Thesis - Tumb1.biblio.tu-muenchen.de
Thesis - Tumb1.biblio.tu-muenchen.de
Thesis - Tumb1.biblio.tu-muenchen.de
Erfolgreiche ePaper selbst erstellen
Machen Sie aus Ihren PDF Publikationen ein blätterbares Flipbook mit unserer einzigartigen Google optimierten e-Paper Software.
2. Material und Methodik 13<br />
weiteren Gebrauch wur<strong>de</strong>n die trockenen Testflächen nochmals mit 70 vol.-%igem Ethylalkohol und<br />
einem Einmalwisch<strong>tu</strong>ch <strong>de</strong>sinfiziert. Wie<strong>de</strong>rum wur<strong>de</strong> das Verdunsten <strong>de</strong>s Alkohols abgewartet (ca.<br />
10 Minuten).<br />
2.1.2.3 Ansetzen <strong>de</strong>r Reinigungslösung<br />
Die Reinigungslösung wur<strong>de</strong> in einem maschinell gespülten Kunststoffeimer nach Anweisung <strong>de</strong>s<br />
Herstellers angesetzt. Hierzu wur<strong>de</strong> abgekochtes und wie<strong>de</strong>r abgekühltes Lei<strong>tu</strong>ngswasser verwen<strong>de</strong>t,<br />
um ein erschwertes Ablesen <strong>de</strong>r KBE 6 <strong>de</strong>s Testkeims auf <strong>de</strong>r CSA 7 -Platte durch an<strong>de</strong>re Keime aus<br />
<strong>de</strong>m Lei<strong>tu</strong>ngswasser o<strong>de</strong>r eine Verfälschung <strong>de</strong>s Ergebnisses durch evtl. im Lei<strong>tu</strong>ngswasser<br />
enthaltene Keime <strong>de</strong>rselben Spezies zu vermei<strong>de</strong>n. Ein Liter dieses Wassers wur<strong>de</strong> im Meßzylin<strong>de</strong>r<br />
abgemessen und in <strong>de</strong>n Kunststoffeimer gefüllt. Dann wur<strong>de</strong>n 3,125 ml <strong>de</strong>s Reiniger-Konzentrats<br />
hinzugegeben, um die vom Hersteller angegebene Konzentration für die Unterhaltsreinigung<br />
herzustellen.<br />
2.1.2.4 Herstellung <strong>de</strong>r Keimsuspension<br />
Zuerst wur<strong>de</strong> eine Ausgangssuspension mit einer optischen Dichte (OD) von McFarland Standard<br />
0,5 in 0,9%iger NaCl-Lösung mit Hilfe <strong>de</strong>s Spektral-Photometers hergestellt, in<strong>de</strong>m mit einer sterilen<br />
Öse Material von zwei bis drei <strong>de</strong>r auf <strong>de</strong>r Kul<strong>tu</strong>rplatte befindlichen Einzelkolonien abgenommen, in<br />
sterile 0,9%ige NaCl-Lösung eingerieben und auf <strong>de</strong>m Vibrationsschüttler suspendiert wur<strong>de</strong>. Dabei<br />
entspricht <strong>de</strong>r McFarland Standard 0,5 einer OD von 0,125 bei einer Wellenlänge λ von 550 nm.<br />
Die Ausgangssuspension wur<strong>de</strong> <strong>de</strong>shalb auf eine Extinktion von 0,125 ± 0,005 bei einer Wellenlänge<br />
von λ = 550 nm eingestellt, wobei gegen sterile 0,9%ige NaCl-Lösung als Leerwert gemessen<br />
wur<strong>de</strong>. Die Keimsuspension wur<strong>de</strong> durch eine in ihrer Höhe für <strong>de</strong>n jeweiligen Testkeim in<br />
Vorversuchen (siehe Kapitel 2.1.5) ermittelte Verdünnung <strong>de</strong>r Ausgangssuspension in einer<br />
Verdünnungsreihe hergestellt, wobei alle Verdünnungen mit steriler 0,9%iger NaCl-Lösung<br />
vorgenommen wur<strong>de</strong>n. Die Kontrolle <strong>de</strong>r Keimsuspension erfolgte durch Anlegen von je 0,1 ml <strong>de</strong>r<br />
100-fachen und <strong>de</strong>r 1000-fachen bzw. <strong>de</strong>r 1000-fachen und <strong>de</strong>r 10.000-fachen Verdünnung <strong>de</strong>r<br />
6 KBE = Kolonie-bil<strong>de</strong>n<strong>de</strong> Einheit(en)<br />
7 CSA = Caseinpepton-Sojabohnenmehlpepton-Agar