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3. Ergebnisse 83 Kontrolle Gehirn Milz Niere Muskel Leber ABBILDUNG (25). Transformierender Effekt von Membranpräparationen aus verschiedenen Geweben bei einer Proteinkonzentration von jeweils 20µg/ml. Mikroglia auf einem konfluenten Astrozytenrasen nach Stimulation mit Membranen, sichtbar gemacht durch αMß2/DAB-Immunozytochemie. Gehirnmembrane haben einen starken transformierenden Effekt; Niere und Leber zeigen moderate Effekte; die Effekte auf Milz und Muskel sind relativ schwach. Vergrößerung = 114X.
3. Ergebnisse 84 Aktivierung, jedoch mit nur wenigen vollständig abgerundeten Makrophagen. Die meisten Zellen wiesen weiterhin eine Art Zwischenmorphologie auf. 3.3.1.4. Aufnahme von fluoreszierenden Gehirnmembranen und Fluorosphere- Latex-Beads Zur Bestimmung des Schicksals der Zellmembranen nach Zugabe zur Kokultur wurden diese mit Rhodamin-B-Isothiocyanat fluoreszent markiert und dem Kulturmedium bei einer Konzentration von 20 µg/ml Protein zugefügt. Die Immunfluoreszenz-Doppelmarkierung, mit dem Antikörper gegen das αMβ2-Integrin, zeigte die Aufnahme von Gehirnmembranen von fast allen abgerundeten αMβ2-positiven Makrophagen, mit zahlreichen, ungefähr 1µm großen rhodamin-positiven Körnchen innerhalb des Zytoplasmas, unter Aussparung des Zellkerns, wobei der Anteil der rhodamin-negativen Makrophagen 5% betrug. Eine kleine Subpopulation von ramifizierten mikroglialen Zellen von ungefähr 15% war rhodamin-negativ (Abb. 26B). Zusätzlich zu den Makrophagen gab es eine starke Aufnahme der fluoreszierenden Membranen durch viele αMβ2-negativen Zellen (Abb. 26A, B), die zahlreicher als die benachbarten αMβ2-positiven Makrophagen waren. Die Immunfluoreszenz-Doppelmarkierung gegen das αMβ2-Integrin und GFAP bestätigte die Aufnahme von rhodamin-positiven Membranen in einer Subpopulation der αMβ2-negativen, GFAP-positiven Astrozyten (Abb. 26C). Wie in der Abbildung 26D gezeigt, führte die Zugabe von 1 µm großen Latexkügelchen (Fluorosphere-Latex-Beads, Fluorobeads) in der Kokultur ebenfalls zur Aufnahme durch fast alle αMβ2-positive Mikrogliazellen (ungefähr 80%) sowie in zahlreichen benachbarten aMβ2- negativen Zellen. Anders als bei den Gehirnmembranen, führte die mikrogliale Aufnahme von Fluorobeads nicht zur Transformation in kleine abgerundete Makrophagen. Statt dessen wies der größte Teil der Fluorobead+/αMβ2+ Mikroglia weiter eine in hohem Grade ramifizierte Morphologie auf. Das Fehlen einer Transformation wurde bis zu der maximalen
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Abteilung für Neuromorphologie des
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Inhaltsverzeichnis II 2.1.3.3 Quant
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Inhaltsverzeichnis IV 4. Diskussion
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1. Einleitung 2 Caroni, 1988, Müll
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1. Einleitung 4 Die zweite Phase de
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1. Einleitung 6 Im Falle von MHC1 e
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1. Einleitung 8 A B Ph0: Normales G
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1. Einleitung 10 (CGRP), Galanin,
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1. Einleitung 12 des Zytoskeletts.
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1. Einleitung 14 bilden (Abb. 3C, S
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1. Einleitung 16 Bei erfolgreicher
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1. Einleitung 18 1.4 Pro-inflammato
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1. Einleitung 20 Falle von Fibronec
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1. Einleitung 22 Ziel dieser Arbeit
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2. Methoden und Materialen 24 die d
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7. Abkürzungen 136 7. Abkürzungen
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7. Abkürzungen 138 PB Phosphat-Puf
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10. Veröffentlichungen 142 10. Ver
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