologie und Infektiologie
SS 2008
06.05.2008: 120 Min.
Dr. med. K. Schwarz, PD Dr. med. A. Schulz und
Prof. Dr. med. W. Friedrich
Transfusionsindikationen, -reaktionen.
POL-Gruppe Mikrobiologie/Virologie/Immunologie/Transfusionsmedizin
07.05. – 28.05.2008: 4 x 120 Min.
Prof. Dr. med. W.A. Flegel
Einführung in die klinische Medizin/Berufsfelderkundung
09.05.2008: 90 Min.
Dr. med. Ramin Lotfi
Vorlesung „Blutprodukte als Medikamente“ im Rahmen des Wahlfachs
„Spezielle Aspekte der klinischen Pharmakologie“
29.05.2008: 120 Min.
Dr. med. V. Mailänder
Blutprodukte: Eigenschaften und Indikation
POL-Gruppe Mikrobiologie/Virologie/Immunologie/Transfusionsmedizin
18.06. – 09.07.2008: 4 x 120 Min.
Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier
Immundefekte
POL-Gruppe Mikrobiologie/Virologie/Immunologie/Transfusionsmedizin
18.06.2008: 4 x 120 Min.
PD Dr. med. J. Mytilineos
Moderne Aspekte der Gentherapie: Generepair
Seminar im Bachelorstudiengang Molekulare Medizin (6. Fachsemester)
25.06.2008: 120 Min.
Dr. med. K. Schwarz
Blutgruppenantigene: Klinische Relevanz
Durchführung einer Transfusion
Vorlesung im Rahmen des Kurses Hygiene/Mikrobiologie/Virologie
(mit Immunologie und Transfusionsmedizin)
26.06./27.06.2008: 2 x 60 Min.
Prof. Dr. med. W.A. Flegel
Herstellung, Eigenschaften und Indikationen von Blutprodukten (I)
Indikationen von Blutprodukten (II); Leitlinien; Dokumentation
Unerwünschte Wirkungen von Transfusionen
Vorlesung im Rahmen des Kurses Hygiene/Mikrobiologie/Virologie
(mit Immunologie und Transfusionsmedizin)
02.07., 03.07. und 09.07.2008: 3 x 60 Min.
Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier
Transplantationsimmunologie: HLA
Vorlesung im Rahmen des Kurses Hygiene/Mikrobiologie/Virologie
(mit Immunologie und Transfusionsmedizin)
04.07.2008: 1 x 60 Min.
PD Dr. med. J. Mytilineos
249

Forschungsbericht 2007 – 2008
Transfusion
Praktikum im Rahmen des Kurses Hygiene/Mikrobiologie/Virologie
(mit Immunologie und Transfusionsmedizin)
10.07.2008: Ganztags
Prof. Dr. med. W.A. Flegel und Mitarbeiter
Wahlfach Transfusionsmedizin mit folgenden Inhalten:
- Blutspende, Teil 1 und 2.
- Blutgruppen, Teil 2 und 2.
- Blutgruppenserologie: Praktikum.
- Indikation für Blutkomponenten, Teil 1, 2 und 3.
- Nicht infektiöse unerwünschte Nebenwirkungen von Bluttransfusionen.
20.10. – 22.12.2008: 9 x 120 Min.
Prof. Dr. med. H. Schrezenmeier und Mitarbeiter
Primäre Immundefekte
Seminar Querschnittsveranstaltung Q4 Immunologie und Infektiologie
WS 2008/09
11.11.2008: 120 Min.
Dr. med. K. Schwarz, PD Dr. med. A. Schulz und
Prof. Dr. med. W. Friedrich
Einführung in die klinische Medizin
14.11.2008: 90 Min.
Dr. med. Ramin Lotfi
Primäre Immundefekte
Seminar Querschnittsveranstaltung Q4 Immunologie und Infektiologie
WS 2008/09
24.11.2008: 120 Min.
Dr. med. K. Schwarz, PD Dr. med. A. Schulz und
Prof. Dr. med. W. Friedrich
250

Fortbildungsveranstaltungen 2007 – 2008
Baden-Baden
18.01.07
Dr. E. A. Scharberg
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-
Baden, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Wissenschaftliche Projekte/Studien der Abteilung Immunhämatologie
22.02.07
Dr. E. Schellenberg
Institut für Transfusiosnmedizin Frankfurt, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen
Pathogeninaktivierung von Plasma mittels Ultraschall
22.03.07
Dr. B. Voigt
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-
Baden, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Arbeitsschutzbelehrung – Desinfektion und Hygienemaßnahmen
19.04.07
Dr. T. Dengler
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-
Baden, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Infektionsepidemiologie der Blutspender 2006
24.05.07
Dr. A. Agildere
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-
Baden, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Herstellung von Sonderpräparaten und Produktvalidierung
21.06.07
Dr. S. Findhammer
Institut für Transfusiosnmedizin Frankfurt, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen
Qualifizierung von Geräten und Anlagen
ARM Berichte – Materiovigilanz
28.06.07
Dr. M. Schipplick
Arbeitskreis Hämotherapie am Institut Baden-Baden
Klinische Aspekte der Qualitätssicherung von Blut und Blutprodukten
aus der Sicht des Qualitätsbeauftragten
28.06.07
Dr. E. Richter
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-
Baden, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen –
Sitzung Arbeitskreis Hämotherapie
PEI Report Herstellung und Verbrauch von Blutprodukten in
Deutschland in den Jahren 2003 und 2004 vom 05.02.07.
28.06.07
Dr. E. Richter
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-
Baden, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen –
Sitzung Arbeitskreis Hämotherapie
Hämovigilanz – PEI Report 2006
06./07.07.07
Fortbildung Klinische Transfusionsmedizin zur Erlangung der Qualifikation
als Transfusionsverantwortlicher/-beauftragter, Stadtklinik
Baden-Baden
24.09.07
Dr. E. A. Scharberg
MTA Fortbildung (dvta), Offenburg
Antikörperscrening, Antikörperdifferenzierung
Fortbildungsveranstaltungen 2007 – 2008
26.09.07
Herr Piroth, Firma Baxter
Erythrozytapherese mittels ALYX auch für die mobile Entnahme?
08.10.07
Dr. E. A. Scharberg
Oktoberforbildung der Klinik für Anästhesieologie und Intensivmedizin
am Schwarzwald-Baar-Klinikum, Schwenningen
Fallstricke der Transfusionsmedizin
30.10.07
Dr. H. Voelskow
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-
Baden, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Datenschutzschulung
21.11.07
Prof. A. Seltsam
Medizinische Hochschule Hannover
Die Biologie des ABO-Blutgruppensystems
22.11.07
Dr. B. Voigt
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-
Baden, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Belehrung nach der Gefahrstoffverordnung
27.11.07
Dr. E. A. Scharberg
Fortbildungsveranstaltung der Asklepios Kliniken Schwalm-Eder,
Homburg
Transfusionszwischenfall
29.11.07
Dr. M. P. Münscher
Hämotherapie im DRG-System 2007, Arbeitskreis Hämotherapie
am Institut Baden-Baden
12.12.07
Frau Bürck-Kammerer
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-
Baden, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Infektionsepidemiologische Daten von Blutspendern 2005 RKI-
Meldung nach § 22 TFG
23.01.08
Dr. H. Butz, Firma Pall
Prionenfiltration – neue Entwicklungen
20.02.08
Dr. A. Agildere
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-
Baden, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Chikungunya in Europa
12.03.08
Dr. H. Hustinx
BSD SRK, Bern
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-
Baden, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
1987 – 2007 RH48 (JAL): wie ein unbekanntes Antigen zur Blutgruppe
wird
31.03.08
Dr. T. Dengler
Fortbildung am Klinikum Offenburg, Offenburg
Infektionsserologie und Spenderepidemiologie 2006/2007
251

Forschungsbericht 2007 – 2008
12.06.08
Dr. T. Dengler
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-
Baden, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Spenderepidemiologie 2006/2007 – Auswertung der Look-back
Verfahren, Arbeitskreis Hämotherapie am Institut Baden-Baden
12.06.08
Dr. E. Richter
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-
Baden, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Bericht des PEI zur Gewinnung und der Anwendung von Blutprodukten
2005/2006, Arbeitskreis Hämotherapie am Institut Baden-
Baden
18.06.08
Dr. S. Reichenberg, Fa. MacoPharma
Pathogeninaktivierung II – Theraflex MB-Plasma
20./21.06.08
Fortbildung Klinische Transfusionsmedizin zur Erlangung der Qualifikation
als Transfusions-verantwortlicher, -beauftragter, Stadtkilnik
Baden-Baden
24.06.08
Dr. E.A. Scharberg
Fortbildung Immunhämatologie an der Uni-Klinik des Saarlandes,
Homburg
Vorgehen beim positiven DCT und Abklärung von Autoantikörpern
03.09.08
Dr. E.A. Scharberg
Arbeitskreis Hämotherapie am Institut Berlin
Klinisches Transfusionsmanagement
23.09.08
PD Dr. Ch. Gassner,
Innsbruck
Schwache- und Null-Allele: Charme und Bürde der molekularen
Blutgruppendiagnostik
26.09.08
Dr. E. A. Scharberg
MTA Fortbildung (dvta), Offenburg
Antikörperscrening, Antikörperdifferenzierung
01.10.08
Dr. E. Richter
Transfusionsmedizinische Fortbildung am Institut Frankfurt/M.
Optimierung der Thrombozytenadditivlösung
23.10.08
Dr. F. Tolksdorf
Fa. MacoPharma
Pathogeninaktivierung I – Theraflex UV Thrombozytenkonzentrate
04.11.08
Dr. E.A. Scharberg
Fortbildung Transfusionsmedizin am Ortenau-Klinikum Offenburg,
Offenburg
- Organisation und Durchführung der Bluttransfusion
- Nebenwirkungen der Bluttransfusion
13.11.08
Dr. H. Voelskow
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-
Baden, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Datenschutzschulung I
252
20.11.08
Dr. E. Richter
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-
Baden, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
ESR Untersuchungsergebnisse der Rückstellproben von Blutspendern
mit Tumorerkrankungen
27.11.08
Dr. K.-H. Beck, MDK Lahr
Abrechnung im DRG-System – ordnungsgemäße Dokumentation
im Krankenhaus, Arbeitskreis Hämotherapie am Institut Baden-
Baden
08.12.08
Dr. H. Voelskow
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-
Baden, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Datenschutzschulung II
11.12.08
Dr. E.A. Scharberg
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Baden-
Baden, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Nicht deletionale ABO-Varianten – Boostern Spender den Anti-Aund
Anti-B-Titer in O-Empfängern?
17.12.08
Dr. E.A. Scharberg
Transfusionsmedizinische Fortbildung am Institut Frankfurt/M.
High- and Low-frequency antigens and antibodies
Frankfurt
15.01.07
Dr. Halvard Boenig
University of Washington Seattle
Homing und Engraftment hämatopoetischer Stamm-/Progenitorzellen:
Rolle der Lamininrezeptoren
17.01.07
Dr. Oliver Seitz
Klinikum der Johann Wolfgang Goethe-Universität Frankfurt
Wertigkeit der autologen Tranplantation von CD133 positiven
Stammzellen inder rekonstruktiven Gesichtschirurgie
24.01.07
PD Dr. Michael Schmidt
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Von der in-house PCR zum CE-zertifizierten in vitro-Diagnostikum
31.01.07
Dr. Christof Geisen
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Differentialdiagnostik des positiven direkten Coombstests
07.02.07
MUDr. Walid Sireis
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Erfahrungen mit und Besonderheiten der anti-HBc-Testung bei
Blutspendern
14.02.07
Dr. Christoph Königs
Moleulare Hämostaseologie, Pädiatrie, Klinikum der Johann Wolfgang
Goethe-Universität Frankfurt
Dreidimensionales Epitop-Mapping bei F VIII-Inhibitoren

21.02.07
Dr. Stefan Margraf
Thorax- Herz- und Gefäßchirurgie, Klinikum der Johann Wolfgang
Goethe-Universität Frankfurt
Virusinaktivierung mittels UVB
28.02.07
PD Dr. Edelgard Lindhoff-Last
Angiologie/Hämostaseologie, Medizinische Klinik III
Klinikum der Johann Wolfgang Goethe-Universität Frankfurt
Diagnostik und Therapie der Heparin-induzierten Thrombozytopenie
07.03.07
PD Dr. Dirk Strunk
Klinische Abt. für Hämatologie, Medizinische Universität Graz,
Österreich
A novel humanized system to propagate mesenchymal stem cells
for regenerative medicine
14.03.07
PD Dr. R. Henschler
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Gute Wissenschaftlichen Praxis
21.03.07
Dr. H. Buxmann
Klinik für Kinderheilkunde, Neonatologische Intensivstation, Klinikum
der Johann Wolfgang Goethe-Universität Frankfurt
Hämolytische Erkrankungen von Feten und Neugeborenen – praktische
Durchführung einer Austauschtransfusion
28.03.07
PD Dr. Wolfgang Weichert
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Gesetzliche Bestimmungen, Vorgehen und Ergebnisse bei Look-
Back-Verfahren
18.04.07
Dr. Barbara Bomke
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Rhesus Diagnostik in der Schwangerschaft
23. bis 27.04.07
Prof. Dr. E. Seifried
u.a. Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie
Frankfurt, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
54. Immunhämatologischer Fortbildungskurs für Ärzte und MTAs
02.05.07
Dr. Thomas Montag-Lessing
Leiter Bereich Mikrobiologie Paul-Ehrlich-Institut
Strategien zur Steigerung der bakteriellen Sicherheit von Blutkomponenten
09.05.07
MUDr. W. Sireis
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Arbeitskreis Hämotherapie
15. 05. 07
PD Dr. Torsten Tonn, Dr. Markus M. Müller
„Blutpräparate für spezielle Indikationen“
Eingeladener Vortrag im Rahmen der wöchentlichen wissenschaftlichen
Fortbildung der internistischen Onkologen und Hämatologen
des Klinikums der Johann Wolfgang
Goethe-Universität Frankfurt
16.05.07
Dr. rer. nat. Stefan Reichenberg
MacoPharma International Langen
THERAFLEX Methylenblau-Plasma-Verfahren
Fortbildungsveranstaltungen 2007 – 2008
22.05.07
Dr. Markus M. Müller
„Blutprodukte – Gewinnung, Einsatz, Nebenwirkungen.“ Eingeladener
Vortrag im Rahmen der Fach-Pressekonferenz „Qualität
Leben: Exjade® bei MDS und seltenen Anämien“ am Institut für
Transfusionsmedizin und Immunhämatologie
Klinikum der Johann Wolfgang Goethe-Universität Frankfurt am
Main & DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
gemeinnützige GmbH
30.05.07
Eberhard Weck
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Strategien, Organisation, Durchführung und Bedarfsanpassung
bei der Werbung von Blutspendern
31.05.07
Dr. Markus M. Müller
„Eisenüberladung und Aderlass: Was gibt es an neueren Therapien?“
Eingeladener Vortrag im Rahmen der Fachweiterbildung der medizinisch-technischen
Assistentinnen am Institut für Transfusionsmedizin
und Immunhämatologie
Klinikum der Johann Wolfgang Goethe-Universität Frankfurt am
Main & DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige
GmbH
05.06.07
Dr. Markus M. Müller
„Sicherheit und Nebenwirkungen der Mobilisierung peripherer hämatopoetischer
Stammzellen (HSC) mittels rekombinantem humanem
Granulozyten-Kolonie-stimulierendem Faktor (rhu-G-CSF).“
Eingeladener Vortrag im Rahmen der Jahrestagung der Arbeitsgemeinschaft
Knochenmark-Spendedateien der Blutspendedienste
(ARGE KMSB) in Kassel
06.06.07
Katja Sittinger
Institut für Transfusionsmedizin Frankfurt, DRK Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen
Angeborene Kombinierte Mängel von Gerinnungsfaktoren
12.06.07
Dr. Stephan Findhammer, Dr. Markus M. Müller
„Transfusionsmedizin und Immunhämatologie.“
Vier eingeladene Vorträge im Rahmen der Fachweiterbildung Intensivpflege
und Anästhesiologie am Klinikum der Johann Wolfgang
Goethe-Universität Frankfurt
20.06.07
Dipl.-Biol. Stefanie Roth und Dipl.-Biol. Daniela Abriß
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Optimierung der rekombinanten FVIII-Produktion in Säugerzellen
27.06.07
Dr. Brigitte Rüster
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Mausmodelle der Leukämie
04.07.07
MUDr. Walid Sireis
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Materiovigilanz
253

Forschungsbericht 2007 – 2008
11.07.07
PD Dr. Sven Martens
Thorax- Herz- und Gefäßchirurgie, Klinikum der Johann Wolfgang
Goethe-Universität Frankfurt
Organprotektion bei Operationen mit der Herzlungenmaschine
08.08.07
PD Dr R. Henschler, Dipl.-Biol. H.-U. Pfeiffer
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Aktuelles aus der Produktion und Einweisung in die Herstellung
von Sonderpräparaten
15.08.07
Dr. M. Müller, Dr. C. Geisen, PD Dr. R. Henschler
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Fallbeispiele aus dem Immunhämatologischen Labor
22.08.07
PD Dr. Michael Schmidt
Institut für Transfusionsmedizin Frankfurt, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen
Neues aus dem Screening Labor
29.08.07
Prof. Dr. C. Seidl
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Aktuelles aus der Transplantationsimmunologie
05.09.07
Dr. Jochen Hoch
Oberarzt des Instituts für Exp. Hämatologie und Transfusionsmedizin
Universität Bonn
Hämotherapie bei Patienten mit selektivem IgA-Mangel
12.09.07
Dr. Markus Müller
Institut für Transfusionsmedizin Frankfurt, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen
Spendersicherheit: Nebenwirkungen und Risiken der Stammzell-
Mobilisierung mit G-CSF
26.09.07
PD Dr. Sabine Grösch
Pharmakologie
Klinikum der Johann Wolfgang Goethe-Universität Frankfurt
Neue Medikamente in der Krebstherapie
10.10.07
Dr. Henschler
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Doktoranden Fortbildung
17.10.07
Dr. Johannes Irsch
Director Scientific Affairs Europe, Cerus Europe B.V.
Intercept-Verfahren zur Pathogeninaktivierung von Blutkomponenten
24.10.07
Dr. Halvard Bönig
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Stamm-/Progenitorzellmobilisation durch Integrinblockade
07.11.07
PD Dr. R. Henschler und Dipl.-Biol. H.-U. Pfeiffer
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Aktuelle Daten und Entwicklungen aus der Produktionsabteilung
254
08.11.07
Dr. Markus M. Müller, PD Dr. Michael Schmidt
„Pathogen-Inaktivierung.“
Eingeladener Vortrag im Rahmen der Fachweiterbildung der medizinisch-technischen
Assistentinnen am Institut für Transfusionsmedizin
und Immunhämatologie; Klinikum der Johann Wolfgang
Goethe-Universität Frankfurt am Main & DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
13.11.07
Dr. Markus M. Müller
„Aktuelle Entwicklungen in der Transfusionsmedizin.“
Eingeladener Vortrag im Rahmen der wöchentlichen wissenschaftlichen
Fortbildung der internistischen Onkologen und Hämatologen
der Abteilung Innere Medizin II des Klinikums der
Johann Wolfgang Goethe-Universität Frankfurt
14.11.07
Dr. E. Chavakis
Molekulare Kardiologie
Klinikum der Johann Wolfgang Goethe-Universität Frankfurt
Role of integrins for adhesion and homing of endothelial progenitor
cells
21.11.07
Dr. B. Luxembourg
Gefäßzentrum Klinikum der Johann Wolfgang Goethe-Universität
Frankfurt
Aktuelle Daten über angeborenen Antithrombinmängel
28.11.07
Dr. M. Müller, Dr. H. Bönig
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Neue Therapien bei der Transfusions-assoziierten Eisenüberladung
05.12.07
Prof. Dr. M. Schrappe
Generalbevollmächtigter des Aufsichtsrates, Klinikum der Johann
Wolfgang Goethe-Universität Frankfurt
Patientensicherheit: Konzept und Anforderungen
12.12.07
Prof. Schrezenmeier
Institut für Transfusionsmedizin Ulm, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen
Diagnostik und Therapie Steroid-refraktärer AIHA
19.12.07
Moderation: PD Dr. Reinhard Henschler
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Nachlese zum DGTI-Kongress: Zusammenfassungen der Vorträge
und Posterbeiträge
09.01.2008
MUDr. W. Sireis
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Testung von Blutprodukten auf Sterilität
16.01.2008
Prof. Dr. E. Seifried, MUDr. W. Sireis
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Arbeitskreis Hämotherapie

23.01.2008
Prof. Dr. H. Burkhardt
Rheumatologie
Medizinische Klinik II, Klinikum der Johann Wolfgang Goethe-Universität
Frankfurt
Die Disintegrin-Metalloproteinase Adam 15 in der Pathogenese
entzündlicher und degenerativer Gelenkerkrankungen
30.01.2008
Katja Sittinger
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Kombinierter Faktor V- und Faktor VIII-Mangel: Strategie zur Mutationsdiagnostik
in Abhängigkeit von der ethnischen Herkunft bei
acht Patienten
06.02.08
Dr. E. Stoltz
Gesundheitszentrum Odenwaldkreis GmbH, Kreiskrankenhaus Erbach
Aktueller Stand notfallmedizinischer Maßnahmen
13.02.08
Dr. T. Saric
Institut für Neurophysiologie, Universität Köln
Entwicklung des Immunsystems bei der Differenzierung embryonaler
Stammzellen
20.02.08
Dr. H. Butz
European Scientific Marketing Manager Firma Pall GmbH Dreieich
Prionenreduktion von Blutkomponenten
27.02.08
Prof. Dr. M. Tjwa
Leibniz – Junior Research Group Leader Molekularkardiologie Klinikum
der Johann Wolfgang Goethe-Universität
Role of uPAR and plasmin in bone marrow stem/progenitor cell
retention and mobilization
05.03.08
Prof. Dr. Boris Fehse
Leitung Experimentelle und Pädiatrische Onkologie & Hämatologie,
Frankfurter Stiftung für Krebskranke Kinder Frankfurt
Retro- und lentivirale Vektoren als Werkzeuge zur funktionellen
Genanalyse
12.03.08
PD Dr. Hans Martin
Medizinische Klinik II
Klinikum der Johann Wolfgang Goethe-Universität Frankfurt
Aktueller Stand der Stammzelltransplantation bei Leukämien und
Lymphomen bei Erwachsenen
18.03.08
Claudia Lange
Johann Wolfgang Goethe-Universitätsklinikum Frankfurt
Mesenchymal stromal cells for regenerative medicine
19.03.08
Dr. Dr. Wolfgang Wagner
Medizinische Klinik V, Klinikum der Universität HeidelbergInteraction
of hematopoietic progenitor cells with mesenchymal stromal
cells as a model system for the stem cell niche
02.04.08
Dr. Jürgen Zimmermann
MacoPharma International GmbH Langen
Der Einsatz von RFID in der Transfusionsmedizin
Fortbildungsveranstaltungen 2007 – 2008
09.04.08
Michael Pröschel
Geschäftsführer
Vifor Deutschland, München
1000 mg iv Eisen in 15 Minuten: Eine neue therapeutische Option
mit Ferinject
14. bis 18.04.08
Prof. Dr. E. Seifried
u. a. Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie
Frankfurt, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
55. Immunhämatologischer Fortbildungskurs für Ärzte und MTAs
30.04.08
Dr. Ulrike Köhl
Pädiatrische Hämatologie, Onkologie und Hämostaseologie, Klinikum
der Johann Wolfgang Goethe-Universität Frankfurt
Immunrekonstitution nach allogener Stammzelltransplantation
07.05.08
Dr. Bernd Giebel
Institut für Transplantationsdiagnostik und Zelltherapeutika, Heinrich-Heine-Universität
Düsseldorf
Cell polarity and cell division of human hematopoietic stem and
progenitor cells
14.05.08
Prof. Joachim R. Goethert
Hämatologie Universitätsklinikum Essen
Conditional transgenic approaches involving SCL/tal1
28.05.08
Prof. Dr. Peter Bader
Leiter des Schwerpunktes Stammzelltransplantation Zentrum für
Kinder- und Jugendmedizin am Johann Wolfgang Goethe Universitätsklinikum
Frankfurt, Entwicklungen in der Stammzelltransplantation
bei Kindern und Adoleszenten in Frankfurt
04.06.08
PD Dr. R. Henschler
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Update Laborordnung und Grundlagen der Guten Wissenschaftlichen
Praxis
09.06.08
Dr. Markus M. Müller:
„Die Knochenmark- oder Blutstammzell-Fremdspende – Moderne
„Blutsbrüderschaft“ über Grenzen hinweg.“ Drei eingeladene
Vorträge 2008: Bergius-Schule, Frankfurt-Sachsenhausen,
MTA-Schule Frankfurt-Hoechst am Donnerstag, 12. Juni 2008
sowie Erwachsenenbildung St. Markus und Dekanat Rodgau,
Mühlheim am Main am Donnerstag, 09. Oktober 2008
11.06.08
PD Dr. P. Bugert
Institut für Transfusionsmedizin Mannheim, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen
Die molekulare Charakterisierung von RhCE Phänotypvarianten
18.06.08
Dr. R. Richter
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
PD Dr. H. Martin
Medizinische Klinik II, Klinikum der Johann Wolfgang Goethe-Universität
Frankfurt
Polymorphismen von NK-Zellrezeptoren bei der allogenen
Stammzelltransplantation
255

Forschungsbericht 2007 – 2008
02.07.08
Dr. S. Findhammer
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Spender-Einschluss-Kriterien und Dokumentation auf Blutspendeterminen
mittels INLOG
05.07.08
Dr. Markus M. Müller
„Blut, ein ganz besond´rer Saft“ – Nachweis und Risiken des Eigenblut-
und Fremdblut-Dopings.“
Eingeladener Vortrag beim Medizinischen Seminar im Rahmen
des IronMan Germany 2008 – European Championship, Frankfurt
am Main, Sitzungssaal im Römer;
16.07.08
Prof. Dr. C. Seidl
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
The European Blood Inspection System (EuBIS) Project: Entwicklung
von Qualitätsstandards und Überwachungsvorgaben für
Blut- und Blutkomponenten im Rahmen eines von der Europäischen
Kommission geförderten multinationalen Kooperationsprojektes
23.07.08
Prof. Dr. C. Seidl, PD Dr. M. Schmidt, Dr. H. Bönig
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Bericht vom ISBT Kongress
30.07.08
Prof. Dr. A. Bernd
Zentrum der Dermatologie und Venerologie
Klinikum der Johann Wolfgang Goethe-Universität Frankfurt
Expansion von Keratinozyten zur Hauttransplantation
06.08.08
Dr. M. Müller
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
TRALI: Klinik, medizinische Relevanz und Maßnahmen zur Prävention
13.08.08
Dr. R. Richter
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Rückstellproben von Organspendern – korrekte Anwendung und
medizinische Bedeutung
20.08.08
Prof. Dr. E. Seifried, MUDr. W. Sireis
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Immunhämatologisches Forum
27.08.08
Dr. E. Deak
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt,
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen
Regulation von Migration und Homing Mesenchymaler Stammzellen
(MSCs)
03.09.08
Dr. J. Schüttrumpf
Institut für Transfusionsmedizin Frankfurt, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen
Molekulare Therapieansätze für die Hämophilie
256
10.09.08
Dr. K. Janetzko
Institut für Transfusionsmedizin Mannheim, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen
In vitro Charakteristika photodynamisch behandelter Thrombozytenkonzentrate
24.09.08
Dr. D. Klarmann
Institut für Transfusionsmedizin Frankfurt, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen
Neue Leitlinien der Bundesärztekammer 2008: Unerwünschte Wirkungen
der Bluttransfusion
01.10.08
Dr. E. Richter
Institut für Transfusionsmedizin Baden-Baden, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen
Untersuchungen zur Optimierung der Thrombozytenadditivlösung
15.10.08
Dr. Halvard Boenig
„Gi proteins and integrins in homing of HSPC”
Department of Experimental Cardiology at the Johann-Wolfgang-
Goethe University, Frankfurt.
22.10.08
Dr. C. Brandts
Medizinische Klinik II Klinikum der Johann Wolfgang Goethe-Universität
Frankfurt
Mechanismen aberranter Signaltransduktion bei der Entstehung
akuter Leukämien
25.10.08
Dr. Halvard Boenig
„Mobilization with AMD3100”
Hematology/Oncology Retreat Rettershof
05.11.08
Prof. Dr. T. J. Legler
Abteilung Transfusionsmedizin Universitätsmedizin Göttingen
Nicht-invasive Rh-Diagnostik in der Schwangerschaft aus mütterlichem
Blut
12.11.08
Dr. H. Hoffmeister
Zellwerk GmbH Eichstädt
3D Zell- und Gewebekultivierung – neue Möglichkeiten für Zelltherapie,
zellbesiedelte Implantate und Produktion von Glykoproteinen
11/13.11.08
Dr. Markus M. Müller
„Anwendung neuer Pathogeninaktivierungsverfahren mittels Amotosalen
plus UVA-Bestrahlung bei gefrorenem Frischplasma (FFP):
Ergebnisse einer in vitro-Studie und strategische Überlegungen zu
FFP.“
Zwei eingeladene Vorträge im Rahmen der INTERCEPT-Anwendertreffen
in Frankfurt am Main
19.11.08
Dr. K. Rajalingam
Emmy Noether Group of the DFG, Institut für Biochemie II
Klinikum der Johann-Wolfgang Goethe-Universität Frankfurt
Regulation of apoptosis through RAF signalling and IAPs
26.11.08
Dr. K. Schwarz
Klinik III, Klinikum der Johann-Wolfgang Goethe-Universität
Frankfurt
Rolle des G3BP-Proteins für Migration und Homing hämatopoetischer
Vorläuferzellen

28.11.08
Dr. Halvard Boenig
„Optimized mobilization by CXCR4 antagonists, and analysis of
properties of HSPC mobilized in this fashion”
DRK Forschungsseminar Grünstadt
03.12.08
Dr. Xuan Duc Nguyen
Institut für Transfusionsmedizin Mannheim, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen
SASPA (simultaneous analysis of specific platelet antibodies) in
der klinischen Diagnostik
10.12.08
Eberhard Wörner
Fa. Terumo Frankfurt
TACSI-Automatisierung in der Thrombozytenherstellung
17.12.08
Dr. E. A. Scharberg
Institut für Transfusionsmedizin, Baden-Baden, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen
High and low frequency antigens and antibodies
Heidelberg
13.02.2007
Prof. Dr. Reinhard Fässler
Max Planck Institute of Biochemistry Department of Molecular
Medicine Martinsried
Analysis of the tumor suppressor gene CYLD in mice
20.02.2007
Prof. Dr. Hans-Reimer Rodewald
Institut für Mikrobiologie und Immunologie Abteilung Immunologie
Universitätsklinikum Ulm
Molecular mechanism of a mast cell protease mediated innate
protection pathway
16.03.2007
Prof. Dr. David A. Hafler
Center for Neurologic Diseases; Brigham and Women's Hospital;
Harvard Medical School; Boston, MA
Genomic and Functional Approaches to Understanding Human
Autoimmune Disease
03.04.2007
Prof. Dr. Jürgen Arnhold
Institut für Medizinische Physik und Biophysik, Universität Leipzig
Konträre Wirkungen der Myeloperoxidase: Gewebeschädigung
versus Entzündungshemmung
10.04.2007
Prof. MUDr. Ji ina Bart ková, DrSc.
Department of Immunology; 2nd Medical School and Hospital
Motol; Charles University Prague Dendritic cell immunotherapy in
ovarian cancer patients – a preclinical study
17.04.2007
Prof. Dr. Dominique Baeten
Clinical Immunology and Rheumatology; Academic Medical Centre;
University of Amsterdam
Spondyloarthritis: a prototype immune-mediated inflammatory
disease
Fortbildungsveranstaltungen 2007 – 2008
22.05.2007
Florence Roufosse, MD, PhD
Hôpital Erasme, Université Libre de Bruxelles; Département de
Médecine Interne Générale
T cell-mediated hypereosinophilic syndromes
24.07.2007
Prof. Dr. Jan Buer
IMMi – Institut für Medizinische Mikrobiologie; Universitätsklinikum
Essen
Regulation of pathogen-specific immune responses in inflammatory
diseases
16.10.2007
Prof. Dr. Abul K. Abbas
Department of Pathology, University of California; San Francisco,
CA U.S.A.
Systemic Tolerance and Autoimmunity: Balancing Pathogenic and
Protecting T-cells
23.10.2007
Thorbald van Hall, PhD
Clinical Oncology, K1-P; Leiden University Medical Center
Tumor recognition by nonclassical HLA molecules
24.10.2007
Dhavalkumar Patel, M.D., Ph.D.
Novartis Institutes for BioMedical Research; Basel, Switzerland
Targeting Protein kinase C for immune mediated diseases
15.11.2007
Prof. Sir Peter Lachmann FRS FmedSci
Department of Veterinary Medicine; Cambridge, UK
The complement C3b-feedback cycle revisited
11.12.2007
Dr. Wolfgang Schamel
MPI für Immunbiologie; Freiburg
Mechanismus der TCR-CD3 Aktivierung
08.01.2008
Dr. Bruno Frey
Roche Diagnostics GmbH; Penzberg
Next Generation Sequencer: High Throughput Re-Sequencing of
Whole Genomes, Genes and Gene locis
01.04.2008
Prof. Dr. Dr. h.c. H. Wagner
Institut für Mikrobiologie, Immunologie und Hygiene; TU München
Immunbiologie des Toll-like Rezeptors 9
08.04.2008
Anne Astier, PhD
Institute of Immunology and Infection Research; University of
Edinburgh, UK
Role of CD46 in T cell activation and its implication in multiple
sclerosis
22.04.2008
Prof. Dr. S. C. Bischoff
Institut für Ernährungsmedizin; Universität Hohenheim; Stuttgart
Mastzellen und gastrointestinale Erkrankungen
29.04.2008
Prof. Oreste Acuto, Ph.D.
Sir William Dunn School of Pathology; University of Oxford, UK
TCR signalosome: positive and negative signalling does the job
257

Forschungsbericht 2007 – 2008
20.05.2008
Matthias Kieslinger, Ph. D.
Helmholtz Zentrum München; Inst. of Clinical Molecular Biology
and Tumor Genetics
Bringing together haematopoiesis and bone formation: The role of
EBF proteins
21.05.2008
Prof. Dr. Michael T. Lotze
Department of Surgery; University of Pittsburgh Cancer Institute
DAMPs and Redox regulate Immunity
01.07.2008
Dr. rer. nat. Nayoung Kim
KIST-Europe Forschungsges. mbH.; Universität Saarbrücken
Differential role of PI3K p110gamma and p110delta in NK cell development
and function and improving NK cytotoxicity for cancer
therapy
22.07.2008
Prof. Dr. Constanze Bonifer
Leeds Institute of Molecular Medicine; University of Leeds
Mechanistic insights into cell fate decisions in early hematopoietic
development
23.07.2008
Dr. Hans-Gerhard Burgert
Department of Biological Sciences; University of Warwick
Anti-Immunology: Suppression of antigen presentation, NK cell
activation and apoptosis by adenovirus E3 proteins
29.07.2008
William G. Kerr, Ph.D.
H. Lee Moffitt Comprehensive Cancer Center and Research Institute;
Tampa, FL
A Role for SHIP in Stem Cell Biology and Transplantation
07.10.2008
Gerald T. Nepom, MD, PhD
Benaroya Research Institute at Virginia Mason; Seattle, USA
Profiling the Autoreactive CD4+ T cell
02.12.2008
PD Dr. Sebastian Mueller
Krankenhaus Salem, Heidelberg
Oxidative stress, hypoxia and HIF1 : Is HIF1 really the cellular
oxygen sensor?
02.12.2008
PD Dr. Stephan Immenschuh
Krankenhaus Salem, Heidelberg
Signaling to heme oxygenase-1 as a therapeutic target
09.12.2008
Paul V. Lehmann, M.D., Ph.D.
Case Western Reserve University; Shaker Heights, OH U.S.A.
ELISPOT assays for delineation of T cell effector classes and activation
states
16.12.2008
Prof. Dr. Dr. h.c. Peter Scriba
Vorsitzender des Wissenschaftlichen Beirates der Bundesärztekammer
Qualitätswettbewerb in der Medizin
Mannheim
17.01.07
Dr. Stern-Straeter
Universitätsklinikum Mannheim HNO-Klinik
Skelettmuskel Tissue Engineering
258
22.01.07
Dr. F. Stichling
Theoretische Grundlagen der Laboruntersuchungen und Praktische
Durchführung der Befundkontrolle und Dokumentation.
Transfusionsmedizinisches Praktikum für laborbetreuende Ärzte
Diakonissen-Stiftungskrankenhaus Speyer
31.01.07
Dr. F. Stichling
Anwendung von Blut und Blutprodukten – das Neueste vom Gesetzgeber.
Transfusionsmedizinische Fortbildung für Ärzte und
Pflegedienstmitarbeiter
Diakonissen-Stiftungskrankenhaus Speyer
Januar 2007
Dr. K. Janetzko
Anforderung von Blutpräparaten und Durchführung von Bluttransfusionen
– Kontrolle, Einleitung, Überwachung, Dokumentation
Klinik für Dermatologie Medizinische Fakultät Mannheim, Universitätsklinik
Heidelberg
Januar 2007
Dr. K. Janetzko
Anforderung von Blutpräparaten und Durchführung von Bluttransfusionen
– Kontrolle, Einleitung, Überwachung, Dokumentation
Klinik für Anästhesiologie, Medizinische Fakultät Mannheim, Universitätsklinik
Heidelberg
14.02.07
Dr. F. Stichling
Sichere Anwendung und korrekte Dokumentation von Blutprodukten.
Transfusionsmedizinische Fortbildung für Ärzte und Pflegedienstmitarbeiter,
Diakonissen-Stiftungskrankenhaus Speyer
21.02.07
Dr. Rüster
DRK Frankfurt
Mausmodelle in der Leukämie
21.02.07
Dr. F. Stichling
Theoretische Grundlagen der Laboruntersuchungen und Praktische
Durchführung der Befundkontrolle und Dokumentation
Transfusionsmedizinisches Praktikum für laborbetreuende Ärzte,
GRN Kreiskrankenhaus Eberbach
22.-24.02.07
Dr. XD.Nguye
Asservation von Nabelschnurblut-Lösung für zukünftige Probleme?
51.Jahreskongress der Saarländisch-Pfälzischen Internistengesellschaft
e.V., Neustadt.
28.02.07
Herr Dirk Hofmeister (Praktikant der AG Bieback)
Etablierung der Real-Time-PCR für die adipogene und osteogene
Differenzierung bei mesenchymalen Stammzellen
28.02.07
Dr. F. Stichling
Erkennung, Behandlung, Meldung und Dokumentation der unerwünschten
Transfusionsnebenwirkung
Transfusionsmedizinische Fortbildung für Ärzte und Pflegedienstmitarbeiter,
Diakonissen-Stiftungskrankenhaus Speyer
Februar 2007
Dr. K. Janetzko
Anforderung von Blutpräparaten und Durchführung von Bluttransfusionen
– Kontrolle, Einleitung, Überwachung, Dokumentation
Klinik für Urologie, Medizinische Fakultät Mannheim, Universitätsklinik
Heidelberg

07.03.07
Dr. XD.Nguyen
Nabelschnurblutentnahme zur Stammzellgewinnung – eine Investition
in die Zukunft? Mosbacher Gynäkologie/und Hebammen-
Treffen/Fortbildung, Mosbach
07.03.07
Dr. F. Stichling
Erkennung, Behandlung, Meldung und Dokumentation der unerwünschten
Transfusionsnebenwirkung
Zertifizierte Transfusionsmedizinische Fortbildung für Ärzte und
Pflegedienstmitarbeiter, GRN Kreiskrankenhaus Eberbach
07.03.07
PD Dr. rer. nat. Ralf Lösel
Universitätsklinikum Mannheim, Klinische Pharmakologie
Steroide – Neue Mechanismen für „alte“ Hormone
14.03.07
Herr Günter Gerlich
Einblicke in die hämatologische und bakteriologische Qualitätskontrolle
mit statistischer Auswertung der erhobenen Daten
19.03.07
Dr. F. Stichling
Qualitätssicherung in der Hämotherapie, Korrekte Indikationsstellung
und Anwendung von Blutprodukten
Transfusionsmedizinische Fortbildung für Ärzte Pflegedienstmitarbeiter,
St. Marien Krankenhaus Lampertheim
21.03.07
Dr. M. Kerowgan
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen, Mannheim
Prüfmittelüberwachung und Qualifizierung
23.-24.03.07
Dr. XD.Nguyen
Immun-Thrombozytopenien, Leukozytenserologie und HLA- und
Granulozytendiagnostik. Klinische Transfusionsmedizin
Fortbildungsveranstaltung zur Qualifikation als Transfusionsverantwortlicher
und Transfusionsbeaftragter in Mannheim
24.03.07
Dr. F. Stichling
Unerwünschte Wirkung nach Transfusion von Blutprodukten und
Meldepflichten
Zertifizierte Fortbildung für Transfusionsverantwortliche und –beauftragte
Mannheim
28.03.07
Dr. M. Schubert
Medizinische Universitätsklinik Heidelberg Abt. Hämatologie
Onkologie und Reumathologie
Homing Engraftment und Differenzierung schnell und langsam teilendert
hämatopoietischer Stammzellen
28.03.07
Dr. F. Stichling
Gesetzliche Grundlagen im Bereich Hämotherapie- Korrekte Indikationsstellung,
Anwendung und Dokumentation von Blutpräparaten
Klinische Fortbildung für Ärzte und Pflegedienstmitarbeiter, St.
Josef Krankenhaus Viernheim
März 2007
Dr. K. Janetzko
Anforderung von Blutpräparaten und Durchführung von Bluttransfusionen
– Kontrolle, Einleitung, Überwachung, Dokumentation für
Pflegepersonal
Klinik für HNO, Medizinische Fakultät Mannheim, Universitätsklinik
Heidelberg
Fortbildungsveranstaltungen 2007 – 2008
17.04.07
Dr. F. Stichling
Aktuelle Daten der SHOT-Studie (Serious hazards of transfusion,
GB) zum Auftreten unerwünschter Transfusionsreaktionen
Arbeitskreis Hämotherapie, Theresienkrankenhaus Mannheim
25.04.07
Frau Anh-Thu Ha
Analyse differentieller Gen- und Proteinexpression in mesenchymalen
Stammzellen expandiert unter GMP-konformen Kulturbedingungen
29. 04.08
Dr. K. Bieback
Mesenchymale Stammzellen
Fortbildung des Instituts für Klinische Hämostaseologie und
Transfusionsmedizin, Universitätsklinikum Homburg/Saar
April 2007
Dr. K. Janetzko
Anforderung von Blutpräparaten und Durchführung von Bluttransfusionen
– Kontrolle, Einleitung, Überwachung, Dokumentation
V. Klinik, Medizinische Fakultät Mannheim, Universitätsklinik Heidelberg
02.05.07
Dr. Sven Christian
Deutsches Krebsforschungszentrum Abt. Vaskuläre Onkologie
und Metastasierung Heidelberg
Die Rolle des Tumorstromamarkers Endosialin in Tumorprogrssion
und Metastasierung
09.05.07
Frau Hecker
Prinzipien der Durchflusszytometrie und Kompensation
16.05.07
Dr. P. Findeisen
Institut für klinische Chemie, Universitätsklinikum Mannheim
Massenspektrometrie-basiertes Protease Profiling in der Diagnostik
23.05.07
Frau Iris Klaus
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen, Mannheim
Sequenzanalyse von Genen des Arachidonsäure-Stoffwechsels
27.05.08
Prof. Dr. rer. nat. P. Bugert
Untersuchungen zu den molekularen Grundlagen des Aspirin-like
Defekts
Forbildungsseminar des Instituts für Klinische Hämostaseologie
und Transfusionsmedizin, Universitätsklinikum Homburg/Saar
30.05.07
Dr. Jens Kroll
Deutsches Krebsforschungszentrum Vascular Signalling Group,
Gebäude 28 / Level 0 Mannheim
Functional Analysis of G proteins and ist mediators in endothelial
migration
Mai 2007
Dr. K. Janetzko
Anforderung von Blutpräparaten und Durchführung von Bluttransfusionen
– Kontrolle, Einleitung, Überwachung, Dokumentation
Klinik für Allgemeinchirurgie
Medizinische Fakultät Mannheim, Universitätsklinik Heidelberg
259

Forschungsbericht 2007 – 2008
Mai 2007
Dr. K. Janetzko
Anforderung von Blutpräparaten und Durchführung von Bluttransfusionen
– Kontrolle, Einleitung, Überwachung, Dokumentation
I Klinik, Medizinische Fakultät Mannheim, Universitätsklinik Heidelberg
Mai 2007
Dr. K. Janetzko
Anforderung von Blutpräparaten und Durchführung von Bluttransfusionen
– Kontrolle, Einleitung, Überwachung, Dokumentation
Klinik für Gynäkologie, Medizinische Fakultät Mannheim, Universitätsklinik
Heidelberg
06.06.07
Herr Mathias Soller
Klinikum und Fachbereich Medizin, Johann Wolfgang Goethe-Universität,
Institut für Biochemie I, Frankfurt
Die Rolle von PPARy bei der Sepsis-induzierten T-Zelldepletion
11.06.08
Prof. Dr. rer. nat. P. Bugert
Die molekulare Charakterisierung von RhCE Phänotypvarianten
Fortbildungsseminar des Blutspendedienstes Frankfurt
13.06.07
Dr. Hermann-Josef Thierse
Klinik für Dermatologie, Venerologie und Allergologie, Universitätsklinikum
Mannheim
Qualitative und quantitative Proteomics in humanen Antigen-präsentierenden
Zellen und primären Keratinozyten in der Allergieforschung
20.06.07
Frau Susanne Kern
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen, Mannheim
Mesenchymale Stromale Zellen nach Langzeitkultur
27.06.07
Frau Kasprzik-Diehl
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen, Mannheim
Informationen zur FSME-Impfung
29.06.07
Dr. F. Stichling
Differentialdiagnose der positiven Eigenkontrolle: -Autoimmunhämolyse
oder verzögerte Transfusionsreaktion? Umgang mit dem
positiven direkten Coombstest beim Neugeborenen: Beurteilung,
Befundmitteilung, Abklärungsdiagnostik. Transfusionsmedizinische
Fortbildung für medizinisch-technisches Personal
Diakoniekrankenhaus Mannheim
04.07.07
Dr. Meike Leible
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen, Mannheim
Adipogene Differenzierung bei Mesenchymalen Stromalen Zellen
August 2007
Dr. K. Janetzko
Anforderung von Blutpräparaten und Durchführung von Bluttransfusionen
– Kontrolle, Einleitung, Überwachung, Dokumentation
III Klinik, Medizinische Fakultät Mannheim, Universitätsklinik Heidelberg
September 2007
Dr. K. Janetzko
Anforderung von Blutpräparaten und Durchführung von Bluttransfusionen
– Kontrolle, Einleitung, Überwachung, Dokumentation
Klinik für HNO, Medizinische Fakultät Mannheim, Universitätsklinik
Heidelberg
260
10.10.07
PD Dr. Erwin Strasser
Transfusionsmedizinische und Hämostseologische Abteilung, Universitätsklinikum
Erlangen
Verfahrensoptimierung der Monozytapherese für die GMP-gerechte
Aufbereitung und Anzüchtung dendritischer Zellen.
17.10.07
Prof. Dr. rer. nat. Peter Bugert
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen, Mannheim
Das Plättchen-Transkriptom bei Patienten mit dem Aspirin-like
Defekt.
22.10.07
Dr. F. Stichling
Aktuelle Änderungen der Hämotherapierichtlinien, Korrekte Indikationsstellung,
Anwendung und Dokumentation von Blutprodukten
Transfusionsmedizinische Fortbildung für Ärzte und Pflegedienstmitarbeiter,
St. Marien Krankenhaus Lampertheim
23.10.07
Dr. F. Stichling
Informationen zur aktuellen Novelle des Transfusionsgesetzes und
zu den Ergänzungen der Hämotherapierichtlinien
Arbeitskreis Hämotherapie, Theresienkrankenhaus Mannheim
24.10.07
Dr. Matthias Rastetter
SIRS-Lab GmbH, Jena
Sensitivitätsgewinn in der molekularen Diagnostik durch die spezifische
Probenvorbereitung
14.11.07
Susanne Elvers-Hornung
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen, Mannheim
Funktionelle Analyse endothelialer Vorläuferzellen aus Nabelschnurblut
20.11.07
Dr. F. Stichling
Anwendung von Blut und Blutprodukten in der Klinik nach den aktuellen
gesetzlichen Vorgaben, Erkennung, Behandlung, Meldung
und Dokumentation der unerwünschten Transfusionsreaktion
Transfusionsmedizinische Fortbildung Pflegedienstmitarbeiter,
Ze:ro Nieren- und Dialysepraxis und Gemeinschaftspraxen,
Schwetzingen
21.11.07
Dr. Kemal Akat
Uniklinikum Mannheim, I. Medizinische Klinik
Junctional Proteins and Sudden Cardiac Death
22.11.07
Dr. F. Stichling
Anwendung von Blut und Blutprodukten in der Klinik nach den aktuellen
gesetzlichen Vorgaben, Erkennung, Behandlung, Meldung
und Dokumentation der unerwünschten Transfusionsreaktion
Transfusionsmedizinische Fortbildung Pflegedienstmitarbeiter,
Ze:ro Nieren- und Dialysepraxis und Gemeinschaftspraxen,
Schwetzingen
26.11.07
PD Dr. Philipp Ströbel
Uniklinikum Mannheim, Pathologisches Institut
Histologie von Blut und Knochenmark

27.11.07
Dr. K. Janetzko
Positiver Direkter Coombstest, was steckt dahinter, was ist zu
tun?
Externe Fortbildungsveranstaltung, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen, Institut für Transfusionsmedizin
und Immunologie.
12.12.07
Dr. F. Stichling
Blutgruppen- und Rhesuskompatibilität im Regel- und Notfall, Der
Morbus hämolytikus neonatorum- Ursachen und immunhämatologische
Befunde
Transfusionsmedizinische Fortbildung für medizinisch-technisches
Personal, Diakoniekrankenhaus Mannheim
19.12.07
Dr. Richard Schäfer
Uniklinikum Tübingen, Institut für klinische und experimentelle
Transfusionsmedizin
Markierung, Isolation und Differenzierung mesenchymaler Stammzellen
23.01.08
Dipl.-Ing. (FH) Angelika Schedel
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen, Mannheim
Acetylcholinrezeptoren bei Plättchen
23.01.08
Dr. F. Stichling
Sichere Anwendung und korrekte Dokumentation von Blutprodukten
Transfusionsmedizinische Fortbildung für Ärzte und Pflegedienstmitarbeiter,
Diakonissen-Stiftungskrankenhaus Speyer
25.01.08
Stötzer, F.
Blut- und Blutstammzellspende
Berufsschulzentrum Böblingen
Januar 2008
Prof. Dr. H.Klüter
Richtlinien und Leitlinien zur Hämotherapie der Bundesärztekammer
5. Symposion zur Hämotherapie Wildbad Kreuth
20.02.08
Dr. F. Stichling
Erkennung, Behandlung, Meldung und Dokumentation der unerwünschten
Transfusionsnebenwirkung
Transfusionsmedizinische Fortbildung für Ärzte und Pflegedienstmitarbeiter,
Diakonissen-Stiftungskrankenhaus Speyer
27.02.08
Dr. Xuan-Duc Nguyen
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen, Mannheim
Neues Verfahren zum Screening von granulozytären Antikörpern
27.02.08
Dr. F. Stichling
Gesetzliche Grundlagen im Bereich Hämotherapie- Korrekte Indikationsstellung,
Anwendung und Dokumentation von Blutpräparaten
Klinische Fortbildung für Ärzte und Pflegedienstmitarbeiter, St.
Josef Krankenhaus Viernheim
05.03.08
Dr. F. Stichling
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen, Mannheim
Stand von Forschung und Technik
Fortbildungsveranstaltungen 2007 – 2008
19.03.08
Prof. Dr. Hermann Eichler
Institut für Klinische Hämostaseologie und Transfusionsmedizin,
Universitätsklinikum des Saarlandes, Gebäude 75
Genetik, Klinik und Behandlung des von Willebrand-Syndroms
12.03.08
Dr. F. Stichling
Gesetzliche Grundlagen im Bereich Hämotherapie- Korrekte Indikationsstellung,
Anwendung und Dokumentation von Blutpräparaten
Klinische Fortbildung für Ärzte und Pflegedienstmitarbeiter,
St. Josef Krankenhaus Viernheim
02.04.08
Frau Maria Fischer
Koordination KM-Spender-Suche
Institut für Klinische Transfusionsmedizin und Immungenetik Ulm
Suche nach einem nichtverwandten Knochenmarkspender
04.-05.04.08
Dr. XD.Nguyen
Immun-Thrombozytopenien, Leukozytenserologie und HLA- und
Granulozytendiagnostik. Klinische Transfusionsmedizin. Fortbildungsveranstaltung
zur Qualifikation als Transfusionsverantwortlicher
und Transfusionsbeaftragter in Mannheim
05.04.08
Dr. F. Stichling
Unerwünschte Wirkung nach Transfusion von Blutprodukten und
Meldepflichten
Zertifizierte Fortbildung für Transfusionsverantwortliche und –beauftragte,
Mannheim
09.04.08
PD Dr. Patrick Schloss
Biochemisches Labor, Zentralinstitut für Seelische Gesundheit
Mannheim
Antidepressiva-induzierte Verminderung des Zelloberflächenexpression
des Serotonintransportes
14.04.08
Dr. F. Stichling
Unerwünschte Wirkung nach Transfusion von Blutprodukten und
Meldepflichten
Transfusionsmedizinische Fortbildung für Ärzte und Pflegedienstmitarbeiter,
St. Marien Krankenhaus Lampertheim
14.04.08
Stötzer, F.
Blut- und Blutstammzellspende
Christiane-Herzog-Schule, Heilbronn
15.04.08
Dr. F. Stichling
Aufklärungspflichten bei der Anwendung von Plasmaderivaten
Arbeitskreis Hämotherapie, Theresienkrankenhaus Mannheim
16.04.08
Dr. Torsten Schulze
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen gGmbH, Mannheim
Die Rolle des Fas-Ligand-Systems in der murinen Schwangerschaft
23.04.08
Dr. Karin Janetzko
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen, Mannheim
Pathogeninaktivierung
261

Forschungsbericht 2007 – 2008
30.04.08
PD Dr. Ralf Knöfler
Klinik und Poliklinik für Kinder- und Jugendmedizin Pädiatrische
Hämatologie und Onkologie, Universitätsklinikum Carl-Gustav-
Carus an der TU Dresden
Die THROMKID-Studie: Projekt zur Diagnostik, Symptomen und
Therapie von Kindern und Jugendlichen mit hereditären Thrombozytopathien
in Deutschland, Österreich und der Schweiz
April 2008
Prof. Dr. H.Klüter
Therapie mit Thrombozytenkonzentraten
Fortbildung ‚Klinische Transfusionsmedizin’, Mannheim
April 2008
Prof. Dr. H.Klüter
Stand und Perspektiven der Pathogeninaktivierung von Blutkomponenten.
55. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Anästhesiologie
und Intensivmedizin Nürnberg
21.05.08
Dr. Dorothee Viemann
Klinik und Poliklinik für Kinder- und Jugendmedizin, Universitätsklinikum
Münster
Immundefekte in der Pädiatrie: Update zur Diagnostik und Therapie
27.05.08
Dr. F. Stichling
Theoretische Grundlagen der Laboruntersuchungen und Praktische
Durchführung der Befundkontrolle und Dokumentation
Transfusionsmedizinisches Praktikum für laborbetreuende Ärzte,
Diakonissen-Stiftungskrankenhaus Speyer
27.05.08
Dr. F. Stichling
Nur das Beste für unsere Patienten-Qualitätsmanagement in der
Transfusionsmedizin
Klinische Fortbildung für Chirurgen, Diakoniekrankenhaus Mannheim
28.05.08
PD Dr. Ralf Karger
M.Sc.: Institut für Transfusionsmedizin und Hämostaseologie, Universitätsklinikum
Gießen und Marburg GmbH, Standort Marburg
Zur Kreislaufhomöostase bei der Spender-Plasmapherese
03.06.08
Dr. F. Stichling
Tipps für die sichere Anwendung von Blutprodukten: von der Aufklärung
bis zur Erfolgskontrolle
Klinische Fortbildung für Chirurgen, Diakoniekrankenhaus Mannheim
04.06.08
Frau Anh-Thu Ha
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen gGmbH, Mannheim
Analyse differentieller Gen- und Proteinexpression in mesenchymalen
Stammzellen
10.06.08
Dr. F. Stichling
Was tun, wenn es doch passiert, die unerwünschte Transfusionsreaktion?-
Erkennung, Behandlung, Meldung und Dokumentation
der unerwünschten Transfusionsnebenwirkung. Klinische Fortbildung
für Chirurgen, Diakoniekrankenhaus Mannheim
262
11.06.08
Frau Dr. Claudia Lange
University Medical Center Hamburg-Eppendorf, Center of Oncology,
Clinic for Stem Cell Transplantation
Mesenchymale Stromazellen in der regenerativen Medizin
18.06.08
Prof. Dr. rer. nat. Peter Bugert
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen, Mannheim
Einführung in die Gendiagnostik (Teil I)
02.07.08
Prof. Dr. Ralf Kinscherf
Centre for Biomedicine and Medical Technology Mannheim
(CBTM), Section: Macroscopic Anatomy, University of Heidelberg
Makrophagen und Arteriosklerose
09.07.08
Frau Minna Haapalahti
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen, Mannheim
Etablierung der RealTime-PCR zur Detektion von Mykoplasmen
30.07.08
Univ.-Prof. Dr. Harald Klüter
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen, Mannheim
Steigerung des Spendeaufkommens 2010Plus – zukünftige Planungen
08.07.08
Dr. F. Stichling
Nur das Beste für unsere Patienten-Qualitätsmanagement in der
Transfusionsmedizin
Klinische Fortbildung für Internisten, Diakoniekrankenhaus
Mannheim
22.07.08
Dr. F. Stichling
Tipps für die sichere Anwendung von Blutprodukten: von der Aufklärung
bis zur Erfolgskontrolle Klinische Fortbildung für Internisten,
Diakoniekrankenhaus Mannheim
26.08.08
Dr. F. Stichling
Was tun, wenn es doch passiert, die unerwünschte Transfusionsreaktion?-
Erkennung, Behandlung, Meldung und Dokumentation
der unerwünschten Transfusionsnebenwirkung. Klinische Fortbildung
für Internisten, Diakoniekrankenhaus Mannheim
13.08.08
Dr. XD.Nguyen
SASPA in der klinischen Anwendung
Fortbildung IKC, Klinikum Mannheim
09.09.2008
Dr. K. Bieback
Cord blood derived non-hematopoietic stem and progenitor cells
Fortbildungsseminar Roche Basel
11.09.08
Dr. F. Stichling
Aktuelle Änderungen der Hämotherapierichtlinien, Korrekte Indikationsstellung,
Anwendung und Dokumentation von Blutprodukten
Transfusionsmedizinische Fortbildung für Ärzte und Pflegedienstmitarbeiter,
KH Buchen

17.09.08
Herr F. Stötzer
Knochenmarkspende
Informationsabend Tagung DRK-Kreisverband, Ludwigsburg
23.09.08
Herr F. Stötzer
Blut- und Blutstammzellspende
Doppelvortrag Berufsschulzentrum Carl-Engler-Schule, Karlsruhe
7.10.08
Schedel A.
The dopamine agonism on ADP-stimulated platelets is mediated
through D2-like but not D1-like dopamine receptors
Forbildungsseminar des Instituts für Klinische Hämostaseologie
und Transfusionsmedizin, Universitätsklinikum Homburg/Saar
08.10.08
Prof. Dr. Jonathan Sleeman
Mikrovaskuläre Biologie und Pathobiologie (Franz-Volhard-Stiftungsprofessor),
Institut für Toxikologie und Genetik Mannheim
Die Beziehung zwischen Krebs und lymphatischen Gefäßen; Konsequenzen
für die Tumormetastasierung
12.11.08
Herr Dr. Henschler
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen, Frankfurt
Migrationsverhalten therapierelevanter Zellen
12.11.08
Dr. F. Stichling
Aktuelle Änderungen der Hämotherapierichtlinien, Korrekte Indikationsstellung,
Anwendung und Dokumentation von Blutprodukten
Transfusionsmedizinische Fortbildung für Ärzte und Pflegedienstmitarbeiter,
KKH Mosbach
14.11.08
Dr. XD.Nguyen
Immun-Thrombozytopenien, Leukozytenserologie und HLA- und
Granulozytendiagnostik. Klinische Transfusionsmedizin
Fortbildungsveranstaltung zur Qualifikation als Transfusionsverantwortlicher
und Transfusionsbeaftragter, Mannheim.
19.11.08
Herr Dr. Voigt
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen, Mannheim
Nadelstichverletzung
21.11.08
Dr. F. Stichling
Unerwünschte Wirkung nach Transfusion von Blutprodukten und
Meldepflichten
Zertifizierte Fortbildung für Transfusionsverantwortliche und -beauftragte,
Mannheim
24.11.08
Dr. F. Stichling
Bedeutung rhesusidentischer und -kompatibler Transfusionen,
Vorgehen bei Rhesus-(D)- inkompatibler Transfusion
Transfusionsmedizinische Fortbildung für medizinisch-technisches
Personal, Diakoniekrankenhaus Mannheim
25.11.08
Dr. K. Bieback
Mesenchymal Stromal Cells: Biology and Clinical Potential
Fortbildungsseminar FZ Karlsruhe
Fortbildungsveranstaltungen 2007 – 2008
26.11.08
Frau Dr. Höchsmann
IKTZ Ulm
Paroxsysmale nächtliche Hämoglobinurie (PNH): Pathophysiologie,
Diagnostik und klinischer Verlauf
November 2008
Prof. Dr. H.Klüter
Therapie mit Thrombozytenkonzentraten
Fortbildung ‚Klinische Transfusionsmedizin’, Mannheim
03.12.08
Dr. XD.Nguyen
SASPA in der klinischen Anwendung
Fortbildung DRK-Frankfurt.
03.12.08
Frau Frederike Schulte
Institut für Transfusionsmedizin und Immunologie, DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen, Mannheim
Charakterisierung des II-6-Produktes bei Hämodialysepatienten in
Abhängigkeit von II-6-Genotyp
10.12.08
Herr Dr. Zinn
Diakonie-Stiftungskrankenhaus Speyer
Indikation und praktische Durchführung der Austauschtransfusion
bei Neugeborenen
Tübingen
21.03.07
Dr. R. Schäfer
Institut für Klinische und Experimentelle Transfusionsmedizin
(IKET) Tübingen
Isolation/labeling Techniques of Mesenchymal Stem Cells
02.11.07
Dr. R. Schäfer
Institut für Klinische und Experimentelle Transfusionsmedizin
(IKET) Tübingen
Erythropoietin: Rolle bei der
Differenzierung von Mesenchymalen Stammzellen sowie bei Hypoxie
02.11.07
Dr. R. Schäfer
Institut für Klinische und Experimentelle Transfusionsmedizin
(IKET) Tübingen
Markierung von Mesenchymalen Stammzellen mit Eisen-Nanopartikeln
17.01.08
Dr. R. Schäfer
Institut für Klinische und Experimentelle Transfusionsmedizin
(IKET) Tübingen
Gabe von Blutprodukten auf der Intensivstation aus der Sicht des
Transfusionsmediziners
29.11.08
Dr. R. Schäfer
Institut für Klinische und Experimentelle Transfusionsmedizin
(IKET) Tübingen
Expression von Blutgruppenantigenen auf Stammzellen
Ulm
10.01.2007
Dr. K. Puellmann
Universität Regensburg
Work in Progress: A variable immunoreceptor in a subpopulation
of human neutrophils
263

Forschungsbericht 2007 – 2008
17.01.2007
PD Dr. Michael Schmidt
Institut Frankfurt, DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg -
Hessen
Work in Progress: Sicherheit von Blutprodukten - Neue Anforderungen
an die Virusdiagnostik
24.01.2007
Prof. Dr. Mark Yazar
Department of Pathology, University of Pittsburg, Pittsburgh, PA,
USA
Work in Progress: The AB0 blood group system: Small changes,
big differences
26.01.2007
Prof. Dr. Hubert Schrezenmeier
IKT Ulm und Institut für Transfusionsmedizin des Universitätsklinikums
Ulm
Work in Progress: Aktuelle Aspekte in Diagnostik und Therapie
der PNH: Molekular-zielgerich tete Therapie mit Eculizumab
29.01.2007
Claudia Flach
IKT Ulm
Mitarbeiterfortbildung Transplantationsimmunologie: Einführung in
Swisslab
31.01.2007
Dr. Anita Schmitt
Klinik für Innere Medizin III, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: Nachweis spezieller T-Zellen mittels Tetramer-
Technologie
14.02.2007
Dr. Holzmann
IZKF Chip-Facility Ulm
Work in Progress: DNA-Chip-Technologie: Eine Übersicht über die
aktuellen Möglichkeiten und Limitierungen
22.02.2007
Mitarbeiter/innen der Abteilung Blutgruppenserologie und Immunhämatologie
IKT Ulm
Work in Progress: Spezielle Methoden in der D-Bestimmung: Indikation
und Aussagekraft
26.02.2007
Dr. Ingeborg von Zabern
IKT Ulm
Autologe Hämotherapie. Transfusionsmedizin: Rechtliche Grundlagen.
Transfusionsreaktionen
Fortbildung an der Krankenpflegeschule des Bundeswehrkrankenhauses
Ulm
07.03.2007
Dr. Klaus Koerner
IKT Ulm
Work in Progress: Change-Control-Qualifizierung/Validierung
12.03.2007
PD Dr. Joannis Mytilineos
IKT Ulm
Das HLA-System: Genetik, Funktion und Typisierungsverfahren
Interne Fortbidlungsveranstaltung des ZKRD, Ulm
14.03.2007
Dr. Ulf Grawunder
4-Antibody AG
Work in Progress: 4-Antibody: A novel way to develop better therapeutic
antibodies 4 you
264
21.03.2007
Prof. Dr. J. Torzewski
Klinik für Innere Medizin I, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: Stammzelltherapie des akuten Myokardinfarkts
21.03.2007
Dr. Ingeborg von Zabern
IKT Ulm
Blutgruppenserologischer Fortbildungskurs: Methoden der Antikörperidentifizierung,
serologi sche Nachweismethoden, Laborprobleme
bei Vorliegen von Antikörpern
22.03.2007
Dr. Ingeborg von Zabern
IKT Ulm
Blutgruppenserologischer Fortbildungskurs: Organisation eines
Blutdepots, Qualitätsmanage ment, Qualitätssicherungshandbuch,
Dokumentation, Selbstinspektion; Vorbereitung und Durchführung
einer Transfusion einschließlich Überwachung und
Transfusionsreaktion
28.03.2007
Dr. Ingeborg von Zabern
IKT Ulm
Work in Progress: DGTI-2006-Nachlese: Immunhämatologie
04.04.2007
Dr. Kaimo Hirv
IKT Ulm
Work in Progress: Die Dauer und Erfolgsrate der nicht-verwandten
Blutstammzellspender-Suche
16.04.2007
PD Dr. Joannis Mytilineos
IKT Ulm
HLA-Diagnostik
Ständige Fortbildung der TEAM-Vobereitung, Ulm
24.04.2007
Dr. B. Wagner
Universitätsklinikum Großhadern, München
Work in Progress: Positiver direkter Coombstest: Klinische Bedeutung
und Abklärung.
25.04.2007
Dr. Ramin Lotfi
Institut für Transfusionsmedizin, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: Rolle der eosinophilen Granulozyten in soliden
Tumoren, Teil I.
02.05.2007
Dr. Ramin Lotfi
Institut für Transfusionsmedizin, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: Rolle der eosinophilen Granulozyten in soliden
Tumoren, Teil II.
09.05.2007
Dr. Lars Bullinger
Klinik für Innere Medizin III, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: Genexpressionsprofilanalyse bei der AML.
16.05.2007
Prof. Dr. R. Brenner
Rehabilitationskrankenhaus Ulm
Work in Progress: Zell-Matrix-Interaktion und Migration humaner
mesenchymaler Stammzellen.
23.05.2007
Andrea Vigh
IKT Ulm
Work in Progress: EFI-Nachlese

06.06.2007
PD Dr. Josef Högel
Institut für Humangenetik, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: Planung des Stichprobenumsatzes bei zellbiologischen
Experimenten (II).
13.06.2007
Gabriele Ruopp
IKT Ulm
Automatisierung der HLA-Klasse I Sequenzierung in Ulm
Fortbildungsveranstaltung der Stefan-Morsch-Stiftung, St. Wendel
14.06.2007
Prof. Dr. Noritaka Adachi
Kihara Institute for Biological Research, Yokohama City University,
Japan
Work in Progress: Genetic studies on the repair of DNA-strand
breaks using human gene knockout
21.06.2007
PD Dr. Franz F. Wagner
DRK-Blutspendedienst, NSTOB Zentralinstitut Springe
Work in Progress: TRALI: Grundlagen und aktuelle Entwicklung
27.06.2007
Dr. Britta Höchsmann
IKT Ulm
Work in Progress: Exjade bei myelodysplastischen Syndromen
04.07.2007
Prof. Dr. Hubert Schrezenmeier
IKT Ulm und Institut für Transfusionsmedizin, Universitätsklinikum
Ulm
Work in Progress: PNH-Ergebnisse der Eculizumab-Studien
10.07.2007
Karin Pabst
IKT Ulm
HLA-AK-Vergleich ELISA Klasse I + II (BIOTEST) vs. LCT X-Match
Work in Progress
11.07.2007
Dr. Klaus Koerner und Mitarbeiter
IKT Ulm und Institut Ulm des DRK-BSD Baden-Württemberg -
Hessen
Work in Progress: QM-Schulung
18.07.2007
Dr. Ulrich Pannicke
Institut für Transfusionsmedizin, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: ARTEMIS-Update
24.07.2007
Gabriele Ruopp
IKT Ulm
Work in Progress: Grundlagen der Sequenzierung
10.09.2007
Dr. C. Weinstock
DRK-Blutspendedienst West, Institut Bad Kreuznach
Work in Progress: Stammzelltransplantationen: Was muss man
bei Blutgruppen beachten?
12.09.2007
Prof. Dr. H. Heimpel und Dr. Klaus Schwarz
Klinik für Innere Medizin III, Universitätsklinikum Ulm, und IKT Ulm
Work in Progress: Kongenitale dyserythropoetische Anämien
(CDA)
Fortbildungsveranstaltungen 2007 – 2008
01.10.2007
Dr. Alexander Maier
The Walter and Eliza Hall Institute of Medical Research, Bundoora,
Victoria, Australien
Work in Progress: Genes influencing host erythrocyte membrane
composition during malaria infection
09.10.2007
Dr. Christof Geisen
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen,
Work in Progress: Lateral-flow-assays (Md-Multicard) zur Blutgruppenbestimmung
17.10.2007
May-Jean King
National Blood Service Bristol, NHS Blood and Transplant, Bristol,
United Kingdom
Work in Progress: Spherocytosis and microspherocytosis represent
different levels of red cell vesiculation
24.10.2007
Dr. Andreas Beilhack
Medizinische Klinik und Poliklinik II, Universität Würzburg
Work in Progress: Inflammatory attraction dictates the tissue tropism
in acute graft-versus-host disease
07.11.2007
Dr. Catharina Schütz
Klinik für Kinder- und Jugendmedizin, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: Hypomorphe RAG-Mutationen mit Granulomen
14.11.2007
Dr. Manfred Hönig
Klinik für Kinder- und Jugendmedizin, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: Septische Granulomatose und McLeod-Phäntyp:
Stammzelltransplantation trotz Sensibilisierung
28.11.2007
Dr. Christof Geisen
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen,
Work in Progress: Neue Aspekte zur Molekulargenetik des Vitamin-K-Stoffwechsels
und der Gerinnung
28.11.2007
Eva Hochgeladen, Lydia Göbel, Sabine Kaiser
IKT Ulm
Work in Progress: Neuerungen im Referenzlabor Safranberg;
Schweigepflicht und Datenschutz
05.12.2007
Dr. Britta Höchsmann
IKT Ulm
Work in Progress: Durchflusszytometrie in der PNH-Diagnostik
19.12.2007
Dr. Peter Reinhardt
IKT Ulm
Work in Progress: Colony assay of stem cells uncovers JAK2 mutation
in a family donor
16.01.2008
Dr. Uschi Mayr-Wohlfart und Dr. Markus Rojewski
IKT Ulm und Institut für Transfusionsmedizin, Universitätsklinikum
Ulm
Work in Progress: Gefahrstoffschulung
23.01.2008
Dr. Tobias Feuchtinger
Universitätskinderklinik Tübingen
Work in Progress: Adoptiver Transfer virusspezifischer T-Zellen
nach allogener Stammzell transplantation
265

Forschungsbericht 2007 – 2008
23.01.2008
Dr. Ingeborg von Zabern
IKT Ulm
Immunhämatologische Grundlagen.
LÄK Thüringen/Universität Jena: Fortbildungskurs zur Qualifikation
als Transfusionsverantwort licher/-beauftragter
24.01.2008
Dr. Ingeborg von Zabern
IKT Ulm
Blutgruppenserologische Diagnostik vor und nach Transfusion
von Blutkomponenten.
LÄK Thüringen/Universität Jena: Fortbildungskurs zur Qualifikation
als Transfusionsverantwort licher/-beauftrager
13.02.2008
Dr. Volker Mailänder
IKT Ulm
Work in Progress: Grundlagen der Kryokonservierung
14.02.2008
Dr. Kaimo Hirv
IKT Ulm
Interne Fortbildung der Kinderklinik Ulm
Beurteilung der KIR-Kompatibilität
22.02.2008
Prof. Dr. Michael Lotze
University of Pittsburgh Cancer Institute, Pittsburgh, PA (USA)
Work in Progress: Without a net: Cancer is a disorder of cell
death.
27.02.2008
Dr. Ramin Lotfi
Institut für Transfusionsmedizin, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: Sinn und Unsinn der Eigenblutspende
05.03.2008
Dr. Markus Wiesneth
IKT Ulm
Work in Progress: TRALI: Pathogenese, Risiko, Prophylaxe
12.03.2008
PD Dr. Joannis Mytilineos
IKT Ulm
Work in Progress: Nachweis von TRALI-relevanten Antikörpern.
Procedere und erste Erfahrun gen in Ulm
09.04.2008
Dr. Bernd Jahresdörfer
Institut für Naturheilkunde und Klinische Pharmakologie,
Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: Granzyme B-Secreting B Cells: Novel Cytotoxic
Players?
16.04.2008
Dr. Peter Reinhardt
IKT Ulm
Work in Progress: Autologe Stammzelltransplantat-Gewinnung
23.04.2008
Dr. Britta Höchsmann
IKT Ulm
Work in Progress: Status quo der TTP-Behandlung in Zeiten der
Antikörpertherapie
30.04.2008
Dr. Anita Schmitt
Klinik für Innere Medizin III, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: Multimere für CMVpp65-spezifische T-Zellen:
diagnostische und therapeuti sche Anwendungen
266
13.05.2008
Dr. Ingeborg von Zabern
IKT Ulm
MTA-Fortbildung Serologie: Rhesus-Proteine: Struktur und Funktion
28.05.2008
Dr. Ingeborg von Zabern
IKT Ulm
Work in Progress: Qualitätskontrolle D-negativer Erythrozytenpräparate
durch RHD-Genotypi sierung
29.05.2008
PD Dr. Joannis Mytilineos
IKT Ulm
HLA-Fortbildungsveranstaltung der Stefan-Morsch-Stiftung, St.
Wedel: Auflösung vom Ambiguitäten: Relevanz und Notwendigkeit
29.05.2008
Dr. Daniel Fürst
IKT Ulm
HLA-Fortbildungsveranstaltung der Stefan-Morsch-Stiftung, St.
Wedel: HLA- und HNA-Antikörperbestimmung mit Luminex-Vorstellung
der Ulmer Daten
04.06.2008
Dr. Daniel Fürst
IKT Ulm
Work in Progress: HLA- und HNA-Antikörperbestimmung mit Luminex:
Vorstellung der Ulmer Daten
18.06.2008
Julia Schmitz-Wienke
IKT Ulm
Work in Progress: Aufnahmemechanismen gegensätzlich geladener
fluoreszenter Nanopartikel in HeLa-Zellen
25.06.2008
Dr. Ramin Lotfi
IKT Ulm
Journal Club: Liu H., Rohowsky-Kochan C.: Regulation of IL-17 in
human CCR6+ effector memory T cells. J. Immunol. 180: 7948-
7957 (2008)
25.06.2008
Prof. Dr. H. Tumani
Klinik für Neurologie, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: Biomarker bei der multiplen Sklerose
02.07.2008
Dr. Ramin Lotfi
IKT Ulm
Journal Club: Khayrullina T. et al.: In vitro differentiation of dendritic
cells in the presence of prostaglandin E2 alters the IL-12/IL-23
balance and promotes differentiation of Th17 cells. J. Immunol.
181: 721-735 (2008)
09.07.2008
Gloria Herzog
Universität Ulm
Journal Club: Schnoeller C. et al.: A helminth immunomodulator
reduces allergic and inflam matory responses by induction of IL-
10-producing macrophages. J. Immunol. 180: 4265-4272 (2008)
09.07.2008
Prof. Dr. Hubert Schrezenmeier
IKT Ulm
Work in Progress: Neue Empfehlungen zur Therapie mit Erythropoese-stimulierenden
Faktoren (ESF)

16.07.2008
Dr. Markus Rojewski
Institut für Transfusionsmedizin, Universitätsklinikum Ulm
Journal Club: Urbán V.S. et al.: Mesenchymal stem cells cooperate
with bone marrow cells in therapy of diabetes. Stem Cells 26:
244-253 (2008)
16.07.2008
Dr. Myriam Lorenz
Universität Ulm
Work in Progress: Markierung immortalisierter Zelllinien und
Stammzellen mit funktionalisierten Partikeln für biomedizinische
Anwendungen
23.07.2008
Gloria Herzog
Universität Ulm
Work in Progress: Eosinophile Granulozyten, dendritische Zellen
und „Damage-Associated Molecular Patterns“.
26.07.2008
PD Dr. Joannis Mytilineos
IKT Ulm
Journal Club, Ulm: Recruitment and Activation of Natural Killer
Cells in vitro by a Human Dendritic Cell Vaccine
30.07.2008
Julia Dausend
Journal Club: Nadege A. et al.: Route of uptake of palmitoylated
encephalitogeneic peptides of myelin proteolipid protein by antigen-presenting
cells: importance of the type of bond between
lipid chain and peptide and relevance to autoimmunity.
J. Immunol. 180: 1398-1404 (2008)
30.07.2008
Prof. Dr. Hubert Schrezenmeier
IKT Ulm
Work in Progress: Komplikationen der Blutspende (Vollblut und
Apherese)
06.08.2008
PD Dr. Joannis Mytilineos
IKT Ulm
Journal Club: Gustafsson K. et al.: Recruitment and activation of
natural killer cells in vitro. Cancer Res. 68 (15 July 2008)
13.08.2008
Dr. Magdalena Hagn
Journal Club: IL-2 and IL-21 confer opposing differentiation programs
to CD8 T cells for adop tive immunotherapy.
Blood 111: 5326-5333 (2008)
20.08.2008
Dr. Bernd Jahresdörfer
Institut für Naturheilkunde und Klinische Pharmakologie, Universitätsklinikum
Ulm
Journal Club: Direct proteasome dependent cross-presentation of
viral antigen by plasmacytoid dendritic cells on MHC I.
Nature Immunology 9 (2008)
03.09.2008
Dr. Thomas Schreiner
Fa. Miltenyi-Biotec, Bergisch-Gladbach
Work in Progress: Möglichkeiten der spezifischen Immunadsorption
10.09.2008
Dr. Xuehua Li
Journal Club: Expansion of FOXP3high regulatory T cells by
human dendritic cells (DCs) in vitro and after injection of cytokinematured
DCs in myeloma patients. Blood 108: 2655-2661 (2006)
10.09.2008
Tanja Gebhard und Mitarbeiter/innen
Institut Mannheim
EDV-Schulung (interne Veranstaltung)
Fortbildungsveranstaltungen 2007 – 2008
10.09.2008
Prof. Dr. Willy A. Flegel
IKT Ulm
MTA-Fortbildung Serologie: AB0: Einführung und praktische
Grundlagen
17.09.2008
Dr. Frank Radecke
Institut für Transfusionsmedizin, Universitätsklinikum Ulm
Journal Club: Establishment of HIV-1 resistance in CD4+ T cells
by genome editing using zinc-finger nucleases.
Nature Biotechnology 26 (July 2008)
24.09.2008
Dr. Stefan Rauch
IKT Ulm
Work in Progress: Falsche Laborwerte: Fallbeispiele
24.09.2008
Dr. Peter Reinhardt
IKT Ulm
Work in Progress: Therapeutische Erythrozytapherese
01.10.2008
Gloria Herzog
Universität Ulm
Journal Club: Induction of immunological tolerane by apoptotic
cells requires caspase-depen dent oxidation of high-mobility
group box-1 protein. Immunity 29: 21-32 (2008)
08.10.2008
Dr. G. Herr
Fa. Advanced Tissue Regeneration, Wetzlar
Work in Progress: Biologische Geweberegeneration mit vitalisierten
prozessierten Allografts
15.10.2008
Kai Sontheimer
Journal Club: Burke S.M. et al. Human mast cell activation with
virus-associated stimuli leads to the selective chemotaxis of natural
killer cells by a CXCL8-dependent mechanism.
Blood 111: 5467-5476 (2008)
22.10.2008
Andrea Vigh
IKT Ulm
Journal Club: Zernich D. et al.: Natural HLA class I polymorphism
controls the pathway of anti gen presentation and susceptibility to
viral evasion. J. Exp. 200: 13-24 (2004)
22.10.2008
Prof. Dr. C. Beltinger
Klinik für Kinder und Jugendmedizin, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: ES cell-derived sympathoadrenergic progenitors
for synthetic neuroblastoma stem cells
29.10.2008
Dr. Daniel Fürst
IKT Ulm
Journal Club: Kroemer A. et al.: The innate NK cells, allograft rejection,
and a key role for IL-15.
J. Immunol. 180: 7818-7826 (2008)
29.10.2008
Prof. Dr. Jan Münch
Institut für Virologie, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: HIV enhancing or blocking compounds in
human body fluids
267

Forschungsbericht 2007 – 2008
05.11.2008
Dr. Markus Rojewski
Institut für Transfusionsmedizin, Universitätsklinikum Ulm
Journal Club: Sheng H. et al.: A critical role of IFNg in priming
MSC-mediated suppression of T cell proliferation through up-regulation
of B7-H1. Cell Res. 18: 846-857 (2008)
05.11.2008
Dr. Frank Radecke
Institut für Transfusionsmedizin, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: Developments in ODN-mediated genom tinkering
12.11.2008
Gerlinde Schrezenmeier
Journal Club: Chen L. et al.: Paracrine factors of mesenchymal
stem cells recruit macrophages and endothelial lineage cells and
enhance wound healing.
PLoS ONE, 2008; 3(4): e1886
12.11.2008
Prof. Dr. Willy A. Flegel
IKT Ulm
Work in Progress: Erythrozytenantigene: Einführung und praktische
Grundlagen
19.11.2008
Julia Dausend
Journal Club: Hamdy S. et al.: Co-delivery of cancer-associated
antigen and toll-like receptor 4 ligand in PLGA nanoparticles induces
potent CD8+ T cell mediated anti-tumor immunity
Vaccine 26: 5046-5057 (2008)
19.11.2008
Dr. Hartmut Geiger
Klinik für Dermatologie und Allergologie, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: Regulation of stem cell mobilization by EGFR
signaling: Stories of a genetic screen
26.11.2008
Dr. Anna-Maria Wolf
Klinik für Allgemein-, Viszeral- und Transplantationschirurgie, Universitätsklinikum
Ulm
Work in Progress: Adipositas-Chirurgie – Bedeutung und Bestimmung
adipositasspezifischer Parameter
03.12.2008
Prof. Dr. Frank Kirchhoff
Institut für Virologie, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: The high virulence of HIV-1: An accident of primate
lentiviral evolution?
10.12.2008
Dr. Ramin Lotfi
IKT Ulm
Journal Club: Yousefi S. et al.: Catapult-like release of mitochondrial
DNA by eosinophils con tributes to antibacterial defense. Nature
Medicine (2008)
10.12.2008
Prof. Dr. Lisa Wiesmüller
Klinik für Frauenheilkunde und Geburtshilfe, Universitätsklinikum
Ulm
Work in Progress: Nachweis von DNA-Doppelstrangbruch-Reparaturdefekten
zur Identifizierung von erhöhtem Brustkrebsrisiko
10.12.2008
Eva Hochgeladen, Lydia Göbel, Sabine Kaiser
IKT Ulm
MTA-Fortbildung Serologie: Neuerungen im Referenzlabor und am
Safranberg
268
17.12.2008
Ghasem Solgi
Journal Club: Codarri L. et al.: Expansion and tissue infiltration of
an allospecific CD4+CD25+CD45RO+IL-7Ra high cell population
in solid organ transplant recipients. JEM 204 (9 July 2007)
17.12.2008
Prof. Dr. S. Fulda
Klinik für Kinde- und Jugendmedizin, Universitätsklinikum Ulm
Work in Progress: Exploiting apoptosis pathways for cancer therapy

Akademische Ausbildung 2007 – 2008
Akademische Ausbildung und Patente 2007 – 2008
Außerplanmäßige Professuren
Bugert, Peter (apl. Prof. Dr. rer. nat.), Ruprecht-Karls-Universität Heidelberg, Medizinische Fakultät Mannheim.
Habilitationen
Schmidt, Michael (PD Dr. med. Dr. med. habil.), „Neue Einsatzmöglichkeiten der Realtime-PCR für das Blutspenderscreening“,
Johann W. Goethe Universität, Frankfurt am Main 2007.
Promotionen
Bistrian, Roxana (Dr. med.): „Homingverhalten von normalen und leukämischen hämatopoetischen Progenitorzellen“,
Johann W. Goethe Universität, Frankfurt am Main, 2007.
Dobrowolski, Christiane A.: Untersuchungen zur Proteinbiosyntheseaktivität humaner Thormbozyten, Dissertation am
Fachbereich Vetrinärmedizin der Justus-Liebig-Universität Gießen
Heck, Julia Anna Katharina (Dr. med.): „Bakterielle Kontamination von Blutprodukten, Überprüfung der bakteriellen
Kontaminationsrate von Thrombozytenkonzentraten“, Johann W. Goethe Universität, Frankfurt am Main, 2007.
Heinz, Stefan (Dr. phil. nat): „Untersuchungen zur Steigerung der rekombinanten Expression von FVIII auf transkriptioneller
und posttranskriptioneller Ebene“, Johann W. Goethe Universität, Frankfurt am Main, 2008.
Hourfar, Michael Kai (Dr. phil. nat.): „Entwicklung, Optimierung und Evaluation eines neuartigen Verfahrens zur Nukleinsäureisolierung
im Kontext der Sicherheit von Blutprodukten“, Johann W. Goethe Universität, Frankfurt am Main,
2008.
Lorenz, Myriam Ricarda (Dr. rer.nat): „Markierung immortalisierter Zelllinien und Stammzellen mit funktionalisierten
Partikeln für biomedizinische Anwendungen“, Dissertation zum Dr. rer. nat. 2007 an der Fakultät für Naturwissenschaften
der Universität Ulm (in Co-Betreuung mit Frau Prof. Dr. K. Landfester, Institut für Organische Chemie der
Universität Ulm).
Stamer, Kathrin (Dr. med.): „Molekulare und funitonelle Charakterisierung genetischer Varianten von DC154 und
CD62P“, Dissertation am Fachbereich Medizin der Ruprecht-Karls-Universität Heidelberg der Medizinischen Fakultät
Mannheim.
Weis, Christina (Dr. med.): „Bakterielle Kontamination von Blutprodukten, vergleichende Untersuchung von drei verschiedenen
Nachweismethoden (Bakterien Real-time PCR, ScansystemTM und FACSTM)“, Johann W. Goethe Universität,
Frankfurt am Main, 2007.
Diplomarbeiten
Giesen, Melanie (Dipl. Biol.): „Isolierung und Expansion humaner mesenchymaler Stammzellen zur Untersuchung des
Adhäsionsverhaltens unter Scherdruckbedingungen“. Frankfurt am Main, 2008.
Heinz, Gitta: „Allelhäufigkeit des Non-homologous-endjoining-Faktors Artemis bei humanen Leukämien/Lymphomen
und Kontrollen“. Bachelor-Studiengang Molekulare Medizin der Medizinischen Fakultät der Universität Ulm.
Höcherl, Anita: „Synthese von fluoreszierenden Nanopartikeln aus unterschiedlichen Monomeren und Charakterisierung
der Aufnahmekinetik in verschiedene Zelllinien“, Masterarbeit 2008 an der Universität Ulm (in Co-Betreuung mit
Frau Prof. Dr. K. Landfester, Institut für Organische Chemie der Universität Ulm).
Zimmermann, Christine (Dipl. Biol.): „Untersuchungen zur Rolle des Guaninnukleotid-Austauschfaktors Tiam1 für Adhäsion
und Migration in der hämatopoetischen Vorläuferzellinie FDCP-mix“, Frankfurt am Main, 2008.
269

Forschungsbericht 2007 – 2008
Patente 2007 – 2008
Name des Patents
mRNA-Transfektion von adulten Progenitorzellen zur spezifischen Geweberegeneration
Anmelder
Universität Ulm
Erfinder
Jan Torzewski, Vinzenz Hombach, Hubert Schrezenmeier, Markus Wiesneth, Juliane Wiehe, Jochen Greiner, Michael
Schmitt, Oliver Zimmermann
Veröffentlichung
Europäisches Patentamt München
Anmeldetag 08.02.2007
Patent Nr. 07703360.3 - 2405 PCT/EP2007001085
Name des Patents
Nucleic acid molecules correlated with the Rhesus weak D phenotype
Anmelder
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige gGmbH
Erfinder
Willy A. Flegel, Franz F. Wagner
Veröffentlichung
United States Patent and Trade Mark Office
Date of Patent 07.08.2007
Patent US 7,252,949
Name des Patents
Nucleic acid molecules correlated with the Rhesus weak D phenotype
Anmelder
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige gGmbH
Erfinder
Willy A. Flegel, Franz F. Wagner
Veröffentlichung
Israel Patent Office
Erteilt in 2008
Patent P-3343-IL
Name des Patents
Molekularstruktur des RHDE-negativ Genortes
Anmelder
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige gGmbH
Erfinder
Willy A. Flegel, Franz F. Wagner
Veröffentlichung
Republik Österreich Patentamt
Ausgabetag 25.09.2007
Patent AT E 356 828 basierend auf EP 1 226 169
270

Name des Patents
Molecular structure of RHD negative locus
Anmelder
Willy A. Flegel
Erfinder
Willy A. Flegel, Franz F. Wagner
Veröffentlichung
Australian Patent Office
Accepted Journal Date 06.11.2008
Patent Nr. 20062023359
Name des Patents
Molecular structure of RHD negative locus
Anmelder
DRK Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige gGmbH
Erfinder
Willy A. Flegel, Franz F. Wagner
Veröffentlichung
Chinesisches Patentamt
Erteilung angekündigt für 2009
Patent 00817777.5
Akademische Ausbildung und Patente 2007 – 2008
Name des Patents
Verfahren zum Nachweis von Antikörpern und/oder Antigenen sowie zur Blutgruppenbestimmung in einer Testsubstanz
(Pat.-Nr. 102006024927)
Anmelder
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gGmbH, 68167 Mannheim
Erfinder
Spindler, Jörg
Veröffentlichung
11.12.2008
Name des Patents
Stabilized Chlorite Solutions in Combination with Fluoropyrimidines for Cancer Treatment
Anmelder
NUVO RESEARCH INC. [CA/CA]; 7560 Airport Road, Unit 10, Mississauga, Ontario L4T 4H4 (CA) Meuer, Stefan
[DE/DE]; (DE) (US Only).
Giese, Thomas [DE/DE]; (DE) (US Only).
Kuhne, Frederich-Wilhelm [DE/TH]; (DE) (US Only).
Erfinder
Meuer, Stefan; (DE)
Giese, Thomas; (DE)
Kuhne, Frederich-Wilhelm; (DE)
Veröffentlichung
Pub. No.:WO/2007/009245
International Application No.: PCT/CA2006/001187
IPC8 Class: AA61K3314FI
USPC Class: 424665
271

Forschungsbericht 2007 – 2008
Mitgliedschaften / Funktionen 2007 – 2008
American Association for Clinical Chemistry
American Association of Blood Banks (AABB)
American College of Sports Medicine
American Society for Histocompatibility (ASHI)
American Society of Clinical Oncology (ASCO)
American Society of Hematology (ASH)
Arbeitsgemeinschaft der Ärzte staatlicher und kommunaler Blutspendedienste
Arbeitsgemeinschaft der Knochenmarkspender-Dateien Deutscher Blutspendedienste e.V. (ARGE-KMSB)
Arbeitsgemeinschaft der Sachverständigen für Abstammungsgutachten in Deutschland
Arbeitsgemeinschaft für pädiatrische Immunologie (API)
Arbeitskreis „Richtlinien zur Transplantation von hämatopoetischen Stammzellen“ des wissenschaftlichen Beirats der Bundesärztekammer
Associate scientific member Biomedical Excellence for Safer Transfusion, ISBT
Association Suisse de Médécine Transfusionelle (ASMT) / Schweizer Vereinigung für Transfusionsmedizin (SVTM), Membre d’honneur
Berufsverband Deutscher Transfusionsmediziner
Biomedical Excellence of Safer Transfusion Collaborative (BEST)
Blood Therapies in Medicine
Centrum für Reisemedizin
Deutsche Arbeitsgemeinschaft für Knochenmark und Blutstammzelltransplantation e.V. (DAG-KBT)
Deutsche Gesellschaft für Abstammungsgutachten
Deutsche Gesellschaft für Hämatologie und Onkologie (DGHO)
Deutsche Gesellschaft für Immungenetik (DGI)
Deutsche Gesellschaft für Immunologie (DGfI)
Deutsche Gesellschaft für Innere Medizin
Deutsche Gesellschaft für Kinder- und Jugendmedizin
Deutsche Gesellschaft für Klinische Chemie (DGKC)
Deutsche Gesellschaft für Pädiatrische Infektiologie
Deutsche Gesellschaft für Technische Zusammenarbeit (GTZ)
Deutsche Gesellschaft für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie (DGTI)
Deutsche Transplantationsgesellschaft (DTG)
Deutscher Akkreditierungsrat (DAR)
Deutscher Akkreditierungsstelle Chemie (DACH)
Deutsche Gesellschaft für Immungenetik (DGI)
Deutscher Hochschulverband (DHV)
Deutsches Register für Stammzelltransplantationen (DRST)
EU European Commission – Directorate C – Public Health and Risk Assessment
European Bone Marrow Transplantation Group
European Federation for Immunogenetics (EFI)
European Group for Blood and Marrow Transplantation (EBMT)
European Society for Immunodeficiencies (ESID)
Eurotransplant Foundation
FCE Multinational Chair (Federation of Clinical Immunology Societies [FOCIS] Centers of Excellence)
Forum Reisen und Medizin e.V.
Gesellschaft Deutscher Naturwissenschaftler und Ärzte (GDNÄ)
Gesellschaft für Genetik (GfG)
Gesellschaft für Immungenetik
Gesellschaft für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie
International Bone Marrow Transplantation Register (IBMTR)
International Histocompatibility Working Group
International Histocompatibility Workshop Council
International PNH Interest Group
International Society for Blood Transfusion (ISBT)
International Society for Cellular Therapy (ISCT)
International Society for Experimental Hematology
International Society for Forensic Haemogenetics (ISFH)
International Society of Exercise Immunology
New York Academy of Sciences (NYAS)
272

Normenausschuss Medizin, NAMed, Transfusions-/Infusionsbehältnisse und -geräte aus Kunststoffen
Primary Immunodeficiency Association
Prüfungsausschuss „Transfusionsmedizin“ und „Bluttransfusionswesen“ der Ärztekammern Baden-Württemberg
Robert-Koch-Stiftung
SCARF Exchange (International Immunohematological Exchange Group)
Serum, Cells and Rare Fluids (SCARF)
Society for Cryobiology
Society for Low Temperature Biology (SLTB)
Studienstiftung des Deutschen Volkes
The Transplantation Society
Union of Swiss Societies for Experimental Biology (USGEB)
Weiterbildungsausschuss der Bezirksärztekammer Nordbaden
ZKRD-Standards-Gruppe
Mitherausgeber folgender wissenschaftlicher Fachzeitschriften:
Annals of Hematology
Hämotherapie
Transfusion
Transfusion Medicine and Hemotherapy
Transfusion Today
Gutachter für folgende wissenschaftliche Fachzeitschriften:
American Journal of Transplantation
Annals of Hematology
BioMed Central Molecular Biology
Biomedical Pharmacology
Blood
Cytotherapy
Experimental Hematology
Gene Therapy
Haematologica
Human Immunology
International Journal of Hematology
International Journal of Immunogenetics
Journal of Cellular and Molecular Medicine
Journal of Gene Therapy
Journal of Immunology
Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics
Molecular and Cellular Biology
Nature Immunology
New England Journal of Medicine
Tissue Antigens
Transfusion
Transplantation
BMC Medical Genetics
BMC Molecular Biology
Bone Marrow Transplantation
Journal of Clinical Apheresis
Journal of Experimental Medicine
ASH 2007 Annual Meeting Abstract Reviewer
ISEH 2008 Annual Meeting Abstract Reviewer
Vorsitze:
ASH 2007 Annual Meeting Mesenchymal Stem Cells
Deutsch-Tschechische Transfusionstage 2008 Transfusion Risks
Sonstige:
Associate Member Faculty of 1000 Hematology seit April 2008
Mitgliedschaften / Funktionen 2007 – 2008
273

Forschungsbericht 2007 – 2008
Organe der Gesellschaft
DRK-Blutspendedienst
Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Gesellschafter:
DRK-Landesverband Baden-Württemberg e.V.
DRK-Landesverband Hessen e.V.
DRK-Landesverband Badisches Rotes Kreuz e.V.
Stadt Frankfurt am Main
Gesundheit Nordhessen Holding AG
DRK-Landesverband Sachsen e.V.
DRK-Landesverband Brandenburg e.V.
DRK-Landesverband Schleswig-Holstein e.V.
DRK-Landesverband Hamburg e.V.
Unser Aufsichtsrat:
Vorsitzender:
Staatssekretär a. D. Dr. Lorenz Menz
Präsident des DRK-Landesverbandes Baden-Württemberg e. V.
Stellv. Vorsitzende:
Bundesministerin a. D. Hannelore Rönsch
Präsidentin des DRK-Landesverbandes Hessen e. V.
Stellv. Vorsitzender:
Landrat a. D. Jochen Glaeser
Präsident des DRK-Landesverbandes Badisches Rotes Kreuz e. V.
Mitglieder:
Holger Adolph
Landesjustitiar des DRK-Landesverbandes Hessen e. V.
Ministerialdirektor a. D. Dr. jur. Eberhard Benz
Landesschatzmeister des DRK-Landesverbandes Baden-Württemberg e. V.
Gerald Böcher
Landesschatzmeister des DRK-Landesverbandes Hessen e. V.
Thomas Brozat
Präsident des DRK-Landesverbandes Brandenburg e. V.
Irmtraut Gürkan
Kfm. Direktorin des Universitätsklinikum Heidelberg
Hans Heinz, MdL
Landesgeschäftsführer des DRK-Landesverbandes Baden-Württemberg e. V.
Prof. Dr. med. Wolfgang Kramer
Stellv. Landesarzt des DRK-Landesverbandes Baden-Württemberg e.V.
Henning Kramer
Präsident des DRK-Landesverbandes Schleswig-Holstein e.V.
274

Dr. Eginhart Lehmann
Vizepräsident des DRK-Landesverbandes Sachsen e. V.
RA Michael Merle
Landesjustitiar des DRK-Landesverbandes Badisches Rotes Kreuz e.V.
Ministerialdirigent Hans-Jürgen Müller-Arens
Ministerium für Wissenschaft, Forschung und Kunst Baden-Württemberg
Hans Hermann Reschke
Bankdirektor i.R.
Frau Stadträtin Dr. Manuela Rottmann
Dezernat für Umwelt und Gesundheit Stadt Frankfurt
Dr. Gerhard M. Sontheimer
Vorstandsvorsitzender der Gesundheit Nordhessen Holding AG
Birgit Wiloth-Sacherer
Landesgeschäftsführerin des DRK-Landesverbandes Badisches Rotes Kreuz e. V.
Dieter Wolf
Landesbereitschaftsleiter des DRK-Landesverbandes Baden-Württemberg e. V.
Geschäftsführer:
Prof. Dr. med. Dr. h. c. Erhard Seifried, Ärztlicher Direktor
Dipl.-Volkswirt Manfred Stähle, Kaufmännischer Geschäftsführer
Organe der Gesellschaft
275

Forschungsbericht 2007 – 2008
Impressum
Herausgeber:
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Sandhofstraße 1
60528 Frankfurt am Main
Verantwortlichkeit für die Inhalte:
Institut Baden-Baden: Dr. med. Ekkehard Richter
Institut Frankfurt: Prof. Dr. med. Dr. h. c. Erhard Seifried
Institut Heidelberg: Prof. Dr. med. Stefan Meuer
Institut Mannheim: Prof. Dr. med. Harald Klüter
Institut Tübingen: Prof. Dr. med. Hinnak Northoff
Institut Ulm: Prof. Dr. med. Hubert Schrezenmeier
Gesamtverantwortung:
Prof. Dr. med. Dr. h. c. Erhard Seifried
Ärztlicher Direktor
Redaktion:
Institut für Transfusionsmedizin und Immunhämatologie Frankfurt
DRK-Blutspendedienst Baden-Württemberg - Hessen gemeinnützige GmbH
Sandhofstraße 1
60528 Frankfurt am Main
Prof. Dr. med. Dr. h. c. Erhard Seifried
PD Dr. med. Reinhard Henschler
Dr. med. Jörg Schüttrumpf
Dr. phil nat. Thea Müller-Kuller
Sabine Fischer
Druck:
Druckerei Wenz GmbH
Luisenstraße 1
63457 Hanau-Großauheim
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