Technische Universität München Wissenschaftszentrum ...

Material und Methoden 43
lipophilen Bestandteile auf eine Extrelut ® 20-Säule (Merck, Darmstadt, BRD)
gegeben und anschließend mit Chloroform eluiert. Das Eluat wurde am
Rotationsverdampfer zur Trockne eingeengt und dann in Ethanol aufgenommen
(BAUER, 1997).
Messung der Cichoriensäure- und Alkamidgehalte
Die extrahierten lipophilen und hydrophilen Inhaltsstoffe wurden getrennt mittels
HPLC analysiert, wobei die von BAUER et al. (1987, 1988a, 1988b und 1989) und
BAUER (1997) publizierten Methoden Verwendung fanden. Zur Bestimmung dieser
Komponenten stand ein HP 1050 Flüssigkeitschromatograph mit HP 1040A
Photodiodenarray-Detektionssystem und HP Chemstation (Hewlett-Packard,
Waldbronn, BRD) zur Verfügung. Die Trennsysteme für die Alkamide und
Cichoriensäure sowie die Einspritzmenge der aufgeschlossenen Presssaft-
Analysenlösung sind der von BAUER (1997) veröffentlichten Methode zu entnehmen.
Bei der Untersuchung des Echinacea-Grünmehls wurden zur Auftrennung der
lipophilen Komponenten 5µl Analysenlösung in den HPLC eingespritzt, während bei
der hydrophilen Fraktion 1µl der Analysenlösung verwendet wurden. Die
Untersuchung der Alkamide bezog sich auf die isomeren Dodeca-2E,4E,8Z,10E/Ztetraensäureisobutylamide,
die die Hauptverbindungen der Alkamide darstellen.
Die Gehaltsbestimmung erfolgte nach der Methode des Externen Standards mittels
Referenzsubstanz von isoliertem Dodeca-2E,4E,8Z,10E/Z-tetraensäureisobutylamid
bzw. Cichoriensäure.
3.6.3 Milch
Kolostrum wurde im Sauenversuch (vgl. 3.3) 1 bis 6 h nach Geburtsbeginn aus
mindestens 4 verschiedenen gereinigten Zitzen der rechten Gesäugeleiste
entnommen. In diesem Zeitraum treten wie die Untersuchungen von JACKSON et al.
(1995) zeigten nur geringfügige Veränderungen im Protein-, Fett- und Lactosegehalt
der Milch auf, ferner bleibt die Konzentration an Immunglobulin G in dieser Phase
relativ konstant.
Nach der Entnahme wurde die Milch zur Entfernung von Schmutzpartikeln durch