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2. Material und Methodik 15
2.1.2.8 Keimrückgewinnung
Die Keimrückgewinnung erfolgte von allen drei Flächen durch Abklatsch der jeweils kontaminierten
Fläche innerhalb des inneren Quadrats (10 cm × 10 cm) mit je drei Rodac 8 -Platten pro Fläche (A, B
oder C). Danach wurden die Rodac-Platten bei 36 ± 1 °C bebrütet und die Anzahl der KBE 9 des
jeweiligen Testkeims pro Platten-Zählfeld von 16 cm 2
zusätzlich noch nach 72 Stunden abgelesen.
nach 24 und 48 Stunden, bei Candida
2.1.3 Methodik der Vorversuche zur Kontamination
Ziel der Kontamination war die möglichst gleichmäßige Verteilung der Testkeime auf dem Gesamt-
Areal der Testfläche. Da die Keime in der Keimsuspension homogen suspendiert waren, mußte
diese Flüssigkeit möglichst gleichmäßig verteilt werden. In der Literatur werden hierfür zwei
verschiedene Methoden beschrieben. Bei der einen Methode wird die Keimsuspension mit einer
Pipette auf die Fläche gegeben und mit einem Glasspatel gleichmäßig verteilt. Bei der anderen
Methode wird ein Stieltupfer mit der Keimsuspension getränkt und die Fläche mit diesem Tupfer
gleichmäßig bestrichen. Zum Vergleich beider Methoden wurden die wie in Abschnitt 2.1.2.2 (Seite
12) beschrieben vorbereiteten Testflächen auf dem Gesamt-Areal mit steriler 0,9%iger NaCl-Lösung
anstelle der später verwendeten Keimsuspension „kontaminiert“, und zwar eine Testfläche mit der
„Spatel-Methode“ und eine Testfläche parallel dazu mit der „Tupfer-Methode“. Dieser Vorversuch
wurde 10 Mal durchgeführt.
2.1.4 Methodik der Vorversuche zur Keimrückgewinnung
Die Keimrückgewinnung sollte möglichst zuverlässige Ergebnisse liefern. In der Literatur wurden
zwei für die vorliegende Versuchsanordnung mögliche Methoden beschrieben. Zum einen gibt es die
Tupfermethode [50, 54], bei der die kontaminierte Fläche mit einem angefeuchteten Stieltupfer
abgerieben wird und die Keime anschließend in einer definierten Flüssigkeitsmenge resuspendiert
werden. Durch quantitatives Abimpfen dieser Suspension auf Agarplatten und Auszählen der
gewachsenen Kolonien kann danach die Anzahl der von der Fläche zurückgewonnenen Keime
8 Rodac = Replicate organism detection and counting
9 KBE = Kolonie-bildende Einheit(en)