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3. Ergebnisse 86
3.3.2 Wirkung verschiedener pharmakologischer Substanzklassen auf Mikroglia
Die ramifizierte Mikroglia breitet sich normalerweise auf der oberen Astrozytenzellschicht aus
und ähnelt im starken Maße der Morphologie in vivo (Abb. 27A, E und I). In diesem Teil der
vorliegenden Arbeit wurden unterschiedliche Kategorien von intrazellulären aktiven
Molekülen auf ihre Fähigkeit untersucht, als mögliche Vermittler in der Umwandlung von
Mikroglia in Makrophagen zu fungieren (Abb. 27-29). Da aktivierte Mikroglia auch
extrazelluläre Faktoren produzieren kann, die den ramifizierenden Effekt von Astrozyten
behindern können, wurden auch die Effekte von Proteasen, Disintegrinen und
Integrinhibitoren auf ihre Fähigkeit geprüft, die Interaktion von Mikroglia mit der
extrazellulären Matrix zu blockieren (Abb. 28C und D, 30 und 31). Alle Effekte wurden nach
48 h Inkubation mit der jeweilig geprüften Substanz untersucht. Die unbehandelten
Zellkulturen dienten als Kontrollen. Die Unversehrtheit des zugrundeliegenden
Astrozytenrasens wurde mit Phasenkontrast bei hoher Vergrößerung im Mikroskop geprüft
(Abb. 26D, H und L).
3.3.2.1 Effekte von intrazellulären Stimuli auf ramifizierte Mikroglia in Zellkultur
Im allgemeinen gab es vier Kategorien pharmakologischer Substanzklassen, die zu einer
kompletten Deramifikation der Mikroglia führten. Hierbei handelte es sich um Substanzen,
die zu einer Erhöhung des intrazellulärem Kalzium oder cAMP, oder zu einer Inhibition der
Phosphatasen oder der G i -Proteine führen. Im Fall vom dibutyryl-cAMP, einem permeablen
cAMP Analogon, kam es bereits nach Zugabe von 10µM zu einer Verringerung der
peripheren Zellausläufer, mit Fehlen von völlig ramifizierter Mikroglia und deutlichem
Anschwellen der Zellkörpers (Abb. 27A-D). Zahlreiche abgerundete Makrophagen
überwogen beim Zellbild bei 1 mM (Abb. 27C,D und 28A). Obgleich ein kleiner Anteil der
Mikroglia pro Zellkulturkammer noch eine mäßig ramifizierte Zellmorphologie aufwies (10%-
20%), zeigten diese Zellen häufig keine sekundären und tertiären Zellausläufer. Der Einsatz
in der Abbildung 27C zeigt die Morphologie eines mit Dibutyryl-cAMP behandelten