Diss Nikki final - TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule ...

Diskussion 100
Zweig des Immunsystems ist zunehmend überfordert und ein sich selbst unterhaltender
Prozess mit konsekutiver Zerstörung der Darmmukosa entsteht (MAGNE,
1992; GUILFORD, 1996; ALLENSPACH und GASCHEN, 2003; KUNISAWA und
KIYONO, 2010).
5.6 Doppelmarkierung von Mastzellen mittels Antikörper
gegen den c-kit Rezeptor sowie Immunglobulin E
Wie bereits im obigen Text erläutert, wirft die identische Topografie von sowohl c-kit
positiven Mastzellen als auch von Immunglobulin E positiven Zellen innerhalb der
Lamina propria des Magen-Darmtraktes die Frage auf, ob Immunglobulin E an Mastzellen
gebunden vorliegt. Ein Ziel dieser Dissertation bestand darin, mittels einer
Doppelmakierung den c-kit Rezeptor (CD117) und IgE sichtbar zu machen. Da trotz
deutlich positiver Reaktionen der Einfachfärbungen von IgE und CD117 sowohl eine
immunhistochemische als auch eine Doppelmarkierung dieser Antigene mittels Immunfluoreszenz
fehlschlugen, stellt sich die Frage, ob die Epitope von Immunglobulin
E und CD117 in so unmittelbarer Nachbarschaft zueinander liegen, dass eine sterische
Behinderung der verwendeten Antikörper ensteht. Wie in Abbildung 5.1 verdeutlicht,
führt die gleichzeitige Verwendung der Antikörper gegen IgE bzw. CD117
und deren Sekundärantikörper und/oder Detektionssysteme zu einer sog. Baumstruktur,
welche das jeweils andere Epitop abschirmt und eine räumliche Behinderung
bei der Bindung des anderen Antikörpers und/oder Detektionssystems entstehen
lässt.
Zur weiteren Klärung, ob IgE an Mastzellen gebunden vorliegt, wäre eine Auswertung
mittels konfokaler Mikroskopie oder Elektronenmikroskopie denkbar. Vor allem
letztere Methodik wäre mittels einer Immunogold-Reaktion am Sekundärantikörper
von IgE für weitere Arbeiten in Betracht zu ziehen.