Hämoglobinopathie-RV 210 - INSTAND eV

Hämoglobinopathie-RV 210
INSTAND eV
Priem / Schulte Overberg
Referenzlabor:
Prof.E.Kohne (Ulm)

Definition der Hämoglobinopathie
Der Begriff umfasst heriditäre Störungen der normalen Hämoglobinsynthese
oder Produktion anormaler Hämoglobine.
Hämoglobinopathie
Thalassämie-Syndrome
Basisdefekt
Synthesedefizit der α-, β-, δ- oder γ-
Ketten
Merkmale:
HbA 2 und HbF-Vermehrung
HbH = β 4 Hb Bart´s = γ 4
Hb-Strukturanomalien
Abnorme Struktur der α-, β-, δ- oder
γ-Ketten
Merkmale: Unterschiedliche
Erscheinungsformen, >700 bekannte
Varianten

Globale Mutationsverteilung

Algorhythmus
J.M.Old
Blood Reviews 17(2003), 43-53

Probenaufbereitung
• Herstellung von fixierten ungefärbten Ausstrichen.
• Erythrozyten von 60 ml Blut werden 3 x mit 0,9%-
iger NaCl gewaschen und anschließend mit PAGGS-M-
Lösung auf 60 ml aufgefüllt. Danach Aliquotierung
in 0,5ml- Portionen und Verschickung an INSTAND.

PAGGS-M AS Ref: 438
(Haemonetics-Ery-Sauer PES)
Haltbarkeit 50 Tage bei 5°C
1,432g Na 2
HPO 4
x 2 H 2
O
1,255g NaH 2
PO 4
x 2 H 2
O
0,194g Adenin
9,405g Glukose
0,408g Guanosin
4,210g NaCl
10,00g Mannitol
H 2
O ad 1000 ml

Methoden- / Geräteschlüssel
• Elektrophorese TN
1100 Sebia, Hydrasys 18
1200 Beckman, Paragon 5
1300 Helena, REP 1
1400 CAF, Celluloseacetat 3
1500 Olympus 1
1900 Andere
Gerät? .............. 1
• Isoelektrische Fokussierung
2100 Helena, Titangel
2900 Andere
Gerät? ..............
• HPLC TN
3100 Variant (BioRad) 7
3200 Varant II (BioRad) 5
3300 Diamat /BioRad)
3400 TOSOH HLC_737 (G7) 5
3500 Chromsystems 3
3600 Menarini_ HA 8160
3900 Andere
Gerät? ....... 4
• Spezialmethoden
HbA2
XX1X Mikrosäule_ BioRad
XX2X Mikrosäule_Helena 3
HbF-Spezialmethode 1
XXX1 RID, Helena
XXX2 Alkalidenaturierung 1

Elektrophorese Sebia-System

HPLC_Chromsystems

RV(210)_Diagnoseschlüssel (1)
101
β−thal., (Compound)
homozygous
106
Hb Lepore / homozygous
102
β−thal., / heterozygous
107
Hb Lepore, heterozygous
103
β−thal., / Hb S
108
δβ−thal., homozygous
104
β−thal., / Hb E
109
δβ−thal.,heterozygous
105
β−thal., / Hb Lepore
110
Hb H- disease

RV(210)_Diagnoseschlüssel (2)
210
HbS, homozygous
221
Hb C, homoz..
300
normal
211
HbS, heterozygous
222
Hb C, heteroz.
301
Fe- defiency
212
HbS / Hb C
231
Hb E, homoz.
302
Unspecif.
HbF↑
213
HbS / Hb DPunjab
232
Hb E, heteroz.
214
HbS / Hb OArab
241
Hb DPunjab, homoz.
242
Hb DPunjab, heteroz.
251
Hb OArab, homoz.
252
Hb OArab, heteroz.
261
Hb GPhiladelphia

Quantifizierung der Hb-Spezies
• Unter < 2% gilt „cut off“ von 2%
• Zwischen 2 - 10% gilt ein Bewertungs-Vk von 15%
• Über 10% gilt ein Bewertungs- Vk von 8%

Protokollbogen_Fall 32/03

J_O.W._Priem_3.5.03

Morphologische Ausstrichbeurteilung
Fall 32/03
TN=59
Positiv
∅ Kreutze
Keine Angaben
Poikilozytose (6)
58
2,06
1
Targetzellen (13)
56
2,41
2
Anisozytose (5)
52
2,34
6
Mikrozytose (2)
47
1,89
11
Basophile Tüpfelung (20)
40
1,11
18
Polychromasie (19)
36
1,29
22
Schistozyten (10)
32
1,36
26
Leptozyten (16)
27
2,19
31
Anulozyten (15)
26
1,81
32
Makrozyten (3)
21
1,57
37

Fehldiagnosen
7 x Hb E, homozygot (231)
1 x Hb E, heterozygot (232)
5 x Thalassämia intermedia (110)
1 x Thalassämia minor (130)
1 x ß-Thalassämia, heterozygot (131)
1 x ß.Thal./ δβ-Thalassämia (111)
1 x Hb C, homozygot (221)
1 x Hb C, heterozygot (222)
1 x Hb C, ß-Thalassämie (131+222)
1 x Keine Diagnose (66,9% Hb C)
Bestehensquote 66.1 %

J_O.W._Kohne 23.10.03

RV_210 im Überblick
TN
Diagnose
+ Σ+
Juni_02
52
Pr.31 ß-Thalassämie, heterozygot
Pr.32 Eisenmangelanämie
43
41
36
Okt_02
33
Pr.31 ß-Thalassämie, „homozygot“
Pr.32 Sichelzellanämie, homozygot
17
32
17
Juni_03
59
Pr.31 Sichelzellanämie, heterozygot
Pr.32 Hb E / ß-Thalassämie
51
39
34
Okt_03
45
Pr.31 ß-Thalassämie, heterozygot
Pr.32 Hb SC- Erkrankung
42
44
42
Mai_04
66
Pr.31 Eisenmangelanämie
Pr.32 ß-Thalassämie, heterozygot
48
62
48
Okt_04
53
Pr.31 Sichelzellanämie, heterozygot
Pr.32 Hb SC- Erkrankung
50
49
49
Mai_05
?
Pr.31 Hb G_Philadelphia
Pr.32 Hb S / ß0-Thalassämie
?
?