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3. Ergebnisse 85
Konzentration von 10 x 10 6 Fluorobeads pro Zellkammer beobachtet (Abb. 26D). Wie in den
vorhergehenden Experimenten beobachtet, führte die Zugabe von Gehirnmembranen zu
einer Transformation der meisten Mikroglia in kleine und abgerundete Makrophagen (Abb.
26E,F). Die zusätzliche Zugabe von Membranen führte zu einer deutlichen Verringerung der
Aufnahme von Fluorobeads bei einer Konzentration von 30 µg/ml Membranprotein (Abb.
26E) und einer nahezu kompletten Inhibition bei 300 µg/ml (Abb. 26F).
RhodB-GM/ M
RhodB-GM/ M
RhodB-GM/GFAP
A
FluoroB/ M
B
FluoroB/ M
C
FluoroB/ M
D
E + 30 g GM
F + 300 g GM
ABBILDUNG (26). Aufnahme von fluoreszierenden Gehirnmembranen und Fluorosphere-Latex-Beads in
Mikroglia-Kokulturen, 48 Stunden nach Zugabe. A/B: Aufnahme von mit Rhodamin-B (rhodB-BM, rot)
konjugierten Gehirnmembranen (20µg/ml), sichtbar gemacht durch Immunfluoreszenz-Doppelmarkierung gegen
das αMß2-Integrin (αM, A,B, grün). Nahezu alle abgerundeten αMß2-positiven Makrophagen zeigen die
Aufnahme von ungefähr 1µm großen fluoreszierenden Gehirnmembranen (leere Pfeile) im Bereich des
Zytoplasmas ohne Beteiligung des Kerns. Die ramifizierte αMß2-positive Mikroglia stellt sich Rhodamin-B-negativ
dar (B). Die starke Aufnahme von Rhodamin-B konjugierten Gehirnmembranen in αMß2-negativen Zellen (A,B,
Pfeilspitze) ist mit der GFAP-Immunoreaktivität (C) kolokalisiert. D-F: Aufnahme von Fluorosphere-Latex-Beads
(FluoroB, rot) in Mikroglia, sichtbar gemacht durch Immunfluoreszenz-Doppelmarkierung gegen das αMß2-
Integrin (αM, grün). D: Aufnahme der Beads in ramifizierte αMß2-positive Mikroglia (Pfeile) sowie in die
benachbarten αMß2-negativen Zellen (Pfeilspitze). E,F: Die Zugabe von Gehirnzellmembranen führt zum
Auftreten von komplett runden Makrophagen (E, leere Pfeile). Bei einer Proteinkonzentration von 30µg/ml (E)
zeigt sich eine deutliche Reduktion der Aufnahme der Fluorosphere Latex Beads in die αMß2-positiven
Makrophagen (Pfeile), in die benachbarten αMß2-negativen Zellen sowie in die verbleibenden ramifizierten
Mikrogliazellen. In einer Konzentration von 300µg/ml Gehirnmembranen (F) kommt es zu einer nahezu
vollständigen Inhibierung der Aufnahme von Fluorosphere-Latex-Beads, wobei noch einzelne Beads in den
αMß2-positiven Makrophagen (F, leere Pfeile) dargestellt werden können. Maßstabsbalken = 100 µm in A,D-F; 64
µm in B; 40 µm in C.