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3. Ergebnisse 84
Aktivierung, jedoch mit nur wenigen vollständig abgerundeten Makrophagen. Die meisten
Zellen wiesen weiterhin eine Art Zwischenmorphologie auf.
3.3.1.4. Aufnahme von fluoreszierenden Gehirnmembranen und Fluorosphere-
Latex-Beads
Zur Bestimmung des Schicksals der Zellmembranen nach Zugabe zur Kokultur wurden diese
mit Rhodamin-B-Isothiocyanat fluoreszent markiert und dem Kulturmedium bei einer
Konzentration von 20 µg/ml Protein zugefügt. Die Immunfluoreszenz-Doppelmarkierung, mit
dem Antikörper gegen das αMβ2-Integrin, zeigte die Aufnahme von Gehirnmembranen von
fast allen abgerundeten αMβ2-positiven Makrophagen, mit zahlreichen, ungefähr 1µm
großen rhodamin-positiven Körnchen innerhalb des Zytoplasmas, unter Aussparung des
Zellkerns, wobei der Anteil der rhodamin-negativen Makrophagen 5% betrug. Eine kleine
Subpopulation von ramifizierten mikroglialen Zellen von ungefähr 15% war rhodamin-negativ
(Abb. 26B). Zusätzlich zu den Makrophagen gab es eine starke Aufnahme der
fluoreszierenden Membranen durch viele αMβ2-negativen Zellen (Abb. 26A, B), die
zahlreicher als die benachbarten αMβ2-positiven Makrophagen waren. Die
Immunfluoreszenz-Doppelmarkierung gegen das αMβ2-Integrin und GFAP bestätigte die
Aufnahme von rhodamin-positiven Membranen in einer Subpopulation der αMβ2-negativen,
GFAP-positiven Astrozyten (Abb. 26C).
Wie in der Abbildung 26D gezeigt, führte die Zugabe von 1 µm großen Latexkügelchen
(Fluorosphere-Latex-Beads, Fluorobeads) in der Kokultur ebenfalls zur Aufnahme durch fast
alle αMβ2-positive Mikrogliazellen (ungefähr 80%) sowie in zahlreichen benachbarten aMβ2-
negativen Zellen. Anders als bei den Gehirnmembranen, führte die mikrogliale Aufnahme
von Fluorobeads nicht zur Transformation in kleine abgerundete Makrophagen. Statt dessen
wies der größte Teil der Fluorobead+/αMβ2+ Mikroglia weiter eine in hohem Grade
ramifizierte Morphologie auf. Das Fehlen einer Transformation wurde bis zu der maximalen