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2. Material und Methodik 13
weiteren Gebrauch wurden die trockenen Testflächen nochmals mit 70 vol.-%igem Ethylalkohol und
einem Einmalwischtuch desinfiziert. Wiederum wurde das Verdunsten des Alkohols abgewartet (ca.
10 Minuten).
2.1.2.3 Ansetzen der Reinigungslösung
Die Reinigungslösung wurde in einem maschinell gespülten Kunststoffeimer nach Anweisung des
Herstellers angesetzt. Hierzu wurde abgekochtes und wieder abgekühltes Leitungswasser verwendet,
um ein erschwertes Ablesen der KBE 6 des Testkeims auf der CSA 7 -Platte durch andere Keime aus
dem Leitungswasser oder eine Verfälschung des Ergebnisses durch evtl. im Leitungswasser
enthaltene Keime derselben Spezies zu vermeiden. Ein Liter dieses Wassers wurde im Meßzylinder
abgemessen und in den Kunststoffeimer gefüllt. Dann wurden 3,125 ml des Reiniger-Konzentrats
hinzugegeben, um die vom Hersteller angegebene Konzentration für die Unterhaltsreinigung
herzustellen.
2.1.2.4 Herstellung der Keimsuspension
Zuerst wurde eine Ausgangssuspension mit einer optischen Dichte (OD) von McFarland Standard
0,5 in 0,9%iger NaCl-Lösung mit Hilfe des Spektral-Photometers hergestellt, indem mit einer sterilen
Öse Material von zwei bis drei der auf der Kulturplatte befindlichen Einzelkolonien abgenommen, in
sterile 0,9%ige NaCl-Lösung eingerieben und auf dem Vibrationsschüttler suspendiert wurde. Dabei
entspricht der McFarland Standard 0,5 einer OD von 0,125 bei einer Wellenlänge λ von 550 nm.
Die Ausgangssuspension wurde deshalb auf eine Extinktion von 0,125 ± 0,005 bei einer Wellenlänge
von λ = 550 nm eingestellt, wobei gegen sterile 0,9%ige NaCl-Lösung als Leerwert gemessen
wurde. Die Keimsuspension wurde durch eine in ihrer Höhe für den jeweiligen Testkeim in
Vorversuchen (siehe Kapitel 2.1.5) ermittelte Verdünnung der Ausgangssuspension in einer
Verdünnungsreihe hergestellt, wobei alle Verdünnungen mit steriler 0,9%iger NaCl-Lösung
vorgenommen wurden. Die Kontrolle der Keimsuspension erfolgte durch Anlegen von je 0,1 ml der
100-fachen und der 1000-fachen bzw. der 1000-fachen und der 10.000-fachen Verdünnung der
6 KBE = Kolonie-bildende Einheit(en)
7 CSA = Caseinpepton-Sojabohnenmehlpepton-Agar