Thesis - Tumb1.biblio.tu-muenchen.de
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2. Material und Methodik<br />
Keimsuspension auf Columbia-Agar mit 5% Schafsblut. Dabei wur<strong>de</strong> je<strong>de</strong> <strong>de</strong>r bei<strong>de</strong>n<br />
Verdünnungen jeweils doppelt angelegt, in<strong>de</strong>m die Platte halbiert und auf je<strong>de</strong>r Hälfte 0,1 ml <strong>de</strong>r<br />
Verdünnung ausgestrichen wur<strong>de</strong>. Die Keimsuspensions-Kontrollen wur<strong>de</strong>n bei 36 ± 1 °C bebrütet<br />
und nach 24 S<strong>tu</strong>n<strong>de</strong>n, bei Candida nach 48 S<strong>tu</strong>n<strong>de</strong>n abgelesen.<br />
2.1.2.5 Kontamination<br />
Pro Ansatz wur<strong>de</strong>n jeweils drei Testflächen (A, B und C) kontaminiert. Auf je<strong>de</strong> Testfläche wur<strong>de</strong>n<br />
1,5 ml <strong>de</strong>r Keimsuspension mit einer Pipette aufgebracht und mit einem sterilen Watte<strong>tu</strong>pfer, <strong>de</strong>r mit<br />
<strong>de</strong>r Keimsuspension getränkt war, auf <strong>de</strong>m Gesamt-Areal gleichmäßig verteilt. Die gleichmäßige<br />
Kontamination <strong>de</strong>r Fläche wur<strong>de</strong> durch zuerst vorsichtiges, kreisförmiges Verteilen und<br />
nachfolgen<strong>de</strong>s zweimaliges Ausstreichen <strong>de</strong>r Flüssigkeit mit <strong>de</strong>m Watte<strong>tu</strong>pfer in Quer- und in<br />
Längsrich<strong>tu</strong>ng <strong>de</strong>s rechteckigen Gesamt-Areals erreicht. Für je<strong>de</strong> <strong>de</strong>r drei Testflächen wur<strong>de</strong> ein<br />
neuer Watte<strong>tu</strong>pfer verwen<strong>de</strong>t.<br />
2.1.2.6 Antrocknen <strong>de</strong>r Keimsuspension<br />
Nach <strong>de</strong>r Kontamination trocknete die Keimsuspension auf <strong>de</strong>r Testfläche während 15 Minuten an.<br />
2.1.2.7 Dekontamination<br />
Dekontaminiert wur<strong>de</strong> immer das markierte Gesamt-Areal (30 cm × 40 cm). Um <strong>de</strong>n Wischvorgang<br />
so weit wie möglich zu standardisieren, wur<strong>de</strong> die Dauer <strong>de</strong>s Wischvorgangs auf 6 Sekun<strong>de</strong>n pro<br />
Testfläche festgelegt und <strong>de</strong>r Wischvorgang immer von <strong>de</strong>rselben Person (= Untersucherin)<br />
durchgeführt. Testfläche A wur<strong>de</strong> mit einem mit 70 vol.-%igem Ethylalkohol durchtränkten<br />
Einmalwisch<strong>tu</strong>ch durch Wischen <strong>de</strong>sinfiziert. Testfläche B wur<strong>de</strong> mit einem in Reinigungslösung<br />
getauchten und gut ausgedrückten Einmalwisch<strong>tu</strong>ch durch Wischen gereinigt. Testfläche C wur<strong>de</strong><br />
nicht <strong>de</strong>kontaminiert (Positiv-Kontrolle für die Kontamination). Nach <strong>de</strong>r Dekontamination <strong>de</strong>r<br />
Testflächen wur<strong>de</strong> ein Zeitraum von 10 Minuten bis zur Keimrückgewinnung abgewartet, um das<br />
vollständige Trocknen <strong>de</strong>r Flächen A und B zu gewährleisten.