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3. Ergebnisse 90
Ein stufenweißer Verlust der ramifizierten Morphologie wurde auch bei Zugabe von Forskolin
beobachtet, einem direkten Induktor der Adenylatcyclase, dem cAMP synthetisierenden
Enzym (Abb. 27E-H und 27A). Ein erster Effekt, mit einer Verbreiterung des perinukleären
Zytoplasmas zeigte sich bei 10 µM (Abb. 27F), und führte nach Zugabe von 100 µM zum
Verschwinden der Sekundärverzweigungen und zu einer abgerundeten Zellform (Abb. 27G).
Nach Zugabe von 1mM bzw. 410 µg/ml (Abb. 27G, Einsatz) bestimmten abgerundete
Makrophagen mit vereinzelten sehr kurzen Filopodien das Zellbild. Jedoch zeigte eine
genauere Prüfung (Abb. 27L), dass es bei diesen Konzentrationen häufig zu lokalen
Retraktionen des Astrozytenrasens kam, was auf einen toxischen Effekt schließen ließ.
Keine sichtbaren Effekte auf den Astrozytenrasen wurden bei 0.1 mM (Abb. 27H) oder
niedrigeren Konzentrationen von Forskolin beobachtet. Der Vergleich mit 1 mM DibutyrylcAMP
zeigte ein fein verwobenes Netz von Astrozyten und flachen astrozytären
Zellausläufern bei den mit zyklischen Nukleotiden behandelten Zellkulturen (Abb. 27D), aber
keine Retraktionen mit Sichtbarwerden des zugrundeliegenden Plastiksubstrates. Zugabe
von dibutyryl-GMP (1µM - 1mM) hatte keinen Effekt auf die Morphologie der ramifizierten
Mikroglia (Abb. 27I-K, 28A).
Im Fall der Kalziumionophore Calcimycin (A23187) sah man einen mäßigen Effekt bei einer
Konzentration von 500 nM und Transformation der meisten Mikroglia in kleine und
abgerundete Makrophagen mit noch sichtbaren Filopodien bei einer Konzentration von 50
µM (Abb. 28B und 29A-D). Bei dieser Konzentration war der Astrozytenrasen intakt (Abb.
29D). Die Zugabe von höheren Konzentrationen von Calcimycin (0.5-5 mM) führte zu einer
Zerstörung des Astrozytenrasens. Pertussistoxin (Abb. 28B und 29E-H), ein Inhibitor der i-,
o-, und t-Klassen der G-Proteinuntereinheiten (Bockaert et al., 1987; Tsai et al., 1987),
verursacht ebenfalls eine dosisabhängige morphologische Transformation, angefangen bei
125 pg/ml (1 pM), mit vergrößerten mikroglialen Zellkörpern und Verkleinerung der distalen
Zellausläufer. Gewöhnlich traten kleine und abgerundete Makrophagen bei 125 ng/ml (1 nM)
auf. Jedoch zeigten viele Makrophagen noch bei 100 nM eine lamelläre Oberflächenstruktur